BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL

BALANCES EN
BIORREACTORES
Wilman Alcaraz Zapata
Escuela de Microbiología
1
 BALANCES SEGÚN EL MODO DE
OPERACIÓN DE LOS BIORREACTORES

Discontinua o por Discontinua Alimentada Continua o

lotes o Fed Batch quimiostato

2
BALANCE GENERAL PARA BALANCES
DE MATERIA
Entrada  Salida  Genera  Consume  Acumulacion

Masa Masa Masa

Masa que Masa que
generada consumida acumulada
entra al sale del
en el en el en el
sistema sistema
sistema sistema sistema

3
 Balance general de materia
en biorreactores operados en lote
Masa Masa Masa
Masa que Masa que
generada consumida acumulada
entra al sale del
en el en el en el
sistema sistema
sistema sistema sistema

4
 Balances de componentes: Biomasa

Ecuación para biomasa 𝛶𝑋 = µ. 𝑋

𝑑 𝑉. 𝑋 𝑑 𝑉. 𝑋
= 𝛶𝑋 . 𝑉 = µ − µ𝑑 . 𝑉. 𝑋
𝑑𝑡 𝑑𝑡

Si el volumen permanece constante y se 𝑑 𝑋

considera que μ >>μd, se obtiene: = µ. 𝑋
𝑑𝑡

5
Durante las fases de crecimiento y desaceleración la velocidad de
crecimiento celular se describe mediante la ecuación:

rx: Velocidad volumétrica de producción de biomasa

dX
 rx   . X (Kg/m3 s) o (g/Lh)
µ: Velocidad específica de crecimiento (1/h) o (h-1)
dt X: Concentración de células viables (Kg/m3) o (g/L)

Integrando la ecuación, se obtiene una expresión para X en función del tiempo .

 .t
ln X  ln X o  .t X  X oe

6
Recordemos que las velocidades de crecimiento celular se
expresan generalmente en términos de tiempo de duplicación,
el cual es el tiempo requerido para duplicar la población. Se
calcula mediante el reemplazo de X=2Xo

ln 2
td 


7
 Componente 2: Sustrato
Ecuación para sustrato 𝑑 𝑆 𝑑 𝑆. 𝑉 µ 𝑞𝑝
= 𝛶𝑆 =− + + 𝑚𝑠 . 𝑋. 𝑉
𝑑𝑡 𝑑𝑡 𝑌𝑋𝑆 𝑌𝑃𝑆
µ−µ𝑑 .𝑡
Si V permanece constante y 𝑋 = 𝑋𝑜. 𝑒 se tiene: Que es qp?

𝑑 𝑆 µ 𝑞𝑝 µ−µ𝑑 .𝑡
=− + + 𝑚𝑠 . 𝑋𝑜 . 𝑒
𝑑𝑡 𝑌𝑋𝑆 𝑌𝑃𝑆

Integrando y despejando S Y despejando t

1 𝑞𝑝 𝑚𝑠 µ.𝑡
1 𝑆𝑜 − 𝑆𝑓
𝑆= + + . (𝑋𝑜 . 𝑒 − 𝑋𝑜 ) + 𝑆𝑓 𝑡 = . ln 1 + 𝑞𝑝
𝑌𝑋𝑆 µ. 𝑌𝑃𝑆 µ µ 1 𝑚
+ + 𝑠 . 𝑋𝑜
𝑌𝑋𝑆 µ. 𝑌𝑃𝑆 µ

8
Componente 3: Producto
Ecuación para producto 𝑑 𝑃 𝑑 𝑃. 𝑉
= 𝛶𝑃 = 𝑞𝑝 . 𝑋. 𝑉
𝑑𝑡 𝑑𝑡
Si V permanece constante y 𝑋 = 𝑋𝑜. 𝑒 µ−µ𝑑 .𝑡 se tiene:

𝑑 𝑃 µ.𝑡
= 𝑞𝑝 . 𝑋𝑜 . 𝑒
𝑑𝑡
Integrando y despejando P Y despejando t

µ.𝑡
𝑋𝑜 . 𝑞𝑝 . 𝑒 −1 1 µ
𝑃𝑓 = + 𝑃𝑜 𝑡 = . ln 1 + . (𝑃𝑓 − 𝑃𝑜
µ µ 𝑋𝑜 . 𝑞𝑝

9
 𝑔𝑃
qp: velocidad especifica de formación de producto (
𝑔𝑋.ℎ
)

q p  Yp / x *  Ecuación para metabolito primario

asociado al crecimiento

qp   Ecuación para metabolito secundario

no asociado al crecimiento

q p  Yp / x *    Ecuación para metabolito parcialmente

asociado al crecimiento

10
 BALANCES SEGÚN EL MODO DE
OPERACIÓN DE LOS BIORREACTORES

Discontinua o por Discontinua Alimentada

o Fed Batch Continua o
lotes quimiostato

11
Los parámetros de operación característicos de este sistema son la tasa de
dilución o velocidad de dilución (D) y el tiempo de residencia τ.

1 𝑉
τ= =
𝐷 𝐹
La tasa de dilución indica el número de veces en que se da el cambio o renovación
del volumen del reactor por hora

El tiempo de residencia indica el tiempo promedio en que permanece una partícula

(sustrato, células, etc) en el reactor, desde que ingresa hasta que sale.

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 Balance general de materia
en biorreactores operados en continuo
Masa Masa Masa
Masa que Masa que
generada consumida acumulada
entra al sale del
en el en el en el
sistema sistema
sistema sistema sistema

𝐸𝑛𝑡𝑟𝑎𝑑𝑎 − 𝑆𝑎𝑙𝑖𝑑𝑎 + 𝐺𝑒𝑛𝑒𝑟𝑎 − 𝐶𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑒 = 0

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 Componente 1: Biomasa
Ecuación para biomasa

𝑑 𝑉. 𝑋
= 𝐹𝑒 . 𝑋𝑒 − 𝐹𝑠 . 𝑋𝑠 + µ. 𝑋. 𝑉 − µ𝑑 . 𝑋. 𝑉
𝑑𝑡
No hay acumulación ni entrada de biomasa y se considera que μ >> μd, se
obtiene:
𝐹𝑠 𝐹𝑠
𝐹𝑠 . 𝑋𝑠 = µ. 𝑋. 𝑉 . 𝑋𝑠 = µ. 𝑋 𝑉
. = 𝐷 (𝑡𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛)
𝑉
µ𝑚𝑎𝑥 . 𝑆
𝐷=µ 𝐷=µ=
𝐾𝑠 + 𝑆
14
Componente 2: Sustrato

µ 𝑞𝑝
𝐹𝑒 . 𝑆𝑒 − 𝐹𝑠 . 𝑆𝑠 − + + 𝑚𝑠 . 𝑋. 𝑉 = 0
𝑌𝑋𝑆 𝑌𝑃𝑆
𝐹
 Dividiendo por V, reemplazando = 𝐷 y µ por D, se tiene:
𝑉
𝐷 𝑞𝑝
𝐷. 𝑆𝑒 − 𝐷. 𝑆𝑠 − + + 𝑚𝑠 . 𝑋 =0
𝑌𝑋𝑆 𝑌𝑃𝑆
 Despejando S:  Despejando X:

𝐷 𝑞𝑝 𝑋 𝐷. (𝑆𝑒 −𝑆𝑠 )
𝑆𝑒 = + + 𝑚𝑠 . + 𝑆𝑠 𝑋= 𝑞𝑝
𝑌𝑋𝑆 𝑌𝑃𝑆 𝐷 𝐷
+ + 𝑚𝑠
𝑌𝑋𝑆 𝑌𝑃𝑆
15
 Si no existe síntesis de producto, o la producción está asociada
directamente al metabolismo energético, se tiene:

𝐷. (𝑆𝑒 −𝑆𝑠 )
𝑋=
𝐷
+ 𝑚𝑠
𝑌𝑋𝑆
 Si además se puede despreciar los efectos de mantenimiento, la
ecuación anterior se transforma en:

𝑋 = (𝑆𝑒 −𝑆𝑠 ). 𝑌𝑋𝑆

16
 Despejando S de la ecuación de Monod e incorporándolo en la
ecuación anterior se tiene:

𝐷. 𝐾𝑠
𝑠= 𝑋 = (𝑆𝑒 −𝑆𝑠 ). 𝑌𝑋𝑆
µ𝑚𝑎𝑥 − 𝐷

𝐷. 𝐾𝑠
𝑋 = 𝑆𝑒 − . 𝑌𝑋𝑆
µ𝑚𝑎𝑥 −𝐷
 Esta ecuación es una expresión para la concentración de células en estado
estacionario en términos de D y del rendimiento.

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 Componente 3: Producto

𝐹𝑒 . 𝑃𝑒 − 𝐹𝑠 . 𝑃𝑠 + 𝑞𝑝 . 𝑋. 𝑉 = 0
𝐹
 Dividiendo por V, reemplazando = 𝐷 se tiene:
𝑉

𝐷. 𝑃𝑒 − 𝐷. 𝑃𝑠 + 𝑞𝑝 . 𝑋 =0
 Despejando P:
𝑞𝑝 . 𝑋
𝑃𝑠 = 𝑃𝑖 +
𝑃𝑒
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Proceso continuo
Ecuación de lavado (washout)

 max Si
Dcrit  Cuando S = Si
K s  Si
Tasa de dilución óptima
 Ks 
Doptima   max 1  
 K s  Si  Nota: la Dopt es menor que la Dcritc

La Productividad de la biomasa esta dada por: P = X*D y por lo tanto Pmax = Xopt*Dopt


X optima  X max  Yxs Si  K s  K s K s  Si  
19
Analicemos…
Se tiene un reactor de 5 m3 que opera en estado estacionario. Este
se alimenta con una concentración de sustrato de 20 kg/m3. El
microorganismo cultivado en el biorreactor presenta las siguientes
características: la velocidad especifica de máximo crecimiento es
de 0,45 h-1, Ks de 0,8 kg/ m3 y Yx/s de 0,45 g/g.

a. Determinar el caudal de alimentación si se alcanza una conversión del

sustrato del 95%.
b. Determinar la productividad de la biomasa para el cultivo y
compararla con la Pmax

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 BALANCES SEGÚN EL MODO DE
OPERACIÓN DE LOS BIORREACTORES

Discontinua o por Discontinua Alimentada

o Fed Batch Continua o
lotes quimiostato

21 21
 Balance general de materia
en biorreactores operados en lote alimentado
Masa Masa Masa
Masa que Masa que
generada consumida acumulada
entra al sale del
en el en el en el
sistema sistema
sistema sistema sistema

𝐸𝑛𝑡𝑟𝑎𝑑𝑎 − 𝑆𝑎𝑙𝑖𝑑𝑎 + 𝐺𝑒𝑛𝑒𝑟𝑎 − 𝐶𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑒 = 𝐴𝑐𝑢𝑚𝑢𝑙𝑎𝑐𝑖ó𝑛

22
Proceso semicontinuo
dV
 F  vol / tiempo  V  Vo  Ft
dt
Componente 1: Biomasa

𝑑 𝑉. 𝑋
 FX i    K d   XV
dV dX
= 𝐹𝑒 . 𝑋𝑒 + µ. 𝑋. 𝑉 − µ𝑑 . 𝑋. 𝑉 X V
𝑑𝑡 dt dt

 FX i    K d   XV
dX
Si se reemplaza dV/dt por F, se tiene: XF  V
dt

23
 Proceso semicontinuo
 FX i    K d   XV
dX
XF  V
dt
Dividiendo por V , y definiendo la velocidad de dilución D como F/V, se tiene:

 DX i  X   k d  D 
dX
dt
Esta ecuación se simplifica al considerar que no ingresan células y que la velocidad de
muerte es muy pequeña.
𝑑 𝑋
= 𝑋. (µ − 𝐷)
𝑑𝑡

24
 Proceso semicontinuo
 La integración de la ecuación anterior es complicada, debido a que
D es función del tiempo (por qué???). Sin embargo se pueden
derivar expresiones analíticas, realizando simplificaciones.

 Se supone estado seudo-estacionario

𝑑 𝑋 µ𝑚𝑎𝑥 . 𝑆
= 𝑋. (µ − 𝐷) 𝐷=µ=
𝑑𝑡 𝐾𝑠 + 𝑆
𝐷. 𝐾𝑠
𝑠=
µ𝑚𝑎𝑥 − 𝐷

25
Proceso semicontinuo
Componente 2: Sustrato

𝑑 𝑆. 𝑉 µ 𝑞𝑝
= 𝐹𝑒 . 𝑆𝑒 − + + 𝑚𝑠 . 𝑋. 𝑉
𝑑𝑡 𝑌𝑋𝑆 𝑌𝑃𝑆

𝑑 𝑆 µ 𝑞𝑝
= 𝐷. (𝑆𝑒 − 𝑆) − + + 𝑚𝑠 . 𝑋
𝑑𝑡 𝑌𝑋𝑆 𝑌𝑃𝑆

26
Proceso semicontinuo
Suponiendo que el cultivo no genera producto o que éste se encuentra
asociado directamente a la generación de energía y además que la energía
de mantenimiento puede despreciarse, se tiene

𝑑 𝑆 µ
= 𝐷. (𝑆𝑒 − 𝑆) − .𝑋
𝑑𝑡 𝑌𝑋𝑆
𝑑𝑠
Teniendo en cuenta que S << Si, = 0 y que  = D
𝑑𝑡

𝑋 = 𝑌𝑋𝑆 . 𝑆𝑖 En este caso se asume que el sustrato se

usa solo para biomasa

27
Proceso semicontinuo

Sin embargo, debido a que el volumen del líquido aumenta, haciendo que X
cambie, por lo tanto:

 Yxs S i D   t
V0
X  Xo
V
Donde: Xo y Vo corresponden a la biomasa y al volumen existente al inicio
de la alimentación

28
Proceso semicontinuo
Suponiendo que el cultivo no genera producto y además que la energía de
mantenimiento puede despreciarse, se tiene
𝑑 𝑆 µ
= 𝐷. (𝑆𝑒 − 𝑆) − .𝑋
𝑑𝑡 𝑌𝑋𝑆
Si se desee mantener constante el crecimiento, se deberá mantener constante
la concentración residual de azúcar del medio, de esta manera, se puede
asumir un estado pseudo estacionario y obtener la siguiente ecuación:

µ 𝑉𝑜. 𝑋𝑜. ℮µ 𝑡−𝑡𝑜

𝐹 𝑡 = .
𝑌𝑥 𝑆𝑖
𝑠
29
Proceso semicontinuo
Componente 3: Producto

dPV
 q p XV P´ PV Como el volumen cambia con el tiempo
dt
dP´
 q p XV  q p X (Vo  Ft ) Cuando qp es constante
dt
V0 Vo D.t
Ft
P´ Po ´ q p X (Vo  )t P0´ P0V0 P  Po  q p X (  )t
2 V V 2
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Analicemos…
En una planta de desarrollo biotecnológico quiere implementar un nuevo
proceso en semicontinuo que pueda manejar un flujo de medio de cultivo
de 3,7 L/h. El Microbiólogo Industrial encargado de la planta recomienda
que la etapa de alimentación de los cultivos no debe ser mayor a 4 días. En
la planta se dispone de un biorreactor de 666,66L (volumen total) y la
fermentación inicia con 200 L. ¿Cuánto debe durar el proceso si el reactor
solo se puede llenar con medio de cultivo hasta el 75% del volumen del
reactor?

A. será posible o no su implementación?

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 Analicemos…
Lactobacillus casei es cultivada en un fermentador que opera en fed-batch. La
etapa previa en lote parte con una concentración de sustrato de 20 Kg/m3 y es
inoculado con 0,1 Kg/m3 de biomasa. Esta etapa tiene una duración de 12 h en
donde se logra una conversión de sustrato del 90%. La etapa de alimentación se
lleva a cabo con un flujo de 4 m3/h y una concentración de sustrato en la
alimentación de 80 kg/m3. El proceso opera en estado pseudo-estacionario.
Las características de esta cepa son:
µmax = 0,35 h-1; Yx/s = 0,23 kg biomasa/kg sustrato; Ks = 0,15 kg/m3; ms = 0,135 kg/kg.h
Al cabo de 6 horas de operación el volumen de líquido en el biorreactor es de 40 m3.

Determine la cantidad de biomasa (kg) y sustrato en el biorreactor (kg) al cabo de 6 horas de

operación.
Nota: Indique los supuestos requeridos para resolver el ejercicio

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