UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
Práctica 2:
FAGOCITOSIS
OBJETIVO
Comprender el proceso de fagocitosis in vitro y aplicar los conocimientos teóricos en casos de daño
tisular, traumas o invasión de múltiples microorganismos o sustancias.
FUNDAMENTO
Cuando un agente patógeno sobrepasa las barreras naturales constituidas por la piel y las mucosas,
entra en acción un segundo mecanismo de defensa llamada fagocitosis.
La fagocitosis es llevada a cabo por macrófagos y neutrófilos, por lo que a estas células se les conoce
como fagocitos.
Los neutrófilos se originan en la médula ósea a través de la línea mieloide, salen de la médula ósea y
entran a los vasos sanguíneos en donde algunos circulan libremente y otros se adhieren a las paredes
de los vasos de aquí pasan a los tejidos, a la luz intestinal y a las secreciones. Su vida media en los
tejidos es de 4 días. Los neutrófilos presentan gránulos primarios y secundarios ricos en enzimas. Los
primeros contienen enzimas hidrolíticas como la mieloperoxidasa, catalasa y lisozima. Los
secundarios son ricos en lactoferrina y en proteínas catiónicas.
Los fagocitos mononucleares se encuentran en sangre y en tejidos; en sangre se conocen como
monocitos y posteriormente viajan hacia los tejidos donde sufren procesos de diferenciación hasta
convertirse en macrófagos maduros. Estos macrófagos pueden tener forma y función diferentes según
el tejido en el que se encuentren, además de recibir también distintos nombres. Por ejemplo los
macrófagos presentes en el pulmón se denominan macrófagos alveolares, los que se encuentran en el
hígado, células de Kupffer; los de la piel, células de Langerhans, y los que colonizan el sistema
nervioso central se denominan células de la microglía.
La función de los fagocitos en la inmunidad innata, es fagocitar partículas, microorganismos
(fagocitosis) o material soluble (pinocitosis).
Para que las células fagocíticas puedan actuar, tienen que ser atraídas al sitio de la infección. Se
desplazan por los tejidos en respuesta a un gradiente de concentración de moléculas producidas en el
sitio dañado; a estas moléculas se les denomina factores quimiotácticos, los cuales son de diversos
orígenes. La quimiotaxis es vital para atraer fagocitos al sitio dañado, los neutrófilos llegan primero
y posteriormente los macrófagos.
Las moléculas llamadas opsoninas como los componentes C3b y C5a del sistema complemento y
algunos anticuerpos, éstas se adhieren al agente para que sea reconocido por los fagocitos mediante
sus receptores, favoreciendo así la fagocitosis.
La fagocitosis comprende 5 fases fundamentales:
1. Quimiotaxis
2. Adherencia
3. Fagosoma
4. Fagolisosoma
5. Digestión y muerte.
Los agentes biológicos se pueden destruir dentro del fagocito por dos mecanismos:
a) Dependientes de oxígeno
Una vez englobado el agente por el fagocito se produce un estallido respiratorio, que consiste en
un aumento en el consumo de oxígeno, acompañado por el incremento en la actividad de varias
enzimas que inducen la generación de diversos elementos o compuestos bactericidas como son
anión superóxido (O3), singlete de oxígeno (O), radical hidroxilo (OH) y peróxido de hidrógeno
(H2O2).
La mieloperoxidasa contenida en los gránulos lisosomales, utiliza el peróxido de hidrógeno y iones
haluro como yodo y cloro para producir hipohaluros, compuestos microbicidas más potentes que
los antes mencionados.
b) Independientes de oxígeno.
En este mecanismo la destrucción del agente se lleva a cabo por diversas enzimas tales cano
lisozimas, elastasas, hidrolasas, proteínas catiónicas y lactoferrina.
MUESTRA
Sangre venosa con anticoagulante heparina. Una cepa pura de Staphylococcus aureus, coagulasa
negativo.
MATERIALES Y EQUIPOS
• Agujas
• Jeringas
• Torundas
• Torniquete
• Alcohol
• Asa de siembra ,mechero de alcohol
• Tubos de ensayo de 12 x 75 mm
• Pipetas Pasteur con bulbo
• Microscopio óptico
• Aceite de inmersión
• Portaobjetos
• Tinción de Wright
• Termómetro
• Baño María a 37oC
• Cronómetro
• Papel para microscopio
MÉTODOS
1) Identificar 1 tubo de ensayo de 12 x 75 mm;
2) Agregar 2-3 gotas de sangre (MUESTRA) de la cepa Staphylococcus aureus al tubo.
3) Incubar el tubo preparado en baño María por 30 minutos.
4) Realizar un frotis sanguíneo de la muestra que será el control negativo. Y se realizara otro frotis
con la muestra del tubo incubado y con la cepa bacteriana
5) Teñir los frotis con la técnica de Wright.
6) Poner una gota de aceite de inmersión a los frotis y distribuirlo homogéneamente.
7) Revisar los frotis en el microscopio bajo el objetivo de 100x.
RESULTADOS
CUESTIONARIO
1. Describa el proceso de la fagocitosis.
2. ¿Qué papel juega en fagocitosis el sistema de complemento?
3. ¿Qué defectos pueden presentar los fagocitos? ¿Qué consecuencias traen consigo?
Esquema de presentación:
1. Introducción (importancia y objetivos)
2. Revisión bibliográfica (conceptos, marco referencial y bibliográfico)
3. Material y métodos
4. Resultados y discusión (resolución de los casos clínicos)
5. Conclusiones
6. Recomendación (opcional)
7. Referencias bibliográficas
