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Uvvis

La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución midiendo la cantidad de luz absorbida a diferentes longitudes de onda. En esta práctica, se explican los conceptos básicos de la espectrofotometría y el funcionamiento del espectrofotómetro. Luego, se realizan espectros de absorción para determinar la longitud de onda de máxima absorción de las muestras y rectas de calibrado para cuantificar las concentraciones de diferentes biomol

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La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución midiendo la cantidad de luz absorbida a diferentes longitudes de onda. En esta práctica, se explican los conceptos básicos de la espectrofotometría y el funcionamiento del espectrofotómetro. Luego, se realizan espectros de absorción para determinar la longitud de onda de máxima absorción de las muestras y rectas de calibrado para cuantificar las concentraciones de diferentes biomol

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Espectrofometría: Espectros de absorción y

cuantificación colorimétrica de biomoléculas

Nieves Abril Díaz1

, J. Antonio Bárcena Ruiz1

Emilio Fernández Reyes1

, Aurora Galván Cejudo1

Jesús Jorrín Novo1

, José Peinado Peinado1

Fermín Toribio Meléndez-Valdés1

, Isaac Túnez Fiñana2

Departamento de Bioquímica y Biología Molecular,

Campus Universitario de Rabanales, Edificio Severo Ochoa, 14071-Córdoba,

Facultad de Medicina, Avda. Menéndez Pidal s/n, 14004-Córdoba.

RESUMEN

La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite

determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa en

que las moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas y a su vez

que la cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la

concentración. Para hacer este tipo de medidas se emplea un

espectrofotómetro, en el que se puede seleccionar la longitud de onda de

la luz que pasa por una solución y medir la cantidad de luz absorbida por

la misma.
En esta práctica se darán a conocer las características generales y

conceptos relacionados con la espectrofotometría. A continuación y tras

la explicación del funcionamiento del espectrofotómetro se harán

espectros de absorción con el fin de determinar la longitud de onda

donde la muestra presenta la máxima absorción, y tras realizar las

correspondientes rectas de calibrado se cuantificarán las

concentraciones de distintas biomoléculas.

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