ANALISIS DE MITOSIS EN PLANTAS

INTRODUCCIÓN
El proceso por el cual se originan nuevas células a partir de otras ya existentes se
llama división celular o reproducción celular. Este es un proceso necesario para:
remplazar las células muertas, para colaborar con el crecimiento del organismo del que
forman parte y es la base para la reproducción de los organismos a través de la
formación de gametos. Cada célula en etapa de división se denomina célula madre, y
sus descendientes se llaman células hijas. Se les llama así porque la célula madre
transmite copias de su información genética a sus células hijas, posteriormente las
células hijas se convertirán en células madres y volverán a pasar la información
genética.
El crecimiento y división celular se llama CICLO CELULAR. Entonces el ciclo celular está
formado de dos fases importantes: la fase M y la INTERFASE.
La fase M incluye: 1) mitosis o meiosis y 2) citocinesis que es la división del citoplasma
para dar células hijas. La célula en fase M pasa un corto tiempo de todo el ciclo.

MITOSIS:
Es un proceso de división celular, que ocurre en todas las células excepto las
germinales y que da como resultado dos células hijas con el mismo número de
cromosomas de la célula madre. La mitosis generalmente se divide en cinco etapas:
1. Profase: La cromatina se condensa para formar cromosomas. Los cromosomas están
formados de dos cromátidas unidos por un centrómero con cinetocoro. Empieza a
organizarse el huso mitótico. El citoesqueleto, el nucleolo y la envoltura nuclear
desaparecen.
2. Prometafase: Los microtúbulos del huso mitótico se fijan al cinetocoro de los
cromosomas, los cromosomas se desplazan hacia el plano ecuatorial del huso.
3. Metafase: los cromosomas se alinean en el plano ecuatorial de la célula.
4. Anafase: Separación de las cromátidas hermanas y desde este momento se les
considera a cada una como un cromosoma independiente. Los cromosomas se mueven
hacia los polos opuestos del huso. Este período termina cuando todos los cromosomas
han llegado a los polos. La citocinesis o división del citoplasma puede comenzar en
este período.
5. Telofase: los cromosomas se agrupan en los polos apuestos del huso, se ensambla la
envoltura nuclear alrededor de los grupos de cromosomas, los nucleolos se vuelven
evidentes y desaparecen los microtúbulos del huso. Al final de esta fase terminara la
citocinesis. En las células animales la citocinesis comienza con un surco que la rodea en
la región ecuatorial, se profundiza y termina por separar al citoplasma en dos células
hijas, cada una con núcleo completo. En las células vegetales se forma una placa
celular en el centro del citoplasma y finalmente separa a la célula en dos partes
iguales.

OBJETIVOS
 Analizar la importancia de la división celular en el crecimiento y la reposición de
células en tejidos desgastados.
 Realizar adecuadamente la técnica de laboratorio en la preparación de placas
de mitosis.
 Observar microscópicamente las fases de la mitosis.
 Identificar las fases de mitosis

MARCO TEÓRICO
El estudio citológico del ciclo celular se basó tradicionalmente en el análisis de la
mitosis, ya que éste es el momento en que se producen alteraciones morfológicas de
las células fácilmente apreciables. Mitosis es sinónimo de cariocinesis o división del
núcleo y su punto de comienzo se identifica al microscopio óptico por las
transformaciones que sufre el núcleo en el que empiezan a hacerse patentes los
cromosomas. El final de la mitosis se produce al terminar la desespiralización de los
cromosomas que dejan así de ser visibles. Solapada con el final de la mitosis se
produce la división del citoplasma o citocinesis. El conjunto de la mitosis más la
citocinesis es la división celular. Al finalizar ésta comienza la interfase. Meristemo
radicular. Material biológico: cebolla (Allium cepa). Cerca del extremo apical de las
raíces se encuentra un conjunto de células que proliferando hacen que crezca la raíz.
Es la zona meristemática cuyas células sufren ciclos celulares continuos y en
condiciones normales no tienen sincronización alguna entre ellas.
Si se pudiera hacer una película del desarrollo de un meristemo radicular se podría
observar cómo cada célula después de la interfase entraría en división y daría lugar a
dos células hijas. Se podría calcular directamente la duración de cada etapa lo que
proporcionaría una idea de la complejidad de cada proceso y su intensidad metabólica.
Sin embargo al hacer una preparación lo que se obtiene es una instantánea, una foto
fija del meristemo a través de la cual también pueden determinarse parámetros de
interés ya que al no existir sincronización cada célula sigue ciclos celulares
independientemente del resto y, mientras más largo sea un proceso o una etapa del
ciclo celular, más células se encontrarán en ella mientras que si la etapa es corta las
células pasarán poco tiempo en ella y será más difícil que en la “foto fija” se
encuentren muchas células de esa fase. Si en una preparación se localiza una zona
meristemática y se contabilizan células en división y células en interfase, se puede
tener una estima indirecta del tiempo de duración de una respecto a la otra o a todo el
ciclo celular. La citocinesis (que es parte de la división celular) se desarrolla en su
mayor parte de manera coincidente con el final de la mitosis, de tal forma que la
división termina sólo un poco después del final de la cariocinesis. Teniendo en cuenta
esto y la dificultad que entraña la determinación del final de la citocinesis, para el
desarrollo de la práctica se puede asumir como mínimo el error de contabilizar las
células que no están en mitosis como células en interfase. Para poder realizar el
conteo y teniendo en cuenta que el límite entre interfase y principio de mitosis es
también difícil de determinar, deben precisarse características celulares observables al
microscopio óptico que permitan la identificación sin duda alguna de la etapa en que
se encuentre la célula que se analiza.
CÉLULA EN INTERFASE: Presenta un núcleo redondeado con un granulado muy fino y
continuo (algunas zonas más intensamente teñidas y otras menos pero sin
discontinuidades). La envoltura nuclear aunque no se ve, forma un círculo que limita el
núcleo. En número de 1 o 2 se aprecian zonas más claras, transparentes, que son los
nucleolos (1). Cuando las células van a entrar en mitosis aparecen más voluminosas y
el núcleo mucho más grande (2).
CÉLULA EN MITOSIS: Están en mitosis todas las células en las que se observan
cromosomas. El principal problema consiste en identificar en comienzo de la mitosis,
que coincide con el de la división celular, y el final de la mitosis que se solapa con la
citocinesis. Comienza la mitosis con el inicio de la espiralización de los cromosomas. En
la práctica se consideran en mitosis las células en las que se puede apreciar una tenue
concentración de la cromatina dejando espacios más claros a modo de canales entre
los grumos alargados (3).
Los últimos momentos de la mitosis están definidos por la desespiralización de los
cromosomas en telofase (12). Mientras se observen, aunque sea como tenues cúmulos
de cromatina con canales entre ellos, se considera que persiste la mitosis Para
diferenciar células en profase temprana de células en telofase tardía debe tenerse en
cuenta que en esta última suele haber dos células del mismo tamaño, sincrónicas y
juntas. Si por causa de la técnica se separasen las células hijas se tendrían en cuenta
otros criterios como que los núcleos en profase son mayores que los de las células en
interfase y los de telofase no; los estrechos canales entre los cromosomas en telofase
son muy paralelos mientras que en profase son más irregulares.

ANÁLISIS DE LA MITOSIS:
Del mismo modo que se hace el estudio de la mitosis dentro del ciclo celular se pueden
analizar las fases de la mitosis en la división del núcleo. Sin olvidar en ningún momento
que la cariocinesis es un proceso continuo, para su estudio se divide en varias etapas
que tienen que ver con cambios conformacionales, es decir que pueden diferenciarse
por la observación en el microscopio óptico de células en división. Desde el comienzo
de la espiralización hasta la desorganización de la envoltura nuclear se le denomina
profase; desde la rotura de la envoltura hasta la colocación de los cromosomas en un
plano y en el centro de la célula se le llama prometafase; la disposición de los
cromosomas en el plano central de la célula con los centrómeros tensionados por su
unión a la fibras de huso mitótico constituye la metafase; la migración de las
cromátidas a los polos se conoce como anafase y la organización de la envoltura
nuclear y desespiralización de los cromosomas constituye la telofase.
IDENTIFICACIÓN DE LOS LÍMITES DE LAS FASES MITÓTICAS:
El comienzo de la profase se identifica como el comienzo de la división (3). Se
consideran en profase aquellas células que tienen envoltura nuclear que se intuye al
microscopio óptico por el contorno redondeado que tiene el núcleo o el conjunto de
los cromosomas sea cual sea el grado de espiralización de éstos (4).

Empieza la prometafase cuando se desorganiza la envoltura nuclear que se detecta

porque el conjunto de los cromosomas pierde su contorno circular (5). La prometafase
media presenta los cromosomas dispersos por la célula (6) y dura hasta que todos los
cromosomas se colocan en la placa ecuatorial o plano central de la célula, después de
unirse los centrómeros a las fibras del huso. La colocación de todos los centrómeros en
el plano central identifica el comienzo de la metafase (7).
El número de cromosomas de Allium cepa (2n=16) hace difícil que se puedan ver bien
independientemente por lo que se clasifican las células en metafase por la existencia
de una marcada banda central y la ausencia de centrómeros fuera de esa banda. El
comienzo de la anafase (migración de cromátidas hermanas a polos diferentes) es
difícil de ver por la gran cantidad de material cromatínico que hay en la zona central de
la célula. En la práctica se puede determinar porque la escisión del centrómero y el
arrastre de las zonas pericentroméricas en el comienzo de la migración , hacen que se
forme una sub-banda más clara dentro de la marcada banda central (8); de esta forma
puede determinarse el comienzo de la anafase. Además se identifican como anafases
las células en las que hay dos grupos de cromosomas migrando a los polos y cada uno
de estos grupos tiene un contorno de trapecio isósceles con los centrómeros
coincidiendo con la base pequeña (9). Termina la migración con un grupo de
centrómeros en las proximidades de cada polo (10). Se identifica el comienzo de la
telofase por el contorno redondeado de cada bloque de cromosomas en el que
además, por esa disposición convergente en un espacio pequeño, puede quedar algún
brazo cromosómico situado hacia el exterior de la célula (11). El final de la telofase se
considera que coincide con la desespiralización de los cromosomas (12) y se identifica
como se ha descrito en el final de la división.

MATERIALES:
 Microscopios
 Porta objetos
 Cubre objetos
 Raíz de cebolla
REALIZACIÓN DE PREPARACIONES: Material biológico: raíces de cebolla de 2 - 3 cm.
de longitud
1. El material que necesitamos para poder estudiar la mitosis debe ser un tejido
en división celular activa.
2. Colorear las raíces con orceina acética al 1% durante 30 min.
3. En un portaobjeto limpio, colocado sobre un papel de filtro, depositar una gota
de orceina del diámetro de un cigarrillo.
4. Con la aguja enmangada y la lanceta se corta el extremo del ápice.
5. Retirar el resto de la raíz, dejando únicamente el ápice sobre la gota de orceina.
6. Colocar sobre la gota de orceina un cubreobjetos limpio y desengrasado.
OBSERVACIÓN DE LA PREPARACIÓN
Objetivo 4x: Se observa la bondad de la extensión y aplastamiento de las células, si se
ha conseguido o no una monocapa celular (esto se detecta moviendo ligeramente el
tornillo micrométrico para enfocar distintos planos) y si el grado de tinción es el
adecuado. Con estos aumentos los núcleos se ven como diminutos puntos oscuros. Las
células meristemáticas son ligeramente mayores y más cuadradas que el resto que son
más rectangulares.
Objetivo 10x: Se localiza
la zona en la que se
observan células en
división. (Los
cromosomas se aprecian
como manchas más
intensamente
coloreadas). Localizada
la zona meristemática se
proceda a la
identificación y estudio de las células en división (objetivo 40x).
RESULTADOS:

OBJETIVO: 10X

OBJETIVO: 40X
ANÁLISIS DE LAS FASES MITÓTICAS:

Sobre la misma preparación utilizada para el anterior estudio, buscar la zona

meristemática y contabilizar con el objetivo de 40 aumentos todas las células en
división nuclear que vayan apareciendo en el campo

CONCLUSIONES:

 Se logró identificar con claridad las diferentes fases de

la Mitosis.
 Colorantes como la orceina y el carmín acético permiten identificar los
cromosomas de las células de la cebolla, durante la mitosis. 
 Desde que se pueden observar los cromosomas en el microscopio, se pueden
reconocer las diferentes fases del ciclo celular, en base a las diferentes
situaciones que presentan los cromosomas durante el proceso mitótico.

CUESTIONARIO:
1. ¿Cuántas células se ha visto de cada tipo?
a.
2. ¿Cómo conseguimos acumular metafases en las preparaciones?
a. La acción de determinados tratamientos como la colchicina, la
colcemida, la mescalina, la hidroxiquinoleína, el bromona
ftaleno, el paradiclorobenceno etc..o agua con hielo, inhiben
la formación de los microtúbulos y por tanto la migración
hacia los polos en anafase.
3. El fijador se utiliza para relajar la estructura del ADN. ¿Verdadero o
falso?
a.
4. Indique el número cromosómico de la especie estudiada.
 a. Los cromosomas son estructuras organizadas, los cuales están
formados por proteínas y ADN y contienen la información
genética de cada uno de los individuos.  En cuanto a la cebolla,
esta es una planta hortícola con el bulbo comestible y de tallo
hueco. La cebolla presenta en su estructura celular cromosomas,
los cuales son 8 pares (2n = 16), estos, tienen un gran tamaño y
microscópicamente una morfología bastante definida de sus
cromátidas, las cuales son las dos unidades longitudinales de los
cromosomas duplicados que se encuentran unidos por el
centrómero del cromosoma.

5. Describir las diferencias entre la meiosis I y la meiosis II.

En meiosis I la profase I es el periodo más largo de la meiosis y durante

esta fase se recombinan los genes de los cromosomas homólogos, lo
que constituye la base de la "variación intergeneracional" necesaria para
el proceso evolutivo, ocurre en esta fase además todo lo que ocurre en
una profase mitótica, hasta la disgregación de la membrana nuclear,
posteriormente la metafase I es idéntica a la de mitosis, pero anafase I
difiere en 2 cosas: a) Los centrómeros de los cromosomas no se dividen
y b) Cada cromosoma homólogo integro con sus 2 cromátidas migra a
un polo opuesto, en la telofase I se divide la célula en dos células
haploides. 

La meiosis II prácticamente es idéntica a la mitosis y al dividirse los

centrómeros de cada cromosoma durante la anafase II, los cromosomas
migran a los polos cada uno con una sola cromátida, por lo que al final
de telofase II se obtienen finalmente 4 células haploides, cuyos genes
están recombinados y ninguna cromátida de los cromosomas homólogos
expresará cualitativamente las mismas características heredables.