El DNA es el material hereditario I.
Transformación y agente transformante en bacterias
Variantes genéticas de Streptococcus pneumoniae
Estirpe S Las células de la estirpe S tienen Las células de la estirpe R no
Alrededor de 1920 se conocían una cápsula (polisacáridos) que las Estirpe R
dos variantes genéticas tienen la cápsula presente en
proteje de los mecanismos de las células S. En cultivo in
(estirpes) de la bacteria defensa de los animales infectados.
Streptococcus pneumoniae . vitro, forman colonias con
En cultivo in vitro, forman colonias aspecto rugoso (rough)
con aspecto liso (smooth)
Descubrimiento de la transformación en bacterias (Griffith, 1928)
A finales de los años 20, Griffith realizó los siguientes experimentos con Streptococcus pneumoniae que le llevaron al descubrimiento de la
transformación en bacterias
El ratón muere
Estirpe R
Estirpe S El ratón
Inyección sobrevive
Inyección
1.- Al inyectar a un ratón células de la estirpe S, el ratón muere de 2.- Al inyectar a un ratón células de la estirpe R, el ratón sobrevive.
neumonía (y se recuperan células S vivas del cadáver). Esto indica Esto indica que la cepa R es "no virulenta" (las defensas
que la cepa S es "virulenta". inmunológicas del ratón vencen a la bacteria).
Algunos años mas tarde se desarrollaron técnicas para
llevar a cabo experimentos de transformación in vitro que
permitieron confirmar la existencia de la transformación y
Inyección El ratón sobrevive conocer el proceso con más detalle (competencia,
frecuencia de transformación, etc.)
Estirpe S
Lisis
+ extracto sin células
3.- Al inyectar a un ratón células de la estirpe S tratadas con calor, el ratón (contiene el agente
precipitación
sobrevive. Obviamente, las células S murieron con el calor. transformante)
Estirpe S
El ratón muere
Estirpe R Adición del extracto al medio en el
que crecen células de la estirpe R
Del cadáver se
Inyección aislan células de
la estirpe S vivas
transformación
Estirpe R
Algunas células de la estirpe R
Estirpe S células R vivas adquieren la capacidad de formar
+ Estirpe S
células S muertas cápsula (se transforman en células
de la estirpe S)
4.- Al inyectar a un ratón con una mezcla de células de la estirpe R vivas y No todas las especies bacterianas se pueden transformar
células de la estirpe S muertas con calor, el ratón muere de neumonía (y se de manera "natural" como ocurre con Streptococcus
recuperan células S vivas del cadáver). Conclusión: células de la estirpe R se pneumoniae. Por ejemplo, E. Coli no puede hacerlo
transformaron en células de la estirpe S (convirtiéndose en células "virulentas"), (aunque se conocen varios sistemas "artificiales" para
por la acción de un "agente transformante" presente en las células S muertas. conseguir transformación en E. coli de forma muy eficaz)
El agente transformante es el DNA (Avery, MacLeod & McCarty, 1944; Hotchkiss, 1949)
Avery, MacLeod y McCarty fraccionaron el extracto obtenido de las células S, eliminando las proteínas, los lípidos, los polisacáridos, y el RNA
sin observar disminución de la capacidad de transformación en ningún caso. El DNA purificado, por sí solo, mostró una elevada capacidad de
transformación.
Hotchkiss demostró que la transformación es posible para otros caracteres
Lisis que no tienen que ver con la formación de la cápsula.
+ extracto
precipitación
Estirpe S
aislamiento
Aislamiento de DNA de DNA DNA
Estirpe S resistente
a la penicilina (Penr)
DNA de la
estirpe S Adición del DNA al medio en el
Adición del DNA al medio en que crecen células de la estirpe R
el que crecen células de la - Células Penr sin cápsula (estirpe R)
estirpe R
- Células Pens con cápsula (estirpe S)
transformación
transformación Estirpe R susceptible
a la penicilina (Pens) - Células Penr con cápsula (estirpe S)
Estirpe R
Conclusión: El "agente transformante" es el DNA. El DNA es capaz de producir transformación para cualquier carácter heredable, por tanto,
el DNA es el material hereditario ( más sobre la transformación ).
© Ramón Giráldez