PRÁCTICA 1: EXTRACCIÓN DEL ADN DE LAS FRESAS.
OBJETIVOS:
Extraer el ADN de las fresas que contienen células vegetales.
Comprender y llevar a cabo el procedimiento correcto para ello.
MATERIALES:
Mortero de porcelana con mano
Gradilla y tubos de ensayo
Placa Petri
Papel de filtro
Embudo de vidrio
Agua
1 o 2 fresas
Una pizca de sal
Detergente líquido de fregar
Alcohol etílico frio de 96%
PROCEDIMIENTO:
1. Cogemos la fresa y la metemos en el mortero junto con dos dedos de agua y
una pizca de sal, machacamos hasta que quede una mezcla lo más
homogénea posible.
2. Verter la mezcla con la ayuda de un embudo recubierto con papel de filtro en
una probeta.
3. Añadir 3 gotas de desengrasante, agitar haciendo movimientos circulares y
dejar reposar durante5minutos
4. Verter delicadamente el alcohol en la probeta con la mezcla y dejar reposar.
Veremos como el ADN forma un anillo blanco parecido al algodón.
ANÁLISIS DE DATOS:
a. ¿Por qué has tenido que agitar la solución de fresa?
b. ¿Por qué crees que se tiene que añadir detergente?
c. ¿Cuál es el propósito del alcohol frío?
CONCLUSIONES:
PRÁCTICA 2. EXTRACCIÓN DEL ADN DE UN PLÁTANO.
Introducción.
El ADN es una molécula que almacena las “instrucciones” que dirigen el desarrollo de
cualquier ser vivo y que es portadora a su vez de la información hereditaria.
Se trata de una molécula de proporciones gigantescas comparada con el tamaño
celular y a su vez está formado por dos cadenas antiparalelas y complementarias
formadas por la sucesión de desoxirribonucleótidos.
Estos nucleótidos a su vez están compuestos cada uno por un monosacárido
(pentosa: desoxirribosa), una molécula de ácido fosfórico, y una basa nitrogenada que
puede ser: Guanina, citosina, adenina o timina. Las moléculas de ácido fosfórico y
desoxirribosa se unen y quedan hacia fuera formando el “esqueleto externo” de azúcar
fosfato, mientras que las bases quedaran enfrentadas internamente con las de la
cadena complementaria apareando A-T y C-G, lo que constituye realmente la
información genética; la sucesión o secuencia de bases nitrogenadas de una cadena.
OBJETIVOS.
Demostrar que las células del plátano portan ADN.
Extraer dicho ADN.
Demostrar que puede extraerse el ADN de un plátano con instrumental de
cocina.
MATERIALES.
Plátano ( banano)
Piña
Detergente
Agua destilada
Sal
Agua
Etileno 95º (2 horas en el congelador)
Balanza
Probeta
Vaso de precipitados
Erlenmeyer
Termómetro
Colador y filtro
Embudo
Tubos de ensayo
Pipeta Pasteur
PROCEDIMIENTO.
1. Trituración del plátano: Con la ayuda de un cuchillo cortamos unos 100g de
plátano y lo troceamos hasta obtener porciones muy pequeñas. Después
aplastamos todos los trozos con un tenedor para formar una pasta más o
menos homogénea. Depositamos esta pasta en un vaso de precipitados.
2. Preparación de la solución de extracción: Primero pesamos con la balanza 3g
de sal. Con una probeta preparamos 100ml de agua destilada y 10ml de Fairy.
A continuación lo mezclamos todo en un erlenmeyer procurando no formar
muchas burbujas.
3. Detergente + plátano: Vertemos el detergente en el vaso de precipitados que
contiene el plátano y lo mezclamos todo procurando de nuevo no hacer
muchas burbujas
4. Baño caliente: Ponemos agua a calentar y con un termómetro medimos la
temperatura hasta que alcance unos 60ºC aproximadamente. Después
introducimos el vaso de precipitados con la mezcla y vamos removiendo
durante unos 15’ con la ayuda de una barita agitadora. Hay que procurar
mantener la temperatura en los 60ºC y no hacer muchas burbujas.
5. Baño frio: Preparamos un recipiente con agua y hielo e introducimos el vaso de
precipitados. Lo dejamos en estas condiciones durante 5’ removiendo
constantemente.
6. Preparación del zumo de piña: Mientras esperamos que pasen los 5’ del baño
frío preparamos el zumo de piña. Troceamos una piña y trituramos la parte
central o corazón en la batidora. Filtramos la pasta con un colador para obtener
el zumo.
7. Filtración de la solución: Preparamos un erlenmeyer con un colador encima y
vertemos el contenido del vaso de precipitados. A continuación preparamos un
embudo con un papel de filtro encima y vertemos la solución obtenida
anteriormente recogiendo el líquido en un tubo de ensayo. Este segundo
proceso puede tardar unos minutos.
8. Solución + zumo de piña: Con una pipeta Pasteur cogemos 1ml de zumo de
piña y lo añadimos a 5ml del extracto en un tubo de ensayo. Dejamos que
actúe el zumo en la solución de 2 o 3’.
9. Solución + alcohol: Sacamos el alcohol del congelador y preparamos en un
tubo de ensayo aproximadamente el mismo volumen de alcohol que de la
solución de interés.
Plátano.
Plato.
Tenedor.
Dos tazas
Cucharilla.
Lavavajillas.
Sal de cocina.
Agua destilada.
Filtro de café o gasas.
Alcohol frio de 95º.
Tubo de ensayo.
Palillos o pinzas.
Procedimiento.
1. Cogemos la mitad de un plátano y lo depositamos en un plato.
2. Con un tenedor aplastamos el plátano facilitando la labor con algo de
agua destilada.
3. En una taza mezclamos una cucharadita con lavavajillas y dos pizcas de
sal de cocina, todo ello evitando hacer espuma.
4. A la disolución anterior le añadimos una cucharada del plátano aplastado
y se mezcla unos 5 minutos sin producir espuma.
5. Filtramos la mezcla obtenida a través de un filtro de café o gasa situado
sobre un embudo. Deberemos obtener al menos 5 mL de disolución. Se
pasa a otra taza.
6. Colocamos la disolución filtrada en un tubo de ensayo ocupando una
cuarta parte de éste. Después introducimos alcohol cubriendo la mitad de
éste.
7. Se observa al poco tiempo que una sustancia blanquecina (ADN)
comienza a subir.
8. Con la ayuda de unas pinzas o de un palillo extraemos el ADN de la
mezcla.
Análisis de resultados.
El lavavajillas, el tenedor, la sal y el agua destilada son utilizados para
romper tanto membrana como pared celulares vegetales.
El alcohol sirve para aislar el ADN del resto de sustancias celulares que se
liberan tras la lisis o rotura celular. También, al fijarse al ADN y ser poco
denso, asciende con él en el tubo de ensayo.
Pueden aparecer diferencias en los diferentes grupos debido a diferentes
variables como pueden ser las cantidades de cada producto que se utilizan,
la cantidad de plátano que se utiliza finalmente, o bien los tiempos de
reposo o espera para que reaccionen.
