UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL
TEMA: COLORACIÓN GRAM POSITIVA Y GRAM
NEGATIVA
ASIGNATURA: Microbiología Ambiental
DOCENTE: Dr. Julio Cesar Cáceda Quiroz
NOMBRE DE LA ALUMNA: Jesenia Fatima Paucar Jove
CÓDIGO DE LA ALUMNA: 2017-178028
SEMESTRE: V
TACNA- PERÚ
2019
COLORACIÓN GRAM
I. INTRODUCCIÓN
En los laboratorios de Microbiología, se realiza la observación de
microorganismos, además de realizarse el tratamiento de colorantes
mediante la tinción, para determinar si son Gram positivas, o Gram
negativas.
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II. OBJETIVOS
Conocer acerca de la coloración Gram, tanto como su creador
Averiguar las diferencias entre las Coloraciones Gram Positivas y Gram
Negativas
III. MARCO TEORICO
III.1. TIPOS DE COLORACIONES
Las tinciones son un diagnostico que se utilizan en los laboratorios de
Microbiología para determinar las enfermedades infecciosas, además las
tinciones desde hace años han ayudado a resolver todos los problemas
referentes a etiología bacteriana, existen una Gram variedad de Tinciones
que nos han servido para la detección de diversos agentes infecciosos, tanto
como, bacterias, parásitos y hongo.
La tinción de Gram se considera básica para los análisis bacteriológicos,
además la Tinción de Wrigth es la que se encarga de diagnosticar las
enfermedades pero en parasitología, por otra parte, existe otras tinciones de
grnautilidad, como la tinción de Ziehl-Neelsen, que es necesaria para los
diagnósticos de enfermedades crónicas, como son la tuberculosis, o
actinomicosis, también está la tinción de azul de Lactofenols, que nos sirve
para identificar los hongos y sus componentes estructurales.
III.2. COLORACIÓN DE GRAM
En 1880 en el hospital de Berlín, Hans Cristian Gram, un médico Danés,
desarrollo una técnica en el que el podía observar bacterias en los tejidos de
los pulmones de los pacientes que se estaban muriendo de neumonía, es por
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eso que dio como nombre a su descubrimiento la tinción de Gram, en el que
se demostró que existían bacterias y eran capaza de diferenciar los gran des
grupos de eubacterias, que se teñían de color violeta y otras que se teñían de
color rojo.
En 1963 se dio a conocer el mecanismo de diferenciación de la tecina de
Gram en el que las bacterias teñidas de azul fueron conocidas como Gram
positivas y las bacterias teñidas de rojo como Gram negativas.
III.2.1. COLORACIÓN GRAM POSITIVA
La bacterias Gram positivas son las bacterias que se teñirían de
cristal violeta y no perderán coloración en el proceso de sus
pasos sucesivos. Las bacterias Gram positivas son aquellas que
poseen peptidoglucano, en su parte más externa.
III.2.2. COLORACIÓN GRAM NEGATIVA
Las bacterias Gram negativas, son las que van a peder la
coloración inicial del cristal violeta, en los pasos sucesivos,
además se teñirán de rosado, por la safranina, puesto a que la
diferencia se encuentra en la envoltura celular, además tienen una
capa fina de peptidoglucano, que es una membrana externa que
envuelve toda la celula.
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III.3. DIFERENCIAS ENTRE GRAM POSITIVAS Y GRAM
NEGATIVAS
N Bacterias Gram Bacterias Gram
° Positivas Negativas
1. Color de la Violeta Rojo
tinción Gram
2. Pared celular Gruesa Delgada
3. Presencia de Ausente Presente
liposacáridos en
pared celular
4. Presencia de Presente Ausente
acidos lipoteicos
y teicoicos en
pared celuar
III.4. PROCEDIMIENTO DE COLORACIÓN GRAM
Pasos para una técnica de Tinción
a. Hacer frotis de manera regular
b. Fijarlo a la flama
c. Cubrir con cristal violeta durante 1minuto y después lavar
ligeramente con agua común
d. Cubrir con yodopovidona (Lugol) durante1minuto
e. Lavar con agua común
f. Decolorara con alcohol- acetona (1:1)
g. Lavar con agua corriente
h. Cubrir con safranina durante 30 segundos
i. Lavar con agua común.
j. Dejar secar y observar en el microoscopio
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Representación esquemática de la tinción de Gram
Procedimiento GRAM + GRAM - OBSERVACIÓN
Paso 1. Colorante Las bacterias gram
fundamental cristal positivas y gram
violeta durante 1min. negativas se tiñen de
violeta.
Paso 2. Mordiente, La bacterias gram
solución de yodo y positivas y Gram
ioduro potásico, 1 negativas se tiñen de
minuto. violeta
Paso 3. Decoloración, Las bacterias gram
lavado con etanol, 30 positivas mantienen el
segundos. color violeta, las gram
Paso 4. Colorante Las Bacterias gram
contraste, safranina 1 negativas se tiñen de
minuto. color rojo, las gram
positivas mantienen el
color violeta
IV. CONCLUSIONES
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V. BIBLIOGRAFÍA
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