UNIVERSIDAD EVANGÉLICA
DE EL SALVADOR
Departamento de Ciencias Fisiológicas
FISIOLOGIA Y BIOQUIMICA I
Dra. Karen Gómez
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OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Analizar la importancia biomédica de la cinética enzimática.
Describir los factores que afectan el índice de reacción.
Describir los factores que influyen sobre los índices de reacción
catalizada por enzima.
Analizar la inhibición competitiva y no competitiva.
Revisar el mapa de conceptos fundamentales sobre las enzimas.
IMPORTANCIA BIOMÉDICA DE LA CINÉTICA ENZIMÁTICA
El estudio sistemático de factores que afectan estas
tasas, constituye una herramienta fundamental para el
análisis, diagnóstico y tratamiento de los desequilibrios
enzimáticos que subyacen muchas enfermedades
La aparición de enzimas particulares en la sangre, o un
aumento repentino de las concentraciones de las
mismas, sirve como un indicador clínico para
enfermedades como infarto de miocardio, cáncer de
próstata y daño hepático
Creación de agentes terapéuticos que inhiben de
manera selectiva las tasas de procesos catalizados por
enzima específicos
Murray RK, Bender DA. HARPER Bioquímica Ilustrada. 29a. Mc Graw Hill; 65 p.
¿COMO ACTUAN LAS ENZIMAS?
Actúan por dos mecanismos:
Cambios de Energía
• Facilitamiento de la catálisis por su sitio activo
Harvey RA, Ferrier DR. Bioquímica. 6a. Wolters Kluwer; pag.55
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CAMBIOS DE ENERGIA QUE OCURREN DURANTE
LA REACCIÓN
ENERGÍA LIBRE DE ACTIVACIÓN:
• Definida como una barrera de energía que separa
los reactantes de los productos
• Diferencia de energía entre la energía de los
reactantes y un intermediario de energía elevada
Que aparece durante la formación del producto
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Harvey RA, Ferrier DR. Bioquímica. 6a. Wolters Kluwer; pag.55 5
VELOCIDAD DE LA REACCIÓN
• Para que las moléculas reaccionen deben contener
suficiente energía Como para superar la barrera de energía
del estado de transición
• Solo una pequeña proporción de una población de
moléculas puede poseer esa energía suficiente para
alcanzar el estado de transición Entre el reactante y el
producto
• La velocidad de la reacción esta determinada por el
numero de moléculas energizadas
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Harvey RA, Ferrier DR. Bioquímica. 6a. Wolters Kluwer; pag.56 7
QUIMICA DEL SITIO ACTIVO
Plantilla molecular flexible que enlaza el sustrato e inicia su conversión a un estado de transición
Proporciona grupos catalíticos que intensifican la probabilidad de que se forme el estado de transición
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TEORÍAS DE LA ACCIÓN ENZIMÁTICA
Modelo de Llave y Cerradura (Emil Fischer)
Substrato y enzima se acoplan de forma estereospecífica,
de la misma manera que una llave se ajusta a su cerradura.
Modelo aceptado durante mucho tiempo; hoy se considera
insuficiente al no explicar algunos fenómenos de la
inhibición enzimática
TEORÍAS DE LA ACCIÓN ENZIMÁTICA
Modelo de Ajuste Inducido (Koshland)
Tanto la enzima como el substrato sufren una alteración en
su estructura por el hecho físico de la unión.
Está mucho más de acuerdo con todos los datos
experimentales conocidos hasta el momento.
FACTORES QUE AFECTAN EL ÍNDICE DE REACCIÓN
Concentración del sustrato
Concentración de la enzima
Temperatura
Efectos activadores e inhibidores
pH
Harvey RA, Ferrier DR. Bioquímica. 6a. Wolters Kluwer; pag.56
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CONCENTRACION DEL SUSTRATO
Velocidad máxima: la tasa o velocidad de una reacción (v) es el número de moléculas de sustrato
que se convierte en producto por unidad de tiempo. La velocidad suele expresarse como μmol de
producto formado por minuto. La tasa de una reacción catalizada enzimáticamente aumenta con la
concentración del sustrato hasta alcanzar una velocidad máxima (Vmáx)
Para una enzima típica, a medida que la concentración de sustrato aumenta, vi se incrementa hasta
que alcanza un valor máximo Vmax
Cuando los aumentos adicionales de la concentración de sustrato no aumentan más la vi, se dice que
la enzima está “saturada” con sustrato.
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ECUACIÓN DE MICHAELIS-MENTEN
Describe cómo varía la velocidad de la reacción en función de la concentración del sustrato
Donde:
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CINÉTICA DE MICHAELIS-MENTEN
Modelo de reacción
Donde: S es el sustrato
E es la enzima
ES es el complejo enzima-sustrato
P es el producto
K1 y K2 son las constantes de velocidad
Harvey RA, Ferrier DR. Bioquímica. 6a. Wolters Kluwer; pag.58
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LAS ECUACIONES DE MICHAELIS-MENTEN Y DE HILL
MODELAN LOS EFECTOS DE LA CONCENTRACIÓN DE
SUSTRATO
La mayoría de las enzimas muestran una cinética de
Michaelis-Menten
en la cual, la representación de la velocidad de reacción
inicial (v0) frente a la concentración de sustrato ([S]) es
hiperbólica
Harvey RA, Ferrier DR. Bioquímica. 6a. Wolters Kluwer; pag.57
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CARACTERÍSTICAS DE LA KM
Km o constante de Michaelis es característica de una enzima y su sustrato concreto
Refleja la afinidad de la enzima por ese sustrato
No varía con la concentración de la enzima
Km Pequeña Km Grande
Numéricamente pequeña (baja) Refleja una afinidad baja de la
refleja una afinidad elevada de la enzima por el sustrato, porque se
enzima por el sustrato, porque se necesita una concentración elevada de
necesita una baja concentración de sustrato para saturar la mitad de la
sustrato para saturar la mitad de la enzima.
enzima
Harvey RA, Ferrier DR. Bioquímica. 6a. Wolters Kluwer; pag.59
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INHIBICIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
Sustancia capaz de disminuir la velocidad de una reacción catalizada por una enzima
Pueden ser reversibles o irreversibles
Los inhibidores irreversibles se unen a enzimas por medio de enlaces covalentes
Por ejemplo la ferroquelatasa, una enzima que interviene en la síntesis del grupo hemo
es inhibida de manera irreversible por el plomo
Harvey RA, Ferrier DR. Bioquímica. 6a. Wolters Kluwer; pag.60
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LOS INHIBIDORES REVERSIBLES
Los inhibidores reversibles se unen a las enzimas mediante enlaces no covalentes, de modo que la
dilución del complejo enzima-inhibidor provoca la disociación del inhibidor unido reversiblemente y
la recuperación de la actividad enzimática.
Los dos tipos de inhibición reversible más frecuentes son la inhibición competitiva y la no
competitiva.
INHIBICIÓN COMPETITIVA
Se produce cuando el inhibidor se une de manera reversible al mismo sitio que ocuparía normalmente
el sustrato y, por consiguiente, compite con el sustrato por ese sitio.
Estatinas son ejemplos de inhibidores competitivos
de este modo, inhiben la síntesis de novo del
colesterol, reduciendo así los niveles plasmáticos
de colesterol
Harvey RA, Ferrier DR. Bioquímica. 6a. Wolters Kluwer; pag.60
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INHIBICIÓN NO COMPETITIVA
Se produce inhibición no competitiva cuando el inhibidor y el sustrato se unen a sitios
diferentes de la enzima.
El inhibidor no competitivo puede unirse o bien a la enzima libre o bien al complejo ES,
impidiendo así que se produzca la reacción
los inhibidores no competitivos no interfieren en la unión del sustrato a la enzima.
Un metabolito del fármaco alopurinol, es un
inhibidor no competitivo de la xantina oxidasa,
una enzima de la degradación de la purina.
12/3/2020 Harvey RA, Ferrier DR. Bioquímica. 6a. Wolters Kluwer; pag.61 20
INHIBICIÓN NO COMPETITIVA
Reducen la presión arterial Inhibe irreversiblemente la síntesis de
bloqueando la enzima que escinde la prostaglandina
angiotensina I para formar el potente
vasoconstrictor angiotensina II
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MAPA DE CONCEPTOS FUNDAMENTALES SOBRE LAS ENZIMAS
CATALISIS MODELOS DE REACCIÓN
Se estudia utilizando
QUE INDUCE
Competitivo
Clasificados en Ecuaciones Cinéticas
Suele verse influida por No Competitivo
Como los cambios en la
concentración del sustrato Que predice
Afectan la velocidad de la
reacción inicial
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