INFORME PRACTICA DE LABORTORIO MECANISMO DE ACCIÓN DE LAS ENZIMAS
Mariana Noreña Vargas.¹
Luz Angela Pedraza Pinilla. ¹
Katherine Silva Díaz ¹
Edna Yamileth Gaitán Sigindoy ¹
¹Pregrado Química, Facultad de Ciencias Básicas, Universidad de la Amazonia, Cl. 17 Diagonal 17 con,
Cra. 3F, Florencia, Caquetá.
Resumen
Las enzimas son proteínas que los catalizadores de las reacciones de nuestro cuerpo, como se pudo
observar en el laboratorio con las muestras
Introducción
La investigación sobre la química enzimática se ha encargado de dar respuesta a funciones vitales
más básicas, en (1938) fue descubierta la enzima ribonucleasa por el bacteriólogo estadounidense
René Jules Dubos. El químico Moses Kunitz aisló la enzima en (1946) después de esto fue
sintetizada por científicos en 1969; se identificaron áreas de la molécula que son responsables de
funciones químicas e hicieron posible creación de enzimas especializadas con propiedades de las
que carecen las sustancias naturales y gracias a este estudio se ha hecho posible la producción de
enzimas en grandes cantidades.
Las enzimas son las encargadas de catalizar las reacciones de nuestro cuerpo, por lo tanto, habría
tantas enzimas como reacciones. Algunos catalizadores necesitan de la energía para crear la
reacción química y en otros no es necesaria la abundancia de energía. (La existencia de
catalizadores biológicos se dio en el siglo XIX en unos estudios de la digestión por la carne por
secreciones del estómago y la conversión de almidón con azúcar por saliva) (Alejandro Portón
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Andión). Se buscó identificar las reacciones de enzimas-sustratos para diferenciar proteínas y
almidones de las diferentes sustancias que utilizamos (extracto de piña y saliva).
Materiales y metodología
Actividad enzimática sobre proteínas
2ml de gelatina sin
s Se agregó sabor
Tubo 1
2ml de gelatina sin
Tubo 2 Se agregó
sabor.
Cada minuto se
2ml de solución de
agitó cada uno de los
saliva
2ml de gelatina sin sabor tubos de ensayo
Tubo 3 Se agregó
2ml de extracto de piña
Se anotaron los
cambios
Actividad enzimática sobre almidones:
2ml de Sln de
Tubo 4 Se agregó almidón Se mezclaron
las sustancias
2 gotas de Lugol
2ml de Sln de
Tubo 5a Se agregó Se mezclaron
almidón
las sustancias
2ml de Sln de saliva Baño maría
37°C por
2ml de Sln de (10 min)
Tubo 6 Se agregó Se mezclaron
almidón las sustancias
2ml de extracto de
piña
Se les agregó 2
gotas de Lugol
Se observó si
continuaba la
presencia del
2 almidón
2ml de Sln de almidón Se adicionaron 8 gotas
Tubo 5b Se agregó de reactivo de Benedict
2ml de Sln de saliva
Baño maría 60°C por
(10 min)
Se observó cambio de
color
Resultados
La gelatina sin sabor es un derivado de las proteínas, las cuales catalizan de forma específica,
determinadas reacciones bioquímicas uniéndose al sustrato, por medio de la practica vimos los
efectos de estás enzimas en la saliva y la piña TABLA 1.
TABLA 1. Resultado de muestras de tubo 1, tubo 2 y tubo 3
Tubo 1: Tubo 2: Tubo 3:
Gelatina sin sabor Gelatina sin sabor + saliva Gelatina sin sabor + extracto
de piña
Esta muestra no sufrió En el minuto 4 la gelatina y la saliva En el minuto 4, la gelatina
ningún cambio en permanecieron en estado de mezcla permaneció con textura un
específico. heterogénea. poco dura y con presencia de
Imagen 1. Imagen 2. algunos coágulos.
Imagen 3.
Pasados 10 minutos, la gelatina se
mezcló de manera heterogénea, dado Del minuto 5 en adelante se
que, aunque la muestra de saliva tiene observa que la Bromelina
presencia de amilasa, las enzimas presente en la piña absorbió
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presentes en la gelatina fueron más por completo la gelatina,
fuertes y terminan por absorberla, quedando totalmente
quedando unificadas con la misma homogéneas y en estado
textura de la gelatina pero un leve líquido.
cambio de color, siendo una mezcla Imagen 5.
heterogénea sólida.
Imagen 4.
Imagen 1. Tubo 1, Tubo 2 y tubo 3. Imagen 2. Saliva y gelatina al minuto 4.
4
Imagen 3. Piña y gelatina al minuto 4. Imagen 4. La gelatina absorbe la saliva.
Imagen 5. La piña absorbe la gelatina.
El almidón contiene una gran cantidad de carbohidratos sumamente importantes para la vida, en la
actividad se observó su comportamiento con otras enzimas como la amilasa presente en la saliva y
la bromelina presente en la piña. TABLA 2
Tabla 2: Resultado de muestras de tubo 4, tubo 5a, tubo 5b y tubo 6
Tubo 4: Tubo 5a: Tubo 5b: Tubo 6:
Procedimiento Solución de Solución de Solución de Solución de
almidón + lugol almidón + solución almidón + almidón +
de saliva solución de saliva Extracto de piña
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Etapa 1 El lugol es un Cuando se Al adicionar Al adicionar la
Adicionar reactivo de color mezclaron la saliva Benedict, reactivo piña y el
lugol azul oscuro, por y el almidón, estos de color azul almidón, los
lo cual, la muestra quedaron de color claro, la muestra sustratos
tomo este color, blanco y una quedo con este quedaron de
además se textura blanda, tono, su textura color amarillo y
Etapa 2 observó como el pero sin ser fue semi-blanda blanco, con una
Reacción almidón se separó completamente y su mezcla textura semi-
secundaria al quedando en la homogéneos. heterogénea. blanda y una
adicionar parte inferior Imagen 6. Imagen 11. mezcla
reactivo de pero este heterogénea.
Benedict continuo siendo Después del baño Pasados los 10 Imagen 7.
de color blanco y Maria, la amilasa minutos al baño
de textura catalizo por Maria, la mezcla Después del
grumosa. completo el continuó siendo baño Maria, la
almidón y la igual, su textura bromelina
muestra quedo en semi-blanda y la catalizo el
estado líquido. mezcla almidón y la
Imagen 8. heterogénea, lo muestra quedo
cual indica que en estado
Luego, cuando se no se presentó el blando.
agregó el lugol; la cambio de color Imagen 8.
muestra tomo un esperado. El
color azul oscuro, motivo por el Al agregar el
lo cual indicó cual esto sucedió lugol; la muestra
positivo para no se conoce. tomo un color
almidón, sin azul oscuro,
6
embargo la textura indicando
grumosa y color positivo para
blanco no se hizo almidón,
presente, sino que quedando en la
quedo totalmente parte inferior el
homogénea la almidón de color
muestra. blanco y de
Imagen 9. textura grumosa.
Imagen 10.
Imagen 6. Mezcla inicial de almidón y saliva. Imagen 7.
Mezcla inicial de
almidón y piña.
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Imagen 8. Tubo 51 y 6 después del baño maria. Imagen 9. Tubo 5ª positivo para almidón.
Imagen 10. Tubo 6 positivo para almidón. Imagen 11.
Tubo 5b con adicción de Benedict.
DISCUCIONES
El comportamiento de las enzimas es vital para la vida diaria y su comportamiento brinda
información acerca de porque algunos alimentos reaccionan entre si y otros no, como en el caso de
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la gelatina la cual reacciono con la saliva, permaneciendo solida pero no con la piña, ya que la
bromelina la consumió quedando liquida. En el colegio de bachilleres del estado de Oaxaca- México
en el año 2015, se llevó a cabo la práctica de laboratorio de “enzimas”, en la cual se utilizó una
metodología similar para analizar el comportamiento de las enzimas de proteína y almidón,
haciendo uso de la gelatina mezclada con saliva, donde los resultados obtenidos fueron similares,
ya que, la gelatina absorbió la saliva, pues la presencia de amilasa en la saliva es muy poca y no fue
capaz de descomponer la gelatina; del mismo modo, ocurrió con el almidón, el cual se mezcló con
saliva y fue llevado al baño maría a 37◦ C, posteriormente se le adiciono Yodo para determinar si
aún existía presencia de Almidón en las muestras, dando como resultado positivo.
Del comportamiento del tubo 5b es difícil definir qué factores impidieron que la muestra cambiara
de color, ya que, de los 8 grupos en el laboratorio, a 4 les reacciono, cambiando de color azul claro a
naranja, pero en los 4 restantes la muestra permaneció igual.
Conclusiones
Se pudo demostrar que una enzima puede ser específica para cada sustrato, identificado en una
reacción enzima-sustrato. Donde se pudo observar la presencia de almidón y proteínas, con la
ayuda de los reactivos de Lugol y de Benedict, se evidenció en la solución de almidón + Lugol, que
se separaron en dos fases y el almidón quedó en la parte inferior, lo que demostró que la muestra se
tornó un color azul claro por la tonalidad del reactivo. También, en la muestra de la gelatina + la
saliva, donde se buscó conocer la actividad de las proteínas y en esta, se pudo observar que las dos
muestras fueron solubles entre ellas e hicieron una mezcla homogénea.
Referencias
Aquino et al. 2015.
Aquino Brachetti Caballero Cortés Cruz García Ramírez Jimenez Valles, 2015. Oaxaca- Mexico.
