COLORACIONES CITOLOGICAS
INTRODUCCION
La citología es la ciencia que estudia las células. También se conoce
comúnmente como los exámenes de laboratorio para determinar anormalidades
en las células de determinada área del cuerpo.
En biología, la citología se conoce a su vez con el nombre de biología celular. La
célula se define como unidad base de la vida por Robert Remak (1815-1865) en
1830, que definiría el primer postulado de la Teoría celular.
Por otro lado, la citología es usada en la medicina para referirse a los exámenes
que se hacen a muestras de tejido en determinadas áreas del cuerpo. Estas
muestras generalmente son extraídas con la técnica conocida como citología
exfoliativa y puede ser realizada en la cavidad oral, los pulmones, la vejiga o en el
estómago.
Las citologías sirven como una forma de prevención, ya que, la detección de un
cáncer en sus primeras fases es una de las claves para combatirlo con éxito.
1. TIPOS DE OBSERVACIONES MICROSCOPICAS
1.1 OBSERVACIÓN EN FRESCO
Son preferibles en las situaciones siguientes:
La morfología de las bacterias se altera cuando se desecan y tiñen. Cuando las bacterias se
observan para determinar movilidad Para observar los cambios citológicos que ocurren
durante la división celular Por este método se observan fácilmente algunas inclusiones
celulares como vacuolas y materias grasa.
1.2 OBSERVACIÓN CON TINCIONES
Para observar las características morfológicas de las bacterias.
Identificación y diferenciación de microbios entre especie y dentro de la misma especie
(tinción diferencial o selectiva).
Tinción simple: un solo colorante.
Tinción diferencial: mas de un colorante.
Tinción negativa: colorea el medio que rodea a la bacteria permaneciendo esta sin teñir.
2. TINCIONES
2.1 Tipos
2.1.1 Vitales
Son aquellas que se practican sobre células que están vivas, mediante la
introducción de un colorante en la circulación de un organismo vivo.
Ejem: el verde Jano y el azul de metileno.
2.1.2 Supravitales
son aquellas que se realizan sobre células o tejidos vivos, pero que están
aislados del organismo del que proceden.
2.1.3 No vitales
se realizan sobre células muertas.
2.2 PAP
Fue descrita por el Doctor George Papanicolaou en 1942
Es una técnica sencilla, de fácil aplicación, segura cuando la toma, fijación y
los reactivos utilizados son de buena calidad
Esta coloración es un método policrómico que consta de una tinción nuclear
y un contraste citoplasmático, basado en la diferenciación de color de los
diversos tipos celulares y sus componentes, para el diagnóstico de cambios
malignos y la tipificación celular. Ésta tiene como ventajas:
a) Buena definición del detalle nuclear, evidenciando el patrón de
cromatina.
b) Aspecto transparente de los citoplasmas y diferenciación celular, que
permite apreciar grados de maduración celular y actividad metabólica.
Consta de cuatros pasos principales:
1. Eliminación del Fijador.
2. Tinción del núcleo con la hematoxilina.
3. Tinción del citoplasma con Orange G y EA.
4. Aclaramiento
Tinción diferencial o polícroma, hematoxilina de Harris, OG6, EA-50
2.3 HEMATOXILINA EOSINA
Muy usado en citología e histología
Consta de dos partes: tinción nuclear y tinción citoplasmática
- Hematoxilina: Existen varios tipos; las mas utilizadas son la de
Harris(muestra secado al aire) y la de Carazzi(muestra fijada con alcohol de
96°). Colorea el núcleo celular de un tono azul – oscuro.
- Eosina: Colorante de contraste; colorea el citoplasma de un tono rosáceo o
anaranjado.
2.4 MAY – GRUNWALD – GIEMSA
Tinción diferencial, Es utilizada para la diferenciación de células sanguíneas
normales y anormales en frotis de sangre periférica y médula ósea, así como
para la tinción de cortes histológicos y muestras citológicas.
2.5 DIFF – QUICK
Es una variante comercial de tinción de Romanowsky, comúnmente utilizada
en la tinción citológica para teñir y diferenciar rápidamente una variedad de
frotis, comúnmente frotis de sangre y no ginecológicos, incluidos los de
aspirado con aguja fina.
Se realiza sobre extensiones secadas al aire
Se basa en una modificación de la tinción de Wright-Giemsa iniciada por
Bernard Witlin en 1970
Tiene ventajas sobre la antigua técnica de tinción de Wright-Giemsa, ya que
reduce el proceso de 4 minutos a una operación simplificada de 15 segundos
y permite un aumento selectivo Tinción eosinofílica o basófila, dependiendo
del tiempo que quede el frotis en las soluciones de tinción
2.6 ROMANOWSKY
Tinción diferencial, azul de metileno – eosina, Wrigth – Giemsa, Diff - quick
2.7 COLORACIONES RÁPIDAS
Azul de metileno 1% para Dx rápido y ex. de material en fresco.
3. CLASIFICACION
3.1.1 Básicos:
Consisten en un catión coloreado unido a un anión incoloro. Tiñen la célula
bacteriana uniformemente (ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos)
(cromatina nuclear de pro y eucariotas)
(más usados en citología bacteriana).
Ej: clorhidrato (-) de azul de metileno (+). la safranina, la fucsina básica, el
cristal violeta.
3.1.2 Ácidos :
Tienen el catión incoloro unido a un anión coloreado. No tiñen la célula
bacteriana, pueden usarse como color de contraste (coloración negativa).
Tiñen estructuras citoplasmáticas de las células eucariotas(Rx básicas)
Ej: eosinato (-) de sodio (+),la fucsina ácida y el rojo Congo.
4. TECNICAS
4.1 Frotis o película (extensión)
4.2 La fijación
Los microorganismos queden adheridos al portaobjeto ( coagula las sustancias
proteicas)
TIPOS
CON CALOR (O MÉTODO DE KOCH)
FIJACIÓN QUÍMICA: alcohol metílico, formalina al 5 % (v/v), licor de
Hoffman (partes iguales
4.3 Coloración
4.4 Frotis o película (extensión)
Utilizar portaobjetos limpios y desengrasados.
4.5
5. OBTENCION DE LA MUESTRA
6. TIPOS DE FIJADORES
ETANOL 96°
PAP
Ginecoógicos
Secreciones Bronquiales / Durante 15 – 20 min.
METANOL 100°
Fijados al aire
BAFF
Diff- Quick
CITOSPRAY
Capa protectora de polietilenglicol, Retirar antes de aplicar tinción.
