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Práctica 9

Este documento presenta los resultados de un estudio sobre la patogenicidad y virulencia de varias bacterias. Se realizaron pruebas de coagulasa, catalasa y hemólisis en bacterias como Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa y otras. Los resultados mostraron que S. aureus es coagulasa positiva, mientras que la mayoría de bacterias son catalasa positivas excepto S. pyogenes. También se observó hemólisis beta en P. aeruginosa y S. pyogenes.

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Práctica 9

Este documento presenta los resultados de un estudio sobre la patogenicidad y virulencia de varias bacterias. Se realizaron pruebas de coagulasa, catalasa y hemólisis en bacterias como Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa y otras. Los resultados mostraron que S. aureus es coagulasa positiva, mientras que la mayoría de bacterias son catalasa positivas excepto S. pyogenes. También se observó hemólisis beta en P. aeruginosa y S. pyogenes.

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Universidad Nacional

Autónoma de México.

Facultad de Estudios Superiores


Zaragoza.

Laboratorio de Microbiología General 1.

Práctica 9

Patogenicidad y virulencia.

Integrantes:
Bandera Bazán Wendy.
Juárez Jiménez Brenda Jaqueline.
Morales Sánchez Paola.

Asesora:
Carmen Camacho Venegas.

Grupo:
2652.
Equipo 3.

Fecha de entrega.
11 de marzo de 2020.

Objetivos
● Observar y comprender los mecanismos de patogenicidad y virulencia de un
grupo de bacterias.

Introducción
La comprensión de las interacciones entre un hospedero y un microorganismo es
esencial para la prevención y control eficaz de la mayoría de los procesos
infecciosos.
➢ Patogenia microbiana.
1. La patogenia microbiana es resultado de la interacción entre un hospedero y
un microorganismo.
2. El resultado patológico en el hospedero, debido a la interacción hospedero-
microorganismo, se determina por la cantidad de daño producida en el
hospedero.
3. El daño en el hospedero resulta de factores microbianos y de la respuesta
inmune del hospedero.

Un microorganismo patógeno es aquel que tiene la capacidad de causar


enfermedad en un individuo. Etimológicamente es correcto; sin embargo, excluye a
los microorganismos infecciosos que no causan signos clínicos aparentes.
Casadevall y Pirofski proponen la definición de microorganismo patógeno como
aquel con la capacidad de producir daño en un hospedero. Esta capacidad es la
patogenicidad. En este sentido, la virulencia de un microorganismo la definen como
la capacidad relativa de un microorganismo de causar daño en un hospedero. La
virulencia no puede ser considerada variable independiente, ya que sólo se expresa
en un hospedero susceptible. La virulencia microbiana resulta de la interacción entre
el hospedero y el microorganismo. Este último puede ser altamente virulento en un
hospedero susceptible, pero de baja virulencia en un hospedero inmunizado contra
ese microorganismo. Desde el punto de vista centrado en el patógeno dentro de la
patogenia microbiana, las características del microorganismo, de manera particular,
explican la virulencia. Sin embargo, en hospederos susceptibles se pueden observar
diferencias en la virulencia de microorganismos de una misma especie o cepa.
Estas diferencias se deben a la expresión de diferentes factores de virulencia, que
se definen como los componentes microbianos que pueden causar daño al
hospedero. Un gen microbiano que codifica para estos componentes se llama gen
de virulencia. El uso de una terminología más precisa en la patogenia microbiana y
en las enfermedades infecciosas favorece la comprensión de patogenicidad y
virulencia.

Para que un agente biológico pueda funcionar como parásito, es decir como
patógeno debe ser capaz de llevar a cabo las siguientes acciones:
1. Adherencia al hospedero.
2. Penetración en el hospedero.
3. Condiciones adecuadas en el hospedero.
4. Escape de los mecanismos de defensa en el hospedero.
5. Escape de la acción iatrogénica.
6. Producir daño en el hospedero.
Para poder sobrevivir y multiplicarse dentro de un hospedero, muchos
microorganismos producen una variedad de sustancias que les permiten evadir los
mecanismos de defensa de este; estas sustancias incluyen:
❏ Cápsulas y sustancias viscosas extracelulares: permiten a los
microorgaismos escapar de la fagocitocis al evitar la interaccion entre la
superfice celular bacteriana y la celula fagocitica.
❏ Proteínas y carbohidratos de superficie.
❏ Enzimas y toxinas: tienen efectos tóxicos o necrosantes directos en las
células inflamatorias del hospedero y en otros componentes del sistema
inmune.

Existen dos tipos de toxinas de origen bacteriano: endotoxinas y exotoxinas.


Las endotoxinas son moléculas que se encuentran frecuentemente entre las
paredes celulares de las gram negativas. Estas moléculas tienen como función
proteger a las bacterias de diversas amenazas. Una vez que la bacteria muere
libera estas endotoxinas al ambiente porque sus paredes celulares han sido
comprometidas. Estas moléculas son tóxicas (venenosas) para humanos y para
animales así como para otros organismos. Las endotoxinas son dañinas una vez
que la bacteria muere. Estas moléculas tóxicas pueden causar diarrea, vómitos,
fiebres y respuestas inflamatorias. Muchas endotoxinas se encuentran en forma de
lipopolisacárido (LPS), aunque hay otros tipos de moléculas también. Es posible
matar endotoxinas mediante calor seco y calor húmedo.
Las exotoxinas son diferentes de las endotoxinas. Una exotoxina es segregada por
una bacteria. La presencia de bacterias exotóxicas creará problemas a un huésped
cuando la bacteria está viva al contrario de una bacteria endotóxica. La bacteria
exotóxica también libera exotoxinas endógenas también por lisis. La mayor parte de
las exotoxinas pueden ser desactivadas por calentamiento. Un ejemplo de exotoxina
sería la toxina botulímica que procede del Clostridum botulinum.
Por desgracia para nosotros pero por suerte para algunas bacterias, las esporas se
pueden formar en condiciones ambientales adversas. A menudo éste es el caso de
ambientes secos. Las esporas bacterianas se llaman endoesporas porque en
realidad se forman en el interior de la célula bacteriana. Una endoespora bacteriana
puede sobrevivir a varias condiciones severas como el calor, la sequedad, la
radiación y los productos químicos. Otros organismos producen esporas, pero las
esporas bacterianas son generalmente más resistentes al calor y más difíciles de
desnaturalizar. La mayor resistencia al calor se esconde en la estructura íntima de
una endoespora.
● Prueba de la catalasa: La catalasa es una enzima que poseen la mayoría de
las bacterias aerobias. Descompone el peróxido de hidrógeno en agua y
oxígeno. El desprendimiento de burbujas procedentes del oxígeno indica que
la prueba es positiva.
● Prueba de la coagulasa: Es una enzima producida por un determinado
microorganismo capaz de coagular el plasma sanguíneo. Su aplicación
clínica más importante es la ayuda a la diferenciación del Staphylococcus
Aureus de otros Staphylococcus. Al poner en contacto el microorganismo
problema con plasma, si el microorganismo posee la enzima coagulasa, el
plasma coagule.
Resultados

TABLA 1. Prueba de coagulasa


Microorganismo Resultado

Ensayo en
tubo

Staphylococcus aureus en
plasma

TABLA 2. Prueba de catalasa


Microorganismo Resultado

Streptococcus -
pyogenes

Bacillus subtilis +

Klebsiella pneumoniae +

Pseudomonas +
aeruginosa

Salmonella typhi +

Corynebacterium equi +

Staphylococcus aureus +

Escherichia coli +

Proteus vulgaris +

Micrococcus +
lysodeikticus

Tabla 3. Prueba de hemolisinas.


Microorganismo Tipo de hemólisis

Pseudomona aeruginosa β hemólisis

Streptococcus pyogenes β hemólisis

Análisis de resultados.

Prueba de la coagulasa

Staphylococcus aureus presenta la capacidad de coagular el plasma debido a la


presencia de la enzima estafilocoagulasa.

La prueba de coagulasa en tubo permitió identificar la coagulasa libre, la cual es una


proteína extracelular, que se encuentra presente en los filtrados de cultivos, la
misma reacciona con el factor reactivo de la coagulasa (FRC) presente en el
plasma, para formar una sustancia similar a la trombina, un complejo coagulasa-
FCR que actúa indirectamente en la conversión del fibrinógeno en fibrina.

Prueba de la catalasa

El peróxido de hidrógeno (H 2O2) es el producto de un proceso oxidativo que permite


degradación aerobia de los azúcares en las bacterias. Sin embargo, la acomulacion
de éste puede causar su muerte.

La actividad de la catalasa permite degradar las moléculas de H 2O2 obteniendo


como productos agua y oxígeno.

La mayoría de las bacterias del cepario dieron positivo a esta prueba, como parte de
su mecanismo de defensa.

Prueba de hemolisinas

Con esta prueba se evaluó Streptococcus pyogenes la presencia de toxinas


capaces de realizar la lisis de la membrana de los eritrocitos. La hemólisis
observada sobre la placa de agar (sembrado por estría) fue causada por
estreptolisinas S que son estables en atmósferas con oxígeno. En la siembra por
picadura, se observa hemólisis por estreptolisinas O, que también causan hemólisis
beta pero en condiciones anaerobia.

En Pseudomona aeruginosa no se realizó siembra por punción, por lo que sólo se


puede concluir que presentó hemólisis beta.

Conclusión.
De acuerdo a la teoría encontrada en libros y en el manual del laboratorio, en su
mayoría las bacterias dentro de las cepas del equipo, son aerobias o bien catalasa
positiva, con excepción de Streptococcus pyogenes ya que al colocar la bacteria en
el agua oxigenada esta no burbujeo, respuesta a una catalasa negativa.
Asimismo, se pudo comprobar que la bacteria Staphylococcus aureus, posee la
enzima coagulasa.

Referencias bibliográficas.
❖ Salgado-Miranda C, Soriano VE. Conceptos básicos en la patogenia del virus
de la necrosis pancreática infecciosa. Bol Prog Nac Sanid Acu Red Diagn
2004; 4:10- 11.
❖ Pelczar M, Reid R, Chan E. Microbiología, 4a ed. México: Mc Graw-Hill,1982.
❖ Farmacopea Argentina (Volumen III), séptima edición

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