1.

- DATOS DE IDENTIFICACIÓN
NOMBRES Y APELLIDOS PARALELO FECHA FECHA DE
ENTREGA
DEINA PATRICIA INUCA DE “A” 03/07/2020 05/07/2020
LA CRUZ

Tema: Identificación de Mycobacterium tuberculosis Calificación: (Informe) Calificación: (Lab)

(bacterias ácido-alcohol resistentes) y medios de cultivo
Lowenstein Jensen

2.- OBJETIVOS

3.- PREREQUISITOS

4.- MATERIALES E INSUMOS

5. PROCEDIMIENTO
Realizar el procedimiento de Tinción Ziehl-Neelsen
Fig1. Los microorganismos se observan con ZN con la evidencia de bacilos pequeños
teñidos de color rojo brillante o fucsia, por la afinidad por colorantes básicos por
presencia de lípidos y ácidos micólicos, muestra bacilos delgados curvos de 1-4 micras
longitud.

Fig. 2. Granulomas con necrosis caseosa, contienen el mayor número de bacilos

8. DISCUSION:
Describa los criterios a tomar en cuenta con respecto a:
Porque se rechaza una muestra para baciloscopia
Tipo de muestra y recolección. Rechazo de muestra
Esputo: Tubo de ensayo:
 Se debe recolectar hasta tres La muestra será rechazada cuando
muestras, con el fin de mejorar la tenga: saliva, residuos de alimentos,
detección de bacilos en el estudio. secreciones nasales; este tipo de
 En lo posible se debe recoger esputo, partículas alteran los resultados.
evitando saliva.
Envase: Cuando existe un contacto directo de la
 El envase de recolección debe tener: boca del paciente con el envase de
boca ancha de 50mm, capacidad de 30 recolección, esto hace que exista una
a 40 ml. contaminación de muestra.
 Se debe tener precaución al momento
de etiquetar la muestra, siempre poner Hisopado faríngeo
en una zona visible como la pared del
bote y no en el envase mismo de la Muestras congeladas o muestras que
muestra. recolectadas hayan sido dejadas a
 Cierre con tapa rosca siendo hermético exposición en temperatura ambiente.
En la práctica:
 Una vez recolectada la muestra no se
debe lavar con agua corriente de grifo,
puede perjudicar el resultado.
 Evitar sobrecalentar la muestra, no
evaporar.
 En el estudio se requiere la muestra de
esputo mucopurulenta de la parte
bronquial para observar con claridad
bacilos
PROCEDIMIENTO ESPECIAL DE
RECOLECCIÓN DE MUESTRAS
 Se realiza un lavado gástrico, en
pacientes pediátricos que no puedan
expectorar, con el fin de recolectar la
muestra de esputo que se encuentra en
el estómago y así detectar bacilos.
 Se realiza nebulizaciones en pacientes
geriátricos, con el fin que el esputo
pueda ser expulsado con solución
fisiológica y recolectar la muestra para
estudio.
9.- TEMA DE CONSULTA:
9.1 ¿Explique el principio de la tinción de Ziehl - Neelsen?

Fig. 3. Tinción de Ziehl, Mycobacterium tuberculosis

9.2 ¿Cuáles son las características microscópicas de las bacterias ácido alcohol
resistentes?
CARACTERÍSTICAS
 Son bacilos rectos o ligeramente curvados, inmóviles, son aerobios, son gram
positivos débiles
 Su pared celular con ácidos micólicos (6,6-dimicoliltrehalosa) asociada a la
virulencia y lipoarabinomanano(LAM)
 Membrana celular es gramnegativa, contiene manósidos de fosfatidilinositol y
lipoarabinomanano. Membrana externa contiene peptidoglucano que se compone
de N-acetilglucosamina en un enlace B-14, con N-glucolilmurámico.
 Capa de mureína entrecruzada por puentes tetrapéptidos que contiene residuos
L-alanina, D-glutamato y meso-DAP.
 Pared celular contiene arabinogalactano y ácido micólico en cadenas 70 a 90
átomos.
 Presenta proteínas ancladas en la pared celular de las micobacterias están
involucradas en la biosíntesis y construcción de los polímero de la pared y algunas
funcionan como porinas. Las proteínas en la pared celular tienen antígenos que
estimulan la respuesta inmunitaria.
9.- CONCLUSIONES
 El género Mycobacterium está formado por bacilos, Gram positivos, aerobios,
inmóviles y no esporulados, ácidos resistentes (resisten a la decoloración con
soluciones ácidas débiles a fuertes) gracias a la presencia de ácidos micólicos
intermedios o largos en su pared celular. La detección por la tinción de Ziehl –
Neelsen basada en el principio que las mycobacterias son coloreadas de rojo o
fucsia, retienen el color a pesar de la acción del ácido y del alcohol; la capacidad
de resistir a la decoloración se debe al alto contenido de lípidos complejos (ácidos
micólicos). La modificación de la pared celular grampositiva se observa en los
géneros: Mycobacterium, Nocardia y Corynebacterium, en los cuales los lípidos
constituyen el 60% de la estructura de la pared. Las bacterias de importancia
médica son bacterias de crecimiento lento y necesitan un período de incubación
de 2 a 7 días (Nocardia, Rhodococcus, Gordonia, Tsukomurella) hasta 1 mes
(mycobacterium). (Elmer W. Koneman, 2007).

 Las etapas en la tinción de Ziehl Neelsen, se emplea colorante básico con el

método de fucsina que en los resultados se tiñe de rojo, cuando el microorganismo
es ácido alcohol resistente. Cuando se emplea mordiente y en el método se
emplea calor, la bacteria ácido alcohol resistente permanece rojo. En el uso de
decolorante con el método de alcohol- clorhídrico el resultado seguirá
manteniéndose en un rojo. En el caso de emplear contraste y en el método usar
azul de metileno, el resultado resulta ser rojo. Los resultados esperados en
especies como Mycobacterium, se mantendrán en un color rojo o rozo azulado,
dispuestas en cadenas alargadas como bastones. (Gerard J. Tortora, 2007).

 El espectro de infecciones asociadas a los géneros ácido alcohol resistentes es

extenso y abarca desde una colonización insignificante hasta infecciones
cutáneas, infecciones sistémicas e infecciones oportunistas.
 M. tuberculosis que causa tuberculosis
 M. Leprae que produce lepra.
 M. Abscessus que provoca formación de abscesos.
 M. Chelorae provoca infecciones cutáneas.
 M. Haemophilum provoca infecciones cutáneas esporotricoide.
 M. Fortuitum afecta a la piel y tejidos blandos con formación de
abscesos, nódulos y úlceras.
 M. Kansai provoca enfermedades pulmonares similar a tuberculosis.

 La clasificación de RUNYON es un mecanismo que nos permite estudiar al género

mycobacterium no tuberculoso, en dependencia de su crecimiento y de su
capacidad de pigmentarse. Dentro de la categoría no pigmentada, que presentan
una coloración beis, se subdivide en dos clasificaciones: crecimiento lento (M.
avium y M. intracelulare) y crecimiento rápido (M. fortuitum, M. Chelonae, M.
Abscesus, M.mucogenium). Dentro de la categoría pigmentada, estos producen
carotenoides intensamente amarillos, estimulados por la luz siendo
 fotocromógenos con luz, de crecimiento lento ( M. kansai y M.marinum) y
ectocromógenos sin luz, de crecimiento lento (M.Gordonae no patógeno).
 La infección bacteriana por M. tuberculosis, provoca tuberculosis siendo una
infección pulmonar que provoca: granulomas y necrosis caseosa; presenta etapas
desde el momento de su infección. La primera etapa es la llamada primo infección
primaria, que afecta lóbulos medios e inferiores, como cuadro clínico el paciente
presenta: complejo de Gohn, adenitis, linfangitis, neumonitis formación de
abscesos y cavitaciones unilateral. La segunda etapa es llamada reactivación,
que afecta a los segmentos apicales y posteriores; el cuadro clínico del paciente
es: sudoración nocturna, adelgazamiento, fiebre, tos, cavitaciones, granuloma
caseoso, malestar general y en ocasiones esputo o hemoptísico purulento.

8. Bibliografía
 Básicas, D. d. (2012). Manual de practicas de Microbiología I y II y Parasitologia. Argentina:
Instituto de Ciencias biomédicas Argentina.

 Elmer W. Koneman, S. A. (2007). Microbiologico/ Microbiological diagnosis: Texto y Atlas.

Madrid - España: Médica Panamericana.

 Gerard J. Tortora, B. R. (2007). INTRODUCCIÓN A LA MICROBIOLOGIA. Madrid - España:

Panamericana.

 Rafael Tardío Alonso, P. S. (2010). Microbiología clínica práctica. España: Servicio de

publicaciones de la Universidad de Cadiz.

 Roger Y. Stanier, J. R. (2002). Microbiología. Buenos Aires: Reverté.