Laboratorios básicos –
niveles de bioseguridad
1y2
BIOSEGURIDAD
SANTIAGO GONZALÓN MSC.
Requisitos
Todos los laboratorios de diagnóstico y de atención de salud (de
salud pública, clínicos o de hospital) deben estar diseñados para
cumplir, como mínimo, los requisitos del nivel de bioseguridad 2.
Dado que no se puede ejercer un control absoluto sobre las
muestras que recibe, el personal puede verse expuesto a
organismos de grupos de riesgo más altos de lo previsto.
Código de prácticas
Este código puede utilizarse para elaborar una guía escrita de
prácticas y procedimientos para el trabajo de laboratorio en
condiciones de seguridad.
Manual de seguridad o de trabajo (identificar riesgos conocidos y
potenciales y se especificar las prácticas y los procedimientos
encaminados a eliminar o reducir al mínimo esos riesgos)
Las técnicas microbiológicas apropiadas son fundamentales para
la seguridad en el laboratorio y no pueden sustituirse por equipo
de laboratorio especializado.
Acceso
El símbolo y signo internacional de peligro biológico deberá
colocarse en las puertas de los locales (grupo de riesgo 2 o
superior).
Sólo podrá entrar en las zonas de trabajo del laboratorio el
personal autorizado.
Las puertas del laboratorio se mantendrán cerradas.
No se autorizará ni permitirá la entrada de niños en las zonas de
trabajo.
El acceso a los locales que alberguen animales habrá de
autorizarse especialmente.
No se permitirá el acceso al laboratorio de animales que no
sean objeto del trabajo.
Protección personal
Se usarán en todo momento batas o uniformes especiales para el
trabajo.
Se usarán guantes protectores apropiados para todos los
procedimientos. Una vez utilizados, los guantes se retirarán de
forma aséptica y a continuación se lavarán las manos.
Lavarse las manos después de manipular materiales y animales
infecciosos, así como antes de abandonar las zonas de trabajo
del laboratorio.
Se usarán gafas de seguridad, viseras u otros dispositivos de
protección.
Estará prohibido usar las prendas protectoras fuera del
laboratorio.
No se usará calzado sin puntera.
En las zonas de trabajo estará prohibido comer, beber, fumar,
aplicar cosméticos o manipular lentes de contacto.
Estará prohibido almacenar alimentos o bebidas para consumo
humano en las zonas de trabajo del laboratorio.
La ropa protectora de laboratorio no se guardará en los mismos
armarios o taquillas que la ropa de calle.
Procedimientos
Estará estrictamente prohibido pipetear con la boca.
No se colocará ningún material en la boca.
Todos los procedimientos técnicos se practicarán de manera que
se reduzca al mínimo la formación de aerosoles y gotículas.
Se limitará el uso de jeringuillas y agujas hipodérmicas.
Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales
a materiales infecciosos se comunicarán al supervisor del
laboratorio. Se mantendrá un registro escrito de esos accidentes e
incidentes.
Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza
de todos los derrames.
Los líquidos contaminados deberán descontaminarse (por
medios químicos o físicos) antes de eliminarlos por el colector de
saneamiento.
Los documentos escritos que hayan de salir del laboratorio se
protegerán de la contaminación mientras se encuentren en
éste.
Zonas de Trabajo en el Laboratorio
El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de
materiales no relacionados con el trabajo.
Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo
derrame de material potencialmente peligroso y al final de
cada jornada de trabajo.
Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán
ser descontaminados antes de eliminarlos o de limpiarlos para
volverlos a utilizar.
El embalaje y el transporte de material deberán seguir la
reglamentación nacional o internacional aplicable.
Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con
rejillas que impidan el paso de artrópodos.
Gestión de Bioseguridad
Incumbirá al director del laboratorio (la persona que tiene
responsabilidad inmediata respecto del laboratorio) garantizar
la elaboración y la adopción de un plan de gestión de la
bioseguridad y de un manual de seguridad o de operación.
El supervisor del laboratorio (que dependerá del director)
velará por que se proporcione capacitación periódica en
materia de seguridad en el laboratorio.
Se informará al personal de los riesgos especiales y se le exigirá
que lea el manual de seguridad o de trabajo y siga las
prácticas y los procedimientos normalizados.
El supervisor del laboratorio se asegurará de que todo el personal
los comprenda debidamente. En el laboratorio estará disponible
una copia del manual de seguridad o de trabajo.
Habrá un programa de lucha contra los artrópodos y los roedores.
Se ofrecerá a todo el personal en caso de necesidad un servicio
apropiado de evaluación, vigilancia y tratamiento médico, y se
mantendrán los debidos registros médicos.
Diseño e instalaciones
La formación de aerosoles.
El trabajo con grandes cantidades o altas concentraciones de
microorganismos.
El exceso de personal o de material.
La infestación por roedores y artrópodos
La entrada de personas no autorizadas.
El circuito de trabajo: utilización de muestras y reactivos
concretos.
Características de Diseño
Se dispondrá de espacio suficiente para realizar el trabajo de
laboratorio en condiciones de seguridad y para la limpieza y el
mantenimiento.
Las paredes, los techos y los suelos serán lisos, fáciles de limpiar,
impermeables a los líquidos y resistentes a los productos químicos y
desinfectantes normalmente utilizados en el laboratorio.
Los suelos serán antideslizantes.
Las superficies de trabajo serán impermeables y resistentes a
desinfectantes, ácidos, álcalis, disolventes orgánicos y calor
moderado.
El mobiliario debe ser robusto y debe quedar espacio entre mesas,
armarios y otros muebles, así como debajo de los mismos, a fin de
facilitar la limpieza.
Habrá espacio suficiente para guardar los artículos de uso
inmediato, También debe preverse espacio para el
almacenamiento a largo plazo, convenientemente situado fuera de
las zonas de trabajo.
Se preverán espacio e instalaciones para la manipulación y el
almacenamiento seguros de disolventes, material radiactivo y gases
comprimidos y licuados.
Los locales para guardar la ropa de calle y los objetos personales se
encontrarán fuera de las zonas de trabajo del laboratorio.
Los locales para comer y beber y para descansar se dispondrán
fuera de las zonas de trabajo del laboratorio.
En cada sala del laboratorio habrá lavabos, a ser posible con agua
corriente, instalados de preferencia cerca de la salida.
Características de Diseño
Las puertas irán provistas de mirillas y estarán
debidamente protegidas contra el fuego; de
preferencia se cerrarán automáticamente.
Enel nivel de bioseguridad 2 se dispondrá de una
autoclave u otro medio de descontaminación
debidamente próximo al laboratorio.
Lossistemas de seguridad deben comprender medios
de protección contra incendios y emergencias
eléctricas, así como duchas para casos de urgencia y
medios para el lavado de los ojos.
Cuando se planifique una nueva instalación, habrá que prever
un sistema mecánico de ventilación que introduzca aire del
exterior sin recirculación. Cuando no se disponga de ventilación
mecánica, las ventanas deberán poder abrirse y, a ser posible,
estarán provistas de mosquiteras.
Es indispensable contar con un suministro regular de agua de
buena calidad
Debe disponerse de un suministro de electricidad seguro y de
suficiente capacidad, así como de un sistema de iluminación
de emergencia que permita salir del laboratorio en
condiciones de seguridad.
Es esencial un suministro fiable y adecuado de gas. La
instalación debe ser objeto del debido mantenimiento.
Hay que prever sistemas de protección física y contra
incendios.
Hay que prever locales o salas de primeros auxilios,
convenientemente equipados y fácilmente accesibles.
Material de Bioseguridad Indispensable
Dispositivos de pipeteo para evitar que se pipetee con la boca
CSB, que se utilizarán en los siguientes casos:
— Siempre que se manipule material infeccioso.
— Cuando haya un alto riesgo de infección transmitida por vía
aérea.
— Cuando se utilicen procedimientos con grandes posibilidades de
producir aerosoles.
Material de Bioseguridad Indispensable
Asas de siembra de plástico desechables. También pueden
utilizarse incineradores eléctricos de asas dentro de la CSB para
reducir la formación de aerosoles.
Frascos y tubos con tapón de rosca.
Autoclaves u otros medios apropiados para esterilizar el material
contaminado.
Pipetas de Pasteur de plástico desechables, cuando estén
disponibles, en sustitución del vidrio.
Los aparatos como las autoclaves y las CSB deben ser validados
con métodos apropiados antes de usarlos.
Vigilancia médica y sanitaria
Proporcionar inmunización activa o pasiva cuando esté
indicada.
Facilitar la detección temprana de infecciones adquiridas en el
laboratorio.
Excluir a las personas muy susceptibles (por ejemplo,
embarazadas o personas inmunodeficientes) de las tareas de
laboratorio que entrañen mucho riesgo.
Proporcionar material y procedimientos eficaces de protección
personal.
Normas para la vigilancia de los trabajadores que manipulan
microorganismos en el nivel de bioseguridad 1
Lo ideal es someter a todo el personal a un reconocimiento
médico previo a la contratación en el que se anoten los
antecedentes médicos de cada persona.
Conviene que se notifiquen rápidamente las enfermedades o
accidentes de laboratorio y que todos los miembros del personal
comprendan la importancia de aplicar técnicas microbiológicas
apropiadas.
Normas para la vigilancia de los trabajadores que manipulan
microorganismos en el nivel de bioseguridad 2
Reconocimiento médico previo al empleo o a la asignación de un
puesto
Debe registrarse el historial médico de la persona y realizar una
evaluación de la salud ocupacional para los fines del laboratorio.
Debe mantener un registro de enfermedades y bajas laborales.
Las mujeres en edad fecunda deberán ser informadas de los
riesgos que supone para el feto la exposición profesional a ciertos
microorganismos.
Capacitación
El elemento clave para prevenir las infecciones adquiridas, los
incidentes y los accidentes en el laboratorio es un personal
preocupado por la seguridad y bien informado sobre la manera
de reconocer y combatir los peligros que entraña su trabajo en
ese entorno.
En consecuencia, la formación continua en el servicio acerca
de las medidas de seguridad es primordial.
La capacitación del personal debe comprender siempre la
enseñanza de métodos seguros para utilizar procedimientos
peligrosos que habitualmente afectan a todo el personal de
laboratorio y que entrañan los siguientes riesgos:
1. Riesgo de inhalación (es decir, formación de aerosoles): uso de
asas, siembra de placas de agar, pipeteo, preparación de frotis,
apertura de recipientes de cultivo, toma de muestras de
sangre/suero, centrifugación, entre otros.
2. Riesgo de ingestión al manipular muestras, frotis y cultivos.
3. Riesgo de inoculación cutánea al emplear jeringuillas y agujas.
4. Riesgo de mordeduras y arañazos en la manipulación de
animales.
5. Manipulación de sangre y otros materiales patológicos
potencialmente peligrosos.
6. Descontaminación y eliminación de material infeccioso.
Manejo de Desechos
1. Se han descontaminado o desinfectado realmente los objetos
o el material por un procedimiento aprobado?
2. De lo contrario, ¿se han embalado con un método aprobado
para ser incinerados inmediatamente in situ o transferidos a otro
laboratorio que tenga capacidad para incinerar?
3. ¿Entraña la eliminación de los objetos o materiales
descontaminados algún otro peligro, biológico o de otra clase,
para quienes realizan las operaciones de eliminación inmediata o
para quienes puedan entrar en contacto con los objetos o
materiales desechados fuera del recinto del laboratorio?
Descontaminación
El tratamiento en autoclave de vapor constituye el método de
elección para todos los procesos de descontaminación. Sólo
se recurrirá a otros métodos si éstos eliminan o destruyen los
microorganismos.
1. Desechos no contaminados (no infecciosos) que puedan
reutilizarse o reciclarse o eliminarse como si fueran «basura» en
general.
2. Objetos cortantes y punzantes contaminados (infecciosos):
agujas hipodérmicas, bisturís, cuchillas, vidrio roto; se recogerán
siempre en recipientes a prueba de perforación dotados de
tapaderas y serán tratados como material infeccioso.
3. Material contaminado destinado al tratamiento en autoclave
que después pueda lavarse y volverse a utilizar o reciclarse.
4. Material contaminado destinado al tratamiento en autoclave y
a la eliminación.
5. Material contaminado destinado a la incineración directa.
Seguridad química, eléctrica y radiológica, protección
contra incendios y material de seguridad
Los incendios o los accidentes de origen químico, eléctrico o
radiológico pueden tener como consecuencia indirecta un fallo
de las medidas de contención de organismos patógenos.
La promulgación de normas y reglamentos sobre cada una de
estas formas de protección incumbe normalmente a las
autoridades nacionales y locales competentes, cuya ayuda
debe recabarse siempre que sea necesario.
El laboratorio de contención 3 y 4
SANTIAGO GONZALÓN MSC.
BIOSEGURIDAD
El laboratorio de contención –
nivel de bioseguridad 3
Este nivel de contención exige fortalecer los programas de trabajo y de
seguridad correspondientes a los laboratorios básicos – niveles de
bioseguridad 1 y 2
Los laboratorios de esta categoría deben figurar en un registro o una
lista que establecerán las autoridades sanitarias nacionales u otra
autoridad competente.
Código de prácticas
El símbolo y signo internacional de advertencia de peligro biológico
expuesto en las puertas de acceso al laboratorio debe especificar el nivel
de bioseguridad y el nombre del supervisor del laboratorio que controla
el acceso a éste, así como indicar cualquier condición especial de
entrada en la zona, como puede ser la inmunización.
En el laboratorio se debe llevar ropa protectora apropiada (batas sin
abertura delantera o envolventes, trajes de dos piezas de tipo pijama,
monos, gorros y, si corresponde, protección para el calzado o calzado
especial).
No son apropiadas las batas de laboratorio abotonadas por delante, ni las
mangas que no cubran por completo los antebrazos.
La ropa de laboratorio no debe usarse fuera de éste y debe
descontaminarse antes de enviarla a la lavandería.
Toda manipulación abierta de material potencialmente infeccioso debe
realizarse dentro de una CSB.
Puede ser necesario utilizar equipo de protección respiratoria para
ciertos procedimientos de laboratorio o para el trabajo con animales
que estén infectados con ciertos agentes patógenos u otro dispositivo de
contención primaria
Diseño e instalaciones del laboratorio
El laboratorio debe estar separado de las zonas del edificio por las que se puede circular sin
restricciones.
Puede conseguirse una separación suplementaria habilitando el laboratorio al fondo de un
pasillo o instalando un tabique con puerta o un sistema de acceso que delimite un pequeño
vestíbulo (por ejemplo, entrada de doble puerta o laboratorio básico – nivel de bioseguridad
2) destinado a mantener la diferencia de presiones entre el laboratorio y el espacio
adyacente.
El vestíbulo debe contar con una zona para separar la ropa limpia de la sucia, y también
puede ser necesaria una ducha.
Las dobles puertas de acceso al laboratorio deben ser de cierre automático y disponer de un
mecanismo de interbloqueo, de modo que sólo una de ellas esté abierta al mismo tiempo.
Para uso en caso de emergencia es posible colocar una mampara que se pueda romper.
Las superficies de las paredes, suelos y techos deben ser impermeables
y fáciles de limpiar. Todas las aberturas existentes en esas superficies
(por ejemplo, para tuberías de servicio) deben estar obturadas para
facilitar la descontaminación de los locales.
La sala del laboratorio debe poderse precintar para proceder a su
descontaminación.
Los sistemas de conducción de aire han de estar construidos de modo
que sea factible la descontaminación con gases.
Las ventanas deben estar cerradas herméticamente y llevar cristales
resistentes a la rotura.
En las inmediaciones de todas las puertas de salida del laboratorio habrá
un lavabo que no necesite ser accionado con la mano.
Debe haber un sistema de ventilación que establezca un flujo direccional
hacia el laboratorio. Se instalará un dispositivo de vigilancia visual, con o
sin alarma, para que el personal pueda comprobar en todo momento que la
corriente de aire circula en el sentido deseado.
El sistema de ventilación del edificio debe estar construido de modo que el
aire del laboratorio de contención – nivel de bioseguridad 3 no se dirija a
otras zonas
El aire puede ser filtrado por un sistema HEPA, reacondicionado y
recirculado dentro del laboratorio.
Cuando el aire del laboratorio (no de las CSB) se expulsa directamente
al exterior del edificio, debe dispersarse lejos de los edificios ocupados y
de las tomas de aire.
Puede instalarse un sistema de control de la calefacción, la ventilación y
el aire acondicionado para impedir una presión positiva sostenida en el
laboratorio
Alarmas audibles o claramente visibles para alertar al personal de
posibles fallos del sistema de calefacción, ventilación y aire
acondicionado.
Todos los filtros HEPA deberán estar instalados de modo que permitan
la descontaminación con gases y la realización de pruebas.
Las CSB deben estar alejadas de las zonas de paso y de los lugares de
cruce de corrientes procedentes de puertas y sistemas de ventilación.
El aire que sale de las CSB de las clases I o II y que habrá pasado por
filtros HEPA, deberá expulsarse de manera que no se perturbe el
equilibrio del aire en la cámara ni en el sistema de evacuación del
edificio.
Dentro del laboratorio de contención debe haber una autoclave para
descontaminar el material de desecho infectado.
Si hay que sacar ese material de desecho del laboratorio de contención
para su descontaminación y eliminación, habrá que transportarlo en
recipientes herméticos, irrompibles e impermeables de acuerdo con las
normas nacionales o internacionales, según proceda.
El sistema de abastecimiento de agua debe estar dotado de dispositivos
contra el reflujo.
El diseño de las instalaciones y los procedimientos de trabajo del
laboratorio de contención – nivel de bioseguridad 3 deben estar
documentados.
Vigilancia médica y sanitaria
El reconocimiento médico de todo el personal que trabaja en el
laboratorio de contención – nivel de bioseguridad 3 es obligatorio y
debe comprender una historia clínica detallada y un reconocimiento
físico orientado a la actividad laboral.
Una vez pasado el reconocimiento médico con un informe favorable, se
entregará a la persona examinada una tarjeta de contacto.
El laboratorio de contención máxima – nivel de bioseguridad 4
CODIGO DE PRACTICAS:
Hay que aplicar la regla del trabajo realizado por dos personas, en
virtud de la cual ninguna persona debe trabajar sola en el interior del
laboratorio.
Esto es particularmente importante si el trabajo se realiza con ropa
especial del nivel de bioseguridad 4.
Al entrar y al salir del laboratorio es imprescindible un cambio
completo de ropa y calzado.
El personal debe recibir capacitación en procedimientos de evacuación
de emergencia en caso de que un miembro del personal sufra lesiones o
caiga enfermo.
Debe establecerse un método de comunicación entre el personal que
trabaja dentro del laboratorio del nivel de bioseguridad 4 y el personal
de apoyo que se encuentra fuera del laboratorio para la comunicación
ordinaria y de emergencia.
Diseño e instalaciones del laboratorio
CONTENCION PRIMARIA
Laboratorio con CSB de clase III.
Se exige el paso a través de un mínimo de dos puertas antes de acceder a
la sala que contiene la CSB de clase III (sala de la cámara).
Es necesaria una ducha personal con vestuarios interior y exterior.
Los utensilios y materiales se introducen por una autoclave o una
cámara de fumigación de doble puerta.
Las puertas de la autoclave o la cámara de fumigación están diseñadas de
tal modo que la puerta exterior no pueda abrirse a menos que la
autoclave haya completado un ciclo de esterilización.
Laboratorio diseñado para trabajar con trajes especiales.
Las salas de este tipo de laboratorio están dispuestas de tal manera que se
dirige al personal a través de las zonas de vestuario y descontaminación antes
de entrar en las zonas donde se manipula el material infeccioso.
Debe existir una ducha de descontaminación de trajes, que será utilizada por
el personal antes de abandonar la zona de contención del laboratorio. Habrá
otra ducha personal con vestuarios interior y exterior.
El traje especial será de una pieza, dotado de presión positiva y con
suministro de aire filtrado por HEPA. El aire del traje será suministrado por
un sistema que tenga una capacidad redundante del 100% con una fuente de
aire independiente, para utilizarla en caso de emergencia.
ACCESO CONTROLADO
El laboratorio de contención máxima – nivel de bioseguridad 4 debe
estar situado en un edificio independiente o en una zona claramente
delimitada en el interior de un edificio protegido.
La entrada y la salida del personal y de los suministros se harán a través
de cámaras de cierre hermético o sistemas de caja de paso.
Al entrar, el personal se mudará por completo de ropa y al salir se
duchará antes de volver a ponerse la ropa de calle.
Sistema de ventilación controlada.
Debe mantenerse la presión negativa dentro de las instalaciones.
Tanto el aire de entrada como el de salida debe pasar por filtros HEPA.
Todos los filtros HEPA serán probados y certificados una vez al año. Los
filtros HEPA estarán instalados de tal modo que permitan su
descontaminación in situ antes de retirarlos. Otra posibilidad es retirar
el filtro y colocarlo en un recipiente primario cerrado y hermético para
su ulterior descontaminación y/o destrucción por incineración.
Descontaminación de efluentes. Todos los efluentes de la zona de
trabajo con trajes especiales, la cámara y la ducha de descontaminación o
la CSB de clase III serán descontaminados antes de su eliminación
definitiva. El método de elección es el tratamiento térmico. El agua de la
ducha personal y los retretes se puede verter directamente al
alcantarillado sin tratamiento previo.
Esterilización de los desechos y materiales. La zona del
laboratorio debe contar con una autoclave de doble puerta. Debe
disponerse de otros métodos de descontaminación para aquellos
elementos del equipo que no soporten la esterilización por vapor.
Accesos con entrada de cierre hermético para muestras,
materiales y animales.
