UNIVERSIDAD NACIONAL DESAN ANTONIO ABAD DEL CUSCO
FACULTAD DE C IENCIAS AGRARIAS
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROPECUARIA
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS (GUCIDOS)
CURSO: Bioquímica
DOCENTE: Ing. Candelaria Milagros Nayhua Yana
ESTUDIANTE: Domínguez Almirón, Oberty
CODIGO: 090339
SEMESTRE: 2020 - I
CUSCO – PERU
2020
INDICE
INTRODUCCION 2
ENSAYO DE MOLISH 3
ENSAYO DE BARFOED 3
OBJETIVOS 4
OBJETIVOS ESPECIFICOS…………………………………………………………………………………………………………………….4
MARCO TEORICO 5
CLASIFICACION DE CARBOHIDRATOS 6
MONO SACARIDOS……………………………………………………………………………………………………………………………..7
OLIGO SACARIDOS……………………………………………………………………………………………………………………………..7
POLISACARIDOS………………………………………………………………………………………………………………………………….7
ENSAYOS…………………………………………………………………………………………………………………………………………. 8
PROCEDIMIENTO………………………………………………………………………………………………………………………………9
REACTIVOS……………………………………………………………………………………………………………………………………….9
ANALISIS DE RESULTADOS………………………………………………………………………………………………………………..11
INTRODUCCIÓN
Los carbohidratos son una gran cantidad de azucares, almidones, celulosa, gomas
que contienen carbono hidrógeno y oxigeno en cantidades similares. La principal
función de los carbohidratos es suministrar energía al cuerpo; especialmente al
cerebro y Al sistema nervioso En cuanto a nuestra carrera es muy importante el
reconocimiento de los carbohidratos para saber en qué cantidades se encuentra en
cada alimento y también para innovar nuevos productos a partir de ellos. En los
últimos años, ha habido grandes avances en lo que respeta a la comprensión de
cómo influyen los carbohidratos en la nutrición y la salud humana El progreso en las
investigaciones científicas ha puesto en aliviar las diversas funciones que tienen los
carbohidratos en el cuerpo y su importancia para gozar de una buena salud.
Un carbohidrato que no puede ser hidrolizado en uno más simple es llamado
monosacárido. Los monosacáridos más comunes son la glucosa, la fructosa, la
galactosa y la manosa. Un carbohidrato que puede ser hidrolizado en dos moléculas
de monosacáridos es llamado disacárido. Los más importantes son la lactosa
(presente en la leche), la sacarosa(presente en el azúcar común) y la maltosa. Por
su parte, aquellos carbohidratos que pueden ser hidrolizados en varias moléculas de
monosacáridos son llamados polisacáridos. Los más comunes son el almidón y la
celulosa, este último es componente estructural de las plantas.
Ensayo de Molisch; Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general
de carbohidratos en el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con
ácido sulfúrico concentrado hasta monosacáridos y se requiere en derivados
del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales reaccionan con α-naftol
formando un color púrpura violeta.
Ensayo de Barfoed; Esta prueba permite diferenciar entre monosacáridos y
disacáridos reductores, también contiene ion cúprico que se reduce hasta
óxido cuproso más rápidamente con los monosacáridos que con los
disacáridos.
Ensayo de Seliwanoff; Este ensayo es específico para cetosas y se basa en
la conversión de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior
condensación con resorcinol formando así complejos coloreados.
Los objetivos de la práctica fueron reconocidos carbohidratos utilizando
trespruebas; prueba de Molisch, prueba de Selivanoff y prueba de Barfoed,
enlas diferentes soluciones preparadas
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
. Identificar mediante pruebas de colorimétricas la presencia de
monosacáridos, disacáridos y polisacáridos
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
DIFERENCIAR:
*Una pentosa de una hexosa
*Aldosas de cetosas
*Un disacárido frente a un monosacárido Mediante reacciones características
y sencillas de realizar en el laboratorio
Identificar y analizar las diferentes reactividades de mono, di y polisacáridos
frente a reacciones típicas de identificación de carbohidratos
MARCO TEORICO
HIDRATOS DE CARBONO ASPECTOS GENERALES:
Reciben este nombre por su fórmula general Cn(H2O)m. Es un nombre incorrecto
desde el punto de vista químico, ya que esta fórmula sólo describe a una ínfima
parte de estas moléculas. Desde el punto de vista químico son aldehídos o cetonas
polihidroxilados, o productos derivados de ellos por oxidación, reducción, sustitución
o polimerización.
También se les puede conocer por los siguientes nombres:
• Glícidos o glúcidos (de la palabra griega que significa dulce), pero son muy pocos
los que tienen sabor dulce.
• Sacáridos (de la palabra latina que significa azúcar), aunque el azúcar común es
uno sólo de los centenares de compuestos distintos que pueden clasificarse en este
grupo. Un aspecto importante de los Hidratos de Carbono es que pueden estar
unidos covalentemente a otro tipo de moléculas, formando glicolípidos,
glicoproteínas (cuando el componente proteico es mayoritario), proteoglicanos
(cuando el componente glicídico es mayoritario) y peptidoglicanos (en la pared
bacteriana).
CLASIFICACIÓN DE LOS HIDRATOS
DE CARBONO :
LOS SIMPLES, son azucares de rápida absorción y son energía rápida. Estos
generan la inmediata secreción de insulina. Se encuentran en forma natural en
alimentos como las frutas, la leche y sus derivados en los productos hechos o, con
azucares refinados azúcar, miel, mermeladas, jaleas, golosinas, leche, hortalizas y
frutas etc.
LOS COMPLEJOS:
son de absorción más lenta, están hechos de
moléculas de azúcar que se extienden juntas
en complejas cadenas largas. Dichos
carbohidratos se encuentran en alimentos
tales como guisantes, fríjoles, granos enteros
y hortalizas. Actúan mas como energía de
reserva por la anterior razón. Se encuentra en
cereales, legumbres, harinas, pan, pastas.
Tanto los carbohidratos complejos como los
carbohidratos simples se convierten en glucosa en el cuerpo y son usados como
energía. La glucosa es usada en las células del cuerpo y del cerebro y la que no se
utiliza se almacena en el hígado y los músculos como glucógeno para su uso
posterior. Los alimentos que contienen carbohidratos complejos suministran
vitaminas y minerales que son importantes para la salud de una persona. La mayoría
de la ingesta de carbohidratos debe provenir de los carbohidratos complejos
(almidones) y azúcares naturales en lugar de azúcares procesados y refinados
Los carbohidratos se clasifican : en monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos.
Un monosacárido, es una unidad, ya no se subdivide más por hidrólisis ácida o
enzimática, por ejemplo glucosa, fructosa o galactosa.
Los oligosacáridos están constituidos por dos a diez unidades de monosacáridos.
La palabra viene del griego, oligo = pocos. Digamos el azúcar que utilizamos es un
disacárido y por tanto un oligosacárido.
Los polisacáridos son macromoléculas, por hidrólisis producen muchos
monosacáridos, entre 100 y 90 000 unidades.
Como
primera aproximación, desde el punto de vista químico, los carbohidratos son
polihidroxialdehídos o polihidroxicetonas o compuestos que los producen por hidrólisis ácida
o enzimática. Esto es solo parcialmente cierto, pues en solución acuosa, las estructuras de
polihidroxialdehídos o de polihidroxicetonas, permanecen en pequeña proporción en
equilibrio con sus formas cíclicas, que son las más abundantes. Estos aspectos interesantes
los veremos más adelante
Ensayo con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite
reconocer polisacáridos, particularmente el almidón por la formación de una coloración azúl
violeta intensa, el glicógeno y las dextrinas por formación de coloración roja.
Ensayo de Molisch: Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general de
carbohidratos en el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido sulfúrico
concentrado hasta monosacáridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil
furfural los cuales reaccionan con α-naftol formando un color púrpura violeta.
Ensayo de Benedict: El ensayo de Benedict permite el reconocimiento de carbohidratos
reductores, al igual que el reactivo de Felhing, el de Benedict contiene ion cúprico en medio
alcalino que se reduce hasta óxido cuproso en presencia de azúcares con el hidroxilo
hemiacetálico libre.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
Materiales:
Tubo de ensayo
Vaso precipitado
Pinza de Madera
Rejillas
Pipeta
Baño maria
Reactivos e muestras
leche
arroz
jugo de fruta
agua destilada
papa
sol. De gelatina
Reactivos: Muestra Problema
Mollish ( α naftol en alcohol)
Acido Sulfurico (H2SO4)
Sellivanoff (resorcinol en Ac. Clorhídrico diluido)
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
a) Identificación de Polisacáridos con el reactivo de Lugol
Preparar un patrón para realizar un margen de comparación +(almidon) y un patrón–
(agua destilada)
Poner en un tubo de ensayo 3 ml del glúcido a analizar Anadir unas gotas de Lugol
Si la solución del tubo de ensayo se toma de color azul violeta, la reacción es positiva
hay presencia de almidón.
Observar los cambios de color y analizar los resultados obtenidos
b) Identificación de Disacárido con el reactivo de Molisch
Preparar un patrón para realizar un margen de comparación +(glucosa) y un patrón–
(agua destilada)
Colocar en un tubo de ensayo 3 ml del disacárido a analizar
Anadir 1 ml del reactivo de molisch
Agregar posteriormente 1 ml de H2SO4 al 1M a cada uno de los tinos de ensayo
Si la solución del tubo de ensayo se toma de color azul violeta y precipitado, la
reacción es positiva.
Observar los cambios de color y analizar los resultados obtenidos
c) Identificación de Carbohidratos reductores con el reactivo de Benedict
Preparar un patrón para realizar un margen de comparación +(glucosa) y un patrón–
(agua destilada)
Colocar en los tubos de 1 o 2 ml de la muestra
Agregar 1 ml del reactivo de benedict
Colocar los tubos de ensayo en el baño maría por 10 min
Observar los cambios de color y analizar los resultados obtenidos
PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN.
1. Prueba de Molish En un tubo de prueba colocar la muestra problema, luego agregar el
reactivo de molish adicionar luego gotas de H2SO4 por las paredes del tubo, sin agitación
alguna, se observara que se forma un anillo ubicado en la zona media, con una coloración
violeta, con la cual concluimos que estamos en presencia de un carbohidratos.
Reacción de Benedict (detecta la
presencia de azúcares
reductores) :
Se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio básico débil. Aunque es similar a la
reacción de Fehling, el medio básico débil y el estabilizante (citrato sódico) utilizados hacen
que este test sea más sensible y estable. Se numeran 5 tubos de ensayo. Se añade a cada
tubo 1 ml de: agua (ensayo blanco), glucosa, sacarosa, almidón y solución problema. Se
añaden 2 ml de reactivo de Benedict a cada uno de ellos y se mezcla bien. Se calientan en
un baño de agua hirviendo durante 5 minutos. Si la reacción es positiva aparece un
precipitado rojizo, verde o amarillo.
ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
I. ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Identificación de Polisacáridos con el reactivo de Lugol
TIPO DE
POLISACÁRIDOS
MUESTRA POSITIVO NEGATIVO
PRESENTE EN
LA MUESTRA
Leche
Agua de arroz
Jugo natural
Jugo comercial
papa
Identificación de Disacáridos con el reactivo de Molisch
TIPO DE
DISACÁRIDO
MUESTRA POSITIVO NEGATIVO PRESENTE
EN LA
MUESTRA
Gelatina
Leche
Agua de arroz
Jugo de mandarina
Identificación de Carbohidratos reductores con el reactivo de Benedict
TIPO DE
CARBOHIDRATO
MUESTRA POSITIVO NEGATIVO REDUCTOR
PRESENTE EN
LA MUESTRA
Gelatina
Jugo natural
Extracto de
plátano
Leche
Suero
energizante
CONCLUCIONES
Se reconoció los carbohidratos en diversas soluciones preparadas en
ellaboratorio. Utilizando la prueba de Molisch se determinó la presencia
decarbohidratos; con la prueba de Seliwanoff se determinó la presencia defructosa
(cetosa); y con la prueba de Barfoed se diferenció la presencia demonosacáridos de
los disacáridos mediante la formación de precipitados
a) Se logró la Identificación de diferentes carbohidratos.
b) Se logró diferenciar una pentosa de una hexosa, aldosas de cetosas y un
disacárido frente a un monosacárido, mediante el empleo de reacciones
características y sencillas de realizar en el laboratorio.
c) Se pudo Identificar y analizar las diferentes reactividades de mono, di y
polisacáridos frente a reacciones típicas de identificación de carbohidratos.
REFERENCIASBIBLIOGRÁFICAS
(1) Freifelder. 1991 técnicas de bioquímica y biología molecular.Reverte. Biblioteca
(2) Angulo Ugalde. 1999. Manual Bioquímica de Laboratorio.Universidad de Costa
Rica.
(3) Switzer, R. y L. Garrity. 1999. Bioquímica experimental :Teoría yejercicios de
métodos fundamentales. 3rd edición, Freeman yCompany, NuevaYork
(4) Watson, 1998. Biología molecular. 3ed. Editar. Biblioteca Omega
5. CHANG WILLIAMS, Raymond. QUIMICA SEPTIMA EDICION. Colombia;
McGraw-Hill MAYO 2005.
6. SELIWANOFF. www.uco.es/dptos/bioquimica-biolmol/pdfs/20. REACCIONES
COLOREADAS DE AZÚCARES.pdf consultado el: 26 - enero-2018.
7. HORTON ROBERT. BIOQUÍMICA. México; Prentice-hall Hispanoamericana,
1995. . Química Orgánica". Morrison y Boyd 5º Edición