INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
Práctica: Reacción de transaminación y su reconocimiento por medio de cromatografía
en papel Integrantes: Cedillo Alcantara Jan Alexis y Loperena Chávez José Antonio.
Sección: 2 Grupo: 2OV1
Introducción.
Las reacciones de transaminación se realizan
entre un aminoácido y un alfa-cetoácido, la
que el grupo amino es transferido y consentido
a un carbono alfa de un alfa-ceto.
Estas reacciones son llevadas acabo por
enzimas llamadas aminotransferasas, las que
requieren de un fosfato de piridoxal como
grupo prostético.
Como ejemplo la reacción que se lleva a cabo
para la obtención de glutámico mas piruvato, Concentración de glutámico total
la cual se lleva a cabo bajo la enzima alanina
transaminasa, la cual actúa sobre la alanina y [Glu]total= [Glu]p – [Glu]t
el alfa-cetoglutarato dejando como productos [Glu]total = 𝟎. 𝟒𝟖 − 𝟎. 𝟐
glutámico y piruvato. Esta reacción es una
alternativa de formación de piruvato a parte [Glu]total = 0.28 micromoles
del glucolisis. 0.48Micromoles-----------1000Microlitros
0.0288------------------------------------60Ml
Objetivos.
Cuantificar la actividad de la transaminasa UAT (Unidades arbitrarias de
(AlaT/GPT) presente en un extracto crudo de transaminación)
hígado empleando un metodo cromatográfico
y espectrofotométrico. 0.28
= 8.4848
1𝑥0.033
Resultados.
Discusión
Se llevo a cambio una reacción de
transaminación donde se comprobó la
reacción de la alanina y el α-cetoglutarato
bajo la acción de la enzima alanina
transaminasa, de esta forma obteniendo como
productos glutámico y piruvato.
Para corroborar que la reacción se llevo de
manera adecuada se realizó una cromatografía
en papel poniendo en manifiesto glutámico y
alanina en diferentes concentraciones. Para
revelar el cromatograma se utilizó como
revelador el solvente ninhidrina en etanol, el • Melo V., Cuamatzi O. (2006)
cual tiño las manchas de corrimiento de color “Bioquímica de los procesos
morado, permitiéndonos observar la presencia metabólicos”. Editorial Reverte.
de glutámico debido a que el corrimiento se México.120-140pp.
encontraba a una misma altura y en el caso del
problema se observa la separación de alanina
y glutámico debido a la altura de corrimiento
de las manchas que se comparan con las de
glutámico en distintas concentraciones y en el
testigo como era de esperarse se observa una
mancha de glutámico muy tenue, debido a la
baja concentración de glutámico en este. A
partir de esto se confirma que la reacción de
llevo a cabo de forma correcta.
A partir de la elaboración de una curva tipo por
medio de la absorbancia que se obtuvo a partir
de las muestras de ácido glutámico, con esto se
llevo a cabo el calculo de la actividad de la
enzima transaminasa en UAT (unidades
arbitrarias de transaminación) para corroborar
que nuestra reacción de llevo a cabo
correctamente.
En la grafica podemos observar que la
concentración de glutámico presente en el
problema es casi menor a la del tubo que
contiene 25 microlitros de glutámico, mientras
que el tubo testigo contiene la misma cantidad
en micromoles de glutámico que el tuvo con
10 microlitros de glutámico.
Conclusiones
Las transaminasas son enzimas que catalizan
las reacciones de transaminación, en este caso
se utilizo alanina transaminasa.
La actividad enzimática de ciertos órganos nos
ayuda a diagnosticar distintas patologías,
dependiendo de las concentraciones en las que
se encuentren y el órgano estudiado.
Se logro cuantificar la actividad de la alanina
transferasa en el extracto crudo de hígado.
Referencias
• Peña A. (2004) “Bioquímica” 2da.
Edición. Ed. Limusa. 311p.
