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Cianometahemoglobina Human

Este documento describe un método colorimétrico fotométrico para determinar la hemoglobina en sangre. El método se basa en la oxidación de la hemoglobina para formar cianmetahemoglobina, cuya absorbancia a 540 nm es proporcional a la concentración de hemoglobina. Se proporcionan valores de referencia, detalles sobre la preparación y estabilidad de los reactivos, el procedimiento de ensayo, cálculos y notas de seguridad.

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Rolando Álvarez
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Cianometahemoglobina Human

Este documento describe un método colorimétrico fotométrico para determinar la hemoglobina en sangre. El método se basa en la oxidación de la hemoglobina para formar cianmetahemoglobina, cuya absorbancia a 540 nm es proporcional a la concentración de hemoglobina. Se proporcionan valores de referencia, detalles sobre la preparación y estabilidad de los reactivos, el procedimiento de ensayo, cálculos y notas de seguridad.

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Hemoglobin liquicolor Valores de referencia 3

Hb [g/dl] Hb/4 [mmol/l]


Prueba colorimétrica fotométrica para la Mujeres 12-16 7,5 – 10,0
determinación de hemoglobina en sangre Hombres 14-18 8,7 – 11,2
Método de la cianmetahemoglobina Recién nacidos 16-25 10,0 – 15,5
Bebés 10-15 6,2 – 9,3
Presentación del estuche
[REF] 10751 para 10 x 500 ml Reactivo Niños de corta edad 11-14 6,8 – 8,7
[IVD] Niños 12-16 7,5 – 10,0

Control de calidad
Método1,2
Para un control de precisión usar controles comercialmente disponibles.
El método está basado en la determinación de cianmetahemoglobina
aceptada como método estándar. La hemoglobina de la muestra de Características de la ejecución
sangre total es liberada de los eritrocitos y es oxidada por hexaciano-
Los datos típicos de ejecución de la prueba pueden ser encontradas en el
ferrato de potasio (III) formando metahemoglobina. Esta reacciona con el
informe de verificación, accesible vía
cianuro formando cianmetahemoglobina estable cuya absorbancia a
540 nm es directamente proporcional a la concentración de hemoglobina www.human.de/data/gb/vr/su-hblc.pdf o
en la muestra. www.human-de.com/data/gb/vr/su-hblc.pdf

Contenidos Si no puede acceder a las caracteristicas de la ejecucion via internet,


pongase en contacto con su distribuidor local quien se las proporcionara
[RGT²² A] 10 x 25 ml Concentrado de reactivo A
sin costo alguno.
Hexacianoferrato de potasio (III) 12 mmoI/I
Bicarbonato de potasio 230 mmoI/I Notas
[RGT²² B] 10 x 25 ml Concentrado de reactivo B 1. Evitar el contacto con ácidos!
Cianuro de potasio 14 mmoI/I 2. Proteger [WR] de la luz directa y cerrarlo bien. [WR] debería ser claro y de
color amarillo claro. No usar [WR] turbio o incoloro.
Bicarbonato de potasio 230 mmoI/I
3. Recomendamos el uso de pipetas de Sahli o pipetas capilares (20 μl,
Preparación del reactivo de trabajo [WR] 5 μl).
Preparar [WR] mezclando un frasco de [RGTA] y un frasco de [RGTB] con
450 ml de agua desionizada. Almacenar [WR] en un frasco o recipiente de Notas de seguridad
vidrio oscuro y etiquetar cuidadosamente. [RGT_B] Atención
· Indicaciones de peligro
Estabilidad de reactivos
[RGT²² A] y [RGT²² B] son estables hasta su fecha de caducidad cuando se
H312 Nocivo en contacto con la piel.
almacenan en la oscuridad de 15...25°C. · Consejos de prudencia
Almacenado en la oscuridad de 15...25°C, [WR] es estable por 12 meses P234 Conservar únicamente en el recipiente original.
después de su preparación, pero no más allá de su fecha de caducidad. P260 No respirar el polvo/el humo/el gas/la niebla/los vapores/el aerosol.
Evitar la contaminación.
P262 Evitar el contacto con los ojos, la piel o la ropa.
Muestras P281 Utilizar el equipo de protección individual obligatorio.
Sangre capilar, sangre venosa EDTA. P303+P361+P353 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL (o el pelo):
Estable por 6 meses cuando se almacena a -20°C y 7 días cuando se Quitarse inmediatamente las prendas contaminadas. Aclararse la piel con
almacena a 2...25°C. agua o ducharse.
P305+P351+P338 EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: Aclarar
Ensayo
cuidadosamente con agua durante varios minutos. Quitar las lentes de
Longitud de onda: Hg 546 nm (540 nm) contacto, si lleva y resulta fácil. Seguir aclarando.
Paso de luz: 1 cm P337+P313 Si persiste la irritación ocular: Consultar a un médico/Buscar
Temperatura: 20...25°C atención médica.
Medición: Frente al blanco de reactivo P401 Almacenar de acuerdo con las regulaciones
(Incremento de la absorbancia). locales/regionales/nacionales/ internacionales.
P501 Eliminar el contenido/el recipiente en concordancia con las
Esquema de pipeteo
regulaciones locales/ regionales/nacionales/internacionales.
Pipetear en los tubos: Macro Semi micro
[WR] 5 ml 1 ml Literatura
Sangre 20 μl 5 μl 1. Van Kampen, E.J., Zijlstra, W.G., Clin. Chim. Acta 6, 538 (1961)
Enjuagar la pipeta (sahli ó pipeta capilar) varias veces con [WR], mezclar 2. International Committee for Standardization in Hematology (ICSH),
bien y leer la absorbancia después de 3 minutos por lo menos frente a Brit. J. of Hematology, 13 Suppl., 71 (1967)
un blanco de reactivo (A). El color del complejo sobrante es estable por 3. Wintrobe, M.M., Clin. Hematology, Lea & Febinger, Philadelphia,
aprox. 2 horas cuando se protege de la luz. Pa. 4th Edit. 1956
Cálculos de la concentración de la hemoglobina
Hg 546 nm Hemoglobina(Hb) Hemoglobina/4 (Hb/4)
SU-HBLC INF 375101 E 11-2017-07 |
[g/dl] [g/l] [mmol/l]
Macro 36,8 x A 368 x A 22,8 x  A
Semi micro 29,4 x A 294 x A 18,2 x A
Factor de conversión: Hb [g/dl] x 0,6206 = Hb/4 [mmol/l]
Hb/4 [mmol/l] x 1,611 = Hb [g/dl]

Human Gesellschaft für Biochemica und Diagnostica mbH


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