ASIGNATURA: ANÁLISIS INSTRUMENTAL DEPARTAMENTO DE
CIENCIAS QUÍMICAS SECCIÓN DE QUÍMICA ANALÍTICA INFORME DE
LABORATORIO PRÁCTICA No. 2 Determinación de Ácido ascórbico en
tabletas efervescentes.
GRUPO: 1501 FECHA DE ENTREGA: 28 Agosto 2019 CARRERA:
Bioquímica Diagnóstica
INTEGRANTES:
Bobadilla López Indira Alejandra
Carmona Hernández Luis Gabriel
Cuevas Nava Sharmell
Godínez Álvarez Alan Rodrigo
Nava Lira Jose Eduardo
NO. EQUIPO: 3 CALIFICACIÓN:
OBJETIVO GENERAL:
Cuantificar ácido ascórbico en tabletas efervescentes mediante una curva de
calibración indirecta bajo condiciones químicas optimizadas identificando la sustancia
que da la absorbancia al pH de trabajo, mediante su espectro de absorción y la
reacción química establecida.
Objetivos particulares.
1.- Registro de los datos experimentales del Espectro de Absorción, gráficas
de los Espectros de Absorción del 2,6-DFI en función de Absorbancia y %
Transmitancia e identificación de la λóptima.
NO SE HIZO
2.- Diagrama de flujo de la preparación del Stock de Ácido ascórbico a partir del
Reactivo STD. DIBUJAR EN LA PARTE DE ATRÁS DE ESTA PÁGINA.
3.- Cálculo de la concentración del STD de Ácido ascórbico para la preparación de
los sistemas de la Curva de calibración:
Masa de reactivo del STD Ac. Ascórbico real pesada: 20 mg
Especificaciones:
Masa molecular: 176.12 gr/mol
% Pureza: 100%
Cálculo de la concentración molar de la
solución A:
1 𝑔𝑟 1 𝑚𝑜𝑙 1.1355 𝑥 10−4 𝑚𝑜𝑙
Concentración A = 20 mg ( )( )= ( ) = 0.01135 M
1000𝑚𝑔 176.12 𝑔𝑟 0.01𝐿
Cálculo de la concentración molar de la solución B stock:
0.01135 𝑚𝑜𝑙 2.27 𝑥 10−5 𝑚𝑜𝑙
Concentración B = 2 x 10-3 L ( )=( ) = 2.27 x 10 -4 M
𝐿 0.1𝐿
4.- Cálculo de las concentraciones de los sistemas de la Curva de calibración, a
partir de la concentración calculada en el inciso anterior: Tabla No. 2.- Datos de la
Curva de Calibración
Sistema Concentración Absorbancia
Ac. ascórbico [M]
1 0 1.286
2 2.27 x 10 -5M 1.172
3 4.54 x 10 -5M 1.054
4 6.81 x 10 -5M 0.925
5 9.08 x 10 -5M 0.794
6 1.135x 10 -4M 0.697
Cálculos
2.27 𝑥 10−4 𝑚𝑜𝑙 2.27 𝑥 10−7 𝑚𝑜𝑙
[Molar de sistema 2]= 0.001 L ( )=( ) = 2.27 x 10 -5M
1𝐿 0.01𝐿
2.27 𝑥 10−4 𝑚𝑜𝑙 4.54 𝑥 10−7 𝑚𝑜𝑙
[Molar de sistema 3]= 0.002 L ( )=( ) = 4.54 x 10 -5M
1𝐿 0.01𝐿
2.27 𝑥 10−4 𝑚𝑜𝑙 6.81 𝑥 10−7 𝑚𝑜𝑙
[Molar de sistema 4]= 0.003 L ( )=( ) = 6.81 x 10 -5M
1𝐿 0.01𝐿
2.27 𝑥 10−4 𝑚𝑜𝑙 9.08 𝑥 10−7 𝑚𝑜𝑙
[Molar de sistema 5]= 0.004 L ( )=( ) = 9.08 x 10 -5M
1𝐿 0.01𝐿
2.27 𝑥 10−4 𝑚𝑜𝑙 1.135 𝑥 10−6 𝑚𝑜𝑙
[Molar de sistema 6]= 0.005 L ( )=( ) = 1.13 x 10 -4M
1𝐿 0.01𝐿
¿Se realizó una modificación en la preparación de los sistemas de la
Curva de calibración? Indicarlo: Ninguna
5.- Cálculo del Coeficiente de Absortividad Molar (e; M-1 cm-1 ) a partir
de la Gráfica No. 1 o 2.
¿A qué especie química corresponde el e calculado?
6.- Cálculo de K de cada sistema de la Curva, a partir de los datos
calculados en la Tabla No. 2, y su análisis estadístico:
Tabla No. 3.- Estadística de los datos de la Curva de calibración.
Sistema K = Abs / C K prom DE CV %
1 0
17219.035 16952.53 98.45 %
2 51629.95
3 23215.85
4 13582.96
5 8744.49
6 6140.96
Cálculos
1.286
[Sistema 1 ]= (0∗2.27 𝑥 10 −5𝑀) =0
1.172
[Sistema 2]= (2.27 𝑥 10 −5𝑀) = 51629.95
1.054
[Sistema 3]= (4.54 𝑥 10 −5𝑀) = 23215.85
0.925
[Sistema 4]= (6.81 𝑥 10 −5𝑀) = 13582.96
0.794
[Sistema 5]= (9.08 𝑥 10 −5𝑀) = 8744.49
0.697
[Sistema 6]= (1.13 𝑥 10 −4𝑀) = 6168.14
7.- Gráfica de los Sistemas de la Curva de calibración (Abs=f(C Ácido
ascórbico STD) y su regresión lineal
Regresión lineal:
b=-5296.41
m=1.2885
r2=0.998
Ecuación: Absorbancia = -5296.41*[Concentración] + 1.2885
[Concentración]=(Absorbancia-1.2885)/-5296.41
8.- Datos del Producto farmacéutico empleado y obtención del peso promedio
por tableta:
Tabla No. 4.- Datos de fabricante del producto farmacéutico.
Nombre comercial Ácido Ascórbico
Presentación Tabletas efervescentes
Lote y fecha de caducidad u origen NOK 211/ Febrero 2021
Marbete 1000 mg
Tabla No. 5.- Estadística de los datos para la obtención del peso promedio por
tableta.
Tabletas Masa (M) M prom DE CV % Análisis
1 4.58gr 4.5448 0.0265 0.5830% de acuerdo
con los
2 4.513 datos de las
tabletas; el
peso es
3 4.562 constante y
semejante
4 4.554 entre ellas,
5 4.515
9.- Diagrama de flujo de la preparación del sistema problema, incluyendo las diluciones
realizadas a partir de la muestra de polvo de tableta descrita en el inciso anterior. DIBUJAR
EN LA PARTE DE ATRÁS DE ESTA PÁGINA.
Semestre 2020-1 4
PRÁCTICA No. 2 Determinación de Ácido ascórbico en tabletas
efervescentes
Absorbancia experimental obtenida del Sistema problema:
P1=1.128 P=0.936
10.- Interpolación de la Absorbancia del sistema problema en la Ecuación de la Curva de
calibración escrita en el inciso 7:
[Concentración]=(Absorbancia-1.2885)/-5296.41
[Concentración P1]=(Abs1-1.2885)/-5296.41
[Concentración P1]=3.03x10-5M
[Concentración P2]=(Absorbancia+5313.59)/1.289
[Concentración P2]=(Abs2-1.2885)/-5296.41
[Concentración P2]=6.65x10-5M
11.- Cálculo de los gramos de Ácido ascórbico por tableta en la muestra farmacéutica,
utilizando las diluciones realizadas:
C1V1=C2V2
P1
(C1)(0.5ml)= (3.03x10-5 M) (10ml)
C1=(3.03x10-5M×10ml)/0.5ml
C1=6.06x10-4M
(Cdis)(2ml)= (6.06x10-4M) (10ml)
(Cdis)= (6.06x10-4M) (10ml)/2ml
(Cdis)=3.03x10-3M
10ml (3.03x10-3mmol/ 1ml) (176.12mg HAsc/ 1mmol HAsc)= 5.336436 mg HAsc
5.336436 mg HAsc están en 20 MG de tableta y una tableta pesa 4560 mg
5.3364mg HAsc--------20mg tableta
X--------4560mg tableta
X=1216.7074mg HAsc ó 1.2167 g.
P2
(C1)(1ml)= (6.65x10-5 M) (10ml)
C1=(3.03x10-5M×10ml)/0.5ml
C1=6.65x10-4M
(Cdis)(2ml)= (6.65x10-4M) (10ml)
(Cdis)= (6.65x10-4M) (10ml)/2ml
(Cdis)=3.325x10-3M
10ml (3.325x10-3mmol/ 1ml) (176.12mg HAsc/ 1mmol HAsc)= 5.8559 mg HAsc
5.8559mg HAsc están en 20 MG de tableta y una tableta pesa 4560 mg
5.8559mg HAsc--------20mg tableta
X--------4560mg tableta
X=1361.4967mg HAsc ó 1.3614 g
Promedio= (1.3614+1.2167)/2=1.28905g
12.- Cálculo del % de principio activo con respecto al Marbete:
(1.2167 g./4.56 g)*100= 26.68% de principio activo para P1
(1.3614g/4.56g)*100=29.85% de principio activo para P2
(1.28905/4.56g)*100=28.26 de principio activo promediado
¿Es aceptable? ¿Porqué?
No por qué el marbete reporta que cada tableta contiene un gramo de principio activo y al
realizar los cálculos obtuvimos una masa de 1.2167 g en el P1 y 1.3614 en el P2. Se cree
que durante la cuanificacion hubo errores experimentales por los cuales la cantidad
cuantificada es mayor a la reportada en el marbete; por lo tanto se recomienda antar todos
los valores obtenidos, mdificaciones realizadas, como tambien calibración del
espectrofotometro.
13.- Cálculo de las condiciones de amortiguamiento:
pH= 4.5
3𝑚𝑙 (0.01𝑀)
pAcO= -log ( ) = 2.52
10𝑚𝑙
14.- Reacción Química Representativa a las condiciones de amortiguamiento
impuestas llevada a cabo en los sistemas de la Curva de calibración:
2,4-DFI´´ +Ác. ascorbico´´ ↔Ác. dehidroascorbico´´+2,6-DFI´´
15.- Cálculo de la Keq’’ a las condiciones de amortiguamiento impuestas:
2 (0.43−0.13)
Keq‘’= 10 e ( ) = 10 10
0.06
16.- Con base a la siguiente tabla de las subregiones del Visible, del valor de pKa del
2,6-DFI y de las condiciones de amortiguamiento impuestas en los sistemas de la
Curva de calibración, justificar el intervalo de λ empleado para realizar el barrido:
pKa del 2.6-DFI = 5.758 (rojo, azul). Tabla No. 5.- Color absorbido y complementario
de la región VISIBLE.
λmáx (nm) Color absorbido Color observado Análisis
380 a 420 Violeta Amarillo verdoso 420 a
440 Azul violáceo Amarillo 440 a 470
Azul Naranja 470 a 500 Verde azulado
Rojo 500 a 520 Verde Púrpura 520 a 550
Verde amarillento Violeta 550 a 580
Amarillo Azul violáceo 580 a 620 Naranja
Azul 620 a 680 Rojo Verde azulado 680 a
780 Púrpura Verde
El rango de longitud de onda seleccionado dependia de la coloración que del 2,6-DFI, en el
medio en que se encontraba y el pH. Debido a que las condiciones antes mencionadas
produce que el 2,6-DFI generara una coloración roja-violeta; por ellos orientándose en la
tabla anterior en la columna de los colores observados se busco el intervalo desde rojo hasta
el violeta, por ello el intervalo de barrido desde 460nm hasta 560nm
17.- Con base a la relación de la variables involucradas con respecto a la Ley de
Lambert & Beer, calcular el valor del ε (M-1cm-1) a partir de la ecuación de la curva
descrita en el inciso 7, y compararla con el valor del ε obtenida a partir del Espectro
de absorción. Concluir cuál de las 2 es más confiable.
Para a calcular epsilon (absortividad molar) se obtiene una regresión lineal de la curva de
calibración 514 nm siendo la siguiente:
Y=1.2885x -5296.41
Por lo tanto de acuerdo a la ley de Lambert y beer, epsilon es igual a la pendiente de la recta
en donde:
A= 514 nm , ɛ= 1.2885 L mol-1 cm-1
18.- Conclusiones generales:
No se pudo cuantificar con exactitud el ácido ascórbico en tabletas efervescentes debido a
errores cometidos experimentalmente, además que el cálculo experimental sobrepasaba el
reportado en el marbete.
19.- Referencias bibliográficas adicionales empleadas:
Hernández, L. (2002). Introduccion al analisis instrumental. España: Ariel.
Canavos, G. (1988) Probabilidad y Estadística. Aplicaciones y Métodos. México: McGraw-
Hill.
Skoog, A. (2008). Principios de análisis instrumental.(6). España: Cengage Learning
