Coprocultivo

Es un examen de laboratorio para encontrar organismos en las heces (materia fecal) que puedan
causar enfermedad y síntomas gastrointestinales.

Forma en que se realiza el examen

Se necesita una muestra de materia fecal.

Hay muchas formas de recolectar la muestra.

 Usted puede recoger las heces en un envoltorio plástico que se coloca suelto sobre la taza
del inodoro y se sostiene en su lugar con el asiento. Luego, se coloca la muestra en un
recipiente limpio. 
 Hay un equipo para recolección de la muestra que trae una gasa especial que se usa para
recogerla. Después de recoger la muestra, se coloca en un recipiente.

No mezcle orina, agua ni papel higiénico con la muestra.

Para los niños que usan pañales:

 Cubra el pañal con un envoltorio plástico. 

 Coloque el envoltorio plástico de forma tal que impida que la orina y las heces se mezclen.
Esto proporcionará una muestra mejor.

Retorne la muestra al laboratorio lo más pronto posible y no incluya en ella papel higiénico ni orina.

En el laboratorio, un técnico coloca una parte de la muestra en un plato especial lleno de un gel
que estimula la multiplicación de bacterias u otro microorganismos. Si se presenta proliferación de
ellos, se identifican los microorganismos. El técnico del laboratorio también puede realizar más
exámenes para determinar el mejor tratamiento.

Preparación para el examen

Usted recibirá un recipiente colector para recoger la muestra de materia fecal. 

Lo que se siente durante el examen

No ocasiona incomodidad.

Razones por las que se realiza el examen

Este examen se realiza cuando el médico sospecha que usted puede tener una infección
gastrointestinal. Asimismo, se puede llevar a cabo si usted presenta diarrea intensa que no
desaparece o que sigue reapareciendo.

Resultados normales

No hay bacterias ni otros microorganismos anormales en la muestra.

Hable con el médico acerca del significado de los resultados específicos de su examen.

Significado de los resultados anormales

Los resultados anormales pueden significar que usted tiene una infección intestinal.

Riesgos

No existen riesgos.

Consideraciones

Además del coprocultivo, a menudo se hacen otros exámenes de las heces tales como:

 Tinción de Gram en heces

 Frotis fecal
 Examen de huevos y parásitos en las heces

Nombres alternativos

Cultivo de heces; Cultivo de materia fecal

Referencias

DuPont HL. Approach to the patient with suspected enteric infection. In: Goldman L, Schafer AI,
[Link]'s Cecil Medicine. 24th ed. Philadelphia, PA: Saunders Elsevier; 2011

Análisis de las heces

¿De qué se componen las heces?

Las heces ‒o excrementos‒ están compuestas por sustancias alimenticias no digeribles (fibras, por
ejemplo) y no digeridas, como secreciones mucosas y celulosa, restos de jugos intestinales
procedentes del hígado, el páncreas y otras glándulas, restos celulares, grasa, agua, sales
minerales y enormes cantidades de bacterias.

En términos porcentuales, tres cuartas partes de las heces son agua y la restante cuarta parte
materia sólida constituida por bacterias muertas (30%), proteínas (2-3%), grasa (10-20%), 
sustancias inorgánicas (10-20%) y restos no digeribles (30%).

¿En qué consiste el análisis?

El análisis consiste en la recogida de una muestra de heces de la persona para la que se solicita el
estudio que, convenientemente conservada, es enviada a un laboratorio especializado en este tipo
de estudios.

Existen diferentes métodos de análisis de las heces, cada uno de los cuales tiene su finalidad
específica. Son los siguientes:

 Estudio bioquímico: mediante el que se determinan las características generales de

las heces: color, consistencia, acidez, etc.
 Prueba del guayacol: que permite detectar la presencia de pequeñas cantidades de
sangre oculta en las heces (no es visible a simple vista) y mezclada con ellas. La detección
de sangre oculta en heces también se puede realizar mediante el uso de tiras reactivas
que en algunos países se venden en las farmacias.
 Estudio microbiológico: llamado en terminología técnica coprocultivo (cultivo de las
heces), con el que se estudia la posible existencia de una infección y se identifica el
germen causal.
 Estudio parasitológico: mediante el que se puede detectar la presencia en las heces
de larvas y huevos de parásitos que podrían estar causando enfermedades en el tracto
digestivo.

¿Para qué se utiliza?

El análisis de las heces es una de las técnicas diagnósticas de uso frecuente en medicina.
Proporciona información muy valiosa para:

 Determinar si los órganos digestivos funcionan de manera adecuada y mediante el

mismo se puede sospechar la existencia de síndromes o enfermedades intestinales (colitis
ulcerosa, enfermedad de Cronh).
 Diagnosticar infecciones bacterianas o infestaciones por parásitos en el tracto intestinal.
 Detectar la presencia de sangre oculta en las heces, que es característica de procesos
inflamatorios, infecciosos o tumorales (cáncer de colon, por ejemplo).

¿Cómo se recoge la muestra y cómo se hace el análisis?

Para proceder al análisis previamente se ha de obtener una muestra de las heces del paciente
para el que se ha solicitado el análisis.

 Lo habitual es que la recogida de la muestra la realice el propio paciente en su domicilio.

  La emisión de las heces se hará en un recipiente limpio (orinal o similar) que no
contenga restos de jabones, detergentes, desinfectantes o lejía. Posteriormente se
transferirá una pequeña muestra (no más del tamaño de una nuez si las heces son sólidas,
y 5-10 mililitros si son líquidas) a un recipiente estéril de cierre hermético ayudándose de
una espátula, cuchara o similar asimismo estériles. Conviene no llenar excesivamente el
recipiente con las heces pues, una vez cerrado éste, los gases que se generan a partir de
ellas pueden hacer saltar la tapa del recipiente con una cierta violencia.
 La recogida puede realizarse en cualquier momento del día y la muestra para análisis se
ha de llevar en el recipiente herméticamente cerrado al laboratorio a la mayor brevedad
posible (antes de 24 horas). En todo caso, la muestra debe guardarse en el frigorífico si ha
de transcurrir algún tiempo entre su recogida y su entrega.
 Se ha de evitar que la muestra de heces se mezcle con orina, por lo que la persona a la
que pertenece aquélla ha de orinar y realizar una adecuada higiene de la zona que rodea
al ano antes de iniciar la defecación.
 Para el estudio bioquímico o de sangre oculta en heces bastará una sola muestra; en
cambio, para otros estudios más complejos, como la búsqueda de grasa o de parásitos,
será necesaria la recogida de muestras sucesivas en distintos días según las indicaciones
del médico.

Preparación para el análisis

No se requiere ninguna preparación especial por parte de la persona que ha de proporcionar la

muestra de heces, pero sí se han de tener en cuenta las siguientes observaciones:

 En el caso de la mujer, es preferible no realizar la toma de la muestra durante los días

de la menstruación a fin de evitar que la sangre se mezcle con las heces, lo que podría
alterar los resultados del análisis.
 Si la muestra es para realizar un coprocultivo, se ha de evitar la toma en los días previos
a la recogida la toma de antibióticos o antidiarreicos.
 Si la muestra es para estudio parasitológico, conviene evitar la toma en los días previos
de antiácidos y laxantes oleosos, así como las sustancias que se utilizan de ordinario en
los estudios radiológicos del tubo digestivo, como el bario o el bismuto.
 Aun cuando será el médico el que dará las indicaciones oportunas en cada caso, en
general para los estudios parasitológicos se han de recoger tres muestras obtenidas en
días diferentes.
Precauciones, riesgos y contraindicaciones

La recogida de heces para análisis es una técnica simple y segura que no requiere tomar ninguna
precaución; tampoco entraña ningún riesgo ni tiene ninguna contraindicación.

Microbiología clínica
Coprocultivo
 1 – OBJETIVO
Identificar las posibles especies patógenas de microorganismos presentes en las vías
gastrointestinales (Heces) a través del coprocultivo y de sus reacciones bioquímicas.

2 - FUNDAMENTO
La porción inferior del intestino tiene una flora bacteriana normal excesivamente amplia. Los
microorganismos con mayor prevalencia son los anaerobios ( Bacteroides, bácilos gram
positivos, Estreptococos), microorganismos entéricos gran negativos y Enterococcus faecalis.
Cualquier intento por aislar bacterias patógenas de las heces implica la separación de las especies
patógenas, usualmente a través del empleo de medios selectivos diferenciales y de cultivos
enriquecidos. Las principales causas de trastornos gastrointestinales agudos incluyen a los virus,
las toxinas (de: Estafilococos, Vibriones, Escherichia coli ), bacilos entéricos gran negativos
invasores, los fermentadores lentos de la lactosa, la Shigella, la Salmonella y la Campilobacterias.
La importancia relativa de estos grupos tiene grandes discrepancias en las distintas partes del
mundo.
Las heces y los raspados rectales son los especimenes de que se dispone con mayor facilidad.
Debe anotarse, en el examen macrocópico la presencia de sangre, moco o helmintos en la
inspección inicial. Se suspenden los especímenes en un caldo selectivo como el Caldo de
Tetrationato y se cultivan sobre medios ordinarios así como en medios selectivos diferenciales, por
ejemplo Agar EMB, Agar McConkey, Agar S-S, para permitir la separación de los bacilos gran
negativos que no fermentan la lactosa de otras bacterias entéricas comunes.
Los frotis teñidos pueden revelar una prevalencia de leucocitos y de ciertos microorganismos
anormales como Cándida o estafilococos, pero no pueden utilizarse para diferenciar las bacterias
entéricas patógenas de las de la flora normal, por lo que deben realizarse otro tipo de pruebas para
discriminar los tipos de bacterias presentes en la muestra como son las pruebas bioquímicas.

3. MATERIAL
 Agua destilada
 Gradilla
 Tubos de ensayo
 Asa de siembra desechable y normales
 Hisopo
 Papel de filtro
 Pipetas de vidrio
 Medios de cultivo
 Pinzas metálicas
 Alcohol
 Algodón graso
 Vaso de precipitado
 Mechero Bunsen
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Microscopio
 Cubeta de tinción
 Pinzas de madera
 Frasco lavador

3.2 Reactivos:

 Medios de cultivo para aislamiento:

– agar sangre
– agar Mc Conkey
– Agar entérico Hektoen (HK)

 Medios para pruebas bioquímicas:

- Agar Christensen
- KIA

 Colorantes para tincion de Gram: lugol, cristal violeta, fucsina básica, alcohol
 Lugol o Negro sudán
 3.3 Muestras:
Muestra: heces de adulto.

4. PROCEDIMIENTO
El procedimiento fue el siguiente:

1. Recogida de la muestra
Preparación o indicaciones del paciente:

Se debe seguir con el régimen habitual de comidas.

a. para niños/as
Para bebés y niños pequeños que usan pañales:
Se puede cubrir el pañal con un envoltorio plástico. Si se coloca correctamente el envoltorio
plástico, separando las heces de la orina, se puede evitar que éstas se mezclen con el fin de
obtener una muestra mejor.

b. para adultos

Hay muchas maneras de recolectar las muestras. Se pueden recoger las heces con la ayuda de un
envoltorio plástico que se coloca suelto sobre el inodoro y se sostiene en su lugar con el asiento.
Luego se coloca la muestra en un recipiente limpio. El equipo para recolección de la muestra trae
una gasa especial que se usa para recogerla y luego se coloca la muestra en un recipiente limpio.

B. Condiciones para la toma de muestras

Heces que no tengan más de media hora de obtenidas, o muestras tomadas directamente del recto
con un hisopo de algodón. Cuando las siembras no se pueden efectuar de inmediato o la muestra
demora en llegar al laboratorio, se aconseja emulsionar aproximadamente 1g de heces en 1º ml de
un líquido conservador, o bien, depositar en éste el hisopo rectal.

Muestra de heces de 12 o 24 hrs.

Se recogerán las heces en un frasco limpio con cierre hermético, no es necesaria la esterilidad. El
análisis se hará en las 12 horas siguientes a la deposición, guardando la muestra en el frigorífico a
4-10º C. Si el análisis se pospone más de 24 horas se añadirá un volumen igual al de las heces de
una solución acuosa al 5% de formol comercial.

C. Procesamiento de la muestra una vez llega al laboratorio.

- Evitar contaminación por material no estéril.

- Uso de contenedores y medios de transporte apropiados.
- Etiquetar muestra adecuadamente.
- Temperatura de conservación: 4°C para evitar la proliferación bacteriana.

2. Examen macroscópico de la muestra 

Se comprueba su olor, consistencia, presencia de mucus, sangre, restos de alimentos sin digerir.
3. Examen y en fresco. 
Observación en el microscopio: lugol- fresco:
En fresco: Colocamos una gota diluida en agua destila de la muestra en un portaobjetos y
colocamos un cubre encima.
Se realiza una dilución en un tubo de ensayo con una pequeña cantidad de heces recogida con la
ayuda de un asa de siembra desechable y se le añade un poco de agua destilada, se agita un poco
y se obtiene una gota de esta dilución. Dicha gota la colocamos en un portaobjetos y añadimos una
gota de Lugol donde colocaremos un cubreobjetos encima para su posterior observación al
microscopio.
Otro método de observación es realizando el mismo procedimiento pero sustituyendo el lugol por el
negro sudan. Esta tinción está indicada para la observación de grasa.
Prueba de parasitología:
Este tipo de pruebas se realiza cuando se sospecha de la presencia en heces de parásitos. En
nuestro caso, la prueba no es necesaria, ya que el paciente no presenta una sintomatología como
diarrea aguda, gases intestinales excesivos, dolores cólicos, elevación de eosinófilos en sangre u
otros síntomas.
En el examen de parasitología se coloca un poco de muestra en el portaobjetos y se agrega una
gota de lugol.
Con un bote de muestra colocar una gasa y añadir 50 ml de suero fisiológico para poder filtrar
dicha muestra. Al liquido resultante del filtrado de le coloca en un tubo de centrifuga y se centrifuga
5 min. a 3000 r.p.m. se desecha el sobrenadante y obtenemos el sedimento que observaremos con
una gota de lugol añadida para poder observar mejor.

4. Realización de medios de cultivo y siembra 

1. Medios de cultivo utilizados y su utilidad. 

Medios ml/gr AutoclavarRecipiente Utilidad

en el que se
vierte

Aislamiento aislamiento de bacilos Gram

Agar Mac negativos, aerobios y anaerobios
Conkey 25/1.25Si Placa facultativos. diferencia bacterias que
utilizan o no, lactosa.

Medio diferencial para aislamiento y

Agar entérico diferenciación de gram-negativos
Hektoen 25/75.1No Placa entéricos (Salmonella y
Shigella spp)

Pruebas diferenciar microorganismos en base

bioquímicas a la actividad ureásica. Identificar
Agar 25/0.6 Si Tubo bacterias que hidrolizan urea, tales
Christensen como Proteus spp., otras
enterobacterias y estafilococos.
 determinar si un
Microorganismo es capaz de utilizar
KIA 25/1.45Si Tubo la lactosa, produce gas o ácido
sulfhídrico.

Para la realización del medio Christensen, le añadimos 50ml al medio con la técnica de barry, para
realizar la prueba de la ureasa.

6. Siembra e inoculación de placas

Se procede a realizar la siembra, en estría múltiple, con la ayuda de un asa de siembra, tomando
una pequeña cantidad de incóculo de las heces, previamente diluido en suero, teniendo en cuenta
de trabajar en condiciones lo más asépticas posibles. Se tapa la placa y se mete en la estufa en un
periodo de 24-48 horas.

1. Examen morfológico del crecimiento de las colonias

cultivadas macroscópicamente y al microscopio.

Las características físicas de las colonias son de gran ayuda en la identificación. Cada
microorganismo crece de manera diferente formando colonias de distinto color, forma, tamaño,
textura, olor, brillo, etc. Existen colonias más o menos elevadas, con bordes enteros, estrellados,
deflecados, y un largo etc. El tiempo de incubación necesario para que aparezcan las colonias
también puede tener valor en la identificación. Las características de las colonias tampoco ofrecen
un diagnóstico por si solas, pero dirigen los esfuerzos hacia un grupo más o menos amplio de
microorganismos.

Hay colonias muy características, casi exclusivas de determinadas bacterias. Es el caso de las
especies de Proteus, que se extiende ampliamente por la placa formando un velo muy
característico.

1. Examen microscópico
Una vez transcurrido el tiempo necesario se procede a sacar el medio de cultivo, la placa de Petri y
se obtiene una pequeña muestra con la ayuda del asa de siembra y se coloca en un porta
previamente humedecido con una gota de agua destilada. Para poder fijar la muestra lo podremos
realizar con calor, por lo que se pasa a realizarlo con el mechero y cuidando de no quemarnos lo
haremos con la ayuda de una pinza de madera.
A continuación se procede a teñir la muestra.
Tinción azul de metileno:

El procedimiento es bastante sencillo. Primero se ha de fijar la muestra pasando el porta por el

mechero varias veces. Luego se tiñe con el azul de metileno cubriéndola entera. Pasado 5 min. Se
lava con agua destilada se deja secar y se procederá a observar en el microscopio con aceite de
 inmersión y en el objetivo de 100x.
Esto nos permite comprobar la presencia o ausencia de leucocitos. Así:

Presencia de leucocitos: La infección ha cursado con inflamación intestinal. Se trata por tanto de
microorganismos invasivos como Salmonella, Shigella.

ausencia de leucocitos: Significa que no ha habido inflamación por lo que la infección puede ser
debida a virus (Rotavirus) o a bacterias productoras de toxinas (Vibrio cholerae).

Para realizar la tinción de Gram:

Primero se realiza un frotis con la muestra en un portaobjetos.( Realizamos 3 frotis con tres
colonias aisladas). Se fija la muestra en el mechero y se coloca después en la cubeta para
proceder a teñirla.
Se cubre la muestra con 1 minuto de cristal violeta, 1 min de lugol, 30 seg y 1 min de fucsina
básica, y se lava con agua destilada entre colorante y colorante además del alcohol y se deja
secar.
Esta tinción nos sirve para distinguir entre las bacterias Gram + y Gram – según sea la
composición de su pared y apreciar visualmente su forma y organización.

1. Realización de pruebas bioquímicas

Prueba KIA
Sembramos en picadura dos tubos con el medio KIA e incubamos a 37ºC durante 18-24 horas.
Observar. Con la prueba bioquímica del KIA hemos detectado la capacidad que tienen las
enterobacteriáceas para metabolizar o no la glucosa y/o lactosa, producción de gas y de ácido
sulfhídrico.

B-GALACTOSIDASA
Nos indica si la bacteria en su metabolismo fermenta la lactosa. Esta prueba la realizaremos
preparando una suspensión densa del microorganismo en un tubo

donde añadiremos una gota de tolueno y mezclaremos para después añadir el disco de ONPG.
Incubaremos a 37ºC y leemos antes de 24h el resultado.

OXIDASA 
Esta prueba nos indica si el microorganismo contiene la enzima citocromo oxidasa descartando
que fuera un microorganismo anaerobio estricto pudiendo ser aerobio o anaerobio facultativo. Se
procede a impregnar una tira reactiva con una muestra de la colonia crecida en la placa de Agar
Sangre y observar la reacción que produce cambiando de color.

CATALASA 
Para esta prueba se toma una colonia del microorganismo joven y se coloca sobre un
portaobjetos donde añadiremos una gota de peróxido de hidrógeno observando si produce o no
burbujas.

UREASA 
Esta prueba se realiza sembrando el microorganismo en medio Christensen en tubo inclinado
por la superficie en zigzag. El resultado se observa después de una incubación a 37ºC con un
cambio de color del indicador.
 [Link]
EXAMEN MACROSCOPICO DIRECTO DE LA MUESTRA
Cantidad: 13.20
Color: marrón oscuro
Olor: fecaloideo
Consistencia: dura y consistente
Forma: cilíndrica
Presencia de:
- moco: no
- sangre: no
- pus: no
- fragmento de carne: no
- fragmento de fécula: si
- trozos de mucosa epitelial: no
- falsas membranas: no

OBSERVACIÓN MICROSCOPIO EN FRESCO Y CON LUGOL

- En fresco: Morfológicamente se observan microorganismos Bacilos.

- Lugol: Se observa almidón tiñido de un suave color liláceo. No se observan parásitos.

EXAMEN MORFOLÓGICO DEL CRECIMIENTO DE LAS COLONIAS

CULTIVADAS MACROSCÓPICAMENTE Y AL MICROSCOPIO 
- Examen morfológico del crecimiento de las colonias cultivadas macroscópicamente y al
microscopio:

1. Agar sangre: Colonias redondas, borde entero, circular, color blanquecino.

2. Christensen: Colonias redondas, circular, convexa.
3. Kia: Se observa producción de Ácido en todo el tubo, burbujas, agrietamiento e incluso
desplazamiento del medio.
4. McConkey: Colonias rosas a rojas si el aislado es capaz de fermentar la Lactosa y en caso de
que fueran colonias sin color sería el caso contario.
5. Hecktoen: No creció nada en este medio en 24 horas puede ser debido a un periodo de
incubación insuficiente o a la siembra con inoculo muy diluido.

TINCIONES

 Con la tinción de Gram detectamos el tipo de bacteria que es, gracias a la diferenciación
de su morfología.
Observación morfológica

AZUL DE METILENO

AGAR SANGRE 
- Se observan diferentes agrupaciones de cocos: cocos, diplococos, tétrada, estreptococos,
estafilococos.
McCONKEY 
- Se observa agrupaciones de bacilos teñidos de azul por el azul de metileno.
CHRISTENSEIN
- Se observan agrupaciones de cocobacilos teñidos de azul por el azul de metileno.

TINCION DE GRAM

CHRISTENSEIN 
- Se observan agrupaciones de cocobacilos Gram +.
McCONKEY 

- Se observan agrupaciones de bacilos Gram – , algunos presentan puntos de color azul en la zona
terminal del bacilo. Esto puede ser debido a que se estuvieran dividiendo

por lo que al romperse la capa externa de peptidoglicano se pudo teñir con el colorante de violeta
de genciana. También pueden ser restos de este mismo colorante al realizar la tinción.
AGAR SANGRE 

- Se observan cocos gram negativos ( rosados) en su mayoría, pero también se pueden observan
algunos color azul del colorante violeta de genciana.

BACTERIAS ENCONTRADAS EN EL INTESTINO GRUESO DE HUMANOS.

BACTERIAS  Incidencia (%)BACTERIAS  Incidencia (%)

Bacteroides fragilis 100 Escherichia coli 100

Bacteroides 100 Salmonella enteritidis 3-7

melaninogenicus

Bacteroides oralis 100 Salmonella typhi 0.00001

Lactobacilos 20-60 Klebsiella species  40-80

Clostridium perfringens 25-35 Enterobacter species  40-80

Clostridium septicum 5-25 Proteus mirabilis 5-55

Clostridium tetan 1-35 Pseudomonas 3-11

aeruginosa
Bifidobacterium bifidum 30-70 Peptostreptococcus Común

Staphylococcus aureus 30-50 Peptococcus Oderado

Streptococcus faecalis 100 Methanogens  Común

CUADROS DE RESULTADOS

MICROORGA-NISMO MEDIO DE TINCION DE GRAM TINCION DE AZUL DE

CULTIVO METILENO

Escherichia coli Mac conkey Bacilos Gram - Bacilos

Peptostreptococcus Agar sangre Cocos, diplococos y estreptococos Cocos, diplococos y

gram + estreptococos

Peptococcus Agar sangre Cocos y racimos Gram + Cocos y racimos

Streptococcus Agar sangre Coco Gram + cocos

faecalis 

MICROORGANISMO PRUEBAS BIOQUIMICAS

B-GALACTOSIDASA OXIDASA KIA CATALASA UREASA

Peptostreptococcus - -

Peptococcus - -

Streptococcus - -
faecalis

Escherichia coli + - A/ A, G + -
 [Link]ÓN
Hemos llegado a la conclusión que en la muestra de heces no se ha encontrado ningún
microorganismo patógeno ya que por las pruebas realizadas hemos deducido que los
microorganismos existentes en la muestra son los habituales que presenta la flora intestinal, como
es Escherichia coli , ya que creció en el medio McConkey con la morfología característica de la E.
coli,( color rosado) basándonos también en la tinción de Gram donde aparecen en forma de Bacilos
Gram – y que da positivo en la prueba de la B-galactosidasa, además de dar negativo en la prueba
de la oxidasa, lo que nos hace sospechar que es una enterobacteria dado que estas siempre son
oxidasa negativa.
Las especies de Peptostreptococcus son organismos comensales en humanos, que viven
predominantemente en la boca, la piel, el aparato digestivo y el excretor, y componen una parte de la flora
intestinal bacteriana. Sospechamos que está presente en la muestra ya que creció como es normal en el
Agar Sangre con colonias blanquecinas y siendo una de las colonias que observamos con la tinción de Gram
tenían forma cocoide en cadenas cortas, en parejas o individualmente siendo Gram +.
El Peptococcus, al igual que el peptostreptococcus crece de la misma manera en agar sangre y al tomar una
colonia diferente observamos que la distribución morfológica era diferente ya que aparecían formando
racimos o solos.
Y por último creemos que también se encuentra entre los microorganismos el Enterococcus faecalis, ya que
también creció en el Agar Sangre y en la tinción de gram fueron cocos gram positivos distribuidos en
cadenas o pares. 

I. INTRODUCCIÓN

Se denomina coprocultivo a la siembra de una muestra adecuada de heces en

medios de cultivo apropiados para el desarrollo de bacterias entéricas patógenas.
Muestra adecuada es aquella que ha sido recolectada durante el periodo agudo de
la enfermedad, cuando es más fácil comprobar presencia de pus, moco o sangre, y
antes de la administración de antimicrobianos.
Para realizar el examen se emplean heces que no tengan más de media hora de
obtenidas, o muestras tomadas directamente del recto con un hisopo de algodón.
Cuando las siembras no se pueden efectuar de inmediato o la muestra demora en
llegar al laboratorio, se aconseja emulsionar aproximadamente 1g de heces en 1º ml
de un líquido conservador, o bien, depositar en éste el hisopo rectal.

El líquido o solución conservadora se prepara de la siguiente manera:

NaCl 4.2 g

K2HPO4 3.1 g
KH2PO4 1.0 g

Glicerol 300 ml
H2O 700 ml

Este líquido, al que se le añade rojo fenol, se distribuye en tubos, que se esterilizan
en autoclave durante 20 minutos a 120° C. Las muestras tomadas mediante
hisopado rectal pueden ser portadas en tubos que contengan medio de Cary-Blair,
colocando el hisopo en su interior.

Medios de cultivo
Para facilitar el aislamiento de bacterias entéricas patógenas se utilizan medios de
enriquecimiento y medios selectivos. Los más empleados son los siguientes:
 Medios de enriquecimiento
 Caldo con tetrationato (Mueller y Kauffmann). Este método posee la propiedad de inhibir
o destruir el crecimiento de Salmonella yShigella. Contiene, entre otros, tiosulfato de sodio,
sales biliares y yodo, el cuál actúa sobre el medio para determinados géneros, en
especial Salmonella; de aquí su uso como paso previo a la siembra en placas de medios
selectivos.
 Caldo con selenito (Leifson). Posee selenito, ácido de sodio que inhibe parcialmente al
grupo coliforme durante las primeras horas de cultivo (12 a 24 horas), y permite el rápido
desarrollo de salmonelas y shigellas.

Selenito sódico 4 g

Peptona 5 g
Manitol 4 g

Fosfato disódico anhidro (Na2HPO4 ) 10 g

Agua destilada 1000 ml

2. Medios selectivos
 Agar SS (salmonella-shigella). Este medio selectivo, empleado para
aislar Salmonella y Shigella ejerce una buena inhibición sobre agentes coliformes, sin limitar
el desarrollo de los patógenos gramnegativos. Se utiliza especialmente junto al agar-sulfito de
bismuto, para siembra de materiales provenientes de medios enriquecedores, como caldo
tetrationato y caldo con selenito. Contiene sales biliares, lactosa, citrato y tiosulfato sódico,
citrato férrico, verde brillante y rojo neutro como indicador. Shigella ySalmonella, como
también otros agentes que no fermentan la lactosa, aparecen como colonias lisas,
transparentes a opacas; las pocas colonias fermentadoras de la lactosa que se pueden
desarrollar tienen color rojo y un centro negro. Conviene señalar que la bilis o las sales
biliares inhiben el crecimiento de microorganismos grampositivos y esporulados sin interferir
en el crecimiento de los bacilos gramnegativos.
 Agar MacConkey. Es un medio selectivo-diferencial que contiene sales biliares, las cuales
inhiben la flora grampositiva. Los agentes del grupo coliforme dan colonias de color rojo,
debido a que fermentan la lactosa. En cambio, Salmonella y Shigella sp. forman colonias
incoloras.
 Agar XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato). Medio indefinido, mixto, sólido y diferencial. En
él crecerán microorganismos quimioheterótrofos formadores de sulfhídrico a partir de
sulfato. En la receta aparece rojo fenol, en el cual actúa el indicador de pH.

Se pueden presentar tres tipos de anomalías intestinales:

 Infección intestinal ! Debida a la producción de cambios ecológicos por la acción directa
del microorganismo.
 Intoxicación alimentaria ! Producida indirectamente por el microorganismo a través de la
producción de toxinas, antes de la ingestión por la persona.
 Toxiinfeción alimentaria ! Producida por el microorganismo a través de la producción de
toxinas, después de su ingestión por la persona.

Hay que tener en cuenta la biota presente en condiciones normales. Así:

 Lactantes (alimentación materna).
Altos niveles de Bifidobacterium

Bajos niveles de [Link] y Enterobacterias

 Lactantes (alimentación artificial)
Altos niveles de grampositivos
Bajos niveles de Bifidobacterium
 Niños y adultos
Predominancia de Anaerobios

Anaerobios Facultativos y Aerobios:

% [Link] " 80%

% Enterococos " 14%

% Staphylococcus y Streptococcus " 4%

% Otros " 2%
" Dieta rica en proteínas: predominancia de biota Grampositiva.

" Dieta rica en hidratos de carbono: predominio de Gramnegativa.

II. TOMA Y OBSERVACIÓN DE MUESTRAS

Una vez tomada la muestra como se mencionó anteriormente procedemos a la

observación de la muestra. Ésta ha de hacerse a dos niveles:
 Macroscópicamente.
Se comprueba su olor, consistencia, presencia de mucus, sangre, restos de
alimentos sin digerir.
 Microscópicamente.
Sometemos la muestra a una tinción simple con azul de metileno. Esto nos permite
comprobar la presencia o ausencia de leucocitos. Así:
 " presencia de leucocitos ! la infección ha cursado con inflamación intestinal. Se
trata por tanto de microorganismos invasivos como Salmonella, Shigella o ETEC.

" ausencia de leucocitos ! significa que no ha habido inflamación por lo que la

infección puede ser debida a virus (Rotavirus) o a bacterias productoras de toxinas
(Vibrio cholerae).
III. REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA

Vamos a realizar un análisis de heces. En primer lugar haremos un examen

macroscópico de las heces y a continuación sembraremos en agar SS, en agar XLD
y en agar MacConkey. Paralelamente vamos a sembrar [Link] en estos dos medios.
Finalmente haremos una tinción de Gram.
IV. RESULTADOS
 Examen macroscópico
 color marrón claro

 olor normal
 consistencia intermedia

 pocos restos de alimentos

 ausencia de sangre

 ausencia de mucus
 Examen microscópico
B.1 Placa XLD: heces
Medio indefinido, mixto, sólido y diferencial. En él crecerán microorganismos
quimioheterótrofos formadores de sulfhídrico a partir de sulfato. En la receta
aparece rojo fenol, en el cual actúa el indicador de pH.

Resultados ! Medio muy virado a rosa. Colonias negras.

B.2 Placa SS: heces

Este medio selectivo, empleado para aislar Salmonella y Shigella ejerce una buena

inhibición sobre agentes coliformes, sin limitar el desarrollo de los patógenos
gramnegativos. Shigella y Salmonella, como también otros agentes que no
fermentan la lactosa, aparecen como colonias lisas, transparentes a opacas; las
pocas colonias fermentadoras de la lactosa que se pueden desarrollar tienen color
rojo y un centro negro.
Resultados ! aparecen colonias transparentes o lisas con un punto negro por lo que
son lactosa negativa.

B.3 Placa XLD: [Link]
Resultados ! aparecen colonias incoloras negras, por lo que son lactosa negativa y
sulfhídrico positiva

B.4 Placa SS: [Link]
Resultados ! La mayoría de las colonias están muy aisladas y se ha formado
sulfhídrico. Aparecen de color negro con un halo blanco alrededor. Son lactosa
negativa porque si fuera lactosa positiva hubiera aparecido una tonalidad más
rosada. Prácticamente no hay [Link], es un medio muy selectivo, por lo que para
coprocultivo se utiliza casi siempre medio SS.

B.5 Placa MacConkey
Es un medio selectivo-diferencial que contiene sales biliares, las cuales inhiben la
flora grampositiva. Los agentes del grupo coliforme dan colonias de color rojo,
debido a que fermentan la lactosa. En cambio, Salmonella y Shigella sp. forman
colonias incoloras.

Resultados ! Aparecen colonias incoloras por lo que son microorganismos lactosa

negativa. Podemos sospechar que se trata deSalmonella.
Vamos a identificar ahora, a partir de una colonia determinada de la

placa de XLD los microorganismos que observemos.

Resultados ! cocobacilos gramnegativos

Finalmente vamos a tomar una colonia de la muestra de coprocultivo y vamos a

hacer una identificación mediante una prueba llamada Api20E para Enterobacterias.
Consiste en una tira en la cual encontramos diferentes pocillos. En cada uno de
éstos hay una serie de reactivos que reaccionarán con la muestra dando unas
características que nos llevan a la identificación del microorganismo. Así:
- ONPG "

- ADH +
- LDC +

- ODC +
- CIT "

- H2S +
- URE "

- TDA "
- IND "

- VP "
- GEL "
- GLU +

- MAN +
- INO +

- SOR +
- RHA +

- SAC "
- OXI "

- MEL +
- AMY "
- ARA +
Resultado ! Salmonella

rocultivo
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Es un examen de laboratorio para analizar si hay bacterias u otros microbios en una muestra de
orina.

Forma en que se realiza el examen

La mayoría de las veces, la muestra se recogerá como una muestra de orina limpia en el

consultorio del médico o en la casa. Usted usará un equipo especial para recolectar la orina.

Una muestra de orina se toma introduciendo una sonda de caucho delgada (catéter) a través de la
uretra hasta la vejiga. Esto lo puede hacer un médico en el consultorio o en el hospital. La orina se
vacía en un recipiente estéril y luego se retira la sonda.

En raras ocasiones, el médico puede optar por recolectar una muestra de orina introduciendo una
aguja a través de la piel de la parte baja del abdomen hasta la vejiga.

La orina se lleva luego a un laboratorio para su análisis. Los resultados tardan de 24 a 48 horas.

Preparación para el examen

Si es posible, recoja la muestra cuando la orina haya estado en la vejiga durante dos a tres horas.

Lo que se siente durante el examen

Cuando se introduce la sonda, se puede sentir presión. Se usa un gel especial para insensibilizar la
uretra.

Razones por las que se realiza el examen

El médico puede ordenar este examen si usted tiene síntomas de una infección urinaria o vesical,
tales como dolor o ardor al orinar.

A usted también le pueden hacer un urocultivo después de que le hayan tratado una infección con
el fin de constatar que todas las bacterias hayan desaparecido.

Valores normales

La "proliferación normal" es un resultado normal, lo cual significa que no hay ninguna infección.

Significado de los resultados anormales

Un examen "positivo" o anormal es cuando se encuentran bacterias o cándidas en el cultivo. Esto

casi siempre significa que usted tiene una infección urinaria o vesical.

Otros exámenes pueden ayudarle al médico a saber qué bacterias o cándidas están causando la
infección. La causa de la infección ayudará a determinar qué antibióticos se emplearán para
tratarla.

Algunas veces, en el cultivo se puede encontrar más de un tipo de bacterias o sólo una pequeña
cantidad.

Riesgos

Existe un riesgo muy poco frecuente de un agujero (perforación) en la uretra o la vejiga si el médico
o el personal de enfermería utiliza una sonda.

Consideraciones

Se puede presentar un resultado falso negativo en el urocultivo si usted ha estado tomado

antibióticos recientemente.

Nombres alternativos

Cultivo y sensibilidad de la orina

Referencias

Hooton TM, Bradley SF, Cardenas DD, et al. Diagnosis, prevention, and treatment of catheter-
associated urinary tract infection in adults: 2009 International Clinical Practice Guidelines from the
Infectious Diseases Society of America. Clin Infect Dis. 2010;50(5):625-663.

Ban KM, Easter JS. Selected urologic problems. In: Marx JA, Hockberger RS, Walls RM, et al,
eds. Rosen's Emergency Medicine: Concepts and Clinical Practice. 7th ed. Philadelphia, Pa: Mosby
Elsevier; 2009: chap 97.

Dean AJ, Lee DC. Bedside laboratory and microbiologic procedures. In: Roberts JR, Hedges JR,
eds. Clinical Procedures in Emergency Medicine. 5th ed. Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier;
2009:chap 68.
 Actualizado: 6/19/2013

Versión en inglés revisada por: Daniel Levy, MD, PhD, Infectious Diseases, Lutherville Personal
Physicians, Lutherville, MD. Review provided by VeriMed Healthcare Network.

Traducción y localización realizada por: DrTango, Inc.

Hojee la encicloped

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I. INTRODUCCIÓN
Varios miembros de las enterobacterias pueden aislarse de la orina en el curso de infecciones del
aparato urinario o urogenital, como también en otros tipos de afecciones.

La orina vesical normalmente no contiene microorganismos. Sin embargo, los primeros 10 a 15 ml.
de orina emitidos por personas normales de cualquier edad o sexo, siempre presentan bacterias, las
que proceden de la flora corriente de la uretra anterior, prepucio, región vulvovaginal o de
contaminación fecal. La flora de estas localizaciones es variada y está constituida por estafilococos
coagulasa-positivo y negativos, estreptococos diversos, bacilos difteromorfos, enterobacterias,
lactobacilos, micoplasmas, bacterias anaerobias, levaduras y muchos microorganismos. En la
presencia de esta flora influyen localización anatómica, sexo, edad, hábitos de higiene y factores
patológicos propios del huésped.
En la etiología de las infecciones urinarias predominan los bacilos gramnegativos. Los procesos
agudos y crónicos son provocados por E. coliy por especies de los
géneros Enterobacter, Proteus, Citrobacter, Pseudomonas, Serratia, etc. De estos agentes, E.
coli se aísla en 80% de los casos. [Link] y [Link] se identifican en pacientes
hospitalizados, muy debilitados o sometidos a instrumentación repetida. Con bastante menor
frecuencia desempeña un papel causal Streptococcus faecalis (enterococo) y excepcionalmente los
estafilococos.

El examen microbiológico de una muestra de orina se denomina Urocultivo. Éste se ha de hacer

desde un punto cuantitativo y cualitativo.
A. Examen cuantitativo

 Método de conteo en placa o recuento de colonias. Introducido por Kaas para evitar los
riesgos del cateterismo vesical y diferenciar bacteriuria verdadera de contaminación, se realiza de la
siguiente manera:
 Se homogeneiza la muestra mediante agitación.

 Se diluye la muestra al 1:100, colocando 0.1 ml. de orina en 9.9 ml. de caldo de tripticasa o
de suero fisiológico, estériles.
 Se preparan diluciones al 1:1000 y 1:10 000, a partir de la dilución al 1:100.
 Se deposita 1 ml. de cada dilución en placas de Petri esterilizadas, sobre las cuales se vacía
un tubo de agar-tripticasa o medio CLED, fundidos y enfriados a 45°. Mediante rotación suave, se
favorece la distribución homogénea de la siembra.

 Se incuban todas las siembras a 37° durante 24 a 48 horas.

Para calcular el número de colonias se eligen placas que contengan entre 30 y 300 colonias.
Contadas éstas, basta multiplicar su número por la dilución respectiva para obtener la cuenta total.

 Método del asa calibrada. Esta estimación cuantitativa consiste en sembrar una placa con
medio de agar-sangre o agar con CLED en una muestra de orina, sin centrifugar, empleando asa de
platino calibrada (4 mm. de diámetro). Después de incubar las siembras a 37° durante 24 a 48 horas,
se cuenta el número de colonias desarrolladas y el resultado se multiplica por 100, ya que la asada
de platino contiene 0.01 ml. de orina.
Los resultados del estudio cuantitativo se informan de la siguiente manera:

 No hubo desarrollo microbiano.

 Menos de 10 000 colonias por ml.

 Entre 10 000 y 100 000 colonias por ml.

 Más de 100 000 colonias por ml.

Cuando se obtienen dos recuentos sucesivos con más de 100 000 colonias por ml., la probabilidad
de infección es de 80%, cifra que se eleva a 95% si el mismo resultado se logra en tres recuentos
sucesivos.
Por lo general, las muestras contaminadas tienden a mostrar cuentas inferiores a 10 000 colonias/ml.
Cuando el recuento revela valores intermedios, entre 10 0000 y 100 000 colonias /ml, el examen
debe repetirse. Conviene advertir que pueden pasar inadvertidas infecciones urinarias verdaderas, si
no se toman en cuenta cuentas inferiores a 100 000 colonias por ml, ya que existen diversos factores
que pueden explicar recuentos bajos en infecciones urinarias verdaderas, diuresis acentuada,
obstrucción uretral, infecciones crónicas e infecciones por cocos grampositivos.

b. Examen cualitativo
El estudio cualitativo, que conduce a la identificación del agente, se realiza mediante la siembra de
la muestra homogeneizada, en placas con agar-sangre, agar-CLED, agar de Levine o MacConkey.
Es recomendable el medio CLED, porque favorece el desarrollo de bacterias patógenas urinarias y
permite la identificación de los microorganismos contaminados. Su contenido en cisteína y lactosa y
su deficiencia en electrolitos facilitan, por una parte, el reconocimiento de colonias de bacterias y,
por otra, inhiben el carácter invasor de las colonias deProteus. Así se facilita la identificación de
estafilococos, bacilos difteromorfos, lactobacilos y otros agentes que pueden contaminar la orina.

La identificación final de los agentes se hace mediante el estudio de sus propiedades bioquímicas y
características serológicas. Esto permite establecer relaciones de identidad entre microorganismos
aislados en cultivos sucesivos o de control, y definir el estado de revivida o de reinfección. De esto
deriva el valor que tiene el conocimiento del biotipo, del serotipo (particularmente en E. coli), del
piocinotipo (en especial cuando es de Ps. aeruginosa) y del antibiótico. Éste último se obtiene al
comparar el antibiograma de cepas aisladas de muestras obtenidas de diferentes oportunidades en
un mismo paciente Si existe correspondencia, se concluye que se trata de una misma cepa.
* Métodos rápidos de diagnóstico.

Existen varios procedimientos prácticos y económicos para el diagnóstico rápido de infecciones

urinarias o de bacteriurias significativas. Son útiles para investigar grandes grupos de personas.
Estos métodos pueden ser microscópicos, químicos o de microcultivo.
La coloración de un frotis de orina no centrifugada mediante el método de Gram constituye un
índice práctico para diferenciar entre infección y contaminación urinarias. En efecto, la observación
de un bacilo gramnegativo por campo microscópico puede realizarse cuando la muestra contiene
más de 100 000 bacterias por ml. Sin embargo, la dificultad de encontrar bacterias en frotis de orina
por este método, provoca resultados falsos negativos. Menos confiable aun es el hallazgo de 20 o
más bacterias gramnegativas por campo microscópico de sedimento urinario, aunque dicho número
permita sospechar recuentos superiores a 100 000 microorganismos por ml.

Los procedimientos químicos están basados en propiedades enzimáticas de las bacterias, que se
pueden poner de manifiesto en la orina. Entre las pruebas se pueden mencionar: catalasa, reducción
de nitratos, reducción de trifeniltetrazolio e hipoglucosuria. Estos métodos, aunque rápidos y
económicos, tienen el inconveniente de ser indirectos, basarse en propiedades metabólicas de las
bacterias y no en su desarrollo y observación, y producir muchos falsos negativos.
II. REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA

A. TOMA DE LA MUESTRA
El método más recomendado para realizar la recogida de muestra para un urocultivo es la toma,
durante el periodo medio de la micción, siempre que el paciente sea capaz de limpiarse y recogerla,
ya que la muestra de orina requiere una cuidadosa limpieza de los genitales externos. Esta técnica
impone los siguientes requisitos:

 El paciente debe tener como mínimo de tres a cuatro horas de retención de orina, y la muestra
más representativa es la primera orina de la mañana.
 El paciente no debe haber recibido tratamiento antimicrobiano durante los tres días anteriores a
la recolección, exceptuando los casos de control de tratamiento, y paciente gravemente enfermos.

Esta técnica no es apropiada para niños que no controlan sus esfínteres, en cuyo caso se procede a
hacer limpieza de los genitales y a fijar un recolector de orina estéril (especial para bebés). Se deja
en esta posición hasta que el niño realice su micción; se despeja el recolector y se sella
inmediatamente. No debe dejarse colocado el recolector por tiempo prolongado. La alta
probabilidad de contaminación en muestras de orina de lactantes, obliga a realizar el estudio en tres
muestras sucesivas de micción espontánea.
En ciertas ocasiones se justifica el sondeo uretral o la aspiración suprapúbica. No obstante, existe un
pequeño riesgo de infección tras sondeo uretral, el cual varía según el tipo de paciente. Debido a la
colonización por bacterias de la uretra, suele ser difícil definir si los microorganismos aislados a
partir de orina tomada con sonda son de origen urinario o uretral.
En los pacientes con sonda uretral permanente con drenaje cerrado, la orina para cultivo se recoge
después de desinfectar la pared de la sonda en su punto de unión con el tubo de drenaje. Se aspira la
orina por medio de punción en la sonda con una aguja 21. En ningún momento deberá sacarse de la
bolsa de drenaje material para cultivo.
b. Conservación y/o Transporte

En lo que respecta al transporte y conservación de muestras de orina, hay que tener en cuenta que la
orina constituye un excelente medio de cultivo para casi todas las bacterias, por lo que una vez
recogida, la muestra debe enviarse de inmediato al laboratorio, previa colocación del envase en un
recipiente que contenga cubos de hielo. Este procedimiento permite que el número de bacterias
permanezca relativamente constante por un tiempo considerable.
C. Procesamiento de la muestra

Una vez se ha obtenido la muestra de orina se homogeneiza en dos partes:

 Una parte de la muestra va destinada al Examen en Fresco y posterior Tinción.

 La otra parte va destinada al Urocultivo.

En nuestra práctica vamos a realizar en primer lugar una siembra en placa con la muestra de orina.
Cuando se desean observar las características de las colonias de un microorganismo, las placas de
Petri resultan muy adecuadas para tal fin. La poca profundidad de la placa y la extensa superficie de
cultivo facilitan el examen macroscópico de las colonias así, como si fuera necesario, la
observación microscópica de las mismas.

Para aislar colonias de modo individualizado el medio en placas de Petri se inocula de la siguiente
manera. Empleando un asa estéril se extiende la toma de la muestra a modo de estrías en el primer
cuadrante. A continuación se hace lo mismo en el segundo cuadrante pero en una dirección
diferente a la anterior. En el tercer y cuarto cuadrante hacemos lo mismo.
Una vez realizada la extensión de la muestra dejamos incubar la muestra a 37° C durante 24 o 48
horas.

A continuación vamos a hacer un urocultivo en el cuál emplearemos un tubo a cuyo tapón hay
unido una lengüeta. En cada cara de la lengüeta hay una medio de cultivo. En nuestro caso, uno de
los medios de cultivo es agar MacConkey y el otro es Agar CLED.
EL agar MacConkey es un medio selectivo-diferencial. Los microorganismos aislados de orina
pueden ser fermentadores o no fermentadores de la lactosa. Se emplean medios diferenciales para
distinguir unos de otros. El medio MacConkey se utiliza para diferenciar los microorganismos
intestinales fermentadores de la lactosa de los que no presentan esta propiedad. En el agar, los
nutrientes básicos son el agar y la peptona. El taurocolato sódico (sal biliar) inhibe la flora Gram
positiva, mientras que la lactosa y el indicador (rojo neutro) diferencia los fermentadores de la
lactosa de los que no tienen esta capacidad.

Los microorganismos que fermentan la lactosa producen ácido láctico, que neutraliza la sal biliar y
absorbe el colorante dando colonias rojizas. Los microorganismos que no fermentan la lactosa dan
una reacción alcalina, no toman el rojo neutro y dan lugar a colonias incoloras.
Composición del agar MacConkey:
Taurocolato sódico 5 g.

Peptona 20 g.
Lactosa 10 g.

ClNa (opcional) 5 g.
Agar deshidratado 15 g.

Solución acuosa rojo neutro

al 1% 5-7 ml.

Agua destilada 1000 ml.

El otro medio de cultivo utilizado es diferente según la casa comercial. Uno de los más utilizados es
el agar CLED. Según la casa comercial éste recibe diferentes nombres; en nuestro caso se llama
Brolacyn. El medio CLED (Cistina-Lactosa-Deficiente en Electrolitos) se recomienda para
bacteriología urinaria. La deficiencia en electrolitos evita el crecimiento invasivo de Proteus
spp. , al mismo tiempo que se consigue una buena diferenciación de colonias para la mayor parte de
los patógenos.

Composición del agar CLED:

Peptona 4 g.

Extracto de carne 3 g.
Triptona 4 g.

Lactosa 10 g.
L-Cistina 0.128 g.

Azul de Bromotimol 0.02 g.

Agar en polvo 15 g.

H20 destilada 1000 ml.

Tanto en el medio MacConkey como el Brolacyn tienen un sustrato llamado MUG sobre el cuál
actúa E. coli. De modo que si existe E. coli. en la muestra romperá la molécula de MUG dejando
libre una parte de ella de tal modo que al aplicarle luz ultravioleta (360-400 nm.)emitirá
fluorescencia.

Para la realización de nuestra práctica introducimos la lengüeta en la muestra de orina, lo cerramos

y dejamos incubar durante 24 horas.
III. RESULTADOS

Placa de agar MacConkey ! No ha crecido nada

Tubo-Lengüeta MacConkey/CLED ! Los colores no han virado y mantienen e brillo.
 Resultados: no se observan microorganismos en la muestras analizadas.
Vemos un análisis paralelo para ver como deberían haber virado los colores. Así:

 verde brillante ! amarillo mate

 anaranjado ! rojo fuerte

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Urinocultivo

¿Qué es?

El urinocultivo (cultivo de orina), o urocultivo como también se denomina, es una prueba (análisis)
de laboratorio, que tiene como finalidad detectar la presencia de microorganismos infecciosos,
fundamentalmente bacterias y hongos, en la orina de las personas.
¿Para qué se utiliza?

La orina es un líquido transparente y amarillento cuyas funciones son la eliminación de residuos

tóxicos del organismo y la regulación y control de mecanismos básicos orgánicos, que, en
condiciones normales es aséptico, es decir, que no contiene microorganismos infecciosos. Sin
embargo, en situaciones no normales la orina puede contener bacterias (lo que se conoce como
bacteriuria) que, si están presentes en un número o concentración suficientemente elevados,
pueden causar una infección urinaria, o mejor, una infección del tracto urinario. Dependiendo de la
parte de este tracto que esté afectada por la infección, ésta recibirá diferentes
denominaciones: cistitis, uretritis,protatitis, orquiepididimitis, pielonefritis o absceso renal.
Las infecciones del tracto urinario se pueden producir tanto en la comunidad como en personas
hospitalizadas, en las que habitualmente revisten una mayor gravedad, y son más frecuentes en
las mujeres que en los hombres.

Las manifestaciones clínicas de estas infecciones pueden inducir al médico a sospechar su

existencia e incluso ser suficientes en ciertos casos para establecer el diagnóstico de infección,
pero en otros el diagnóstico de certeza sólo se puede establecer mediante la práctica de un
urinocultivo (urocultivo). En él se identifica el microorganismo (bacteria u hongo) que está presente
en la orina y, a partir de ahí, mediante estudios adicionales se puede determinar la sensibilidad de
esos microorganismos a los diferentes antibióticos y seleccionar el más adecuado para
combatirlos.

¿Cómo se realiza el urinocultivo?

Para realizar el urinocultivo es preciso recoger una muestra de orina del paciente.

Métodos para la recogida de la orina

Para la recogida de la muestra se pueden utilizar diferentes métodos dependiendo de las

condiciones en que se encuentre el paciente. El principio común a todos ellos es que la toma se ha
de hacer en condiciones de asepsia, evitando la contaminación externa de la orina recogida.

Mediante micción espontánea

La recogida la realiza la persona cuya orina se va a cultivar o, en el caso de niños muy pequeños,
sus padres o personas responsables. Para la recogida se ha de utilizar un recipiente estéril, de
boca ancha y con tapón de rosca para su cierre hermético. El procedimiento a seguir es como
sigue:
  La orina a recoger será la de primera hora de la mañana, dado que es cuando está más
concentrada y ofrece las mejores condiciones para su estudio, en este caso, su cultivo.
 Antes de la micción se ha de proceder primero a un lavado y secado de manos y
después a un cuidadoso lavado de la zona genital con agua y jabón pero no con
desinfectantes, aclarando abundantemente con agua para eliminar los restos de jabón. La
mujer utilizará una compresa empapada en jabón y se lavará de delante hacia atrás, es
decir, de la vagina hacia el ano.
 Antes de iniciar la micción, la mujer separará con su mano izquierda los labios vaginales
mientras con la derecha sostiene el recipiente estéril. El hombre ha de retraer el prepucio
dejando al descubierto la cabeza del pene.
 Una vez hecho esto se iniciará la micción sin recoger la primera parte de ella. Esa
primera orina que no se recoge servirá para arrastrar y eliminar los gérmenes que haya en
la uretra. Sí se recogerá la orina de la porción media de la micción y nuevament
 El médico que le haya solicitado el cultivo le indicará la cantidad de orina que ha de
recoger, pero normalmente es suficiente con 10-20 cm3. En cualquier caso, no ha de llenar
el recipiente por completo.
 Finalmente se de tapar el recipiente enroscando el tapón de forma que quede
herméticamente cerrado. Durante todo el procedimiento se ha de evitar tocar el interior del
recipiente o del tapón con ninguna parte del cuerpo u otro elemento para evitar una posible
contaminación.
 La muestra así se recogida se ha de entregar a la mayor brevedad posible (como
máximo en el plazo de 2 horas) en el laboratorio en que se llevará a cabo el cultivo. Si no
fuera posible entregarla en es tiempo, se ha de mantener en la nevera a una temperatura
de 4 grados centígrados. En estas condiciones puede conservarse útil para cultivo durante
24 horas.
En el caso de las niñas o niños pequeños la recogida de la muestra de orina se realizará en una
bolsa o colector estéril, específicamente diseñado al efecto, que le proporcionará el centro sanitario
o que podrá adquirir en la farmacia, procediendo como sigue:

 Lavar con agua y jabón la zona genital del niño o niña y aclarar cuidadosamente para
eliminar cualquier resto de jabón. Secar con una toalla limpia. No utilizar desinfectantes.
 Aplicar la bolsa o colector al área genital de acuerdo a las instrucciones proporcionadas
por el personal sanitario o por el fabricante.
 Dado que los niños de esta edad no tienen todavía control de esfínteres, es decir, no
pueden orinar a voluntad, se ha de observar el colector al menos cada media hora para
 comprobar si se ha producido la micción. Si ésta no ha tenido lugar durante la primera
hora, se ha de retirar el colector y colocar uno nuevo repitiendo el procedimiento desde el
principio
 Una vez recogida orina suficiente (de 5 a 10 cm3 es suficiente) se ha de retirar y cerrar
el colector de acuerdo a las instrucciones que constarán en él.
 Para la entrega de la muestra en el laboratorio se han de tener en cuenta las mismas
indicaciones que en el caso de los adultos.

Otros métodos de recogida

En determinadas situaciones (por ejemplo, pacientes hospitalizados que llevan colocada una sonda
vesical permanente) o en determinados pacientes (por ejemplo, niños muy pequeños en los que no
se ha podido utilizar el método de la micción espontánea para la recogida de una muestra de orina
válida para cultivo) se utilizan métodos de recogida como el sondaje vesical o la punción
suprapúbica. En ambos casos la técnica la realiza personal sanitario (médicos o enfermeras)
experto.

La muestra así obtenida se envía al laboratorio donde la orina se coloca en unos recipientes
cilíndricos que contienen sustancias que favorecen la proliferación de los microorganismos
infecciosos que pueda haber en la orina de la muestra. Estos recipientes así preparados se
conocen como medios de cultivo y son analizados por los expertos en Microbiología para observar
si se produce proliferación de microorganismos, habitualmente bacterias, que confirme la
existencia de una infección.

Otras consideraciones

La obtención de una muestra de orina para cultivo no requiere ninguna preparación especial por
parte del paciente. Por lo demás, se trata de una técnica simple y absolutamente segura que no
requiere ninguna precaución ni entraña riesgo o complicación algunos.

Resultados del urinocultivo

Un resultado normal (negativo) quiere decir que no ha habido proliferación de bacterias o de otros
microorganismos en el medio de cultivo, lo que quiere decir que no hay infección. Un resultado
anormal (positivo) indicaría lo contrario, es decir, crecimiento bacteriano y por tanto presencia de
infección.
No obstante, se pueden producir resultados falsos positivos (crecimiento de bacterias que no
proceden del organismo del paciente) por contaminación de la muestra en algún momento del
proceso de su obtención o cultivo, o falsos negativos en caso de que el paciente estuviera tomando
antibióticos en el momento de recoger la muestra de orina o haberlos tomado en los días
inmediatamente anteriores.
ultivo de muestra faríngea
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Es una prueba de laboratorio que se hace para identificar microorganismos que pueden causar una
infección en la garganta. Casi siempre se utiliza para diagnosticar faringitis estreptocócica.

Forma en que se realiza el examen

A usted se le solicitará que incline la cabeza hacia atrás con la boca bien abierta. El médico frota
con un hisopo o aplicador de algodón estéril a lo largo de la parte posterior de la garganta cerca de
las amígdalas. Usted debe contener las náuseas y cerrar la boca mientras el aplicador toca esta
área.

Es posible que el médico necesite raspar la parte posterior de la garganta varias veces, lo cual
mejora las probabilidades de detectar bacterias.

Preparación para el examen

No utilice enjuagues bucales antisépticos antes del examen.

Lo que se siente durante el examen

La garganta puede doler al momento del examen e igualmente se puede experimentar una
sensación de náuseas cuando se toca la parte posterior de la garganta con el aplicador de
algodón, pero el examen sólo dura unos cuantos segundos.

Razones por las que se realiza el examen

Este examen se realiza cuando se sospecha de una infección en la garganta, en particular

una faringitis estreptocócica. Un cultivo de garganta también puede ayudarle al médico a
determinar qué antibióticos funcionarán mejor en su caso.

Valores normales

Un resultado normal o negativo significa que no se encontró ninguna bacteria u

otros microorganismos que puedan causar un dolor de garganta.

Significado de los resultados anormales

Un resultado anormal o positivo en el cultivo significa que se observaron bacterias u otros

microorganismos que pueden causar un dolor de garganta en el exudado faríngeo.

Riesgos
Esta prueba es segura y se tolera bien. En muy pocos pacientes, la sensación de náusea puede
llevar a una urgencia de vomitar o toser.

Nombres alternativos

Cultivo de garganta y sensibilidad; Cultivo de exudado faríngeo

Referencias

Wessels MR. Clinical practice. Streptococcal pharyngitis. N Engl J Med. 2011;364(7):648-655.

Weber R. Pharyngitis. In: Bope ET, Kellerman RD, eds. Conn’s Current Therapy 2012. 1st ed.
Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier; 2011:chap 1.

Nussenbaum B, Bradford CR. Pharyngitis in adults. In: Flint PW, Haughey BH, Lund LJ, et al,
eds. Cummings Otolaryngology: Head & Neck Surgery. 5th ed. Philadelphia, Pa: Mosby Elsevier;
2010:chap 13.

Actualizado: 5/15/2012

Versión en inglés revisada por: Linda J. Vorvick, MD, Medical Director and Director of Didactic
Curriculum, MEDEX Northwest Division of Physician Assistant Studies, Department of Family
Medicine, UW Medicine, School of Medicine, University of Washington. Also reviewed by David
Zieve, MD