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ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL

AGUA
Determinación de la presencia de coliformes totales y termotolerantes muestra
de agua, mediante el método de filtro de membrana.
Autor 1: Castaño Tabarez Sofía, Autor 2: Chaves Suárez Sharon Juliana, Autor 3: Herrera Carlos Mario,
Autor 4: Vasquez Gallego Veronica
Facultad de Ciencias Ambientales, Universidad Tecnológica de Pereira, Colombia
[Link]@[Link] , [Link]@[Link] ,[Link]@[Link] ,
[Link]@[Link]
I. INTRODUCCIÓN infectante y la boca de una persona susceptible,
El presente informe, se realizó con el fin de causando un riesgo de salud importante [1].
aprender a caracterizar y determinar la presencia
de coliformes totales y termotolerantes en El análisis microbiológico del agua, tiene como
muestras de agua provenientes de diferentes objetivo determinar la presencia de
lugares (principalmente de grifos del campus de la microorganismos que puedan modificar sus
Universidad Tecnológica de Pereira), todo ello, características y puedan resultar dañinos para el
como medida de análisis del parámetro de ser humano. Entre las enfermedades más
caracterización microbiana en el agua. conocidas, cuyos agentes infecciosos pueden ser
transmitidos por el agua destacan las siguientes:
El agua es un recurso indispensable para la vida; fiebre tifoidea (Salmonella typhi), cólera (Vibrio
por tal ende, su tratamiento debe ser evaluado y cholera), infecciones del oído (Pseudomonas
controlado periódicamente para garantizar su aeruginosa), tularemia (Brucella tularensis), fiebre
calidad. La disponibilidad del agua apta para la paratifoidea (salmonella paratyphi), entre otros
preparación de alimentos, la higiene personal y [3].
doméstica, la agricultura y la producción de
energía, son fundamental para garantizar la salud La metodología utilizada es la filtración por
y el bienestar de los seres humanos y demás seres membrana es el mecanismo mediante el cual se
vivos que se abastecen de ella; por eso es atrapan en la superficie de la membrana
importante que la disponibilidad y uso de sistemas microorganismos cuyo tamaño es mayor que el
de abastecimiento de agua potable sean tamaño del poro 0.45 um, esto gracias a que una
adecuados, así como los medios higiénicos, los bomba eléctrica ejerce una presión diferencial
cuales constituyen partes integrales de la atención sobre la muestra de agua haciendo que se filtre.
primaria de salud, lo que ayuda a evitar o limitar Los contaminantes de tamaño menor que el
la propagación de muchas enfermedades específico del poro atraviesan la membrana o se
infecciosas, tanto en los seres humanos como en quedan retenidos en su interior, las bacterias
animales [1]. quedan en la superficie de la membrana y luego
está es llevada a un medio de enriquecimiento
La contaminación del agua con excretas ha sido, a selectivo [4].
través del tiempo, una de las principales
preocupaciones humanas, la falta de un II. MATERIALES Y
tratamiento adecuado de las mismas puede MÉTODOS
producir las llamadas enfermedades entéricas1, en
las que la infección se origina en el tubo digestivo La práctica de parámetros de caracterización
y los microorganismos causantes se eliminan por microbiana se llevó a cabo por el método de
las heces; es por esta razón que la infección filtración de membrana, el cual consistió primero
resulta del contacto directo entre material fecal en tomar una muestra de agua de diferentes partes
de la universidad tecnológica, la cual se dispuso
1 Infecciones entéricas son enfermedades bacterianas y
en un frasco el cual se encontraba esterilizado, es
parasitarias transmisibles de persona a persona y causadas por
agentes que penetran por vía oral, se desarrollan y multiplican decir sin presencia de bacterias, después se filtran
en alguna porción del tubo digestivo alterando los procesos 100 mL de la muestra en una bomba de vacío, con
fisiológicos, y se eliminan por las heces, las que constituyen su ayuda de un peler filtro de membrana de 0,45
principal medio de propagación [2].
2 Química Ambiental, facultad de Ciencias Ambientales, Universidad
Tecnológica de Pereira MMXIX.

micrómetros de diámetro de poro; el papel filtro

ayuda a que sólo pase el agua, y queden
retenidas la bacterias presentes en la muestra de
agua. con ayuda de unas pinzas flameadas
retiramos la membrana filtrante y la disponemos
sobre una placa petri, el cual contenía un gel
selectivo que sirvió como siembra, tapamos la
caja de petri e incubamos en una estufa a 37 °C
durante 24 horas. después de las 24 horas se
observan las formaciones de colonias y se
analizan los resultados de la siembra.

Imagen 2: Resultado microbiológico, muestra tomada:

baños niñas FACA.

Para la muestra tomada del agua de un grifo en el

baño de mujeres de la Facultad de Ciencias
ambientales de la UTP se determina la presencia
de colonias microbianas por característica
cualitativa, específicamente de color, como lo son
el rosado, en partes rojo y el blanco para este
cultivo en particular. Por consiguiente, se compara
con la imagen 3 para concretar el análisis
microbiano.

imagen 1: izquierda método de filtración por

membrana, derecha siembra de papel filtro (membrana)
en la caja de petri.

III. RESULTADOS Y
DISCUSIÓN
3

presentes en dicha agua o lugar, como lo son la

Imagen 3:Agar cromogénico para E. coli (colonias desinfección de las manos posterior al uso de los
azules -olas-) y demás coliformes (colonias rosas
baños, evitar el contacto con la boquilla del grifo
-surf-). Campylobacter y Shigella crecen con colonias
verdes (hierba) y otros Gram negativos con colonias pues puede ser acumulador de bacterias, y
crema (Pseudomonas -montañas-).2 realizar tratamiento del agua que alimenta los
lavamanos del baño de niñas en el primer piso de
Como se mencionó, nuestra muestra después del la FCA.
cultivo presenta color rosado y color crema que
son un indicativo gracias a la comparación con la Al momento de tomar la muestra hay que tener
imagen 3, indicando entonces la presencia de muchas precauciones se dan limitaciones para el
cepas bacterianas como coliformes y Gram análisis microbiológico, se refieren a posibles
negativos en el agua del baño de las mujeres en la falsos positivos o negativos, que se pueden
FCA (también pudo deberse a contaminación en presentar por las siguientes causas:
el perímetro donde se toma la muestra). Aspecto
importante a considerar, pues es uno de los
parámetros para la determinación de la calidad del ● Lavado de material ineficiente.
agua, que en este caso no resulta ser favorable ● Fallas en el proceso de esterilización de
debido a que en la resolución 2115 del 22 junio material.
de 2007 se establece un límite aceptable (ver ● Ambientes contaminados que afectan las
Imágen 4) para el caso de las coliformes según el muestras (grifo baño de niñas de la
método que se empleó en la práctica, de 0 en FACA).
100m3 que equivale a 100 ml, (volumen que ● Procedimientos inadecuados de la
corresponde a la muestra de agua en cuestión), se siembra.
muestra entonces que el cultivo pasó el límite de ● Fallas en la toma y transporte de la
colonia 0, a por lo menos 1 colonia de coliformes muestra etc.
fecales, poniendo en riesgo la salud humana.
Todos estos factores pueden influir en los
Así mismo, la presencia de Gram negativas, que resultados obtenidos, ya que si algo se encontraba
podrían representar en riesgo la salud de las contaminado, pudo alterar la muestra por lo tanto
mujeres usuarias de estos baños pues, muchas generar cambios en los resultados [6]
especies de estas bacterias ocasionan
enfermedades, como algunos cocos
gramnegativos causan la gonorrea (Neisseria Para poder conocer los límites microbiológicos en
gonorrhoeae), la meningitis (Neisseria una fuente hídrica debemos tener en cuenta la
meningitidis) y síntomas respiratorios (Moraxella Resolución número 2115 del 22 jun 2007;Por
catarrhalis), entre otros. Los bacilos medio de la cual se señalan características,
gramnegativos incluyen un gran número de instrumentos básicos y frecuencias del sistema de
especies. Algunos de ellos causan principalmente control y vigilancia para la calidad del agua para
enfermedades respiratorias (Haemophilus consumo humano. Las características
influenzae, Klebsiella pneumoniae , Legionella microbiológicas del agua para consumo humano
pneumophila, Pseudomonas aeruginosa), deben enmarcarse dentro de los siguientes valores
enfermedades urinarias (Escherichia coli, Proteus máximos aceptables desde el punto de vista
mirabilis, Enterobacter cloacae, Serratia microbiológico, los cuales son establecidos
marcescens) y enfermedades gastrointestinales teniendo en cuenta los límites de confianza del
(Helicobacter pylori, Salmonella enteritidis, 95% y para técnicas con habilidad de detección
Salmonella typhi). Otros están asociadas a desde 1 Unidad Formadora de Colonia (UFC) ó
infecciones nosocomiales (Acinetobacter 18 microorganismo en 100 cm3 de muestra.[7].
baumanii)[5].

Debido a la calidad regular y cuestionable de la

muestra, es preciso tomar algunas medidas al
respecto evitando la propagación o contagio de
alguna patología a raíz de los microorganismos

2Fuente: recurso de la docente.

4 Química Ambiental, facultad de Ciencias Ambientales, Universidad
Tecnológica de Pereira MMXIX.

tipo definición uso método

imagen 4: características microbiológicas.3
muestras son las que se Cuando la Se realiza un
simples toman en un composición muestreo
tiempo y lugar de una fuente puntual e
El análisis microbiológico de agua potable y agua determinado es individual en
cruda es de gran importancia para determinar la (análisis relativamente un recipiente,
calidad de la misma, la cual se define como el (por lo general individual) constante a considerando
a agua potable) través de un el o los
conjunto de caracteres biológicos que deben tiempo parámetros a
satisfacerse, con el fin de que el agua sea segura prolongado ensayar en el
para su uso final, entre los cuales están: agua laboratorio.
potable, agua embotellada, agua para uso agrícola,
agua de piscinas, agua para usos recreativos, entre muestras Son las Se emplean Se toman
compuestas obtenidas por para observar porciones
otras. La microbiología de aguas se basa en mezcla y las individuales
identificar si hay presencia de microorganismos homogeneizaci concentracione del cuerpo de
indicadores de calidad tales como: Coliformes ón de muestras s promedio, agua en
Totales , Coliformes Fecales, Escherichia coli, simples usadas para estudio en
recogidas en el calcular las botellas de
Pseudomonas aeruginosa, y recuento de Aerobios (por lo general mismo punto y respectivas boca ancha,
Mesófilos, de tal manera que basados en la a agua en diferentes cargas o la según el
normatividad vigente, se pueda dar un concepto residual) tiempos eficiencia de intervalo de
una PTAR. tiempo
de aceptabilidad, ya que estos pueden contraer
seleccionado
grandes tipos de enfermedades, se debe realizar un mezclandolas
monitoreo adecuado para garantizar la salubridad al final del
pública, determinando problemáticas y realizar periodo
soluciones para evitar brotes de enfermedades
muestras Son las Muestras de Se usa una
dentro de una población y ecosistema.[8] integradas obtenidas por ríos o mezcla de
mezcla y corrientes que muestras que
Debemos tener en cuenta para la realización del homogeneizaci varían en representen
análisis microbiano, la importancia de las ón de muestras composición a varios puntos
simples lo ancho y de la sección
diluciones ya que en la mayoría de los ambientes, (por lo general recogidas en profundo de su transversal en
la densidad microbiana suele ser demasiado a agua puntos cauce. relación a sus
elevada o baja para poder realizar una siembra superficial ) diferentes y flujos relativos
directa de la muestra de buenos resultados en la simultáneamen
te
enumeración de microorganismos. Esta situación
hace necesaria la dilución o la concentración de la Tabla 1: criterios para el muestreo microbiológico de
muestra previa a la realización de cualquier aguas [10]
estudio. Además, las muestras sólidas requieren su
dilución para facilitar la manipulación y permitir En el caso de análisis microbiológicos de aguas, la
trabajar con ellas como si fueran muestras muestra para analizar debe ser siempre simple, sin
líquidas.[9] que se puedan obtener muestras compuestas ni
integradas, de modo que la muestra para el
laboratorio sea la obtenida en el punto de
Para el muestreo microbiológico de aguas se muestreo.
deben tener en cuenta los siguientes criterios, ya
que dependiendo el tipo de agua, se hacen
métodos diferentes para la toma de muestras.

IV. CONCLUSIONES

Se es importante conocer las especies presentes en

3Fuente: Ministerio de la protección social la fuente hídrica que se es estudiada y el ambiente
ministerio de ambiente, vivienda y desarrollo en el cual se encuentra, para definir posibles
territorial.”características microbiológicas”
5

soluciones mediante técnicas, así erradicar las (2004). Recuperado de:

diferentes enfermedades que estas poseen. [Link]
script=sci_arttext&pid=S1315-
Teniendo en cuenta los resultados obtenidos, 25562004000100008&lng=es&nrm=iso&tlng=es
podemos deducir que, se le debe tener un mejor
manejo a el agua de el baño niñas FCA, debido a [2]. C. RISTORI “NOTIFICACIÓN DE LAS
los diferentes microorganismos encontrados ya INFECCIONES ENTÉRICAS” Servicio Nacional de
que esta agua es muchas veces consumida por el Salud de Chile (1993). Recuperado de:
estudiantado y podría contraer enfermedades y
[Link]
causar problemática, por otro lado se debería
[Link]
hacer un segundo análisis más detallado y con
más precaución por si en la toma de muestra
actual no se tomó los parámetros necesarios para [3]. D. Prieto S. “Análisis microbiológico de aguas
la naturales”
Universidad de Coruña (2017). Recuperado de:
Un resultado positivo fue que en esta muestra de [Link]
agua no se encontró la bacteria Escherichia Coli, 3/19635/PrietoSierra_Daniel_TFG_2017.pdf?
la cual afecta muy negativamente la salud de la sequence=2&isAllowed=y
población universitaria, tanto porque sus efectos
son deteriorantes, como porque su reproducción [4]. “DETERMINACIÓN DE ESCHERICHIA COLI Y
es rápida y por ende de fácil propagación. Del COLIFORMES TOTALES EN AGUA POR EL MÈTODO
mismo modo se cumple con la determinación de DE FILTRACIÒN POR MEMBRANA EN AGAR
la resolución 2115 del 22 junio de 2007 para CHROMOCULT” Instituto de Hidrología,
este parámetro. Meteorología y Estudios Ambientales (2007)
V. REFERENCIAS Recuperado de:
[Link]
155/Coliformes+totales+y+E.
[1]. Silva J., Ramírez L. et al. “Determinación de +coli+en+Agua+Filtraci
microorganismos indicadores de calidad sanitaria. %C3%B3n+por+[Link]/5414795c-370e-
Coliformes totales, coliformes fecales y aerobios 48ef-9818-ec54a0f01174
mesófilos en agua potable envasada y distribuida
en San Diego, estado Carabobo,
Venezuela” .Revista de la Sociedad Venezolana
de Microbiología versión impresa ISSN 1315-2556
Rev. Soc. Ven. Microbiol. v.24 n.1-2 Caracas

[5]. Wyithe E. “3D structures of proteins from +coli+en+Agua+Filtraci

inner membranes” gram-negative bacteria 2010. %C3%B3n+por+[Link]/5414795c-370e-
Recuperado de: 48ef-9818-ec54a0f01174
[Link]
localization=Bacterial%20gram-negative%20inner [7].Normativa :”RESOLUCIÓN NÚMERO 2115 ( 22
%20membran JUN 2007 )” Ministerio de la protección social
ministerio de ambiente, vivienda y desarrollo
[6]. M O Navarro, ” DETERMINACIÓN DE territorial.
ESCHERICHIA COLI Y COLIFORMES TOTALES EN
AGUA POR EL MÈTODO DE FILTRACIÒN POR
MEMBRANA EN AGAR CHROMOCULT” de:
recuperado de: [Link]
[Link] 52/a56345cd-f5f4-4309-89ad-2e7a61c83f93
155/Coliformes+totales+y+E.
[8]. “LABORATORIOS DEL DEPARTAMENTO DE
INGENIERÍA CIVIL Y AMBIENTAL REGLAMENTO
DEL SERVICIO” recuperado de :
6 Química Ambiental, facultad de Ciencias Ambientales, Universidad
Tecnológica de Pereira MMXIX.

[9] J. A. DONIS “IMPORTANCIA DE LA CALIDAD

FISICOQUÍMICA Y MICROBIOLÓGICA DEL AGUA”
Universidad de San Carlos de Guatemala, 2008
recuperdo de:
[Link]
a56345cd-f5f4-4309-89ad-2e7a61c83f93

[10] I. Arana, M. Orruño, I Barcina, “CÓMO

ABORDAR Y RESOLVER ASPECTOS PRÁCTICOS DE
MICROBIOLOGÍA” Departamento Inmunología,
Microbiología y Parasitología Universidad del País
Vasco/Euskal Herriko Unibertsitatea, Recuperado
de
:[Link]
urce/content/1/Tema_1._Diluciones_y_concentraci
[Link]