Ammonia

C Para la determinación de amoníaco (NH3) en plasma

SIGNIFICACION CLINICA MUESTRA

Se ha demostrado que el aumento de los niveles de amonía- Plasma con EDTA
co (hiperamonemia) causa efectos tóxicos sobre el sistema (Ver Limitaciones del Procedimiento)
nervioso central. Existen diversas enfermedades, tanto a) Recolección: extraer la muestra evitando estasis y hemóli-
hereditarias como adquiridas, que causan hiperamonemia. sis. Centrifugar en un tubo tapado tan pronto como sea posible.
La deficiencia hereditaria de enzimas del ciclo de la urea b) Aditivos: emplear únicamente EDTA (Anticoagulante W
es la principal causa de hiperamonemia en niños. Entre las de Wiener lab) como anticoagulante.
causas adquiridas que ocasionan aumento en los niveles de c) Sustancias interferentes conocidas: la hemólisis visible
amoníaco se encuentran la enfermedad hepática avanzada interfiere en el ensayo. No se observan interferencias signi-
y la insuficiencia renal. ficativas por bilirrubina hasta 60 mg/dL, hemoglobina hasta
50 mg/dL ni triglicéridos hasta 500 mg/dL.
FUNDAMENTOS DEL METODO Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
El método se basa en la reacción del amoníaco de la muestra drogas en el presente método.
con α-cetoglutarato y NADPH en presencia de glutamato d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: co-
deshidrogenasa (GLDH) para producir glutamato y NADP+. locar la muestra en hielo y ensayar de inmediato. El plasma
La disminución de la absorbancia a 340 nm es proporcional es estable durante 3 horas a 4oC en un recipiente tapado.
a la concentración de amoníaco en plasma. Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes
GLDH de realizar el ensayo.
α-cetoglutarato + NH3 + NADPH
α-glutamato + NADP+ MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
REACTIVOS PROVISTOS - Espectrofotómetro.
A. Reactivo A: α-cetoglutarato 8,0 mmol/L, NADPH 0,35 mmol/L - Baño de agua a la temperatura de reacción seleccionada.
y GLDH 1000 kU/L en buffer Tris 100 mmol/L, pH 8,6. - Cronómetro.

REACTIVOS NO PROVISTOS CONDICIONES DE REACCION

Ammonia Calibrator de Wiener lab. Longitud de onda: 340 nm
Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC
INSTRUCCIONES PARA SU USO Tiempo de reacción: 5 minutos
Reactivo Provisto: listo para usar. Volumen de muestra: 100 uL
Volumen final de reacción: 1,1 mL
PRECAUCIONES
El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro".
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales PROCEDIMIENTO
de trabajo en el laboratorio de análisis clínico. En dos cubetas mantenidas a la temperatura seleccio-
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de nada, marcadas B (blanco) y D (muestra o calibrador),
acuerdo a la normativa local vigente. colocar:
B D
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO Muestra o Calibrador - 100 uL
Reactivo Provisto: estable en refrigerador (2-10oC) hasta Agua destilada 100 uL -
la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Reactivo A 1,0 mL 1,0 mL
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS Mezclar e incubar durante 30 segundos. Leer la absor-
REACTIVOS bancia DO1 de inmediato y luego DO2 a los 2,5 minutos
La solución del reactivo debe ser clara. Si es turbia, el reac- exactos.
tivo puede estar deteriorado.
CALCULO DE LOS RESULTADOS BIBLIOGRAFIA
Amoníaco (ug/dL) = ∆AM x factor ∆A = DO2- DO1 - Tietz, N.W., Clinical Guide to Laboratory Tests. 3rd ed.
Philadelphia, PA: W.B. Saunders Co; 1995:44.
x ug/dL - Young, D.S., Effects of preanalytical variables on clinical
Factor = laboratory test. AACC Press. Third ed., 2007.
∆AC
- Mondzac A,  Ehrlich GE,  Seegmiller JE - An enzymatic
donde: determination of ammonia in biological fluids - J. Lab. Clin.
∆AM: ∆Absorbancia de la muestra Med. 66/3:526-31, 1965.
x ug/dL: concentración de amoníaco en el Calibrador
∆AC: ∆Absorbancia del Calibrador

METODO DE CONTROL DE CALIDAD

Ammonia Control de Wiener lab.

VALORES DE REFERENCIA
Hombres: 25 - 94 ug/dL (14,7 - 55,3 umol/L)
Mujeres: 19 - 82 ug/dL (11,2 - 48,2 umol/L)
Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de
referencia. Los resultados deberán ser evaluados junto con
la historia clínica del paciente, el examen médico y otros
hallazgos de laboratorio.

CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI

Amoníaco (ug/dL) = 1,703 x amoníaco (umol/L)

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Ver Sustancias interferentes en MUESTRA.
No utilizar suero como muestra ya que durante la coagu-
lación puede originarse amoníaco, produciendo resultados
erróneos.
Diluir manualmente las muestras que están por encima
del rango de medición con agua libre de amoníaco recién
destilada o desionizada (ej.: 1+1). Multiplicar el resultado
por el factor de dilución (ej.: 2).
No informar de los resultados generados a partir de una
nueva corrida automática a menos que se agregue una
muestra fresca.

PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: se evaluó de acuerdo al protocolo
EP5-A del CLSI. En este estudio se emplearon dos muestras
con distintas concentraciones de amoníaco (NH3) que se
probaron con 2 corridas diarias en duplicados durante 5 días.
Nivel C.V.wr C.V.t
71,9 ug/dL 3,0% 3,9%
961,3 ug/dL 2,9% 4,3%
b) Límite de detección: el límite de detección es de 15 ug/dL
(9 umol/L) de amoníaco.
c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 1700 ug/dL (1000 umol/L)
de amoníaco.

PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS

Para las instrucciones de programación consulte al manual
del usuario del analizador en uso.

PRESENTACION
- 1 x 20 ml (Cód. 1009693)
- 1 x 20 ml (Cód. 1009911)
Símbolos
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnóstico de Wiener lab.

C
Este producto cumple con los requerimientos
previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de
productos sanitarios para el diagnóstico "in vitro"
M Elaborado por:

P Representante autorizado en la Comunidad

Europea Nocivo

V Uso diagnóstico "in vitro"

Corrosivo / Cáustico

X Contenido suficiente para <n> ensayos

Irritante

H Fecha de caducidad

i Consultar instrucciones de uso

l Límite de temperatura (conservar a)

 No congelar
Calibr. Calibrador

b Control

F Riesgo biológico

Volumen después de la reconstitución

b Control Positivo

Cont. Contenido c Control Negativo

g Número de lote h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina

Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
PM-1102-92 2000 Rosario - Argentina