Control químico de los
microorganismos
Definiciones
• Desinfección: se refiere al uso de agentes
físicos o químicos para eliminar las células
vegetativas pero no necesariamente las
esporas.
• La desinfección se
emplea
principalmente
sobre objetos
inanimados debido
a que se utilizan
compuestos
altamente tóxicos
para las células
animales.
• La elección del agente químico o físico
depende del nivel de control que se
requiera:
A) Células vegetativas
B) Bacilos tuberculosos
C) Esporas
La resistencia que presentan los
microorganismos a los agentes químicos o
físicos es variable.
Elección del nivel de acción del
desinfectante
Bacterias Alta Media Baja
Endosporas
Mycobacterium
Células vegetativas
Hongos filamentosos
Parásitos
Quistes
Virus
Desnudos pequeños
Envueltos medianos
• Asepsia. Es
eliminación de
microorganismos de
objetos animados.
• Antiséptico: es el
nombre que reciben
los agentes químicos
que se usan en la piel.
Sólo elimina los
microorganismos que
están en la dermis
BMBL 5 ed. 2009
Efecto de los agentes químicos
• Biocida (Germicida): es un compuesto químico
que causa lesiones irreversibles, mata cualquier
tipo de microorganismo.
• Su poder de acción desinfectante generalmente
es alto por lo que elimina bacterias, virus,
hongos y parásitos. (Bactericida, fungicida, etc)
• Bioestático: son compuestos que causan
reacciones reversibles sobre el
crecimiento y proliferación de los
microorganismos sin causarles la muerte.
• Para que sean efectivos siempre deben
estar presentes.
• Biolítico. Provoca la lisis de la célula, la
cual se detecta por el descenso en el
número de células o disminución de la
turbidez
Factores que afectan la actividad
de los agentes químicos
• 1) Concentración del agente y tiempo de
actuación
• 2) pH: El pH afecta tanto a la carga superficial
neta de la bacteria como al grado de ionización
del agente. En general, las formas ionizadas de
los agentes disociables pasan mejor a través de
las membranas, y por lo tanto son más
efectivos.
• Los agentes aniónicos suelen ser más efectivos
a pH ácidos.
• Los agentes catiónicos muestran más eficacia a
pH alcalinos.
Factores que afectan la actividad
de los agentes químicos
• 3) Temperatura. Normalmente, al aumentar la
temperatura aumenta la potencia de los
desinfectantes. Para muchos agentes el
aumento de 10 grados supone duplicar la tasa
de muerte
• 4) Naturaleza del microorganismo y otros
factores asociados a la población microbiana
según la especie empleada: p. ej., M. tuberculosis
resiste la acción del hipoclorito mejor que otras
bacterias;
Factores que afectan la actividad
de los agentes químicos
1. Según la fase de cultivo;
• La presencia de esporas o de cápsula (suelen
conferir más resistencia);
• El número de microorganismos iniciales
Factores que afectan la actividad
de los agentes químicos
• 6) Presencia de materiales extraños: La
existencia de materia orgánica en el
material a tratar (p. ej., sangre, suero, pus)
afecta negativamente a la potencia de los
desinfectantes de tipo oxidante (como los
hipocloritos) y de tipo desnaturalizante de
proteínas, hasta el punto que pueden
llegar a hacerlos inactivos en cuanto a su
poder desinfectante o esterilizante.
Métodos para evaluar la actividad
de agentes químicos
• Coeficiente fenólico
• Reto microbiano
• Concentración mínima inhibitoria (MIC,
dilución en tubo)
• Difusión en agar
Reto microbiano
• El desinfectante se prepara de acuerdo
con las instrucciones del fabricante.
• Se adiciona una concentración conocida
de microorganimos tipo: S. aureus, E. coli
y Salmonella typhi (75 –125 x 106)
• Se evalúa la efectividad del desinfectante
después de 30 seg de contacto del
microorganismos con el.
Reto microbiano
• Resultado se expresa en por ciento de
efectividad.
• Ejemplo:
Cuenta inicial = 90 x106 UFC/ml
Cuenta después del contacto con desinfectante =
8 x 102 UFC/ml
% efectividad= 100- (8 x 102 x 100) = 99.9999 %
90 x106
Concentración mínima inhibitoria
• La CMI (MIC) se define como la
concentración más pequeña de agente
químico que se necesita para inhibir el
crecimiento de un microorganismo control.
• Para determinarla se prepara una serie de
tubos cada uno contiene medio de cultivo
con una concentración diferente del
agente químico y se inoculan con el
microorganismo control (S. aureus, E. coli,
Salmonella)
MIC
MIB Concentración mínima
bactericida
Difusión en placa
Agentes quimioterapéuticos
• Sustancias usadas en concentraciones
bajas para el tratamiento de
enfermedades; destruyen o inhiben el
crecimiento de microorganismos
patógenos, sin causar daño a los tejidos
del hospedero.
Desde el punto de vista químico, se
clasifican en grandes familias
• antibióticos que contienen carbohidratos;
• lactonas macrocíclicas;
• quinonas y compuestos relacionados;
• antibióticos peptídicos y con aminoácidos;
• heterociclos del N;
• heterociclos del O;
• aromáticos;
• alifáticos, etc.
• Para estudiarlos es más útil agruparlos en
función de los “sitios blanco” sobre los que
actúan
• A) antibióticos que interfieren con la biosíntesis
de la pared celular
• B) antibióticos que actúan sobre la membrana
celular
• C) antibióticos que inhiben la síntesis de
proteínas
• D) antibióticos que actúan sobre la síntesis de
ácidos nucleicos.
• E) antibióticos que inhiben vías metabólicas
Métodos empleados para evaluar la
susceptibilidad a antibióticos
• Método de Kirby Bauer (difusión en placa)
• Método de dilución en tubo
• Epsilómetro o E-test
Método de Kirby Bauer o
Difusión en placa
CLSI (Clinical and
Laboratory Standards
Institute)
• Agar Hinton-Müeller
• Grosor 4 mm
• pH del medio 7.0
• Taxos a -20°C
• 5 -12 taxos por placa de 10
o 15 cm de diámetro
respectivamente
• Inóculo al 0.5 de M.F (150 x
106)
MO para ensayo de PSA por el método de
difusión en agar (KB)
BGNFER GNDC BGNF
• Enterobacteriaceae • Haemophilus spp. Pseudomonas aeruginosa
• Vibrio cholerae • Neisseria gonorrhoeae Acinetobacter spp.
• Neisseria meninigitidis Burkholderia cepacia
CGP Micrococaceae CGP Streptococaceae
• Staphylococcus spp. • Enterococcus spp.
• Streptococcus pneumoniae
• Streptococcus spp
Tablas CLSI
No es correcto utilizar el multidiscos para las
pruebas de susceptibilidad
Dilución en tubo o microdilución
Epsilómetro E-test
