PRACTICA N° 04
TITULACION POTENCIOMETRICA DE UN ACIDO FOSFÓRICO, EL AMINOÁCIDO GLISINA
Los aminoácidos en tienen carácter anfótero, ya que debido a sus grupos ionizables, se
comportan como ácidos o como bases en solución acuosa. Cuando se trata de aminoácidos con un
grupo amino y uno carboxilo, ambos se encuentran ionizados en solución neutra, constituyendo
un ion dipolar o zwiterión (término alemán, ion híbrido); lógicamente, no poseen carga eléctrica y
por lo tanto, no migran en un campo eléctrico. Por ejemplo, en el caso del -aminoácido más
sencillo, la glicina, el equilibrio de ionización corresponde a:
H+ H+
NH3+ NH3+ NH2
H - C - COOH H - C - COO- H - C - COO-
K1 = 10-2.34 K1 = 10-9.60
Donde la forma zwiterión puede actuar como ácido, al perder el H + el grupo nitrogenado, o como
base, al combinarse el grupo carboxílico con un H +, adquiriendo, en consecuencia, una carga neta
negativa o positiva, respectivamente. Los aminoácidos que, como la glicina, sólo tienen los dos
grupos ionizables citados, -NH2 y -COOH, se encuentran casi totalmente en forma zwiterión al
pH fisiológico 7.4. Se define el punto isoeléctrico (PI) de un aminoácido como el pH en el cual éste
no tiene carga eléctrica neta.
Los ácidos polipróticos son ácidos que tienen más de un hidrógeno ionizable, por ejemplo el ácido
fosfórico y el ácido sulfúrico$ donde estos se disocian en más de una etapa y cada una de estas
presenta su propia constante de equilibrio. Estos ácidos no ceden con la misma facilidad todos los
protones, sino que lo hacen de forma escalonada, y cada vez con mayor dificultad. Las
correspondientes constantes de disociación, disminuyen mucho para cada una de las sucesivas
ionizaciones. El aminoácido es una molécula orgánica con un grupo amino y un grupo carboxilo
donde los más frecuentes y de mayor interés son aquellos que forman parte de las proteínas. Los
aminoácidos se combinan en una reacción de condensación entre el grupo amino de uno y el
carboxilo del otro, liberándose una molécula de agua y formando un enlace amida que se
denomina enlace peptídico.
CUESTIONARIO
1. ¿En qué se diferencian los tres aminoácidos estudiados?
H H H
H - C - COO- -
OOC - C - CH2 - CH2 - COO- -
OOC - C - CH2 - CH2 - CH2 - CH2 - NH3+
NH3+ NH3+ NH3+
Glicina Ácido glutámico Lisina
Estructuralmente, los tres aminoácidos se diferencian en los grupos amino y carboxilo. La
glicina es monoamino y monocarboxilo, el ácido glutámico tiene un grupo amino y dos
grupos carboxilos y la lisina presenta dos grupos amino y uno carboxilo.
Según su titulación, la glicina forma dos sistemas amortiguadores, mientras que el ácido
glutámico y la lisina forman ambos tres sistemas amortiguadores.
Considerando el pH, la glicina en medio acuoso presenta un pH cercano a la neutralidad, el
ácido glutámico en solución acuosa presenta pH ácido y la lisina presenta un pH básico.
La glicina forma un sistema buffer en medio alcalino y uno en medio ácido, el ácido
glutámico forma un sistema amortiguador en pH alcalino que corresponde al grupo amino y
formación de otros dos sistemas amortiguadores en pH ácido que corresponden a los dos
grupos carboxílicos. La lisina forma dos sistemas buffer, uno en medio alcalino y otro en
medio ácido.
2. De los buffers formados por el ácido glutámico, ¿cuál es el más efectivo y a qué pH?
El sistema buffer más efectivo es aquel que presenta la mayor capacidad de impedir los
cambios bruscos del pH de una solución. El sistema amortiguador más efectivo formado por el
ácido glutámico es el formado a un pH ácido de 4.2
3. Proponga las reacciones producidas en la titulación de la lisina con NaOH a partir de su especie
iónica más positiva.
COOH H2O COONa H2O
NH3+ - C - H + NaOH NH3+ - C - H + NaOH
(NH2)4 (NH2)4
NH3+ NH3+
COO- H2O COONa
NH3+ - C - H + NaOH NaNH2 - C - H
(NH2)4 (NH3+)4
NH2Na NH2Na
La especie iónica más positiva es:
COOH
NH3+ - C - H
con carga +2
(NH2)4
NH3+
En la reacción producida en la titulación de la lisina con NaOH a partir de su especie iónica
más positiva que tiene carga +2, al añadirle el NaOH, el sodio (Na +) ingresa en el grupo
carboxilo, liberando un hidrógeno (H +) que se junta con el hidroxilo (OH -) del NaOH y se
produce la formación de agua (H2O). Esta reacción se produce nuevamente pero esta vez el
sodio ingresa al grupo amino, liberando un hidrógeno que junto al grupo hidroxilo forma agua.
Esto ocurre con el otro grupo amino, terminando la reacción.
4. Calcule los componentes de un litro de tampón glicina de pH 8.8 y concentración 0.1 M a partir
de glicina sólida (PM: 101.6) y NaOH sólido (PM: 40) si el pK 1 = 2.35 y el pK2 = 9.78
pH = pKa + log SA
8.8 = 9.78 + log SA
- 0.98 = log SA
SA = 0.1047
A + S = buffer
A + glicina = buffer
1.1047 A = 0.1
A = 0.09
S = 0.0094
BIBLIOGRAFIA
HERRERA, Emilio. BIOQUIMICA. Aspectos estructurales y vías metabólicas. Tomo I. Editorial
McGraw Hill - Interamericana de España. Primera edición, 1991. Madrid - España.
MANUAL DE PRACTICAS DE BIOQUIMICA I. UNALM. 2000.
NIETO ARAVENA, Cecilia. Apuntes de Bioquímica I. Solucionario de Problemas. Departamento de
Química, UNALM. Lima - Perú. 1999
