LABORATORIO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR 1

Robert Antonio Vanderbilt Hernández, Jesús Alberto López Regino, y Natalia Sotelo Saker

Julio 31 de 2019

Facultad de Ciencias Agrícolas: Ingeniería Agronómica

Laboratorio de Biología Celular y Molecular

Universidad de Córdoba
 INTRODUCCION

La célula es la unidad de la vida. Probablemente, una de las características fundamentales de

estas sea la capacidad que tienen estos seres vivos a la hora de auto reproducirse.

Todas las células se reproducen dividiéndose en varias células hijas, que a su vez pueden seguir

proliferando.

La mitosis es el proceso por el que las células se dividen de forma que el material genético se

reparte por igual entre las dos células hijas, y así las dos son genéticamente iguales. En las

plantas la mitosis se produce sobre todo en los meristemos, que son los tejidos que permiten el

crecimiento de la planta y que se encuentran, entre otros lugares, en los extremos de los tallos y

de las raíces. La mitosis es el tipo de división celular por el cual se conservan los orgánulos y la

información genética contenida en sus cromosomas, que pasa de esta manera a las células hijas

resultantes de la mitosis. La mitosis es igualmente un verdadero proceso de multiplicación

celular que participa en el desarrollo, el crecimiento y la regeneración del organismo. Este

proceso tiene lugar por medio de una serie de operaciones sucesivas que se desarrollan de una

manera continua, y que para facilitar su estudio han sido separadas en varias etapas.
 RESUMEN

En el presente informe hablaremos sobre la mitosis en raíces de cebolla, así mismo daremos a

conocer conceptos de mitosis su subdivisión según los cambios que presente el núcleo y la

morfología que presenten los cromosomas en: profase, metafase, anafase y telofase

Por otro lado aclararemos las dudas frente a los comportamientos de los cromosomas en cada

una de las fases mencionadas anteriormente.

Objetivos

1. Observar e interpretar figuras de distintas fases de la Mitosis en células vegetales

2. Hacer una preparación microscópica de células meristemáticas de la raíz de cebolla.

MATERIALES Y EQUIPOS

 Microscopio óptico simple

 Aguja de disección.

 Plancha de calentamiento

 Caja de Petri

MATERIALES QUE DEBE TRAER EL ALUMNO

 Ápices de cebolla.

 Portaobjetos.

 Cubreobjetos.

 Papel absorbente

 Cinta de enmascara
MARCO TEORICO

Descubrimiento de la mitosis

El descubridor de la mitosis fue Flemming. Dicho personaje investigó el proceso de la

división celular y la distribución de los cromosomas en el núcleo hermano, proceso que

denominó mitosis, de la palabra griega para el hilo. Sin embargo, no se dio cuenta de la

separación en dos mitades idénticas, las cromátidas hermanas. Estudió la mitosis in vivo y en

preparaciones cromadas, empleando como única fuente el material genético proveniente de

las aletas y branquias de las salamandras. Estos resultados fueron publicados en 1882 en el

volúmen semanario Zellsubstanz, Kern und Zelltheilung (1882; Substancia celular, Nucleo y

División celular). Basándose en sus hallazgos, Flemming hipotetizó por primera vez que

todos los núcleos celulares provenían de otro núcleo anterior (de hecho, acuñó la frase omnis

nucleus e nucleo, siguiendo la de Rudolf Virchow: omnis cellula e cellula).

LA MITOSIS

La mitosis es la división celular propiamente dicha, y produce dos células hijas

genéticamente idénticas entre sí. Puede ocurrir en las células de los individuos eucariontes

tanto haploides como diploides.(Rodríguez-Gómez AJ y Frias-Vázquez S. La mitosis y su

regulación(2014)

La mitosis propiamente dicha está compuesta de 4 etapas o fases: Profase, Metafase, Anafase

y Telofase. Frecuentemente se ha discutido si la Interfase está incluida en la mitosis o no

pero, técnicamente, no es parte de la división celular sino del ciclo celular.

ETAPAS DE LA MITOSIS

Profase.- Se inicia la formación del huso acromático. En esta etapa los cromosomas pasan de

la forma laxa de trabajo (eucromatina) a la forma compacta de transporte (paracromatina): se

condensan. La envoltura nuclear va desapareciendo. También los nucleolos desaparecen, se

dispersan en el citoplasma en forma de ribosomas.

Prometafase.- Los microtúbulos se anclan a los cromosomas a través de los cinetocoros.

Cuando el huso crece hasta una longitud suficiente, los microtúbulos asociados a cinetocoros

empiezan a buscar cinetocoros a los que anclarse. Otros microtúbulos no se asocian a

cinetocoros, sino a otros microtúbulos originados en el centrosoma opuesto para formar el

huso mitótico. La prometafase se considera a veces como parte de la profase.

Metafase.- los centrómeros de los cromosomas se congregan en la "placa metafásica" o

"plano ecuatorial", una línea imaginaria que es equidistante de los dos centrosomas que se

encuentran en los 2 polos del huso. Este alineamiento equilibrado en la línea media del huso

se debe a las fuerzas iguales y opuestas que se generan por los cinetocoros hermanos.

Anafase.- Es la fase crucial de la mitosis, porque en ella se realiza la distribución de las dos

copias de la información genética original mediante la disyunción de los cromosomas.

Entonces tienen lugar dos sucesos. Primero, las proteínas que mantenían unidas ambas

cromatidas hermanas (las cohesinas), son cortadas, lo que permite la separación de las

cromátidas. Estas cromátidas hermanas, que ahora son cromosomas hermanos diferentes, son

separados por los microtúbulos anclados a sus cinetocoros al desensamblarse, dirigiéndose

hacia los centrosomas respectivos. Los microtúbulos no asociados a cinetocoros se alargan,

empujando a los centrosomas (y al conjunto de cromosomas que tienen asociados) hacia los
extremos opuestos de la célula. Estos dos estados se denominan anafase temprana (A) y

anafase tardía (B). La anafase temprana viene definida por la separación de cromátidas

hermanas, mientras que la tardía por la elongación de los microtúbulos que produce la

separación de los centrosomas. Al final del anafase, la célula ha conseguido separar dos

juegos idénticos de material genético en dos grupos definidos, cada uno alrededor de un

centrosoma.

Telofase.- Se descondensa los cromosomas en cromatina. La membrana nuclear se reforma

alrededor de ambos grupos cromosómicos que se ubican en los polos formándose el anillo

contráctil con la ayuda de las proteínas actina y miosina. Este añilo estrangula a la célula

dividiendo la en dos células hijas con la misma carga genética. En esta etapa ocurre la

citocinesis que es la división del citoplasma.

Obs: la cariocinesis es proceso por el cual a partir de un núcleo se generan dos núcleos

idénticos (en cuanto al número y tipo de cromosomas y a la combinación de genes) y se da en

todo el proceso de la mitosis. Glotzer M. (2005)

TIPOS DE MITOSIS

Mitosis abierta y cerrada

En "la mitosis abierta", los microtúbulos que han irradiado a partir de los dos centrosomas

situados en los polos opuestos de las células invaden el espacio nuclear como la membrana

nuclear desmonta. Esto permite a los microtúbulos para llegar a los cromosomas y se unen a

sus cinetocoros. La mayoría de los hongos y muchos protistas, tales como algas, se someten a

una variación llamada "la mitosis cerrada" donde los microtúbulos son capaces de penetrar en

una envoltura nuclear intacta a través de un cuerpo de polo del huso.

Mitosis anastral.- se da cuando no hay presencia de centriolos y ásteres los que en este caso

formarían el huso acromático seria los casquetes polares.

Mitosis astral.- aquí si presentan centriolos y ásteres.

Mitosis intracelular.- se caracteriza porque la envoltura nuclear permanece sin desgastarse.

Un ejemplo de quienes la realizan son: protozoarios, dinoflagelados y levaduras.

Endomitosis.- se caracteriza porque la mitosis ocurre sin división del núcleo. Sin embargo las

fibras de cromatinas hermana se separan por lo que resultan células con el numero

cromosómico duplicado (poliploides). Es común en plantas vasculares.

CARACTERÍSTICAS DE LA MITOSIS Y DIFERENCIAS DE LA MITOSIS EN LA

CÉLULA VEGETAL Y ANIMAL

-La mitosis es un proceso ecuacional.

-se producen dos células hijas iguales a la madre (conserva el mismo número de cromosomas

que la madre).

-La estrangulación de la célula se da por una fuerza centrípeta en plantas gracias al

fragmoplasto su ¨estrangulación¨ es de forma centrifuga

-En las células vegetales presentan casquetes polares a diferencia de la animal que presenta

centriolos.
 METODOLOGIA

Con una tijera se corta

el extremo de varias
Tres o cuatro días antes de la raicillas, procurando
práctica poner un bulbo de que su longitud sea de
cebolla en un vaso de precipitado unos 2 a 3 mm.,
con agua para hacer crecer sus Encuentre las cuatro etapas de la
raíces. mitosis, además observe la
apariencia de las células que se
encuentran en interface

(Aquellas que no están en

Enjuague los ápices de cebolla mitosis). Realiza un conteo de
(fijados) en agua destilada por campo.
30 segundos.

Después de dejar la elodea por Después del aplastamiento, si es

5 minutos acercar a esta a la necesario, levante el cubreobjetos
con la ayuda de una aguja de
luz de la bombilla y contar las Coloque las raíces en un plato
Petri que contenga unos 3mL disección y agregue una gota
burbujas que salgan de la
de HCl 1% por 7-8 min. adicional de aceto-orceína
elodea por otros 5 minutos

Coloque un trozo de papel

Mientras transcurre el tiempo toalla sobre el cubreobjetos;
anterior, corte y conserve la presione fuerte y
porción del ápice de raíz que cuidadosamente por medio
posea un tejido blanquecino de un borrador de lápiz

Coloque un cubreobjetos sobre

Transferir los ápices a agua Coloque el tejido sobre un
destilada y dejarlos allí 30 el tejido y caliente la muestra
portaobjetos e inmediatamente
segundos (enjuague). suavemente por 1 minuto, por
agregue dos gotas de aceto-
orceína sobre éste. medio de toques intermitentes
sobre la superficie de un plato
de calentamiento
RESULTADOS Y ANALISIS

Para llevar a cabo este laboratorio se tuvo que poner a nacer unas raíces de cebolla en un

vaso de agua con 4 días de anticipación y así poder trabajar con ellas.

Con ayuda de unas tijeras se cortaron los extremos de las raíces de cebolla a unos 2 a 3

mm de longitud debido a que en esta parte de la raíz se encuentran las células en división,

luego de esto se enjuagaron los ápices de cebolla por 30 segundos con agua destilada,

después se pusieron las raíces en un plato de Petri con 3ml de HCL por 10 minutos, más

tarde se volvieron a enjuagara los ápices de cebolla con agua destilada y se les agregó

aceto-orceina sobre este.

Tiempo después se procede a poner la muestra en un porta objetos y se le puso encima su

respectivo cubre objetos, después se le aplico la técnica de ´squach´ la cual consiste en

presionar fuerte y cuidadosamente con un borrador de lápiz la muestra, ya que así las

células se separan más una de otras y esto nos ayudó a distinguir mejor cada etapa de la

mitosis.

Más tarde la muestra fue llevada al microscopio y observada con el objetivo en 40x para

poder mirar mejor los detalles, primero no pudimos encontrar ninguna de las etapas pero

luego realizamos otra muestra y se colocó en el microscopio y esto fue lo que se observó:

PROFASE: en esta primera etapa, observamos

que el material cromosómico llamado
cromatina se condensa y aparece gradualmente
como barras cortas y los cromosomas pueden
comenzar a observarse con el microscopio.

Cada cromosoma consta de dos hebras llamadas

cromátidas, las cuales se mantienen unidas por
una parte llamada centrómero, poseen además,
una zona externa llamada cinetocoro.

Hugo, Gómez. (2009)

 METAFASE: en la segunda etapa de la mitosis
pudimos observar que los pares de cromátidas se
mueven hacia el centro o ecuador de la célula.
En los polos tendremos situados los centriolos, a
partir de los cuales comenzarán a crecer unas
fibras que se asemejan a las líneas de latitud de la
Tierra. A esta estructura se la denomina huso
mitótico. Los cromosomas dirigidos por las fibras
de este huso van al ecuador de las células,
quedando allí alineados formando la placa
ecuatorial.
Hugo, Gómez. (2009)

ANAFASE: en la tercera etapa de la mitosis los

cromosomas separados son jalados hacia los polos o
extremos del huso mitótico por las fibras del huso que se
han pegado a los polos.

Una vez que los cromosomas están alineados, los

centriolos comienzan a recoger las fibras del huso
mitótico. Esto provoca que los cromosomas atrapados en
las fibras, y con forma de araña de 8 brazos, se partan
en dos y sean arrastrados hacia los polos. Ahora, cada
cromosoma vuelve a tener dos cromáticas, o lo que es lo
mismo, 4 brazos. Olga, Carbajo (2007)

TELOFASE: en la cuarta etapa pudimos observar que Los

juegos de cromosomas se agrupan en los polos opuestos,
la membrana nuclear se vuelve a formar alrededor de cada
juego y la citoquinésis (división del citiplasma) sigue
generalmente.

Una vez que los cromosomas se han situado en los polos

opuestos de la célula, comienzan a descondensarse. Al
mismo tiempo,  la célula irá formando, de nuevo, la
membrana nuclear  alrededor de ellos a partir de las fibras
del áster de los centriolos. Olga, Carbajo (2007)

PREGUNTAS DE ACTIVIDAD COMPLEMENTARIAS

1. Describe las etapas del ciclo celular.

2. Explica en qué etapa del ciclo celular se encontraban la mayoría de las células observadas

3. Por qué crees que se utilicen las partes en crecimiento de la cebolla para observar la

mitosis?

4. Con que fin se utiliza el HCL y la aceto-orceína?

5. Cuál es la importancia de la mitosis en la transmisión de la información genética?

SOLUCION A ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA

1. Fases del ciclo celular

Para dividirse, una célula debe completar varias tareas importantes: debe crecer, copiar su

material genético (ADN) y dividirse físicamente en dos células hijas. Las células realizan

estas tareas en una serie de pasos organizada y predecible que conforma el ciclo celular.

El ciclo celular es un ciclo, y no un camino lineal, porque al final de cada ronda las dos

células hijas pueden iniciar el mismo proceso exacto otra vez desde el inicio.

El ciclo celular consta de cuatro etapa: G1,S,G2 y M.

G1 y G2 son las fases "vacías" donde la célula crece y se prepara para dividirse.

S es la fase de síntesis en la cual los cromosomas se copian (replicación).

M es la fase miotica en la cual la célula se divide físicamente en dos células hijas.

La mayor parte de las células NO se están dividiendo todo el tiempo. Estás célula se

encuentran en una fase de descanso (G).

2. La mayoría de las células observadas se encontraban en metafase la cual es la segunda

fase de la mitosis y de la meiosis que sucede después de la profase en donde esta pierde la

envoltura y aparecen los microtúbulos del huso acromático (también llamado meiótico o

mitótico).
3. Porque está formada por tejido meristémico, con una elevada taza de crecimiento y

consecuentemente sus células sufren mitosis continuas, lo que permite la visualización de

todas las fases de la mitosis

4. El HCL Se utiliza en el proceso para degradar la pared celular de las células de la cebolla

y la aceto-orceina para teñir los cromosomas y así poder observar el proceso de división

celular(mitosis)

5. Durante la mitosis, el material genético contenido en el núcleo se ordena de modo tal

que cada uno de los cromosomas es copiado por enzimas específicas para repartirse en

partes iguales en cada una de las dos células hijas que surgirán de este proceso. Por lo

tanto, la mitosis consiste en un mecanismo reproductivo durante el cual la totalidad del

ADN de una célula eucarionte es copiado a sí mismo para dar lugar a nuevos elementos

celulares.

CONCLUSIÓN

En conclusión la división celular es un proceso muy dinámico y sencillo ya que al

observarlo en el microscopio y viendo las imágenes que se reflejaban logramos entender

con una mayor facilidad el ciclo celular de igual manera pudimos identificar las fases de

la mitosis que se presentaron en esta célula  vegetal, hubo total lucidez respecto a las

características de cada fase: como por ejemplo que en la interfase se inicia el ciclo celular

y la división de esta célula en dos, pasando por la profase, metafase, anafase hasta llegar

por fin a la telofase que ya es totalmente la división de esta célula madre en dos células

hijas las cuales a su vez van a entrar de nuevo en el mismo ciclo es decir nuevamente a la

interfase y así sucesivamente de igual forma quedo totalmente claro el proceso que sigue
la célula para llegar a cumplir su ciclo de división que es: En primer lugar esta el

crecimiento celular, el cual pasa a la replicación de ADN, distribución de los

cromosomas duplicados a las células hijas y por último la división celular con sus

respectivas fases. Este trabajo nos sirvió para entender mejor el proceso de mitosis de una

manera práctica, es decir viendo nosotros mismos, como se lleva a cabo dicho proceso,

de esta forma justificar y llegar a una conclusiones a partir de lo entendido.

BIBLIOGRAFIA

Fases de la mitosis, Hugo, Gomez (2009). Recuperado de:

[Link]

Las 4 fases de la mitosis: asi se duplica la celula, Olga, Carbajo. (2007). Recuperado

de: [Link]

Mitosis, BG4 libro virtual (2015). Recuperado de: [Link]

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