UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE SINALOA

9 DE MARZO DE 2018

CUADRO DE PRUEBAS BIOQUIMICAS

MICROBIOLOGÍA APLICADA

REYES SOLIAN SANDY GISELLE

M.C. MAYA TORRES SÁNCHEZ
ING. BIOTECNOLOGÍA 5-3
 Prueba Medio de cultivo Revelador Fundamento - Ruta Prueba positiva(+) Prueba negativa(-) Tipos de
bioquímica Tipo de siembra metabólica microorganismos
-Rojo de metilo: El piruvato se metaboliza a Aparición del color El medio de cultivo -E. Coli
Caldo RM-VP, Las bacterias que ácido acético, ácido rojo estable (Ph 4.4) se torna color -Shigella
siembra en tubo siguen succínico, ácido fórmico y amarillo o naranja. -E. tarda
fundamentalmente etanol. El piruvato se divide (Ph 6) -Salmonella
la vía de de la coenzima A para
fermentación ácido formar ácido fórmico y
mixta donde acetil-CoA. Algunas de las
producen el ácido acetil-CoA se reducen a
Rojo de
suficiente como para acetil aldehído y luego a
Metilo mantener el pH por etanol. Los grupos acetilos
debajo de 4. 4 de algunas acetil-CoA se
transfieren a fosfatos y
general acetil fosfatos, que
luego convierten sus
enlaces de elevada energía
en ADP y producen ATP.
-Alfa naftol y Las bacterias que utilizan la Aparición de un El medio de cultivo
Caldo RM-VP, creatina: vía de fermentación del color rojo fucsia se torna color -Enterobacter
siembra en tubo. Los resultados de butanediol tienen una (presencia de amarillo o puede aerogenes
esta prueba se basan enzima que condensa dos acetoína) formarse un color -Enterobacter
en la conversión de moléculas de piruvato en cobrizo. cloacae
la acetoína en CO2 y alfa acetoacetato. El -Hafnia alvei
Voges diacetilo a través de alfa acetoacetato se -Serratia
Proskauer la acción de NaOH y descarboxila y forma marcescens
oxígeno atmosférico. acetoina, en presencia de
El diacetilo se iones hidrogeno la acetoina
convierte en un se reduce a 2,3 butanediol y
complejo rojo bajo la esta acetoina se detecta por
acción catalítica de la adición de afta naftol
a-naftol.
Rojo de fenol Se emplea para detectar la -Para las bacterias -Si no fermenta -Pseudomona
Agar hierro triple fermentación de lactosa, que fermentan glucosa el medio spp
azúcar. Tiosulfato de sodio. sacarosa y glucosa con glucosa: Acidificará permanecerá de -Shigella sp
TSI
Inoculación con formación de ácido y gas y el medio haciendo color rojo. -Salmonella typhi
punta y también ácido sulfhídrico virar a amarillo el -Si no fermenta
lactosa o sacarosa
 estriación con (debido a la reducción de indicador en el continuará de color
zigzag. las sales de hierro) fondo del tubo rojo.
-Si la bacteria
fermenta lactosa o
sacarosa, acidificará
el medio de su
superficie
volviéndolo de color
amarillo.
-H2S(+): se producirá
ennegrecimiento del
tubo
-Gas (+): aparecerá
rotura o
desplazamiento del
medio.

Se utiliza agua Peróxido de La catalasa es una enzima Aparición de No hay burbujas Streptococcus
oxigenada en un hidrógeno. que descompone el burbujas
portaobjetos peróxido de hidrogeno en
Catalasa oxígeno y agua

Agar BHI La prueba de la citocromo- Positivo: color Negativo: no hay Staphylococcus

Agar Mueller Reactivo de Kovac’s: oxidasa, permite detectar la rosado-fucsia en 2 desarrollo de color.
Agar sangre Tetrametril-p- presencia en el minutos.
-Siembra en tubo fenilendiamina microorganismo de ciertas
enzimas del sistema
Oxidasa Dimetil-p- citocromo-oxidasa capaces
fenilendiamina. de oxidar rápidamente al
colorante redox.

Agar Citrato de Azul de bromotimol Determina la capacidad de Producción de un No se produce el Salmonella

Simmons. un microorganismo para color azul indica la color azul ni Citrobacter
utilizar citrato de sodio presencia de crecimiento en la freundii
Citrato
Se siembra en como única fuente de productos alcalinos. línea de siembra. Klebsiella
tubos en pico de carbono para producir oxytoca
 flauta y se productos metabólicos También es un Enterobacter
siembra en estría alcalinos resultado positivo el aerogenes
un pequeño crecimiento visible a nterobacter
inóculo de una lo largo de la línea cloacae
colonia de de siembra en estría
prueba del antes de la
microorganismo. conversión del
medio a un color
azul.

Medio Edwards y Sales de tetrazolio Hay cambio en la E. coli

Ewing como auxiliar para la Se puede observar línea de inoculación No hay cambio Edwardsiella
detección visual del colocando una gota de tarda
Se siembra en un crecimiento medio de caldo de cultivo Salmonella
agar semisólido bacteriano. en un portaobjetos -Citrobacter
teniendo La aparición de un microscópico y freundii
cuidando que por color rojo ayuda a observándola directamente Serratia
donde entre en rastrear la con un microscopio. Esta marcesnces
Motilidad
pico, salga igual, propagación de técnica es para bacterias
ya que al bacterias desde la que no crecen bien en agar
observar un línea de inoculación semisólido.
cambio diferente
en la línea es
porque hay
movimiento de la
bacteria.
Medio de cultivo Reactivo de Ehrlich o El indol es uno de los Se forma un anillo Se forma un anillo E. coli
con indol de Kovács productos de degradación color rojo cereza color amarillo. Edwarsiella tarda
siembra en tubo del metabolismo del Citrobacter
aminoácido triptófano. La koseri
bacteria que contienen la Klebsiella
Indol enzima triptofanasa pueden oxytoca
dividir el triptófano y
producir así indol, ácido
pirúvico y amoníaco.
 Agar lisina hierro Purpura de Se utiliza para diferenciar Una porción -Salmonella
bromocresol los microorganismos profunda negra y un Profundidad rojiza
entéricos sobre la base de pico de flauta violeta pero no amarilla.
su capacidad para con LIA indican
descarboxilar o desaminar especies de
lisina y formar H2S. Salmonella
-Aparición de un
LIA color rojo en el pico
de flauta indica la
presencia de Proteus
y Providencia

Caldo Violeta de Muchas especies de El crecimiento está Profundidad rojiza

descarboxilasa de bromocresol bacterias tienen enzimas indicado por la pero no amarilla Edwarsiella tarda
Moller y se le capaces de descarboxilar conversión a un (pH alcalino) Salmonella
adiciona el aminoácidos específicos en color amarillo Klebsiella
aminoácido el medio de prueba. Las debido a la neumoniae
enzimas descarboxilasas fermentación de Klebsiella
eliminan una molécula de glucosa(pH acido) oxytoca
Lisina CO2 de un aminoácido para Enterobacter
formar aminas de reacción aerogenes
especifica. La lisina se
degrada a cadaverina.
 Agar almidón Lugol que detecta la El almidón es un compuesto Aparición de halos Aparición de color Bacillus cereus.
enzima alfa-amilasa macromolecular así que es color café alrededor azul-violeta
necesario que lo hidrolicen de las colonias Bacillus
para aprovecharlo y para botullinum.
esto se usa la enzima alfa-
Almidón amilasa