UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES OBJETIVOS

FACULTAD DE MEDICINA
•Reconocer las características biológicas de los Apicomplexa.

•Estudiar su proceso de invasión y establecimiento en la célula huésped.

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA, PARASITOLOGÍA
E INMUNOLOGÍA - CÁTEDRA I •Conocer el ciclo de vida, la epidemiología e importancia clínica de los
Apicomplexa: Crypstosporidium spp. Cystosisospora belli, Cyclospora
cayetanensis, Toxoplasma gondii y Plasmodium spp.
SEMINARIO Nº 8
•Estudiar algunos mecanismos de patogenia de estos protozoarios.

Mecanismos de invasión, establecimiento y CONTENIDOS

patogenia de infecciones causadas por los [Link]ón taxónomica de los Apicomplexa.
Apicomplexa: [Link]ísticas morfológicas y de multiplicación.
[Link] de invasión y establecimiento en la célula huésped.
Coccidios intestinales, Toxoplasma gondii  y [Link] y ciclo de vida de Coccidios intestinales, Toxoplasma gondii y
Plasmodium spp.  Plasmodium spp.
[Link] de infección, respuesta inmune y su relación con la patogenia
de ambas parasitosis.

Subreino
TAXONOMÍA APICOMPLEXA: Generalidades
PROTOZOA APICOMPLEXA Taquizoito de Merozoito de
Toxoplasma gondii Complejo apical Plasmodium falciparum
Suborden Conoide
HAEMOSPORINA Anillo apical polar
Digenéico Micronemas
Invertebrado-vertebrado •Todos los
Roptrias
Género Plasmodium miembros del
Especies:P. vivax Gránulos densos
Suborden phylum son
P. falciparum Microtúbulos
EIMERIINA parásitos
P. ovale subpeliculares
Familia P. malariae Complejo interno
Cryptosporidae •Se desarrolla y
P. knowlesi de membrana
Monoxenos Vertebrados multiplica
Mitocondria intracelularmente
Género dentro de una
Apicoplasto
Cryptosporidium Familia vacuola
Eimeridae Familia Núcleo
Retículo endoplásmico
parasitófora.
Monoxenos Vertebrados Sarcocystidae
Quistes tisulares
Membrana plasmática •Ciclo de vida con
Cystoisopora belli Vertebrados
Cyclospora cayetanensis diferentes estadíos
Toxoplasma gondii
Polo posterior
Nature Review-Microbiology 2006
 Apicomplexa: Ciclo biológico
Apicomplexa:
GAMOGONIA
Multiplicación asexual
Sexual Esquizogonia o fision múltiple

merozoitos Cuándo?
Nucleo esquizonte
Gametes •Durante la
merogonia y en

♀ ♂
esporogonia de
Plasmodium sp.)
Mitosis múltiples citocinesis • Durante la
merogonia
Meronte (Esquizonte) de enteroepitelial de:
Plasmodium falciparum
T. gondii
GAMETOGONIA Merozoitos Cryptosporidium
Merogonia de Plasmodium spp.
spp durante de la fase Cystoisospora belli,
eritrocítica.
Cyclospora
MEROGONIA
cayetanensis
Jordan y col., 2007, ;
Tulane University .Last update on February 13, 2017. GIEMSA

Membrana Externa
Apicomplexa: Multiplicación Asexual Apicomplexa e invasión celular I
Roptrias
Endodiogenia Proceso que se inicia con el Micronemas
Formación de dos células hijas dentro de una célula madre reconocimiento de la célula a invadir
Complejo de
(sólo en T. gondii durante la merogonia tisular en H.D. y H.I.) membrana interno
COMO RECONOCE A LA CELULA
A INVADIR?

Según el estadio parasitario este

reconocimiento puede ser altamente
específico o inespecífico Adhesión Reorientación Invasión
Estadio parasitario/ Molécula Célula huésped /molécula

Plasmodium spp Esporozoito Hepatocito /proteoglicano

/Prot. de Superficie del ciscumsporozoito
(CSP)
Plasmodium spp Merozoito/ Prot. de Superficie del Eritrocito/ Banda 3
merozoito (MSP)

Plasmodium vivax Merozoito / Prot de union a Duffy (DBP) Eritrocitos / Proteina Duffy
Striepen y col, 2008. Toxoplasma gondii Esporozoito/?? Enterocito felino /??
En verde complejo interno
de membrana
Toxoplasma gondii Merozoito /Adhesinas (SAG1, SAG3) Varios tipos celulares / proteinas
En rojo ADN nuclear ubicuas superficie celular
 Cinética de la Secreción en Toxoplasma
Apicomplexa e invasión celular Apicomplexa: invasión y establecimiento
en la vacuola parasitófora

Interviene la secreción secuencial de proteínas de

tres organelas del complejo apical:
Micronemas Roptrias Gránulos densos

Secreción de
micronemas [Link] 2. Roptrias [Link]ánulos densos
adhesión y modificación de la vacuola parasitofora
Movilidad por deslizamiento Formación de la
motilidad y entorno de la célula huésped
(gliding) sobre substrato vacuola parasitófora
no-fusogénica y de
GLIDING: . unión móvil Red tubular y
Complejo interno de trofozoito poros en la
TRAP/ MIC2: Capping y exclusión
Actina membrana vacuola
• familia de adhesinas conservada en selectiva de proteínas parasitófora
Apicomplexa Miosina
[Link] de membrana del que permiten
Proceso activo de desplazamiento. TRAP/MIC2
hospedero el paso de
Ligando [Link]ésped. célula huésped
Permite migrar, ingresar y egresar huesped nutrientes
célula huésped
Avance por tracción:
Movimiento hacia atrás de las adhesinas Reclutamiento
Polimerización y despolimerización
de RE y
unidireccional de la actina mitocondrías
Motores de miosina e Interacciones de la célula
ligando (TRAP/MIC)-receptor (por ej Movimiento hacia adelante del parásito huésped
Ácido Siálico) alrededor de la
vacuola
Actualizado: Frénal M et al. 2017 Dos trofozoitos de [Link] dentro de la vacuola parasitófora. C:Conoide; HC
célula huésped; M:mitocondria; N:Núcleo; R:roptrias

Coccidios intestinales
Cryptosporidium spp.
Cyclospora cayetanensis Cystoisospora
belli

Cystoisospora belli.

•• Parasitos
Parasitosmonoxenos
monoxenosque
quese
semultiplican
multiplicanen enlos
losenterocitos
enterocitosdel
delintestino
intestino
•• Causa
Causa de de diarrea
diarrea aguda
aguda en en niños,
niños, de de diarrea
diarrea crónica
crónica en
en
inmunocomprometidosyydiarrea
inmunocomprometidos diarreadel
delviajero.
viajero.
•• Cryptosporidium
Cryptosporidiumspp:
spp:zoonosis
zoonosisyy parasitosis
parasitosismarcadora
marcadorade
deSIDA
SIDA
•• La
La transmisión
transmisión por
por FECALISMO
FECALISMO (agua
(agua yy alimentos
alimentos contaminados
contaminados con
con
ooquistesesporulados).
ooquistes esporulados).
Cryptosporidium spp: Los ooquistes eliminados con la materia fecal son maduros

AUTOINFECCIÓN
 Crytosporidium spp Mecanismos patogénicos Cystoisospora belli y Cyclospora cayetanensis:
Señales Histopatología
Adherencia a la
antiapoptóticas cel.
microvellosidad
infectada
intestinal NFK-B
• Enteritis.
Alteracion de uniones
C. parvum induce intercelulares. • Atrofia vellositaria,
secreción de
serotonina y PGE2 Enterotoxina
IL-8 desencadena • Hiperplasia de las
reacción inflamatoria

criptas.
Aumento Neutrófilo
peristaltismo
• Alteración de la
Inhibición de absorción
de Na+ /Glucosa Apoptosis de cels epiteliales
Aumento de salida de
arquitectura del epitelio.
Cl- cels criptas
Atrofia vellositaria • Vacuolización del
DIARREA SECRETORA Vacuola parasitófora conteniendo merontes en
Y OSMÓTICA
citoplasma de enterocito citoplasma.
New England Journal M, 2002: Vol 346, 1723, May 30 MALABSORCIÓN

IMPORTANCIA CLíNICA DE LA TOXOPLASMOSIS

TOXOPLASMOSIS
• Aprox 13% de la población humana mundial esta infectada por T.
gondii (25% vacas, 30% cerdos).

• En •Transmisión congénita:
inmunocompetentes:
infección crónica Por primoinfección de
asintomática la madre durante la
gestación

•Individuos • Toxoplasmosis ocular :

Zoonosis parasitaria Hospedero definitivo : felino. inmunocomprometidos Tanto
de distribución mundial Alta especificidad (SNC): inmunocompetentes
Reactivación de infección como
Agente causal: latente (>95% casos) inmunocomprometidos
Toxoplasma gondii Hospedero intermediario: Aves y mamíferos.
Primoinfección
Baja especificidad
[Link] Instituto Nacional de Parasitología `Fatala Chabén´, 2017
 CICLO BIOLÓGICO DE Toxoplasma CICLO BIOLÓGICO DE Toxoplasma

Fecalismo Huéspedes intermediarios: Huéspedes definitivos:

Esporozoitos mamíferos y aves felinos
Ingestión
Ooquiste
Cerebro, pulmón, ojo, Ruptura del quiste
Ooquiste músculos, placenta
MEROGONIA esporulado Quistes
tisulares
Ingestion de ooquistes (Bradizoitos)
Diseminación Enterocitos
Ingestion Ingestion de sanguinea
Monocitos
de quistes ooquistes infectados
Carnivorismo
Tejidos GAMETOGONIA
Conversión Ingestión
Taquizoitos MEROGONIA

Taquizoitos
Bradizoitos Taquizoitos
Taquizoitos Esporozoitos Enterocitos
Ooquiste esporulado GAMOGONIA
(2 esporoquites con 4
Ciclo asexual en Ingestión esporozoitos c/u) Ciclo sexual
células nucleadas Esporozoitos
Fecalismo

Mamíferos y aves Transmisión vertical ESPOROGONIA

Medio ambiente
Los gatos eliminan ooquistes únicamente durante su primoinfección

Elementos infectantes El parásito atraviesa diferentes barreras biológicas

Ooquistes: Atraviesa transversalmente epitelios y/o co-opta monocitos

Contaminación de
alimentos y agua por
ooquistes presentes en
deyecciones del gato.
(Fecalismo)
Barrera sangre- retina
Barrera hemato-encefálica
Quistes tisulares:
•Ingesta de carne cruda o
mal cocida  más relevante.
(Carnivorismo)
•Trasplantes de órganos

Taquizoítos:
Transmisión
congénita: cuando la
primoinfección de
Placenta Mucosa intestinal
la madre ocurre
durante la gestación.
 Mecanismos de control del huésped
Mecanismos de control del huésped

RESPUESTA INMUNE INNATA.

Astrocitos iNOS
R NO

IDO
W Kinurenina

Deprivación de triptófano
IFN-
NK IgM
IgG
IDO: Indolamina 2,3- IgA
dioxigenasa

Título
IgE
Epitelio alveolar W: Triptófano
IDO R: Arginina
W Kinurenina
NO: óxido nítrico

10 2-4 4-12 4-18

dpi meses meses meses
Esquematizado a partir de Fujigaki y col., 2003 y Heseler y col., 2008

Mecanismos de Evasión Respuesta Inmune T. gondii: de la invasión a la formación de quistes tisulares

y viceversa
INNATA
PRIMOINFECCION
• Reclusión intracelular:
Respuesta inmune Bradizoíto
• Formación de una vacuola no fusiona con organelas de la cél. huésped Taquizoíto
multiplicación rápida quistes tisulares
• Inhibición de la producción de NO por MQ. (Inhib. trascripción de iNOS. •Cambios en el pH
+/- 2 semanas
•Proteínas de choque térmico (multiplicación lenta;
•Inhibición de actividad persisten por años))
mitocondrial
•Presencia de ON
ADQUIRIDA •IFN-gamma
Estimula:
•prod citoquinas antiinflamatorias como IL-10, TGF-β e IFN-α/β.
•apoptosis de LT CD4+
óxido nítrico
IFN-γ
Inhibe: TNF-alfa
•Prod citoquinas proinflamatorias como TNF-α e IFN- γ. IL-12
•translocación de NF-κB Linfocitos T
•expresión de MHCII en macrófagos. REACTIVACIÓN
•producción de IL-12 por células dendríticas Disminución de la respuesta inmune
•apoptosis de cél. infectadas.
La interconversión taqui  bradizoíto es central en la patogénesis de la enfermedad
 MALARIA Mapa de riesgo de transmisión de Malaria

Especies que infectan al •La mitad de la población mundial

habita en zona de riesgo.
hombre:
P. vivax

 
P. falciparum •Afecta principalmente personas que
P. ovale viven en los países más pobres.
P. malariae
P. knowlesi (también infecta primates -
                                            
zoonosis) •Entre el 90-92% de los
fallecimientos ocurren en Africa

• 212 millones de casos de

paludismo ocasionaron la muerte de
Hembra de Anopheles sp 429 000 personas (2015).

Globulos rojos WHO, World Malaria Report 2018

•Más del 70% de las muertes son en
infectados con P.
falciparum niños menores de 5 años. Argentina interrumpió transmisión (2019) no hay casos autóctonos desde 2008
(GIEMSA)
Casos importados por viajeros o migraciones de países con alta endemicidad

CICLO BIOLÓGICO DE PLASMODIUM SPP La duración de la merogonia eritrocítica y el paroxismo malárico

Días
Mosquito Humano
Fiebre terciana maligna
fiebre alta e irregular
Inoculación
por (P. falciparum)
picadura

Esporozoitos
Glandulas salivares
Fiebre terciana benigna

Temp (°F)
Esporozoitos 48h entre picos febriles
ESPOROGONIA merozoitos
(P. vivax y P. ovale)
Ooquistes
Fiebre cuartana
MEROGONIA
Ooquineto
Hepática 72h entre picos febriles
(P. malariae)
Cigoto Transmisión
Ciclo sexual por MEROGONIA
hematofagia eritrocítica
GAMOGONIA Ciclo asexual
Fiebre cotidiana
en erictrocitos
(P. knowlesii)
Intestino medio
GAMETOGONIA Anillo
Esquizonte

Trofozoito
 Patogenia de Malaria- Anemia
Inmunopatogenia de Plasmodium spp.
1. Destrucción intravascular de eritrocitos

2. Aumento de la eritrofagocitosis esplénica

Glomerulopatías
3. Desvío de hierro y toxicidad de la hemozoína

4. Anemia hemolítica inmune

5. Disminución prod. de eritropoyetina

6. Modificación de la citoadherencia
del eritrocito sólo por P. falciparum
P. falciparum P. malariae
- Hemólisis - Complejos inmunes
- Hipoperfusión (citoadherencia) (Daño en la estructura
- Complejos inmunes del glomérulo)

Pigmento malárico

Modificación de la citoadherencia del eritrocito y su relación con Estructura y características de PfEMP-1

la patogenia
Dominio extracelular
Deformación de eritrocitos (“knobs”) por P. falciparum

Dominio Dominio de
Dominio de Dominio polimórfico trans- unión a
citoadherencia (variable) membra KAHRP y
diferencial na citoesqueleto
Eritrocito
Dominio de cassettes variables

Rosetas “clumps” citoadherencia PfEMP-1: miembro de la familia de genes var

altamente variable, 40-50 genes
• Citoadherencia diferencial
• Evasión del sistema inmune

Extraído de Moreno y col., 2008

Citoadherencia y patogenia de P. falciparum Receptores de PfEMP-1 en el huésped
VCAM, CD36, CD31

Placenta

Malaria grave por P. falciparum

FALLA DE MÚLTIPLES ÓRGANOS

Evasión de la Respuesta Inmune I

1. Reclusión intracelular

2. Respuesta Inmune policlonal no protectiva

3. Variación antigénica

Gracias