Introducción a la Microbiología y Técnicas
Introducción a la Microbiología y Técnicas
Constanza Cornejo
Antecedentes históricos
La microbiología como tal empezó con creo el primer microscopio por Anton van
Leeuwenhoek (1684), que es considerado el padre de la microbiología, ya que,
fue el primero en observar los microrganismos libres “animálculos” , los nombro
así debido a que no sabía realmente lo que estaba viendo. Este veía de forma
invertida los objetos dispuestos en el la lamina
Gente que ayudo a la comprensión de la microbiología
Robert Hooke (1635-1702), el cual construyo un microscopio similar a los
actuales. Observando las estructuras reproductivas de los hongos. Microscopio
este veía de forma igual el objeto
Louis Pasteur y Theodore Schwann, descubrieron el origen microbiológico y de
los procesos de fermentación láctica, alcohólica y la existencia de microrganismos
anaeróbicos. Fermentación y mc. anaeróbicos
Robert Koch, Definió los postulados para identificar a los microrganismos como
causantes de enfermedad. Trabajo con la etiología de carbunco y tuberculosis
Desarrollo métodos de cultivo líquidos y sólidos, además de cómo obtener un
cultivo puro
Postulados de Koch
El mc. Debe estar presente en todos los individuos con la misma
enfermedad y ausente en los sanos
El mc. Debe ser recuperado de un individuo enfermo y poder ser
aislado en un medio de cultivo
El mc. Proveniente de ese cultivo debe ser capaz de generar la misma
enfermedad cuando se le mete a otro individuo
El individuo experimentalmente infectado debe contener el mc.
Constanza Cornejo
Alexander Fleming Uso de los antibióticos posterior que el hongo penicillium
impedía el crecimiento de Staphylococcus aureus. Ademas, Howard Florey y
Erneast Chain, purificaron y aislaron la
penicilina G, para su uso como antibiótico
Nota
Hooke: 2 lentes, objetivo y ocular. El
objeto se amplia y se ve invertido
Leeuwenhoek: 1 lente, se ve a contra luz
Microscopio actual
Resolución mínima 0,2 um (micrómetros)
Aumento efectivo Max. 2000x
Microscopia de luz
La muestra se puede ver debido al contraste entre el espécimen y el contorno que lo
rodea. Las células pigmentadas de forma natural se ven de forma más fácil. Por ej. Las
cianobacterias que realizan fotosíntesis, debido a que tienen clorofilia. Se ven de color
verde, siendo fácilmente de ver. Usualmente las células no tienen color de forma
natural, o son tan pequeñas que el pigmento no se alcanza a hacer de notar, En este
caso el contraste que hay entre la celula y el entorno es minimo, siendo dificultosa la
observación.
Cuando hay células que no están pigmentas y es necesario aumentar el contraste, se
denomina TINCION SIMPLE (es cuando se utiliza un único colorante, sin importar la
clase)
Tinciones
Tinción simple
1. A partir de una pequeña porción de un cultivo líquido, la esparzo en la superficie del
portaobjeto, esto se llama FROTIS.
2. Lo dejo secar al aire
3. Mientras se está secando, la paso sobre la llama del mechero. Esto tiene dos sentidos,
hace que el agua se evapore más rápido y este aplicar calor ayuda a fijar la muestra (se
comienza a pegar al portaobjeto)
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4. una vez que la muestra está seca y que ya se fijó, se aplica colorante (UN SOLO
COLORANTE). Ejemplo: violeta, fucsina, etc. Se aplica el colorante por un rato cosa
que el colorante tiña a las células.
5. Se lava el colorante por medio de agua destilada o agua de la llave. Con esto se logra
eliminar el exceso de colorante
6. Se deja secar o ayudarnos por medio de papel absorbente
7. Una vez que está seco, se monta en el microscopio y se inicia la observación.
Resumen de tinción simple:
✓ Coloco muestra en porta objeto
✓ La seco
✓ La paso por calor fijándose
✓ Agrego Colorante
✓ Lavar quitando el exceso
✓ Lista para Observar
-Gram – (rosita)
TINCION DE GRAM
• Es una tinción diferencial, esta nos permite distinguir o diferencial tipos distintos
de células. La tinción de gram permite distinguir a la inmensa cantidad de bacterias
y agruparlas en dos grupos: GRAM (+) y GRAM (-).
• La GRAM (+) y GRAM (-) se distinguen por su afinidad tintorial. Las gram (-)
se tiñen de color rosado por un colorante que se llama safradina y las gram (+) se
tiñen de color morado o purpura por un colorante que se llama cristal violeta.
Procedimiento:
Se prepara un frotis, lo dejo secar, lo paso por el mechero, le aplico una serie de
colorante que tiene un orden en particular. Primero se aplica el cristal violeta, entre 1 o
3 minutos. El cristal violeta queda pegado en la pared celular. Cuando uno aplica el
cristal violeta, todas las células se tiñen de color morado. Después se aplica una
solución de ioduro haciendo que precipite el cristal violeta y ayude a la retención del
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primer colorante, es decir hace que las células se mantengan moradas. El ioduro se
aplica entre 1 o 3 minutos.
Después de eso viene la parte más crítica de la tinción de gram, es una etapa de
desteñido, se aplica un decolorante que es un solvente orgánico
(ejemplo: etanol con acetona, etc). El desteñido remueve el cristal violeta pero no es
capaz de moverlo de cualquier tipo celular. Cuando uno aplica el decolorante, las
bacterias gram positivas son capaces de resistir la acción del decolorante, por ende, no
se destiñen. Por lo tanto, se mantienen moradas. Las bacterias gram negativas pierden el
colorante y se destiñen.
Si no observa esto, las gram positivas se verían moradas y las bacterias que llamamos
gram negativas se ven muy poco. Como las gram negativas, no se verían realmente se
agrega un último colorante que se llama una tinción de contraste. La safradina le da
color a las gram negativas que quedaron incoloras.
Al final de la tinción, las gram positivas se ven moradas y las gram negativas se ven
rosadas gracias a la safradina.
Resumen tinción de Gram
1. Portaobjeto ya fijado, le pongo colorante violeta (ambas se Tiñen)
2. Se agrega solución de Alcohol (Saca el colorante de la gram negativa)
3. Agrego Safranina (tiñe la negativa de Rosado)
4. Negativas Rosadas, Positivas Violetas
Contraste de fases
Campo oscuro: Usa los distintos índices de refracción que tiene la Bacteria y resalta
la estructura que quiero observar. Se usa para muestras Vivas
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Microscopia electrónica
• Funcionan de manera similar a los microscopios ópticos, pero en vez de usar luz,
utilizan un haz de electrones. En vez de usar lentes para enfocar sobre la muestra,
utiliza electroimanes.
Tenemos dos tipos:
1. MICROSCOPIA ELECTRONICA DE TRANSMISION: Es más comparable a la
microscopia óptica de campo claro porque nos ofrece una imagen plana. No utiliza
colorantes Se utiliza metales pesados. Se puede ver virus, que son muy pequeños.
Solamente gracias a esto se pudieron observar. Utiliza electrones
2. MICROSCOPIA ELECTRONICA DE BARRIDO: Los electrones no pueden
penetrar la muestra, sino que revotan en la superficie de la muestra y dan una imagen
3d. No se sabe lo que sucede dentro de la muestra. Se puede observar la parte externa.
Permite obtener imágenes tridimensionales En vez de colorantes, se utilizan metales
pesados que impiden el paso de los electrones
Morfología y agrupaciones bacterianas Planos de
La pared celular es la responsable de la morfología de la bacteria Division
Los tipos de morfología son:
1. Cocos o cocáceas
2. Bacilos
2 (1 plano)
3. Espirilo
4. Espiroqueta
5. Bacterias gemantes o con apéndices
Cadena (1 plano)
6. Bacteria filamentosa.
4 (2 plano)
8(3 plano)
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MP
Similitudes entre la capa mucoide y capsula
• Pueden participar en la capacidad que tiene algunas bacterias en causarnos
enfermedades o de evadir la acción del sistema inmune. En el caso de la capsula,
puede evadir la fagocitosis y la capa mucoide, protege contra la acción del
complemento, anticuerpos y antimicrobianos.
• Ambas tienen la participación de la bacteria en fijarse a una superficie
Envoltura celular
Envoltura
Después de exopolisacarido se encuentra la envoltura celular. Estructura rígida que ayuda a
mantener la forma de la célula. Las células vegetales, los hongos y las bacterias tienen
pared celular. Es responsable de la morfología celular.
Las formas más típicas de las bacterias son cocáceas y bacilar. Además, tenemos bacterias
filamentosas, algunas tienen tallo, etc.
Es una o la otras ambas no pueden estar presentes en una bacteria
Nota: NO TODAS las bacterias se pueden clasificar como gram (-) y gram (+). Hay un
pequeño grupo que queda fuera de esta clasificación, debido a que no se puede teñir con la
tinción de gram. Estas células son el género mycobacterium, estas para ser observadas se
utiliza otro tipo de tinción que se llama tinción alcohol-acido resistente.
Hablando de la envoltura celular entre la bacteria gran positiva y gran negativa hay
diferencias tales como:
1. Bacterias gram positiva: pared gruesa de peptidoglican; acido teicoico, ácido
lipoteicoico, proteínas asociadas M
2. Bacterias gran negativa: pared delgada de peptidoglican, periplasma, membrana
externa (LPS, LOS, porinas, lipoproteína), tiene membrana externa, tienen
periplasma que está delimitado por las dos membranas: membrana plasmática
interna y externa.
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La gran diferencia en la tinción de gram, cuando se aplica el colorante cristal violeta, la
pared gruesa de los gram (+) se llena de cristal violeta y en los gram (-) también se llena de
cristal violeta. Pero cuando se aplica el decolorante, este al interactuar con el peptidoglican
hace que éste se apriete y se deshidrate. El colorante no puede penetrar bien cuando el
peptidoglican es grueso y no se remueve al quitar el cristal violeta. En cambio, en donde
hay poco peptidoglican, el decolorante entra y disuelve gran parte de la membrana externa
y arranca todo el colorante del peptidoglican. ESO ES LO QUE HACE LA GRAN
DIFERENCIA. Gram + azulitas o moradas y el gram – rosita
Aminoacidos
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Gram positivo:
Se encuentra una gran cantidad de peptidoglican. Este se encuentra embebido por
ciertas estructuras, estas pueden ser ácidos teicoicos (azucares), ácidos lipoteicoicos
(atraviesa todo el peptidoglican y están en contacto con lípidos de la membrana).
Además, se encuentra la proteína M.
• Ácido teitoico
Polisacáridos
• Ácido lipoteitoico
• Proteína M
Polisacáridos acídicos presentes SOLO GRAM POSITIVO:
1) ácido lipoteicoico: es un polímero de glicerol fosfato unido a lípidos de membrana
citoplasmática (pueden atravesarla o no). Son polímeros de glicerol fosfato. El ácido
teicoico es polímero de ribitol fosfato y este acido se encuentra unido de manera covalente
al peptidoglican.
2) Acido teicoico: polímero de ribitol fosfato unido de manera covalente al peptidoglican
atraviesan la pared celular completamente y los ácidos teicoicos la atraviesan de forma
parcial.
Las funciones que poseen es que:
• Estabilizan al peptidoglican
• Funcionan como adhesión celular, debido a que son azucares (adhesina).
• Dan carga negativa a la envoltura de la bacteria, debido a que son acídicos (Los
Gram + están cargados (-) por lo que atrae cositas +
• Gracias a los fosfatos que hay en el polímero, le dan carga negativa a la envoltura
de la bacteria, tanto gram positivo como gram negativo tienen carga negativa en su
superficie por lo que así atrae compuestos positivos
Gram negativo:
En bacterias Gram - solo una pequeña porción de la pared celular es de peptidoglicano,
ya que la mayor parte constituye la membrana externa. La membrana externa contiene
polisacáridos y lípidos y los polisacáridos están unidos formando un complejo. Por ello
suele llamarse capa de lipopolisacáridos o LPS.
Todas las gram negativas tienen LPS, la diferencia está en cómo está constituido el LPS.
En LPS se distinguen 3 zonas:
1. Unidad repetida de polisacárido (Antígeno O): es la parte más externa
2. Oligosacárido central (Core)
3. Endotoxina: es la parte más interna
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1- LPS
El lípido A está formado por 2 azucares, 2 n-acetilglucosamina y 4 o 6 ácidos grasos. Esta
parte lipídica es toxica para los animales, es lo que se llama la endotoxina y se encuentra
anclado a la membrana externa.
Es parte de la bicapa lipídica de la membrana externa. La endotoxina o lípido A es muy
pirogénica (produce fiebre), esta al ser destruida se libera y produce múltiples cosas en el
org. Funcionando como toxina
Unido a esta porción lipídica está la parte intermedia entre el lípido A y el O-oligosacárido
(compuesto por pocos azucares 8-10 dependiendo de la especie bacteriana), se encuentra el
CORE que corresponde al oligosacárido central.
Proyectándose a la superficie de la célula se encuentra el oligosacárido, que son unidades
repetidas n veces. Este polisacárido es antigénico (= estimula al S.I. y este responde
fabricando anticuerpos, el sistema lo reconoce como extraño). Esto corresponde al antígeno
O.
La función principal de LPS es aportar resistencia a la célula Gram -, lo cual es una
importante propiedad biológica en la toxicidad para los animales. (Uno de los síntomas más
comunes es el dolor gastrointestinal)
En la membrana
+ Exterior externa
2- Porinas: (solo en membrana externa): Grupo de proteínas que generan poros o canales
acuosos que permiten el paso de pequeñas moléculas hidrofílicas (afinidad con el agua) a
través de membranas biológicas. Son de estructura de barril beta, son de canal hidrofílico
interior y son hidrofobico al exterior y se encuentran en la membrana externa, llegan
después de pasar al espacio periplasmatico. No cualquier carga pasa ni tampoco el tamaño.
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3- Periplasma:
Representa un 20 a 40% de volumen de la célula total
Tiene una consistencia de gel
Tienen un ambiente altamente oxidable (bacteria crea proteínas y puentes
de disulfuros que son importantes para crearlas 3D de las proteínas,
cuando llega al periplasma este lo “arma” y así la proteína funciona (Deben
salir al exterior para tener la estructura 3d)
Contiene el peptidoglican
Contiene 3 tipos de proteína: enzimas hidrolíticas (metabólicas y
desintoxicantes), proteínas de unión para sustratos específicos (proteínas
que permiten que se transporten sustratos, llamados carriers. Transportan
solutos a través del periplasma desde la parte más ext. A int.),
quimiorreceptores (tienen que ver con la quimiotaxis. Receptores que
censan el ambiente)
En el periplasma ocurre la formación de puentes de disulfuros
Membrana citoplasmática
Tiene el típico modelo de mosaico fluido. Posee fosfolípidos, proteínas, etc. Es
fluida en el sentido de que los componentes de la bicapa no están en posiciones
fijas, se pueden mover uno con respecto al otro. Los lípidos pueden girar en torno a
si mismo, cambiar de posición, incluso cambiar de una capa a otra.
La membrana citoplasmática de células eucarionte hay esteroles, en células animales es
el colesterol y en las plantas es el fitoesterol (no es colesterol). Las bacterias NO TIENEN
ESTEROL.
Normalmente las bacterias no tienen nada equivalente al colesterol ni al fitoesterol. Hay
unas pocas especies bacterianas que tienen unas especies que se llaman HOPANOIDES, y
son similares a los esteroles en cuanto a la ubicación que ocupan (entre los fosfolípidos)
pero no tienen función de los esteroles.
Las bacterias no tienen esteroles, por lo tanto, la fluidez de la membrana se regula de una
manera distinta a como lo regula el colesterol en células animales. El colesterol en las
células animales le sirve para darle rigidez a la membrana. Esto de alguna manera ayuda a
la fluidez de la membrana citoplasmática.
En las bacterias la fluidez de la membrana se regula por:
Alterar la composición de los fosfolípidos. Por ejemplo: cuando hace mucho calor
y la bacteria necesita endurecer la membrana, incorpora ácidos grasos más largos y
saturados en los lípidos de la membrana. Cuando hace mucho frio y se necesita
ablandar la membrana, los ácidos grasos son más cortos.
Insaturación: mayor o menor saturación hace que sea más o menos fluido.
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Funciones de membrana
1. Normalmente es una barrera de permeabilidad. Separa el medio externo del
interno .Presenta permeabilidad selectiva a los solutos, ella decide entre comillas
que es lo que pasa a través de ella y que no. Genera un transporte
2. Tiene un rol estructural, de síntesis y transporte de macromoléculas. También
tienen un rol de comunicación, a eso se refiere la señalización al medio
intracelular y la quimiotaxis
3. Tiene un rol en la generación de energía. Esto no lo posee la membrana de las
células eucariontes. La bacteria no tiene cloroplastos ni mitocondria. Una célula
eucarionte produce energía en la mitocondria. En las bacterias, la energía se
produce en la membrana plasmática. Esto quiere decir que, en la membrana
plasmática de las bacterias, está la cadena transportadora de electrones, la ATP
sintetasa, etc. Otra forma de energía que puede tener estas células son los
gradientes de iones, esa es energía potencial y se utiliza cuando los iones de
mueven a través de la membrana. La bacteria tiene dos fuentes de energía:
i) Un gradiente electroquímico, fundamente de iones de hidrogeno que se
le suele llamar la fuerza protón motriz
ii) Función de síntesis de ATP que también está en la membrana
plasmática
4. La membrana se encuentra poblada de múltiples
proteínas responsables del transporte selectivo de
solutos y se encuentran 3 tipos de transporte:
i) Uniporte: transporta un solo tipo de soluto
ii) Simporte: cuando dos solutos distintos se mueven
en el mismo sentido
iii) Antiporte: cuando los solutos distintos se mueven
en sentido contrario
5. Obtención de energía: se hace en la membrana de la
bacteria en diferencia de una célula normal. Generando potenciales de membrana como
el bombeo de iones como H+,Na+,Etc. Reacciones oxido/reducción. Síntesis de ATP,
fotosíntesis.
Los protones entran, por la bomba de ATP usando un ADP y se genera ATP, quedando en
el interior.
6. Receptores y sensores: Son proteínas receptoras, detectan cambios en el medio
ambiente del microorganismo y envía una señal molecular, su objetivo es modificar la
fisiología bacteriana para así adaptarse a las condición ( como son) para adaptarse
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Apéndices proteicos
Flagelo:
Apéndice fino, filamentos helicoidales formados por polímeros de flagelina.
Están anclados a una “maquinaria rotatoria” presente en la membrana citoplasmática
(cuerpo basal) a través de una estructura de tipo”gacho”. Es responsable del movimiento
bacteriano lo cual consume energía , los flagelos están en bacterias presentes en
ambiente acuático
Tiene factor de virulencia (esto es cualquier cosa que le facilita, colabora y apoya a la
bacteria en llevar a cabo una infección exitosa. Patogenisidad) tiene un carácter proteico
que le brinda propiedades altamente antigénicas (antígeno H o flagelar).
La diferencia de bacterias GRAM positivo y GRAM negativo es en el cuerpo basal.
Interviene en la patogenicidad de ciertas especies y es antigénico. ( sistema inmune lo
reconoce)
Tipos de flagelos 1 flagelo polar Varios flagelos
en 1 extremo alrededor de la célula
1 flagelo en cada
polo Varios flagelos
en 1 polo
Movimiento de flagelo → Por taxia, en otras palabras, el movimiento es dirigido por una
gradiente fisicoquímica, ej.
• Quimiotaxia (componente químico)
• Fototaxia (luz)
• Aerotaxia (concentraciones de O2)
Bacterias sienten el microambiente y mediante sus vías de transducción de señales
controlan según los estímulos su velocidad y rotación flagelar (acercándose o alejándose).
Este método es de competencia y supervivencia de los otros
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Fimbrias o Pili (pilus):
o Son apéndices proteicos. Son pequeños apéndices o microfibrillas de
naturaleza proteica formado por pilina.
o El termino Pili es el plural y pilus es el termino singular.
o El termino fimbria se puede usar como una cosa genérica, o como algo
más específico. La palabra fimbria se puede usar en el sentido más
amplio, para referirse a un conjunto de varios apéndices proteicos que
están formados por esta proteína que se llama pilina. Y también se puede
usar en el sentido específico, para referirse a un tipo de apéndice que está
formado por pilina.
o Estos apéndices participan en la adherencia específica, a otras bacterias
o células eucariontes. NO participan en movimiento (solamente flagelo
puede hacer esto).
FIMBRIAS → son apéndices o microfibrillas de naturaleza proteica
(pilina). Su función es adherencia específica con bacterias y cel.
Eucariontes. No crean movimiento, se clasifican en 3:
1. Peritricas
2. Tipo curli
3. Tipo IV
Pilus→ apéndice retráctil de mayor longitud. Polímero de proteína retráctil (pilina). Tiene
adherencia (Pili tipo V “curli”). Su función es intercambio de material genético entre
bacterias en el proceso de conjugación llamado Pili sexual. La información que se puede
pasar por un pilus sexual es por ejemplo la resistencia de una bacteria a un antibiótico y el
otro recibe esta información y se vuelve resistente también.
Esporas:
No todas las bacterias generan esporas, y es un mecanismo de defensa y
supervivencia ante una inminente muerte. SOLO 2 GENEROS BACT.
Está presente en dos géneros de bacterias importantes para los humanos:
clostridium y bacillus
Las esporas ocurren debido a la respuesta al agotamiento de un nutriente
fundamental. Las esporas se originan dentro de la bacteria (proceso de
diferenciación celular).
Una espora está compuesta por ADN bacteriano muy compuesto y
presenta peptoglican. Su función es resistir al calor, radiación, desecación
etc., pueden durar por cientos de años.
Una sola bacteria crea una sola espora la cual en el momento que considere
bueno se va a desarrollar creando una sola bacteria desde su espora
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DENTRO DE
LA BACT. NO
HAY
ORGANELOS
Ribosomas
Genoma bacteriano
Una bacteria a diferencia de una célula eucarionte que el DNA es lineal, en las
células procariontes su DNA es circular y de doble hebra. Además, se encuentra
sobreenrollado (no está laxo). Contiene un replicón autónomo, este material
genético se puede replicar y tiene solo un origen y termino de replicación. En
cambio, en las células eucariontes, son varios orígenes de replicación.
El tamaño depende de la bacteria, por ejemplo:
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1. H. influenzae tiene 0,8 pares de bases
2. E. coli tiene 4,5 pares de bases
3. pseudomonas tiene 8 pares de bases
Las bacterias tienen varias moléculas de DNA distintas. Una buena parte de las
bacterias, lo único que tienen de DNA en su interior es UN CROMOSOMA. Un
cromosoma es un replicón autónomo, esto quiere decir que tiene todo lo que
necesita para replicarse. Esto quiere decir que tiene las secuencias específicas de
DNA y también, codifica las proteínas que hacen falta para la replicación.
Las bacterias TIENEN UN CROMOSOMA.
Tiene un origen de replicación que es UNO SOLO, a diferencia de las células
eucariontes que tiene varios orígenes de replicación. Además, tiene una secuencia
de término la replicación. Los cromosomas bacterianos son moléculas circulares y
potencialmente la replicación podría empezar una vez y estar así para siempre. Por
eso, existen secuencias específicas de término de replicación.
Generalmente las bacterias están formadas por DNA CIRCULAR DE DOBLE
HEBRA. Tiene un tamaño variable incluso dentro de individuos de la misma
especie.
Los cromosomas se presentan en COPIA UNICA, esto quiere decir que de todos
los cromosomas que tiene la bacteria, tiene uno de cada uno. Bacterias son
haploides
El cromosoma tiene el patrimonio genético de cada bacteria, ósea toda la
información genética en esa célula. El DNA esta libre en el citoplasma en el caso
de las bacterias porque no poseen núcleo. En algunos casos las bacterias pueden
tener alguna otra molécula de DNA en su interior, que son los PLASMIDOS.
Plásmidos:
La bacteria puede tener plásmido a pesar de que algunos no lo poseen. No es esencial que
tengan plásmido las bacterias. Si lo tienen puede vivir perfectamente, pero en aquellas
bacterias que, si tienen plásmido, tienen información genética extras (resistencia a
antibiótico) y resiste más.
Es más pequeño que genoma bacteriano.
Tiene DNA circular de doble hebra
Tiene replicones autónomos, le vale si la célula esta en replicación
Pueden existir varias copias de un plásmido dentro de una sola célula. El plásmido
se puede replicar varias veces por una división celular de 1 a más de 100.
Hay plásmidos grandes y plásmidos pequeños.
Tienen capacidad de transferencia horizontal o traspaso de una célula a otra.
Ese es el material genético que se traspasa a través del pilus. Se denomina
trasferencia horizontal que es por CONJUGACION.
Contienen genes no esenciales, esto quiere decir que una célula puede perder a su
plásmido y no se muere. El tener el plásmido le da ventajas para la resistencia de
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antibióticos, etc. Si le quito el plásmido a la célula, no va a vivir igual, sino que va
a vivir peor la célula.
Una bacteria puede tener varios tipos de plásmidos o el mismo plásmido repetido
varias veces.
Genética bacteriana
Expresión de información genética: síntesis de proteína a partir de los genes que
la codifican, estas proteínas tienen funciones que le otorgan capacidades a las
bacterias y cualquier alteración en la secuencia de ADN se puede (puede o no)
traducirse en una alteración de la función de la proteína, siendo esta alteración
favorable o desfavorable. (variabilidad genética)
Bacterias haploides. 1 SOLO CROMOSOMA
Mutaciones: cambios heredables en el genoma de un organismo. Puede ser
espontanea o inducidas por agentes químicos y físicos, pueden causar cambios
fenotípicos en la bacteria, las mutaciones constituyen una fuente primordial de
variabilidad genética, para que una mutación se establezca en la población esta debe
dar una ventaja adaptativa al organismo. Tipos de mutación:
La propia célula
Transferencia horizontal (lateral) de
Cambio de genes propios: material genético, adquirir nuevos genes:
• Missense/nossense • Conjugación
• Inserción/deleción • Traducción
• Transformación
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Mutación por inserción: entra un nucleótido que genera un
cambio o corrimiento en el marco de lectura de un gen. En caso
Pueden generar extremo puede ganar todo un gen completo mas
los 2 anteriores Mutación por deleción: perdida de nucleótido que genera un
cambio o corrimiento en el marco de lectura de un gen. En caso
Recordemos que la
extremo puede perder todo un gen.
vola se lee de 3
Mutación regulatoria: sustitución de un solo nucleótido,
inserciones y deleciones que se pueden presentar en zonas fuera
de la región codificante alterando promotores y regiones
Bacterias poseen
MG en cromosoma regulatorias. Puede darse la pérdida total del gen
(nucleiode), y Mutación compensatoria: mutación secundaria, corrige la
plásmidos CJ mutación en fenotipo de cualquier mutación previa, o sea
(poseen toda la elimina el gen malo suprimiéndolo. Puede ser intragenica (mismo
info) o no CJ (no gen que provoco el defecto) o extragenica ( presente otro gen
poseen toda la info distinto al mutado que provoco el problema)
Plásmido:
Son replicones autónomos (replican independiente al cromosoma bacteriano),
formados por doble hebra de ADN circular sobreenrrollados, tienen un tamaño
variable (pero menos que el cromosoma), algunos hacen transferencia horizontal
(conjugación y se llaman plásmidos conjugativos -tra), contienen genes
adaptativos no esenciales (dando por ejemplo resistencia antibióticos).
Transferencia por fagos:
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Es más complejo, actúan los bacteriófagos las cuales son virus que infectan a
bacterias , poseen el genoma DNA o RNA, encapsulado en proteínas , se unen
receptores específicos de la pared celular (absorción) y hay dos tipos :
1. Virus lítico: produce lisis, se replica de manera continua y termina
destruyendo a la bacteria hospedera, este virus puede hacer traducción.
2. Virus lisogénico: integra su genoma al genoma bacteriano, se replica
junto al del hospedero. No crea traducción.
Transducción: Partículas virales inyectan ADN de origen bacteriano, y este se
recombina con el MG de la cepa receptora
Transformación: Bacterias (competentes) que poseen proteínas de sup. Que unen
ADN lineal desde el exterior y lo transportan al interior de la celula, se puede
integrar al genoma de la bacteria
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Obtención de energía (cualquier tipo) a través de la glucosa. Algunos ejemplos de
catabolismo en ruta anaeróbica son la:
I. glicolisis o glucolisis
II. ciclo de Krebs (estos dos pasan en el citoplasma)
III. sistema de transporte de electrones y fosforilación oxidativa. (Ocurre en
membrana plasmática)
Glicolisis
Lisis de azúcar. Se degrada una glucosa (posee 6 carbonos) a 2 piruvatos (3C)
tiene una ganancia neta de 2ATP, ocurre en el citoplasma en eucariontes y
procariontes, degrada glucosa para volverlas a piruvato.
• Puede ocurrir en condiciones aeróbicas y en condiciones anaerobias. No
es parte de respiración celular.
• La glicolisis empieza en la glucosa y termina en piruvato (dos moléculas
de piruvato).
• No hay pérdida de átomos de carbono. La glucosa tiene 6 átomos de
carbono y los piruvatos tienen 3 átomos de carbono.
• La glicolisis tiene dos etapas, una fase preparativa que termina justo
cuando la molécula de 6 carbonos se rompe en dos y después viene una fase
de ganancia, que es la que sigue.
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• La ganancia neta es la energía generada en la fase de ganancia, se le resta la
cantidad de energía ocupada en la fase preparativa.
• La GANANCIA NETA de la glicolisis es: 2 moléculas de ATP por cada molécula
de glucosas, 2 moléculas de NADH (6 moléculas de ATP), 2 piruvatos
• La glucosa por medio de la glicolisis se convierte en acido pirúvico (piruvato).
Este puede ir a dar a varias partes.
• Si hay oxigeno va al ciclo de Krebs, fosforilación oxidativa. El producto final es
CO2+H2O. Esta es la RUTA AEROBICA. Esto ocurre siempre y cuando la
bacteria utilice oxigeno
Piruvato
En resumen:
Glicolisis crea 7 ATP. Oxidación de piruvato crea 5ATP. Ciclo de Krebs crea 20 ATP
Ciclo de Krebs: aun que las bacterias no tienen mitocondrias el ciclo de Krebs se
desarrolla en el citoplasma.
•Es la oxidación completa y degradación de glucosa y otras moléculas.
•Es común en bacterias aeróbicas, protozoos, la mayoría de las algas y hongos.
•La oxidación de la glucosa produce dos moléculas de ácido pirúvico (2 moléculas
de acetil coA).
• Por cada molécula de acetil coA el ciclo de Krebs genera
I. 2 moléculas de co2
II. 3 moléculas de NADH (lo cual son 7.5 ATP)
III. 1 FADH2 (equivale a 1,5 ATP)
Constanza Cornejo
IV. 1 GTP o ATP.
Fermentación
Características de la fermentación:
1. Permite obtener energía de los azucares y otras moléculas orgánicas.
2. No requiere oxigeno
3. No requiere del ciclo de Krebs, o cadena transportadora de electrones.
4. Usa una molécula orgánica como aceptor final de electrones
5. Permite la generación de baja cantidad de ATP
Fermentación alcohólica
La Fermentación alcohólica es un proceso biológico de fermentación en plena ausencia de
oxígeno (- O2), originado por la actividad de algunos microorganismos que procesan los
hidratos de carbono (por regla general, azúcares: por ejemplo, la glucosa, la fructosa, la
sacarosa, es decir, cualquier sustancia que tenga la forma empírica de la glucosa, es decir,
una hexosa). Tiene como finalidad biológica proporcionar energía anaeróbica a los
microorganismos unicelulares (levaduras) en ausencia de oxígeno a partir de la glucosa. En
el proceso, las levaduras obtienen energía disociando las moléculas de glucosa y generan
como desechos alcohol y CO2
Para obtener NAD
se hace un proceso
de fermentación
dep. De su
necesidad
Constanza Cornejo
Uso estos
No puedo formar
ATP si no tengo
ADP
Si no hay NAD
no se crea el
proceso Aquí se
recupera el
NAD
Producto de
desecho
Constanza Cornejo
No siempre la Molécula inicial crea el mismo producto exacto final, si no que a veces
puede variar en sus productos debido a la fermentación.
Los desechos de una bacteria pueden ser el alimento
de otra
Se pueden fermentar aminoácidos
Hay bacterias que realizan fermentación lácticas,
también hay otras que realizan fermentación
alcohólica, incluso hay algunas que hacen
respiración aérobica. En todos estos procesos hay
enzimas involucradas.
La fermentación siempre va a ser el último
recurso, ya que a partir de ella el único ATP que
obtiene la célula es el de la glicolisis, y estos
corresponden a 2 ATP.
Clasificación según fuente de energía de los catabólicos
Quimiotroficas o quimiocinteticas: Aquellos que obtienen su energía a partir de reacciones
químicas un ejemplo es la e.coli
I. Quimiorganotroficas: energía la obtiene de sustancias químicas orgánicas. Su
producto final y su desecho es el CO2, obtiene ATP, estas si están en nuestro
cuerpo
II. Quimiolitotroficas: obtienen energía de compuestos inorgánicos, se obtiene
ATP, la bacteria no produce CO2 si no que lo capta y lo une a un proceso de
biosíntesis y crea macromoléculas con carbono y así puede crear el ATP y ahí saca
energía. Estas bacterias no están en el cuerpo
Anabolismo
Es la síntesis de componentes estructurales, haciendo pasar de una molécula más básica,
y transformarla en una molécula más compleja.
Según su fuente de carbono se clasifican en dos tipos:
Constanza Cornejo
1. Heterótrofas: las cuales obtienen su carbono a partir de moléculas más
complejas como por ejemplo hidratos de carbono, aminoácidos, lípidos.
2. Autrotofas : obtienen el carbono a partir de moléculas simples como el CO2 y
CH4
Biosíntesis de macromoléculas: se usa el ciclo de Krebs, la glucosa crea el piruvato, hay
cosas que salen del ciclo de Krebs como ácidos grasos, esteroles, bases nitrogenadas,
aminoácidos
Fijación de co2: se usa el ciclo de Calvin el cual es realizado por todas las bacterias
fototroficas.las plantas lo tienen. Usa glicolizaido 3-fosfato. Nosotros como humanos no
realizamos ciclo de Calvin solos necesitamos consumir el azúcar para poder crear todo esto.
Fijación de moléculas simples:
Fijación de fosforo (P):
1. Fosforilación: formación de ATP desde ADP y PI durante fotosíntesis.
2. Fosforilación oxidativa: formación de ATP desde ADP y PI durante la
cadena transportadora de electrones
3. Fosforilación a nivel de sustratos: ocurre durante glicolisis
Fijación del azufre: el azufre es necesario en las bacterias. Cuando capta el sulfato
(fuente sulfurada), crea acido sulfidrico y junto a otros compuestos crea cisteína y la cual es
súper importante a que es un aminoácido de las proteínas y el azufre está en su compuesto
así que es importante fijar el azufre, hace que funcionen las proteínas
Fijación de nitrógeno: todos los aminoácidos tienen nitrógeno asique es súper importante.
Crecimiento bacteriano
Crecimiento : aumento de número de individuos en una población de
microorganismos (implicando el aumento de biomasa)
Velocidad de crecimiento: crecimiento de un organismo por unidad de tiempo
Tiempo de generación (g): tiempo requerido para que se formen dos células hijas a
partir de una célula parental (esto incluye la duplicación de todos sus componentes
estructurales de la célula) es el tiempo necesario para que la población microbiana
se duplique. Este tiempo es distinto para cada especie y depende de las condiciones
de cultivo (puede variar de minutos a horas)
Constanza Cornejo
FISION BINARIA
• La división binaria es la división de la bacteria madre en las dos o más bacterias
hijas que desarrollan, todas las hijas tienen el mismo genotipo y fenotipo de la
madre (mismo tamaño y contenido genético).
• Esto se ve reflejado poblacionalmente en el aumento de números de organismos
presentes.
• Se requiere coordinación espacial y temporal (secuencial) en la síntesis de
macromoléculas: ADN, proteínas, hidratos de carbono, lípidos.
Curva de crecimiento bacteriano:
Existen 4 fases:
I. Fase lag: es el crecimiento lento (en donde hay acondicionamiento ambiental)
II. Fase exponencial o logarítmica: crecimiento bacteriano a su máxima capacidad
III. Fase estacionaria: detención del crecimiento, no del metabolismo (estrés,
hambruna)
IV. Fase decaimiento: muerte celular (agotamiento del cultivo)
Constanza Cornejo
Las desventajas del recuento total de células son:
1. No se distinguen las células vivas de las muertas. Las células muertas se
ven exactamente iguales a las células vivas.
2. Las células pequeñas es difícil verlas y es posible que se me pase alguna
en el momento de hacer el conteo.
3. Se requiere tiempo y habilidad
4. Se requiere un microscopio con contraste de fases cuando la muestra no está
teñida.
5. No es un método muy recomendable, cuando la suspensión de células está
muy diluida. Normalmente cuando la muestra está muy diluida o muy
concentrada, siempre hay errores. Si el cultivo está demasiado concentrado,
se puede diluir. Cuando el cultivo está muy diluido, no lo puedo
concentrar. No existe un método para concentrar y poder hacer un recuento
que sea confiable.
Colonia bacteriana
• El siguiente recuento tiene la capacidad de determinar las células viables.
Para saber si está viva la célula, se toma una muestra, se traspasa a una placa
Petri y se esparce en esta placa homogéneamente. Luego se lleva a estufa y se
observa.
• Se observa el crecimiento. Donde estaba una bacteria después se observa
como COLONIA BACTERIANA. Lo que se contabiliza es la colonia y si hay
una bacteria muerta, no va a observarse como una colonia.
• Una colonia es una agrupación de células visible a simple vista que provienen de
la división de una única célula bacteriana que está creciendo en un medio solido.
El conteo de una bacteria se mide en unidad formadora de colonias (UFC).
• se ve el crecimiento que tiene la forma de una colonia.
• Si tiene 20 colonias esta placa, separadas unas de otras, al principio cuando se
sembró ahí habían 20 células vivas.
Constanza Cornejo
PRIMER METODO
1. hay una pipeta que se está depositando a una placa una alícuota del cultivo.
2. Utilizo un instrumento de cultivo, que me permite esparcir este volumen de cultivo
por toda la superficie de la placa.
3. Una vez que esto se seca, se incuba en condiciones apropiadas para el bicho
4. Se incuba hasta que aparecen colonias. Se cuenta las colonias presentes en la placa
(si cuento 17 colonias, quiere decir que habían 17 células vivas).
SEGUNDO METODO
1. Se toma una placa vacía, en que se le echa un cantidad del cultivo
2. Sobre esa placa, se agrega medio fundido (agar), no debe ser muy caliente. El agar
se encuentra a 50°C.
3. Se agita la placa, se mezcla
4. Una vez que esto se enfría, se incuba
5. las colonias quedan atrapadas en al agar y en la superficie
El problema de este método con agar es que el agar esta a 50°C, eventualmente a esa
temperatura la bacteria puede morir. Se debe poner a una temperatura limite (45-47°C).
La única diferencia con el método anterior es que en vez de tener colonias solo en la
superficie, también voy a tener colonias atrapadas o incluidas en el agar. Esto genera el
problema de que no se sabe que contar. Por lo tanto, el método que más se utiliza
corresponde al primer método.
Constanza Cornejo
RECUENTO DE CELULAS VIABLES
Segunda forma
Dilución seriada de la muestra en medio estéril y plaqueo sobre medio solido
• Si una persona no sabe si está muy diluido o concentrado, se debe hacer una
DILUCION SERIADA.
• Se debe hacer distintas diluciones para probarlas.
• Tengo mi cultivo original, puedo tomar 1 ml y lo diluyo 10 veces. Al diluirlo 10
veces, lo mezclo con un caldo estéril.
• A partir de estos 10 ml, tomo 1 ml y lo diluyo de nuevo en caldo estéril. De este
tomo 1 ml y lo diluyo. De este tomo 1 ml y lo diluyo.
• Entonces el tubo esta diluido 10 veces con respecto al original, el otro está diluido
• 100 veces con respecto al original. El siguiente 1000 y así sucesivamente.
De cada uno tomo una alícuota que siembro en una placa por separado. Incubo todas las
placas después que se secaron y después veo que placa
realmente es la que tengo que contar.
La que presenta 0 colonias, no sirve porque si se multiplica
por el factor de dilución, va a demostrar que no hay células
vivas y eso es completamente falso. Se encuentra muy
diluida. Induce a error
La que presenta 2 colonias, es un número muy chico
La que presenta 17 colonias, es un número muy pequeño
La que presenta 159 colonias, puede ser una opción para
contar
Las otras dos, no sirven porque hay demasiadas colonias.
Se encuentran muy concentradas.
Se toma los 159 y se multiplica por el factor de dilución.
Sobre esa placa hago los cálculos y va a demostrar la
población del cultivo. Siempre se utiliza notación
científica. No se cuentan bacterias, se cuentan
COLONIAS que representa a una bacteria.
Estadísticamente debería elegir un que tenga más de 30. En términos prácticos, menos de
300. Más de 300 es muy difícil distinguir y separar una célula de la otra. En el recuento
total de células, se hace una dilución seriada y luego un plaqueo sobre un medio solido
Constanza Cornejo
Medición de crecimiento bacteriano
Medición espectrofotométrica
• Este es el método que se usa para hacer la curva de crecimiento de un cultivo
liquido
• Este método permite saber el grado de turbidez que tiene el cultivo.
• Mientras más bacterias hay en el cultivo, mas turbio se ve el cultivo.
• A diferencia de un cultivo que tiene pocas bacterias, se ve más transparente.
• El aparato consta de dos partes fundamentales: una fuente de luz, y un detector de
luz. La luz pasa a través de la muestra. El espectrofotómetro mide el traspaso de luz,
midiendo cuando haces de luz llegan al sensor. El tubo que tiene las partículas, el
haz de luz va a rebotar y no llegan al sensor.
• Este método no discrimina viabilidad. La unidad con la cual se mide es densidad
óptica (od). La od es una cantidad relativa, no es un número exacto. La maquina se
debe calibrar a una cierta longitud de onda.
• No es un método muy exacto y para cultivos muy densos o concentrados, llega un
momento en que la cantidad de células en el cultivo, bloquean tanta luz que si yo
aumento la cantidad de células al doble, no puedo ver una buena diferencia en
turbidez. En cultivos muy densos o muy diluidos el método no funciona mucho.
Ventajas
1. La técnica no distorsiona las muestras. Puedo tener un cultivo creciendo en tubos y
ese mismo tubo lo puedo meter para medir la turbidez. No tengo que abrir el tubo
para sacar la alícuota.
2. Generalmente las determinaciones son muy precisas.
3. Es un método fácil, rápido y barato. Lo de barato es un poco relativo porque el
aparato no es necesariamente barato; pero en base a la compra de este, se pueden
hacer más mediciones.
DESVENTAJAS
Constanza Cornejo
1. No discrimina entre células vivas y muertas. Si se quiere saber realmente cuantas
hay, se debe realizar el recuento seriado.
2. El crecimiento células es una estimación de la biomasa. El grado de turbidez,
dependiendo del tipo de microorganismo, representa distintas cantidades de células
por eso el aparato se debe calibrar.
3. Cuando la turbidez es muy alta se pierde precisión, se pierde exactitud. Se debe
evitar el conteo fotométrico en esta condición.
Tipos de cultivo
Cultivo de Batch o medio no renovado:
Batch: o de medio no renovado, es un cultivo
en tubos, cambios notables en el medio de
cultivo, sobretodo en estadios tardíos de
crecimiento.
Temperatura
Constanza Cornejo
• El transporte de nutrientes a través la membrana es tan lento que no puede haber
crecimiento de microorganismo. No hay transporte de desechos que pueden entrar
o salir de la célula. Por lo tanto, no hay crecimiento celular.
➢ Óptica
• Mejor temperatura para que el bicho crezca
• La membrana sigue estando bien, hay transporte de membrana.
• Las reacciones enzimáticas ocurren a su máxima velocidad.
➢ Máxima
• Temperatura demasiado alta para que el microorganismo crezca.
• Se desnaturalizan las proteínas, colapsa la MP (se ablanda tanto que se rompe).
• Lisis térmica (cel. se revienta de calor)
TIPOS DE BACTERIA:
1. Psicrofilos: temperatura optima baja ( <1 a 15)
2. Mesófilos: temperatura optima en rango medio (25 a 42)
3. Termófilos : temperatura optima alta ( 50 a 70)
4. Hipertermofilos: temperatura optima muy alta (80 a >100)
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Salinidad
Salinidad es como afecta la concentración sal en el medio a los microorganismos. La
salinidad del mar es de 3% de sal. La salinidad de la sangre es 0,85%. CATEGORIA:
• NO HALOFILOS: no toleran ni siquiera concentraciones moderadas de sal..
• HALOTOLERANTES: toleran concentraciones moderadas de sal (1% o un poquito
más).
• HALOFILOS: estos pueden ser de dos tipos:
Halofilos leves 1 a 6% de sal
Halofilos moderados 6 a 15% de sal
• HALOFITOS extremos : 15 a 30% de sal
Ejemplo: halobacterim salinarum, se encuentra en salar de norte de Chile.
ACIDEZ:
• Existen microorganismos que prefieren pH más ácidos, otros pH básicos y otros que
viven a pH neutro.
• Los microrganismos que viven a pH neutro son los que nos van a estar causando a
enfermedades (en la sangre tenemos pH 7,4 y en el citosol de la célula 7,2). Estos
son llamados NEUTROFILOS.
Los microorganismos se pueden clasificar como:
• ACIDOFILOS: pH de 0 a 6
• NEUTROFILOS: pH 7
• ALCALOFILOS: pH de 8 a 14
SALIVA TIENE PH 6,75-7,25
En ser humano, hay bacterias que son acidófilas, tales como la helicobacter pilori (pH de
estomago 1-2). Aunque normalmente se encuentran dentro de la neutralidad. .
Constanza Cornejo
Disponibilidad de oxigeno
´
Para
muchos microorganismos el oxigeno es esencial ya que sin el no pueden llevar a cabo su
metabolismo pero otros en cambio el oxigeno les causa la muerte . por lo cual se divide en
dos clasificaciones: anaeróbicos y aeorbicos.
AEROBIOS
1) AEROBIOS ESTRICTOS: requieren de oxigeno y su metabolismo es
aerobio. No pueden vivir sin oxigeno.
2) AEROBIOS FACULTATIVOS: no necesitan oxigeno pero si lo pueden
utilizar, funcionan mejor con oxigeno que sin él. El metabolismo que
tienen es la respiración y fermentación. No necesitan oxigeno porque
pueden hacer fermentación, pero en presencia de oxigeno respiran y esta
produce mucho más ATP que la fermentación. Aerobios facultativos crecen
en presencia y en ausencia de oxigeno. Pero crecen mejor en presencia de
oxigeno. Un ejemplo es la escherichia coli que puede realizar fermentación y
respiración.
3) AEROBIOS MICROAEROFILICOS: necesitan oxigeno pero tiene que
ser en poca cantidad. Su metabolismo es la respiración aeróbica. el único
problema es que no se nos pase la mano con el oxigeno, hasta 10%.
ANAEROBIOS:
1) ANAEROBIOS AEROTOLERANTES: no necesitan oxigeno pero pueden
vivir en presencia de oxigeno (no mejoran ni empeoran en presencia de
oxigeno). Pueden llevar a cabo solo la fermentación. El oxigeno no los
daña, pero no les permite obtener energía, crecen igual que si no tuvieran
oxigeno.
Constanza Cornejo
2) ANAEROBIO ESTRICTOS: el oxigeno les resulta dañino o letal. Se
mueren en presencia de oxigeno. Su metabolismo es a través de
fermentación y respiración anaeróbica (molécula distinta de oxigeno).
EXPERIMENTACION: se coloco in
indicador que ve la presencia de
oxigeno, colocándose rojo cuando se
encuentra presente (solo en
superficie). En la superficie se
encuentra el oxigeno pero a medida
que se desciende, baja la cantidad de
oxigeno en el tubo de ensayo. Es un
medio de cultivo semi- solido. Tiene
un compuesto químico que se llama
tioglicolato, que reacciona
químicamente con el oxigeno y lo
transforma en agua (lo reduce).
Entonces dentro del medio de cultivo hay muy poco oxigeno. Tiene resazurina que
reacciona con el oxigeno y cambia de color, se pone rosado. Donde esta rosado el medio de
cultivo, hay oxigeno (las tapas no son herméticas, por eso entra aire libremente).
Resumen
• Aeróbicos crecen en la parte rosada, e inmediatamente bajo el rosado donde aún
queda un poco de oxigeno. Y no crecen en el fondo de oxigeno, porque ahí no hay
oxigeno, y estos necesitan oxigeno.
• Anaerobios (se refiere a los estrictos) crecen el fondo del tubo solamente, no pueden
crecer en la parte rosada porque ahí hay oxigeno.
• Facultativos crecen mejor donde esta rosado, porque ahí hay oxigeno (porque les da
mayor energía) pero pueden crecer en todas partes, en el tubo al fondo también se
ven pero en menor cantidad.
• Microaerofilicos necesitan oxigeno, pero no puede ser mucho. Por eso crecen bajo
el rosado, donde aún queda un poco de oxigeno.
• Anaerobio aerotolerantes les da exactamente lo mismo, por eso crecen por parejo en
todo el tubo.
Respiración aérobica genera formas toxicas de oxigeno, radical superoxido, agua
oxigenada, radical hidroxilo y agua (de uwu), los radicales reaccionan oxidando diversas
macromoléculas organicas (destruyendo la células), deben haber enzimas (catalaza,
perxidasa, superoxido dismunutasa) capaces de degradar los derivados tóxicos de O2
Constanza Cornejo
ANAEROBIOSIS
Como se puede cultivar un microorganismo anaerobio. Se debe tomar una muestra, se
siembra y se coloca en jarra, donde se tiene un sistema hermético y un sistema que agota la
cantidad de oxigeno.
Necesitamos:
• Un recipiente hermético que podamos cerrar de manera que no entre aire.
• Un anillo de goma para apretar la tapa del recipiente hermético, para que no
circulen gases ni hacia adentro ni hacia afuera
• Generador de anaerobiosis, reacciona con el agua lo que contiene el sobre y con una
pipeta se le echa agua, generándose dos gases; co2 e hidrogeno.
• Hay un catalizador de paladio (metal), el que cataliza la reacción de hidrogeno mas
oxigeno para formar agua. Esa es la manera mediante la cual nos deshacemos del
oxigeno que hay en el recipiente.
• Hay un indicador de la presencia de anaerobiosis, papeles que están embebidos en
azul de metileno (uno los moja y están azules, a medida que se va acabando el
oxigeno se van poniendo blanco).
Constanza Cornejo
Requisitos de los Medios de cultivo y condiciones de cultivo
En los medios de cultivos, existen requisitos y condiciones:
• ESTERILIDAD: los medios de cultivo deben ser estéril.
• TENER NUTRIENTES ESENCIALES: tiene que tener los nutrientes esenciales
para que crezca la bacteria, esto depende de la bacteria.
• REQUERIMIENTOS FISICOS: pH, presencia de CO2 (capnofilicos), temperatura,
etc.
• ESTAR PROTEGIDOS DEL MEDIO AMBIENTE: se encuentran tapados, tubo de
ensayo y placa petri presentan tapa para proteger del medio ambiente y evitar que se
contamine.
ESTERILIZACION
AUTOCLAVE: La autoclave es una maquina que tiene una alta temperatura y
que también arroja vapor. Es una esterilización por vapor húmedo.
Normalmente la autoclave se lleva a una temperatura de 120°C. Dejándose 15 a 20
minutos, eso es suficiente para lo que se esté esterilizando. La autoclave puede
tener diferentes tamaños. Se logra esterilizar el medio de cultivo, se eliminan
todas las células vivas, los virus viables, las esporas viables. Se autoclave
instrumental, vidrio. NO plásticos.
ESTERILIZACION POR FILTRACIÓN. Hay una trampa de vacío, hace que
absorba liquido (liquido denso no cae) y eso pasa por un sistema de membrana. En
la membrana, tiene un tamaño de poro (0,22-0,45 um). Por lo tanto, queda retenida
en la membrana la bacteria y pasa el líquido para que finalmente quede estéril. Si se
quiere esterilizar un liquido, no se puede hacer a altas temperaturas (como
esterilizar una solución de proteínas) El filtro es un material poroso, que tiene
poros tan pequeños que no dejan pasar células. Es por eso que el líquido que se
filtra no deja pasar células. El recipiente en donde se está recolectando, debe estar
estéril. Se puede filtrar medio líquido, NO medio solido.
RADIACION: Los materiales plásticos para esterilizar se irradian. Otra forma
de esterilizar es por radiación ultravioleta. Sirve para esterilizar superficie
solamente porque la luz UV es muy poco penetrante. Se puede utilizar los rayos
gamma y los X también. Los más penetrantes son los rayos gamma. El efecto que
tiene la luz UV para matar a los microorganismos es alterando el ADN, generando
la formación de los dímeros de timina. Se utiliza radiación para esterilizar
materiales desechables de laboratorio (ej; jeringas).
Constanza Cornejo
Clase 4: Micología
Ciencia que estudia el reino de los hongos o reino fungí.
Características generales del reino hongo:
• Son eucariontes
• Posee paredes rígidas formada por quirina(polisacárido)
• Obtienen sus nutrientes por absorción, son quimioheterootrofos, lo que hacen es
secretar enzimas al exterior , estas hacen degradación y los productos más
simples son los absorbidos
• Presentan reproducción sexual, asexual o ambas.
• Se presentan en una amplia variedad de hábitat, encontrándose en el marino,
agua dulce y terrestre.
• Crece principalmente en material orgánico en descomposición, participan en el
reciclaje de nutrientes básicos y esa es su gran función en el planeta.
• Hay muchos hongos beneficiosos, hay 8000 hongos perjudiciales (en impacto
agrícola y forestal) y de esos App 400 que causan enfermedades en animales
incluyendo al ser humano.
• Son principalmente parásitos vegetales (generando impacto agrícola, forestal y
económico)
• Algunos integrantes del reino de los hongos se reproducen en formas asexuales,
sexuales o ambas. Diferencia con la bacteria que es solamente asexual.
• Su principal función es descomponer sustratos, participan en la descomposición
de materia orgánica muera y por esto, se les considera saprofitos (que es esa
vaina es un organismo heterótrofo que obtiene su energía de materia orgánica
muerta o de los detritos desechados por otros seres vivos, de los cuales extrae los
compuestos orgánicos que requiere como nutrientes). Reciclan los nutrientes
básicos en la naturaleza y para su propia nutrición.
Hongos beneficiosos:
Elevada calidad nutritiva: rico en proteínas y vitaminas, teniendo escaso
cantidad de carbohidratos, lípidos y azucares.
Existe una gran variedad de hongos comestibles algunos se consumían en la antigua
roma. No todos se pueden cultivar de forma artificial, pero el champiñón común de
supermercado sí.
Hay hongos microscópicos que colaboran en la formación de diversos alimentos
como el queso , yoguth , cerveza y pan
Otros colaboran en la industria farmacéutica en la producción de antibioticos
como la penicilina y las cefaloporinas.
En las ciencias básicas son el modelo para el estudio de procesos moleculares en
eucariontes unicelulares. Además sirven como modelo de estudio genético,
fundamentalmente en procesos de recombinación. Son bastante eficientes en
traspasar, recombinar material genético entre distintas especies
Constanza Cornejo
Tienen uso de biocontroladores controlando plagas de insectos.
Control biológico "uso de un microorganismo para matar o controlar a otro".
Hay hongos que matan a otros hongos, se utiliza para controlar. Se utiliza
normalmente en la agricultura.
Hongos dañinos:
× Hongos patógenos que dañan vegetales que consumimos los humanos
× Algunos hongos producen toxinas (micotoxinas) las cuales conllevan a una
enfermedad en humanos y animales
× Hongos llegan a causar daño gracias a su capacidad de colonizar e infectar a un
hospedero de tipo animal
× Toxigenicos (micotoxicosis)
1. LSD: se descubrió en selva amazónica
2. Otras sustancias neurotoxicas
3. Daño hepático y renal
Hongos venenosos (micetismos). Algunas especies de hongos son tóxicas y dan orígenes a
enfermedades en el ser humano, por intoxicación. Fundamentalmente por la ingestión de
elementos contaminados por hongos que producen toxinas o ya sea por la ingestión de los
hongos que producen toxinas. El consumo directamente de hongos (setas, callampas
venenosas) da origen a un tipo de intoxicación que se llama micetismos.
Clasificación de los hongos:
Microscópicos
• Unicelulares
• Pluricelulares
Macroscópicos
Constanza Cornejo
Crecimiento de los hongos
• la mayoría de los hongos son moderadamente acidófilos y crecen en ph 5,6 y 6,8 .
• Hongos unicelulares → anaeróbicos facultativos
• Hongos pluricelulares→ anaeróbicos estrictos.
Revisar pág. 35
Crecimiento con respecto de la temperatura se vuelven 3 categorías:
1. Psicrófilos : rango de crecimiento de 0 a 20 grados(se puede desarrollar
bien))
Temperatura optima es de 15 a 17 grados (donde crece rápido y bien)
2. Mesófilos: rango de crecimiento 0 a 50 grados
Temperatura optima 15 y 40 grados
3. Termófilos: rango crecimiento 20 a 50 grados
Características estructurales
Los hongos son organismos eucariontes por lo que tienen núcleo organizado ,
sistema de endomembrana y vesículas
Un componente importante de la membrana plasmática es el ergosterol que
cumple la funcion del colesterol en las membranas animales.
Posee pared celular compuesta por quirina principalmente y tiene otros tipos de
azucares, proteínas. muchos hongos tiene quirina, la quirina está en muchos lados
de la naturaleza como la caparazón de los moluscos y el exoesqueleto de los
insectos.
Son unidades morfológicas y de crecimiento en hifas (estructura tubular alargada
,filamentoso y plurocelulatres ) y las levaduras que son hongos unicelulares (pero
algunas levaduras presentas pseudohinfas)
Existen hongos di mórficos y estos son los que producen enfermedades la
mayoría de veces. se llaman dimorficos porque tienen dos formas, uno cuando
están en el interior del hospedero y otra cuando están en el exterior. En el
exterior tienen forma filamentosa y en el interior tienen forma de levadura , lo hacen
porque así pueden esparcirse de mayor rapidez dentro de nosotros
Constanza Cornejo
Hongo muestra su hifa con su núcleo, compuesto de varias células (pluricelular) pero tienen
todos los componentes de una célula eucarionte (rel, mitocondrias membrana etc.) y se
compara con una levadura y se ve que esta yemando
Hongo con hifa
Pared celular
FUNCIONES DE LA PARED CELULAR:
Dar protección contra la presión osmótica
Mantener la forma de la célula
Protección mecánica
La pared celular le da la forma al hongo y la clasificación de los hongos tiene que ver
por la forma.
Desde el punto de vista de la investigación, se puede utilizar la composición de la
pared como parte proceso de identificación y clasificación de los del los hongos.
Desde el punto de vista de la fisiología de los hongos, la pared es la interfase entre
el hongo y el medio ambiente, protegiendo a la célula de la lisis osmótica y de
otros factores adversos ambientales.
Protege a la célula de la lisis osmótica y de factores ambientales adversos.
Es un sitio de unión a enzimas, tanto enzimas que catalizan procesos que están
afuera como adentro.
Tiene características antigénicas, en el caso de que el hongo interactúe con algún
hospedero. en su clasificación taxonómica. Básicamente el cuerpo humano cuando
Constanza Cornejo
entra un hogo al cuerpo el SI es capaz de reconocerlo como extraño y crea
anticuerpos contra la pared celular , estos antígenos detectan al sistema inmune
Tiene algunas de las estructuras que están presentes en el hongo; adhesina, o sea
participan en la interacción especifica con otras células, permitiendo la
adherencia del hongo con otras células. Algunos componentes funciona como
adhesinas en la colonización de hospederos, está en la interacción con el Medio
ambiente o hospedero porque es lo mas exterior del hongo. Da adhesión y se llaman
adhesinas
Determina la forma en levaduras y en hongos filamentosos con hifas
La pared celular puede estar constituida de distintos tipos de azucares (principalmente) y
de proteínas. Muchos hongos tienen quitina (azucares, es un polisacárido estructural).
También esta compuestos por otros azucares que son los glucanos, hay distintos tipos de
glucanos dependiendo del enlace
(glucano beta 1-6 glucanos, glucano beta 1-3).
En la parte más externa, hay mano- proteínas que son proteínas glicosiladas con residuos
de manosa (isómero de glucosa).
Constanza Cornejo
Membrana plasmática
Es una bicapa lipidia de modelo mosaico fluido.
Parecida a la de las bacterias salvo por el hecho de presentar este esterol específico
(ergoesterol).
Tiene funciones típicas de las membranas: transporte de soluto, permeabilidad
selectiva, comunicación.
Es el sitio blanco de la mayoría de los anti fúngicos. Como eso es algo especifico
de los hongos, es un buen blanco potencial para desarrollar medicamentos que
traten de atacar a las células fúngicas.
Todo los esteroles se sintetizan por una ruta que parte en un tronco común y
después se separa para los esteroles vegetales, animales y de los hongos.
CAPSULA: ALGUNOS
• Algunos hongos por fuera de la pared tienen capsula, parecido a lo que ocurre con
las bacterias. Normalmente la capsula esta en los hongos unicelulares (levaduras).
• Es una capsula de polisacáridos que va a proteger a la célula, contra algunos
elementos de la respuesta inmune, acción de anticuerpos, del complemento,
acción de células fagocíticas. La capsula resiste la acción de sistema inmune, evade
el sistema inmune.
• La capsula se puede visualizar. no todos los hongos tienen capsula , los que lo
tienen tiene mayor evasión a los antifúngicos y mayor resistencia a ellos
Levaduras
• Son unicelulares
• Tienen tamaño relativamente regular, ovoide. Su diámetro 1-5 um de ancho y 5-30
um de largo. (son como 10 veces más grande que una bacteria).
• Tienen las características típicas de las células eucariontes, en relación los
organelos.
• Se encuentran distribuidas en distintos ambientes, suelo, ambiente acuoso,
colonizando animales.
• Son anaerobios facultativos (puede vivir con y sin O2), eso lo diferencia de los
mohos que son aerobios estrictos. Las levaduras pueden vivir en presencia de
oxigeno y sin la presencia de oxigeno. DIFERENCIA CON LOS MOHOS. Produce
vinos
• Forman colonias similares a las de las bacterias. Tienen textura cremosa o pastosa.
• Se identifican por su tamaño y forma celular, la formación de pseudohifas (se
reproduce y hace una yema y la cell. Hija queda junya y se continua reproduciendo
haciendo un filamento) o hifas verdaderas, presencia de capsula y características
fisiológicas y moleculares.
Constanza Cornejo
Se pueden clasificar en dos familias:
1) Ascomycota
2) Basidiomycota
Se puede crear pseudohifas las culas son levaduras creciendo en cadenas donde cada célula
es una célula individual.
Hongos filamentosos
Los hongos filamentosos se encuentran formados por hifas, que son células
alargadas y unidas.
Son pluricelulares, organismos multinucleados, que se reproducen por medio
de esporas, móviles o inmóviles, sexuales o asexuales.
Las hifas pueden presentar septos que las dividan o no. Si los presentan se
denominan hifas septadas o tabicadas si no los presentan se llaman hifas
cenocíticas o no septadas.
Un conjunto de hifas forma una estructura visible denominada micelio, éste se
divide en micelio vegetativo, el cual se encarga de nutrir al hongo (mediante
absorción de nutrientes, por ejemplo) y micelio reproductor en el cual se encuentran
las esporas
Hongos filamentosos moho
• Son hongos pluricelulares, multinucleados (son un montón de células fusionadas
unas con otras, por lo que da una impresión de célula alargada con varios núcleos en
su interior)
• Son aerobicos obligados
• Desde el punto de vista macroscópica, las colonias pueden tener textura algodonosa,
peluda, aterciopelada, etc.
• Las colonias suelen tener forma circular. Cuando estos hongos llegan al ser humano
también crecen en forma circular.
• Se producen hifas entonces, son filamentos largos tubulares recubiertos por pared
celular con ramificaciones. El conjunto de hifa se denomina micelio.
Constanza Cornejo
Hay 3 tipos de micelio:
1. Vegetativo: orientación paralela a la
superficie donde está creciendo el hongo
y tiene una función de nutrición del
hongo. Toma los nutrientes.
2. Aéreo: se encuentra en orientación
vertical. Creciendo hacia el aire, en el
entendido de que el micelio vegetativo
estaba sobre una superficie horizontal,
entonces el aéreo va perpendicular al
micelio vegetativo, creciendo hacia el
aire.
3. Reproductivo: se encuentra en un extremo del micelio aéreo, y es donde se forman
las estructuras reproductivas que se mencionan como propágulos de
dispersión, estructuras que se pueden dispersar a partir de la colonia del hongo
para propagarlo. Se encuentran las esporas (es la que da el color).
La gran mayoría de los hongos filamentosos se pueden identificar por su morfología
macroscópica (incluye aspecto a la vista, el color de la colonia) y microscópica (incluye
cosas particulares de las hifas, la distribución de las estructuras reproductivas en el extremo
del micelio aéreo).
El 95% de los hongos filamentosos se identifican por la morfología. En el caso de los
hongos unicelulares, su morfología es muy similar por lo tanto, es más complicado
El crecimiento de un hongo filamentoso es desde una espora la cual va creciendo y
yemandose de hifas que van creciendo de la misma espora y se crea un micelio
Constanza Cornejo
Hifas verdaderas→ septadas y aseptadas
Tenemos 2 tipos generales de hifas (sirve como clasificación):
1. Septadas o tabicadas; Tienen septos o tabiques. Puede haber varias células entre
medio. Presentan poros la mayoría de las veces, hay una continuidad del citosol a lo
largo de la estructura. En muy pocos casos existen septos sin comunicación (sin poros).
Constanza Cornejo
Hongos filamentosos heterotróficos por absorción:
• Los hongos son heterotróficos por absorción, quiere decir que obtienen carbono
a partir de fuentes orgánicas (moléculas grandes). A partir del extremo de la
hifa del micelio vegetativo, se liberan enzimas hidrolíticas hacia el sustrato. Las
enzimas hidrolíticas van a actuar sobre esta materia orgánica, rompiéndola y
separándola en moléculas más
pequeñas.
• Las enzimas degradan los
sustratos y estos productos de
degradación es absorbido por la
hifa. Digieren lo que está afuera
estas enzimas y una vez que van
quedando pedazos más chicos,
estos son absorbidos por el hongo, así es como adquiere nutrientes.
• Así es como a la mayoría de los hongos uno los encuentra participando en la
descomposición de la materia orgánica.
• La absorción lo hace las levaduras, hongos filamentosos y los hongos con sombrero
(estos también son hongos filamentosos).
Reproducción de hongos
Tanto levaduras como hongos filamentosos se pueden reproducir en forma sexual o en
forma asexual.
Modalidades reproductivas:
• solamente en forma sexual se denomina TELOMORFOS
• se reproduce en forma sexual y asexual se denomina HOLOMORFO
• solamente en forma asexual se denomina ANAFORMO
Talo fungico
Cuando el hongo tenga dos sexos en el mismo micelio se habla de
HOMOTALICO.
Cuando el hongo tiene solo un tipo sexual por micelio se denomina
HETEROTALICOS.
No se distingue macho ni hembra, se habla de dos tipos x.
Constanza Cornejo
Reproducción asexual:
Fisión binaria: bipartición es una manera de reproducción asexual que se lleva a
cabo en arqueas y bacterias. Consiste en la duplicación del ADN, seguida de la
división del citoplasma (citocinesis), dando lugar a dos células hijas
Gemación: En el caso de seres unicelulares, se forma un abultamiento que se
denomina yema en cierta porción de la membrana plasmática. El núcleo de la
célula progenitora se divide y uno de los núcleos hijos pasa a la yema. Bajo
condiciones favorables, la yema puede producir a la vez otra yema antes de que se
separe finalmente de la célula progenitora. Una celula grande da origen a una
celula más pequeña. Es un proceso mitotico.
Conidioesporas: Un conidio es una espora asexual inmóvil formada
directamente a partir de una hifa o célula conidiógena o esporógena. Aparecen
en hongos: Zygomycetes, Ascomycetes y algunos Basidiomycetes
Esporangioesporas: esporas producidas en esporangios, los esporangios son estructuras
sacciformes cuyo contenido se convierte en su totalidad por segmentación en una o más
esporas que están rodeadas por una pared esporal. Pueden ser de dos tipos:
1. Zoósporas: móviles, uniflageladas o biflageladas, con flagelos lisos o barbulados (con
mastigonemas).
2. Aplanósporas: inmóviles.
Reproducción sexual:
Se forma una hifa que madura por medio de la gemación y se unta con otras pasa
por plasmogamia , pasa por un proceso de cariogamia donde ocurre miosis y se
arma un saco formado por varias esporas que repiten el ciclo
Ascomycotas:
• Producen estructuras llamadas ascocarpo
Basidiomycotas:
• Producen estructuras llamadas basidium
SUBDIVISIONES DE INTERES
Constanza Cornejo
Chitridiomycota: Hongos unicelulares o bien formando un pseudomicelio rizoidal;
células móviles por un flagelo o poli flagelados. Reproducción sexual por fusión de
gametos móviles, reproducción asexual por mitosis en un esporangio. Saprofitos o
patógenos de plantas. Ejemplos: Allomyces, Rhyzophydium.
Zygomycotas: Hongos con reproducción asexual que se desarrolla por
segmentación citoplasmática dentro del esporangio. La reproducción sexual se
genera por esporas denominada zigosporas, las cuales se forman por la fusión de
órganos sexuales (gametangia). Sus hifas generalmente no presentan septos y si los
tienen se localizan irregularmente, abarcando grandes intervalos de la hifa.
Ejemplos: Mucor, Rhizopus.
Ascomycotas: Su reproducción asexual es por conidios; reproducción sexual por
fusión de hifas, a veces por la fusión de una espora con una hifa receptiva. Se
caracterizan por el desarrollo de esporas sexuales (ascasporas) dentro de un saco
llamado asco. Las esporas asexuales se desarrollan a partir de células especializadas
célula conidiógena.
Ejemplos: Aspergillus, Candida.
Basidiomycotas: Su principal característica es formar esporas sexuales llamadas
basidiósporas, en estructuras especializadas, denominadas basidios, estos se
encuentran en cuerpos fructíferos macroscópicos conocidos vulgarmente como
setas. De importancia comercial debido a que algunas son comestibles y forman
micorrizas en conjunto con las plantas que interfieren en la fijación del nitrógeno en
el suelo, otras son sumamente venenosas para el hombre y otras parasitas de plantas.
Ejemplos: Amanita, Agaricales.
Clasificación nutricional
• Saprobios: Pueden descomponer residuos orgánicos para alimentarse. Este es el
caso de los hongos comúnmente hallados sobre troncos muertos, como los
"Pleurotos" u hongo ostra, e incluso el más conocido "Champiñón".
• Parásitos: Extraen las sustancias orgánicas que necesitan desde un hospedero al
que debilitan y eventualmente matan.
• Simbióticos: Extraen las sustancias orgánicas de un hospedador, pero que en
contrapartida le procuran cierto número de ventajas. Ejemplos de este tipo son
los líquenes y micorrizas.
Obtención de nutrientes:
Los Hongos son quimioheterotrofos. Obtienen carbono desde material orgánico no vivo
cuando son saprófitos, o desde tejidos vivos de animales y plantas cuando son simbiontes;
en este caso los hongos pueden clasificarse bajo tres modos nutricionales clínicos:
Constanza Cornejo
Hongos saprotróficos: Aquellos que utilizan compuestos orgánicos de organismos
no vertebrados muertos. Estos pueden tener relevancia clínica cuando son
introducidos dentro de un organismo vivo por inhalación o inoculación traumática.
Hongos zootróficos: Son aquellos que crecen en los tejidos de organismos vivos,
estos se consideran patógenos primarios.
Hongos necrotróficos: Aquellos que utilizan compuestos orgánicos producidos
por animales vertebrados. Estos hongos se pueden encontrar en animales vivos o
muertos o en los productos de estos; de acuerdo con su fuente nutricional se
clasifican como queratinofílicos, lipofílicos, osmofílicos, simbiontes endógenos y uro
y coprofílicos.
Hay tipos:
a. Queratinofílicos: utilizan la queratina como fuente de nutriente. Ejemplo
Trichophyton y Microsporum.
b. Lipofílicos: Utilizan algunos lípidos como fuente de nutriente, pueden ser
encontrados en regiones seborreicas del cuerpo como Malasseiza o formar
microcolonias compactas en el cabello como Piedraia y Trichosporon.
c. Osmofílicos: Aquellos encontrados en ambientes con bajo contenido de
agua, ejemplo Aspergillus en el oído externo.
d. Simbiontes endógenos: Hongos que habitan normalmente el cuerpo y bajo
ciertas condiciones se pueden transformar en patógenos, ejemplo Candida
albicans, el cual es un hongo dimórfico, mostrando un estado de levadura en
la fase saprotrófica y un estado pseudomicelial en estado patógeno.
e. Uro y coprofílicos: Hongos que pueden utilizar urea, ácido úrico y creatina.
Por ejemplo especies de Trichosporon que coloniza cabello y zona púbica.
Constanza Cornejo
Clase 5: Virus
Son los más pequeños entre hongos, bacterias y virus. Solo se pueden observar por
microscopio electrónico. Los virus eran capaces de quedar retenidos en un filtro de
porcelana. Pero sin embargo antes de entender que eran virus solo se comprendía que lo
que estuviera pegado en el filtro era el causante de múltiples enfermedades.
La palabra virus viene del veneno ya que en la antigüedad se creía que la enfermedad era
causada por exposición a un veneno y que al distribuirse por el cuerpo creaba todo los
efectos patológicos. A partir de ese momento se uso el término virus para referirse a lo que
se quedaba atrapado en el filtro de porcelana.
Virus: elemento genético (de DNA o RNA) que se puede replicar solamente dentro de
una célula viva. Son muy específicos ya que no infectan toda clase de tejido, si no que
solo los que ellos necesitan infectar. Un virus tiene una forma extracelular llamada
virión, el cual contiene un genoma y permite transportarse entre células. El virus no
puede replicarse a menos que el virión (o el genoma) pueda haber entrado a una célula
apropiada (una célula hospedera o una célula en blanco) y este proceso se le cataloga
infección. Cuando un virus infecta la célula toma el control absoluto de esta
Características:
Por estas 3 características se
• No tienen actividad metabólica fuera de su célula hospedera
le cataloga como parásitos
• No poseen un aparato de síntesis proteica
intracelulares obligados
• No poseen sistemas para generar ATP.
• Son los agentes infecciosos más pequeños que se conocen
• Tamaño varía entre 20 y 300nm por esto no se ven en microscopio de luz y se
necesita microscopio electrónico
Constanza Cornejo
Características del virus
Constanza Cornejo
Clasificación según hospedero:
Simetrías
SIMETRIA ICOSAEDRICA: Presenta una nucleocapside esférica con geometría de
poliedro regular de 20 caras triangulares (30 aristas y 12 vértices). Pueden ser virus
desnudos o tener envoltura. Autocatalitico, las proteínas x sí solas se reconocen y se van
armando, toma ATP de la célula que infecta
Constanza Cornejo
Ejemplo:
• adenovirus (icosaedrico desnudo)
• virus herpes simplex (icosaedrico con envoltura)
SIMETRIA HELICOIDAL: La nucleocapside a primera vista se
aprecia cilíndrica pero en realidad es una hélice, un espiral.
Puede estar extendida y desnuda o enrollada sobre sí misma y con
envoltura.
En este ejemplo los constituyentes de la cápside; los capsomeros, son
proteínas que van como enlazados a lo largo del genoma del virus,
que es una molécula de ARN de hebra simple.
Es una estructura muy básica. El ensamblaje de la cápside es
autocatalitico.
Ejemplo:
• virus del mosaico del tabaco
Constanza Cornejo
• Cuando existe el manto, este proviene de le membrana de la célula del
hospedero (de la célula donde se replico el virus). El manto se sintetiza a partir de
la membrana plasmática de célula hospedera. No hay proteínas virales que
sinteticen el manto.
• El manto tiene sitios de unión para los receptores celulares, o sea, en el caso de
estos virus, los sitios que le van a servir al virus para reconocer a la célula que va
a infectar están en el manto y no en la capside.
• En el caso de los virus donde no hay membrana, los receptores para reconocerse con
las células que va a infectar están en la capside.
• Solamente en el caso de los virus con manto se justifica el termino nucleocapside y
se refiere al material genético rodeado por la capside.
• Los virus sin manto se reproducen por lisis
• Los virus con manto se reproducen por gemación
• El virus sin manto es estable a la temperatura, resiste ácidos y la acción de
proteasas, resiste la acción de detergentes y la desecación, o sea uno puede secar el
virus y no pierde su viabilidad.
• Los virus con envoltura son sensibles o lábiles, a una temperatura muy alta a
membrana colapsa, son sensibles a la acción de ácidos, proteasas, detergentes.
• El virus con manto cuando pierde el manto, pierde la viabilidad, pierde la
capacidad de infectar, por que los receptores que permiten reconocer a la célula que
van a infectar se encuentran en el manto.
• Los virus sin manto, se liberan desde la célula que infectaron por lisis, la
destruyen al liberarse. En cambio, los virus con manto se pueden liberar por
gemación, exocitosis o por lisis, depende del virus.
• Los virus sin manto se propagan más fácilmente y sobreviven bien, porque no
están vivos, se mantienen viables o con capaces de infectar aun estando en
condiciones adversas.
Constanza Cornejo
No es tan fácil contagiarse ya
que el mismo virus no resiste
al exterior. Por ejemplo el
VIH tiene envoltura por lo
que no resiste las
condiciones externas como
las presentes aquí. Por lo
que no es un virus que anda
“en el aire” y solo queda de
trasmisión sexual o
sanguínea porque ahí no sale
de su “ambiente ideal”
Virus ADN
Material genético es ADN
Desnudo Envuelto
Simple hebra
Doble hebra
Virus ARN
Material genético es ARN Desnudo Envuelto
Todos son de
Simple hebra
Constanza Cornejo
Simple hebra
Doble hebra
Genoma viral
Parte de la replicación de la partícula viral dentro de la célula que infecta,
implica que se expresen las proteínas que están codificadas en el material
genético del virus.
Para lograr la expresión de las proteínas virales del virus, se necesita que a partir
del material genético el virus aparezca un ARN mensajero.
Se clasifican por la polaridad de la molécula y si es de una o dos hebras.
Clases:
CLASE I y VII: Un virus de DNA de cadena positiva de doble hebra. Induce a la
formación de un mRNA. Se debe tener promotores que son reconocidos por la RNA
polimera y esta fabrica el ARNm.
CLASE IV: Un virus RNA de cadena simple de cadena positiva. Ingresa
directamente al sitio de reproducción. El material genético del virus es un mensajero,
este infecta, se libera el material genético dentro de la célula infectada y se puede
fabricar proteínas altiro porque en este caso, el material genético es un ARN
mensajero.
CLASE II: Un virus de DNA de hebra simple, se copia esta cadena a la hebra
complementaria. A partir de la síntesis de la cadena madre, se sintetiza un DNA de
cadena doble y de esta cadena, se copia solo una. Esta cadena va a dar origen a un
RNA mensajero.
CLASE VI: Un virus de RNA de hebra simple de sentido positivo, Hacer una
transcripción reversa, es decir, pasar de RNA a ADN incorporándose a la célula y de
ADN a RNA mensajero. Esto lo hace la transcriptasa reversa.
CLASE V: Un virus de RNA de hebra simple de sentido negativo, x transcripción
debe hacer la hebra complementaria. El proceso es mucho más complejo. Este virus
no es detectable por lo ribosomas por ningún tipo celular (ni de eucariontes ni de
procariontes).
CLASE III: Un virus de RNA de doble hebra de sentido positivo. Tiene dos
cadenas pero se copia una sola para dar origen a un RNA mensajero, la de sentido -.
Constanza Cornejo
TODOS convergen en una molécula común que es el RNA mensajero. Este ingresa a los
ribosomas para dar la lectura de síntesis de cada uno de los aminoácidos.
Resumen
Ciclo replicativo
viral
Etapas
1) Reconocimiento de la célula blanco
2) Unión o adsorción
3) Entrada o penetración
Constanza Cornejo
4) Pérdida de la envoltura o desnudamiento
5) Síntesis macromolecular (multiplicación)
I. Síntesis temprana de ARNmy proteínas no estructurales (enzimas y
proteínas de unión al ácido nucleícos). Sintetiza proteínas sin info
estructural
II. Replicación del genoma
III. Síntesis tardía de mRNA y proteínas estructurales
IV. Modificación post-traduccional de proteínas
6) Ensamblaje del virus (maduración)
7) Liberación del virus
a.- Lisis celular (virus desnudos)
b.- Exocitosis o lisis celular (virus con envoltura)
Reconocimiento de cell blanco
Los virus tienen rangos estrictos y restringidos de cuáles serán sus hospederos y sus tejidos.
Esto significa que cada virus tiene la capacidad de infectar solo algunos organismos
biológicos y en estos organismos biológicos solo algunos tejidos específicos .Esto se le
llama tropismo celular
Tropismo celular: Es la afinidad biológica de un virus por un tejido en un hospedero
particular. El cual está determinado por la presencia de receptores específicos que el virus
usa para reconocer y así adherirse y entrar a la célula.
Unión o absorción a célula blanco
Virus interactúa con la célula. La unión o adsorción se realiza entre altos superficiales del
virus y receptores de la membrana de las células. Es la interacción física entre proteínas del
virus y el receptor. Se da entre proteínas del virus que están en la superficie del virus y
los receptores de la célula blanco que están en la superficie también.
• En el caso de los virus con manto; los sitios superficiales del virus están en el
manto.
• En el caso de los virus desnudos; están en la cápside.
Constanza Cornejo
3. En algunos casos el manto, compuesto de lípidos y proteínas, se fusiona a la membrana
celular la nucleocápside se libera en el citoplasma.
4. La cápside se remueve enzimáticamente y el material genético es liberado.
5. El virus es liberado por gemación o Exocitosis .
Constanza Cornejo