INSTITUTO POLITÉCNICO
NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS
BIOLÓGICAS
PRÁCTICA 10 “MICROORGANISMOS DEL
CICLO DEL NITRÓGENO”
EQUIPOS: 5 Y 8
SECCIÓN 1
INTEGRANTES:
➢ TREJO TREJO ALMA ERENDIRA
➢ MUÑOZ DOMINGUEZ BRENDA MILENIE
➢ VARGAS FUENTES MARIANA
➢ VARONA VELAZQUEZ ANDREA GALA
FECHA DE REALIZACIÓN. 10 DE OCTUBRE, 2018
FECHA DE ENTREGA.23 DE OCTUBRE, 2018
OBJETIVOS
- Determinar experimentalmente los principales procesos metabólicos
involucrados en el ciclo del nitrógeno.
- Enumerar las formas fisiológicas de las bacterias involucradas en estos
procesos en diferentes muestras de suelo.
- Comparar los resultados obtenidos en las diferentes estaciones.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Tabla 1. NÚMERO DE MICROORGANISMOS REPRESENTANTES DE LOS PROCESOS DEL CICLO DEL
NITRÓGENO (CUENTA EN PLACA)
ESTACIÓN %H MICROORGANISMOS PROTEOLÍTICOS
SUELO DILUCIÓN NO. DE UFC/g UFC/g
COLONIAS
(B.H.) (B.S.)
1 50 10 -4 7.5 7.5x10 5 1.5x10 6
2 24 10 -4 68.5 6.8x10 6 9.01x10 6
3 38 10 -3 6 6.8x10 5 9.6x10 4
4 26 10 -4 15 1.5x10 6 2.02x10 6
5 16 10 -4 6 6x10 5 7.1x10 5
6 7 10 -4 8 8x10 5 8.6x10 5
7 16 10 -4 7 7x10 5 8.3x10 5
8 44 10 -4 4.5 4.5x10 5 6.8x10 5
Log UFC/g de microorganismosproteolíticos (B.S)
0
1 2 3 4 5 6 7 8
Estació n
Gráfica 1. Representación del log de UFC/g de microorganismos proteolíticos en las
estaciones. Las proteínas son un componente fundamental de la materia orgánica del
suelo, por eso el rol de las poblaciones proteolíticas es crucial. Gracias a la producción de
enzimas proteasas se produce la liberación de compuestos menores asimilables, como
los aminoácidos que hacen parte de la materia orgánica particulada y que pueden ser
rápidamente accesibles para los microorganismos. Ejemplos de este grupo de
microorganismos en suelo podemos encontrar a Bacillus sp. Pseudomonas sp. hongos
como Aspergillus sp. Mucor. Donde se logró observar un mayor número de
microorganismos que llevan a cabo la proteolisis fue la estación 2.
Tabla 2. NÚMERO MÁS PROBABLE DE MICROORGANISMOS AMONIFICADORES
ESTACIÓN MICROORGANISMOS AMONIFICADORES
DILUCIONES NÚMERO CARACTERÍSTICO NMP / g (B.H) NMP / g (B.S)
1 10-1 10-2 10-3 3-3-3 >1100 >2.2x10 3
2 10-1 10-2 10-3 3-3-3 >1100 >1.44x10 3
3 10-1 10-2 10-3 3-3-3 >1100 >1.7x10 3
4 10-1 10-2 10-3 3-3-3 >1100 >1.48x10 3
5 10-1 10-2 10-3 3-3-2 1100 1.3x10 3
6 10-1 10-2 10-3 3-3-3 >1100 >1.18x10 3
7 10-1 10-2 10-3 3-3-3 >1100 >1309
8 10-1 10-2 10-3 3-3-0 240 363.63
NMP/g de microorgnismos amonificadores (B.S)
2500
2000
1500
1000
500
0
1 2 3 4 5 6 7 8
Estaciones
Gráfica 2. NMP/g de microorgnismos amonificadores (B.S).. Los resultados obtenidos en
la prueba para ver amonificación en el medio de Stuart el cual contiene Urea en el cual se
va a llevar el metabolismo de compuestos orgánicos que fueron transformados a amonio,
la cuantificación de este proceso se llevó a cabo por número más probable en el cual la
estación número 8 es la que obtuvo el menor número de microorganismo que llevan a
cabo la mineralización solo con 240 NMP/g en base seca. Este proceso se puede llevar a
cabo en condiciones óxicas y anóxicas por lo tanto el lugar de las estaciones en cuanto a
si es caída de agua o no, no afectaría demasiado; lo que si se pudiera considerar en esta
prueba y por la cual se podría ver afectaba entre estaciones es por la concentración de
desechos orgánicos en el lugar de la estación como por ejemplo la urea de la orina que es
uno de los principales compuestos que pudieran ser metabolizados por los
microorganismos y eso aumentar su concentración considerablemente. Los
microorganismos que realizan amonificación son muy numerosos y diversos: hongos,
actinomycetes, bacterias aeróbicas y anaeróbicas, esporuladas o no, etc.
Tabla 4. NUMERO MÁS PROBABLE DE MICROORGANISMO NITRIFICANTES FASE II
ESTACIÓN MICROORGANISMOS NITRIFICANTES FASE II (NITRATACIÓN)
DILUCIONES NÚMERO CARACTERÍSTICO NMP / g (B.H) NMP / g (B.S)
1 10-1 10-2 10-3 0-0-0 <3 <6
2 10-1 10-2 10-3 0-0-0 <3 <3.94
3 10-1 10-2 10-3 0-0-0 <3 <4.83
4 10-1 10-2 10-3 0-0-0 <3 <4.05
5 10-1 10-2 10-3 0-0-0 <3 <3.57
6 10-1 10-2 10-3 0-0-0 <3 <3.2
7 10-1 10-2 10-3 0-0-0 <3 <3.57
8 10-1 10-2 10-3 0-0-0 <3 <4.54
NMP/g de microorganismos Nitrificantes (B.S) fase II
0
1 2 3 4 5 6 7 8
Estaciones
Gráfica 4. Representación del NMP/g de microorganismos Nitrificantes fase II. En los
suelos, el principal género que puede oxidar amoníaco a nitrito es Nitrosomonas, y
el principal género que puede oxidar nitrito a nitrato es Nitrobacter. Miembros
de los géneros Nitrospira, Nitrospina y Nitrococ- cus pueden oxidar nitrito a nitrato.
Nitrobacter, Nitrospira, Nitrospina, Nitrococcus, Nitrosomonas y Nitrosococcus se
encuentran en hábitat marinos. Nitrobacter, Nitrosomonas, Nitrosospira,
Nitrosococcus y Nitrosolobus se encuentran en hábitat terrestres. Otros
microorganismos, como las bacterias heterotrofas y los hongos, pueden oxidar
parcialmente compuestos nitrogenados, pero la nitrificación heterotrófica no
parece que tenga un papel destacado en la conversión de amoníaco a iones de
nitrito y nitrato. La estación número uno fue la que presentó el mayor número de
microorganismos que oxidan el nitrito a nitrato.
Tabla 5. NÚMERO MÁS PROBABLE DE MICROORGANISMOS DESNITRIFICADORES
ESTACIÓ MICROORGANISMOS DESNITRIFICANTES
N
DILUCIONES NÚMERO NMP / g NMP / g NMP / g (B.S)
CARACTERÍSTICO (tabla) (B.H)
1 10-3 10-4 10-5 3-3-3 >1100 >1.1x10 5 >2.2x10 5
2 10-3 10-4 10-5 3-3-3 >1100 >1.1x10 5 >1.44x10 5
3 10-3 10-4 10-5 3-3-3 >1100 >1.1x10 5 >1.7x10 5
4 10-3 10-4 10-5 3-2-1 150 1.1x10 4 2x10 4
5 10-3 10-4 10-5 3-3-3 >1100 >1.1x10 5 >1.3x10 5
6 10-3 10-4 10-5 3-0-0 23 2300 2.4x10 3
7 10-3 10-4 10-5 3-3-3 >1100 >1.1x10 5 >1.3x10 5
10-3
8 10-4 10-5 3-1-0 43 4.3x10 3 6.5x10 3
NMP/g( B.S) de de microorganismos desnitrificadores
250000
200000
150000
100000
50000
0
1 2 3 4 5 6 7 8
Estació n
Gráfica 3. NMP/g( B.S) de de microorganismos desnitrificadores. En el suelo,
Pseudomonas y Alcaligenes son los principales géneros desnitrificadores; muchos otros
géneros como Azospirillum, Rhizobium, Rhodopseudomonas y Propionibacterium,
también pueden actuar como desnitrificadores en determinadas condiciones. Para
identificar los microorganismos encargados de este proceso se utilizó el medio para
desnitrificadores que contiene KNO3 y asparagina ( para que los microorganismos lo
utilicen como aceptor final de electrones en condiciones anóxicas, donde el producto final
es el nitrógeno reducido en forma de gas comúnmente nitrógeno molecular por la
siguiente reacción:
1 1 7
1 1 + ¿→ N + C O2 + H O¿
1 O+ H 10
2
4 20 2
3 −¿+ H 2
¿
4 5
NO
5
La Estación donde se observó mayor presencia de este tipo de microorganismos
fue la uno.
CONCLUSION
Se logró identificar y cuantificar la presencia de microorganismos
participantes en tres diferentes etapas del ciclo del nitrógeno;
Amonificación, Nitrificación, Desnitrificación y otros procesos como
proteólisis, con base a su actividad metabólica que presentaron sobre
distintos sustratos.
CUESTIONARIO
1. Qué factores pueden alterar el número de microorganismos involucrados
en el ciclo del nitrógeno.
Los lixiviados de las grandes industrias pueden alterar el pH del suelo lo que hace
que ciertos microorganismos incluidos los involucrados en el ciclo del carbono, así
como también los fertilizantes que alteran de cierta manera la composición del
suelo alterando el medio de los microorganismos que se encuentran en el suelo.
2. La adición de fertilizantes nitrogenados puede tener consecuencias en los
procesos globales de contaminación. Indique cuáles consideraría usted son
estas consecuencias.
Las emisiones atmosféricas que emanan de la utilización de estos compuestos.
Contaminación del agua causada por el efluente de los lixiviados que se pueden
llegar a producir con la utilización de ellos.
3. Cuáles son las ecuaciones químicas que se llevan a cabo en cada uno de
los procesos biológicos analizados.
La fijación del nitrógeno necesita, además de la nitrogenasa, ATP, una ferrodoxina
reducida y quizás otros citocromos o coenzimas. El amonio es el primer producto
que se detecta en el proceso de fijación:
N2 + 6e –> 2NH+
Amonificación:
La liberación de amoníaco desde un compuesto nitrogenado simple como la
urea puede ser descrita:
Nitrificación: Durante la nitrificación, el amoníaco y los iones de amonio se
oxidan a iones nitrito (Ecuación 3) y éstos son trasformados a iones nitrato
(Ecuación 4):
Desnitrificación:
Los reductores de nitrato desnitrificadores, como Paracoccus denitrificans,
Thiobacillus denitrificans y diversas pseudomonadáceas, tienen una ruta de reducción
mucho más compleja, que les permite convertir el nitrato sucesivamente a nitrito, a
óxido nítrico (NO), a óxido nitroso (N20) y, finalmente, a nitrógeno molecular. La
secuencia de desnitrificación es (Ecuación 5):
4. ¿Qué funciones tienen los bacteroides y la leghemoglobina en la fijación
biológica simbiótica del nitrógeno?
Las células de los nódulos donde residen los bacteroides contienen un pigmento
llamado leghemoglobina, que se une reversiblemente al oxígeno. La
leghemoglobina oxigenada transporta el oxígeno en condiciones de baja tensión
de oxígeno libre a los sitios de fosforilación oxidativa en el bacteroide, donde se
utiliza durante la producción de ATP, los bacteroides son capaces de llevar a cabo
la fijación de nitrógeno.
Las bacterias que intervienen en el ciclo del nitrógeno
-Bacterias fijadoras de nitrógeno: Son aquellas que fijan el nitrógeno atmosférico y
lo transforman en amoniaco, en el suelo pueden ser aerobias, Azotobacter y
Rhizobium.
-Bacterias de la amonificación: Son aquellas bacterias que transforman las
proteínas en catión amonio, estas son las bacterias que descomponen los
cadáveres: Pyrococcus furiosus
-Bacterias de la nitrificación: Bacterias nitrosantes y nitrificante, oxidan el
amoniaco a nitrito como por ejemplo las Nitrosomonas y las nitrificantes oxidan los
nitritos a nitratos, como por ejemplo Nitrobacter
-Bacterias desnitrificantes: Son aquellas que reducen la cantidad de nitrógeno
asimilable en el suelo, que es devuelto a la atmósfera en forma gaseosa, como
ejemplos tenemos a Agrobacterium y Rhodobacterium.
BIBLIOGRAFÍA
o RONALD M. ATLAS, RICHARD BARTHA. ECOLOGÍA MICROBIANA Y
MICROBIOLOGÍA AMBIENTAL. ED. PEARSON EDUCACIÓN, MÉX. 2001
pp 545, 609-611
o BETTY A. FORBES. DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO. ED. MÉDICA
PANAMERICANA MÉXICO, 2009 pp. 26-28
o Atlas, R.M., Bartha, R. Ecología microbiana y Microbiología ambiental.
(2002). Madrid: Pearson Education. Pp 414-420.
