PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA DEL
ECUADOR
FACULTAD DE MEDICINA
CARRERA DE BIOQUÍMICA CLÍNICA
CATEDRA DE HEMATOLOGÍA
TEMA: FUNCIONAMIENTO DE CIERTAS
PRUEBAS EN EL EQUIPO AUTOMATIZADO
DE SEXTA GENERACIÓN.
AUTOR(S): TANIA PINARGOTE, EMILIA
GRANJA Y DAVID FLORES
GRUPO: 2
PROFESOR: Mtr. MARCELA ALEXANDRA
MARDONES MONTANARES
QUITO, MAYO 2019
ÍNDICE
TABLA DE CONTENIDO.......................................................................................................... 3
INTRODUCCIÓN ........................................................................................................................ 4
DESARROLLO DEL TEMA ..................................................................................................... 5
ANALIZAR LAS DIFERENTES PRUEBAS EXISTENTES EN EL EQUIPO
AUTOMATIZADO DE SEXTA GENERACIÓN INCLUYENDO HPC Y P-LCC ............. 6
Medición de NRBC ............................................................................................................. 8
Conteo de plaquetas por fluorescencia óptica (PLT-O) ............................................... 8
Medición de reticulocitos por fluorescencia (Retic) ....................................................... 8
Medición del equivalente de hemoglobina de los reticulocitos (RET-He) ................. 8
Medición de la fracción de plaquetas inmaduras por fluorescencia (IPF) ................. 9
Medición de células progenitoras hematopoyéticas (HPC) ......................................... 9
DIFERENCIAR LOS FALSOS QUE PUEDE PRODUCIR EL EQUIPO
AUTOMATIZADO EN CIERTOS ESTADOS DEL PACIENTE........................................ 9
Limitaciones de glóbulos blancos: ........................................................................... 10
¿POR QUÉ SE DAN ERRORES EN LOS EQUIPOS AUTOMATIZADOS, SI CON
LOS CONTROLES QUE SE REALIZAN DIARIAMENTE ME INDICA QUE
FUNCIONA CORRECTAMENTE? .................................................................................... 12
Control de calidad interno: .......................................................................................... 12
Control de calidad externo: ......................................................................................... 12
Gráficos de control de calidad: .................................................................................. 13
CONCLUSIONES..................................................................................................................... 14
BIBLIOGRAFÍA ........................................................................................................................ 14
2
TABLA DE CONTENIDO
1. FUNCIONAMIENTO DE CIERTAS PRUEBAS EN EL EQUIPO
AUTOMATIZADO DE SEXTA GENERACIÓN
1.1 ANALIZAR LAS DIFERENTES PRUEBAS EXISTENTES
EN EL EQUIPO AUTOMATIZADO DE SEXTA
GENERACIÓN INCLUYENDO HPC Y P-LCC
1.2 DIFERENCIAR LOS FALSOS QUE PUEDE PRODUCIR EL
EQUIPO AUTOMATIZADO EN CIERTOS ESTADOS DEL
PACIENTE
1.3 POR QUÉ SE DAN ERRORES EN LOS EQUIPOS
AUTOMATIZADOS, SI CON LOS CONTROLES QUE SE
REALIZAN DIARIAMENTE ME INDICA QUE FUNCIONA
CORRECTAMENTE.
3
INTRODUCCIÓN
En las prácticas de los laboratorios hematológicos, están altamente relacionados
con las observaciones, identificación de diferentes tipos celulares y la
interpretación de las características estructurales de las células sanguíneas. La
aplicación de los equipos automatizados para el análisis, creó un aumento en el
proceso multidisciplinario y en la realización de un mayor número de
determinaciones en menor tiempo, aumentando mayormente la calidad de los
análisis en cuanto a precisión y exactitud a un número de cifras nunca antes visto
mediante la realización de un trabajo manual, esto en gran parte ayudó
significativamente a la disminución de los costos y al acortamiento del tiempo de
entrega de los resultados analizados a los cliente.
La hematología, se expresa como un principal e importante campo laboral para
el laboratorio clínico, la automatización de este ayudó a incrementar las
potencialidades diagnósticas con el pronto surgimiento y perfeccionamiento de
diferentes contadores o analizadores hematológicos. (Fink, 2005)
Muchas de los análisis en el campo hematológico conciernen variables
importantes como son la identificación de diferentes tipos celulares y la
interpretación de la composición de estas, centrándonos en esta investigación
principalmente en los glóbulos blancos y en relación con esto los métodos
automatizados en el análisis hematológico, con el analizador Medonic M32 y XE-
5000 que permite la realización de pruebas rápidas y eficientes, también existe
la facilidad de obtener varios parámetros de hemograma completo de una sola
gota de sangre en menos tiempo. (Medonic, 2019)
4
DESARROLLO DEL TEMA
Para los procedimientos hematológicos, antiguamente, fueron usados los
contadores automáticos de células utilizando el modelo como primer contador
Coulter modelo A.1-4 que constituyó un avance importante, aunque solo era
capaz de realizar conteos electrónicos globales de eritrocitos y mucho menos
satisfactorios de leucocitos; no obstante, estos avances marcaron una ruta
importante para la innovación y perfeccionamiento de varias generaciones en
equipos automatizados.
“El surgimiento y desarrollo de los programas informáticos, los ordenadores, la
robotización, la mecanización y diversos métodos de detección, entre otras
tecnologías, han contribuido al aumento de las potencialidades de estos equipos”.
(Hernández, 2013)
En la actualidad, los contadores automatizados hematológicos han incrementado
la capacidad de análisis y mayor productividad en el procesamiento de las
muestras, de esta manera se han convertido en un poderoso potencial como
herramienta en el diagnóstico, pronóstico y terapias de los trastornos
hematológicos. No obstante, todos los equipos proponen un diseño electrónico
y mecánico similar.
5
ANALIZAR LAS DIFERENTES PRUEBAS EXISTENTES EN EL EQUIPO
AUTOMATIZADO DE SEXTA GENERACIÓN INCLUYENDO HPC Y P-LCC
Los laboratorios continúan enfrentando numerosos desafíos incluyendo temas
clínicos, operacionales y financieros tales como la demanda de información
relevante, la necesidad de la confiabilidad en un mejor y menor tiempo de
respuesta de análisis en presupuestos limitados.
Aún con los desafíos propuestos, la necesidad de realizar análisis hematológicos
continúa aumentando. Los laboratorios necesitan la utilización de analizadores
de hematología que aumenten la productividad y eficiencia mientras suministran
información clínica confiable.
Parámetros M-series M32
Glóbulos rojos
Hemoglobina
VCM
Hematocrito
HCM
CHCM
Plaquetas
VPM
% Distribución de Glóbulos Rojos
Distribución de Glóbulos Rojos
Glóbulos blancos
% Linfocitos
Linfocitos
% Monocitos
Monocitos
% Granulocitos
Granulocitos
Distribución de Plaquetas
Plaquetocrito
Conteo de plaquetas grandes
Tabla 1.1 Parámetros que puede evaluar Medonic M-series M32
6
El sistema M-Series M32 es un analizador hematológico automatizado para la
realización del diagnóstico in vitro en laboratorio, es utilizado para el recuento de
glóbulos blancos (WBC); el número absoluto y el porcentaje de concentración de
granulocitos (GRAN), linfocitos (LYM), glóbulos blancos medianos (MID);
glóbulos rojos (RBC); hemoglobina (HGB); volumen celular medio de glóbulos
rojos (MCV); hematocrito (HCT); hemoglobina celular media (MCH);
concentración de hemoglobina celular media (MCHC); anchos absoluto y relativo
de distribución de glóbulos rojos (RDW%, RDWa); plaquetas (PLT); volumen de
plaquetas medio (MPV), plaquetocritos (PCT), anchos absoluto y relativo de
distribución de plaquetas (PDW%, PDWa) y relación y concentración de
plaquetas grandes (P-LCR, P-LCC) en muestra de sangre total anticoaguladas
en EDTA-K2 y EDTA-K3. (MEDONIC, 2017)
Los valores de concentración de RBC y WBC son determinados mediante el
recuento de células de las diluciones de sangre total, para la medición de
glóbulos blancos necesita un porcentaje de dilución y en la cantidad de células.
Los límites normales del tiempo de recuento para las unidades de medición de
RBC y WBC se sitúan entre 21-30 segundos y 10-13 segundos respectivamente.
Si el tiempo de recuento es inferior o superior a los límites anteriores, se
mostrarán los indicadores ST, TL y TU. Las variaciones en la presión atmosférica,
la acumulación de proteína dentro del orificio y otros efectos secundarios que
pueden causar cambios de presión NO influyen en los parámetros de glóbulos
rojos, plaquetas y glóbulos blancos (RBC, PLT y WBC) contabilizados.
(MEDONIC, 2017)
Parámetros XE-5000
NRBC
PLT-O
Retic
RET-He
IPF
HPC
Tabla 1.2 Parámetros que puede evaluar XE-5000
7
“El modelo automatizado de hematología XE-5000 de Sysmex utiliza el poder de
las tecnologías de citometría de flujo fluorescente y enfoque hidrodinámico,
donde la citometría de flujo fluorescente de Sysmex proporciona la sensibilidad
necesaria para medir y diferenciar tipos celulares en muestras de sangre total y
de fluidos corporales”. (SYSMEX, 2019)
La tecnología de fluorescencia como también el enfoque hidrodinámico permiten
que el XE-5000 diferencie las poblaciones normales de leucocitos, eritrocitos y
plaquetas de las anormales, y por esto, consecuentemente disminuye la
intervención manual.
Medición de NRBC
Tiene mejor sensibilidad y ayuda en el reporte rápido que ayuda en el
diagnóstico para el paciente para proseguir a tomar decisiones del
tratamiento que debe seguir
Proporciona la corrección automática de los resultados de leucocitos y su
diferencial disminuyendo la tasa de falsos negativos y positivos con la mejora
de que ayuda fácilmente en la separación de leucocitos y eritroblastos
Conteo de plaquetas por fluorescencia óptica (PLT-O)
Permite el conteo bajo de plaquetas con exactitud mejorada y cuando se
presentan interferencias, proporcionando la reducción de la intervención
manual
Automatización del reporte de PLT-O o PLT-I basado en algoritmos
Medición de reticulocitos por fluorescencia (Retic)
En la evaluación de reticulocitos, el conteo por fluorescente proporciona la
evaluación en base a un canal exclusivo
Medición del equivalente de hemoglobina de los reticulocitos (RET-He)
Proporciona el recuento exacto de reticulocitos en porcentaje y número,
dando la información de la fracción de reticulocitos inmaduros que a realizar
un diagnóstico de forma temprana.
8
Mide en el canal de reticulocitos para medir la incorporación de hierro a la
hemoglobina del eritrocito.
Análisis rápido y directo en la etapa temprana del desarrollo de los eritrocitos
para el correcto seguimiento clínico temprano y evaluación de anemia para
evaluar el estado inicial de hierro
Exactitud y sensibilidad en la medición de la producción de eritrocitos, lo que
permite protocolos de uso de medicamentos costosos empleados para la
estimulación celular
Medición de la fracción de plaquetas inmaduras por fluorescencia (IPF)
La fracción de plaquetas inmaduras (IPF%) es un parámetro usado para
evaluar la trombopoyesis con exactitud y sensibilidad
Reporte mucho más rápido de los resultados, ayudando en la entrega de
información oportuna que pueda ayudar a evitar potencialmente
procedimientos invasivos y costosos
Medición de células progenitoras hematopoyéticas (HPC)
Utilizado para determinar el tiempo óptimo de cosecha celular, siendo
equivalente a las unidades formadoras de colonias y al CD34+.
A partir de muestras de sangre periférica o sangre de cordón umbilical
proporciona información de calidad para la diferenciación y evaluación de los
protocolos de tratamiento para el paciente
Reducción de costos debido a que no se requiere reactivos adicionales,
volúmenes de muestra adicionales o una habilidad técnica específica
DIFERENCIAR LOS FALSOS QUE PUEDE PRODUCIR EL EQUIPO
AUTOMATIZADO EN CIERTOS ESTADOS DEL PACIENTE
El analizador Medonic M32 ofrece una amplia variedad de entradas de muestreo:
tubo abierto (OT), pre dilución (PD), perforación de tapones, muestreador
automático y micro pipeta (MPA). El método de MPA, basado en una muestra
simple de punción con el dedo tomada directamente del paciente, se usa
ampliamente con el analizador de hematología Medonic M32 en la actualidad.
9
Existen ciertas limitaciones al utilizar este equipo automatizado, nos centraremos
en los posibles errores para análisis de glóbulos blancos. (MEDONIC, 2015)
Limitaciones de glóbulos blancos:
La medición de los niveles altos de glóbulos blancos está influenciada por
factores de coincidencia, por ejemplo, el conteo de dos celdas como una que
puede producir resultados falsamente bajos. El instrumento es compensado por
este efecto mediante un algoritmo para producir un rango de linealidad de
acuerdo con las especificaciones. (MEDONIC, 2017)
Leucocitosis
Los glóbulos blancos en concentraciones que exceden los límites de linealidad
del sistema requerirán la dilución de la muestra de sangre. Volver a analizar la
muestra diluida ayudará a obtener el valor de ensayo correcto.
Células de sangre rojas nucleadas (NRBC)
Los glóbulos rojos nucleados, inmaduros, son grandes y no están lisados como
los glóbulos rojos maduros, por lo que se clasificarán como glóbulos blancos y
pueden provocar resultados de linfocitos y glóbulos rojos falsamente elevados.
(Nipro Corporation, 2018)
Células de sangre rojas no espiradas
En casos particularmente raros, los glóbulos rojos en la muestra de sangre
pueden no lisarse completamente como se esperaba. Estas células no lisadas
pueden detectarse en el histograma de glóbulos blancos con una alarma DE, o
como una línea de base elevada en el lado de la población de linfocitos. Los
glóbulos rojos no lisados causarán un recuento de linfocitos y glóbulos rojos
falsamente elevados. (BOULE, 2015)
Hemólisis
La muestra hemolizada contiene restos de glóbulos rojos, que pueden elevar
falsamente el recuento de glóbulos blancos y / o plaquetas. La hemólisis puede
detectarse observando el color del plasma en una muestra de EDTA a la que se
le ha permitido sedimentar.(MEDONIC, 2016)
10
Leucemias
Este estado de enfermedad puede dar lugar a un recuento bajo de glóbulos
blancos, si los leucocitos son más frágiles de lo normal y se destruyen en la
muestra. Los fragmentos celulares también interferirán con los parámetros
diferenciales de glóbulos blancos (Linfocitos, Granulocitos y Monocitos).
También se puede observar un recuento de glóbulos rojos falsamente bajo en
pacientes con leucemias linfocíticas debido a la presencia de linfocitos
anormalmente pequeños, que pueden no ser contados por el instrumento. (Nipro
Corporation, 2018)
Quimioterapia
Los fármacos citotóxicos e inmunosupresores pueden aumentar la fragilidad de
los leucocitos, lo que puede causar recuentos de glóbulos blancos falsamente
bajos. (Medical, 2019)
Crioglobulinas
El aumento de los niveles de crioglobina puede causar niveles elevados de
conteos de glóbulos blancos, glóbulos rojos o plaquetas, así como hemoglobina.
Las crioglobulinas pueden estar asociadas con mieloma, carcinoma, leucemias,
macroglobulinemia, trastornos linfoproliferativos, tumores metastásicos,
trastornos autoinmunes, infecciones, enfermedades idiopáticas, aneurisma,
embarazo, fenómenos tromboembólicos, diabetes, etc. (Mustafa, 2017)
Mieloma múltiple
La precipitación de proteínas en pacientes con mieloma múltiple puede dar lugar
a recuentos de glóbulos blancos falsamente elevados.
Linfocitos grandes, linfocitos atípicos, blastos y basófilos en cantidades
excesivas
La presencia de linfocitos grandes o atípicos, blastos o un número excesivo de
basófilos puede interferir con el área de los monocitos que, de lo contrario,
consiste principalmente en monocitos.
Metamielocitos, mielocitos, promielocitos, blastos y células plasmáticas en
cantidades excesivas
11
La presencia de cantidades excesivas de metamielocitos, mielocitos,
promielocitos, blastos y células plasmáticas puede interferir con un recuento de
granulocitos preciso.
Interferencia en el recuento de linfocitos
El recuento de linfocitos se deriva del recuento de glóbulos blancos. La presencia
de glóbulos rojos nucleados (NRBC), ciertos parásitos y eritrocitos que son
resistentes a la lisis puede interferir con el recuento de linfocitos. (Mustafa, 2017)
¿POR QUÉ SE DAN ERRORES EN LOS EQUIPOS AUTOMATIZADOS, SI
CON LOS CONTROLES QUE SE REALIZAN DIARIAMENTE ME INDICA QUE
FUNCIONA CORRECTAMENTE?
Los errores son poco frecuentes, gracias a estrategias desarrolladas en cuanto
a control de calidad y automatización. Los errores que principalmente se
producen son en:
Control de calidad interno: Este se realiza en el laboratorio y consiste en
revisar diariamente el correcto funcionamiento del mismo.
Control de calidad externo: Este se realiza por un organismo o compañía
externa. (Corres)
Los controles de calidad deben ser realizados con materiales exclusivos para
control de calidad, mas no en procedimientos de calibración, ya que no presentan
grados definidos de incertidumbre. El material que se debe utilizar debe ser
similar a las muestras y verificar que la medida obtenida se encuentre dentro del
rango indicado en la caja del material de control. Una vez realizado varias
mediciones, se puede redefinir el valor objetivo y rango aceptable determinando
el valor medio y las desviaciones estándar de las muestras obtenidas. (Rincón,
2009)
Los errores se presentan al momento de considerar un intervalo aceptable, ya
que este siendo un valor muy pequeño dará un resultado fuera de control a pesar
de que el instrumento se encuentre en correcto funcionamiento, por otra parte,
si seleccionamos un rango muy grande, no podrá detectar una falla en el
instrumento; por este motivo el intervalo aceptable es ±3 como desviación
estándar. Cuando el instrumento no ha tenido un correcto funcionamiento o a
12
recibido mantenimiento, antes de realizar un análisis de muestras de pacientes,
se debe realizar un análisis de muestras de control de calidad. Comparando
estos valores se puede determinar si el error es sistemático o aleatorio. Los
errores sistemáticos se producen en todas las muestras y con frecuencia, se
presentan de manera continua y definida. Se presentan al realizar un control de
calidad interno y externo, requieren de una calibración. En cambio, los errores
aleatorios son impredecibles, se detectan realizando un control de calidad
interno y pueden ser ocasionados por factores como fluctuaciones en la
temperatura y energía eléctrica. (Rincón, 2009)
Gráficos de control de calidad:
Tendencia o deriva
Figura 2: Tendencia o deriva. Los resultados se van alejando del valor objetivo por lo
que en cualquier momento informará resultados erróneos.
Desplazamiento
Figura 3: Desplazamiento. Los datos se encuentran entre el valor objetivo y el límite
superior o inferior, por lo que hay algo anormal.
13
Imprecisión
Figura 4: Imprecisión. Algo está afectando el funcionamiento del instrumento.
CONCLUSIONES
Con equipos de sexta generación en la actualidad, permiten la realización de
diagnósticos rápidos y seguros, con esto es posible evitar factores que en salud
son de vida o muerte, el hemograma es una prueba muy solicitada en los
laboratorios clínicos, aportando en gran parte en la evaluación de un paciente.
Desde un punto de vista técnico, es necesario reconocer los métodos
electrónicos que definen los parámetros para obtener una mayor certeza
analítica posible y le permita ofrecer resultados lo más precisos y exactos
posibles.
Arraigándonos en la utilización de los equipos de sexta generación se definen
los parámetros relacionados con los glóbulos blancos o leucocitos en sangre
periférica, usualmente el rango de error se encuentra por debajo del 1%. (Maya,
2017)
BIBLIOGRAFÍA
BOULE. (2015). Technical Document Technical Document Medonic M-series
M32 Hematology Analyzer. Recuperado a partir de
https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=3&
cad=rja&uact=8&ved=2ahUKEwji3d2S67riAhViu1kKHdTxAhUQFjACegQ
IAxAC&url=https%3A%2F%2Fdmec.moh.gov.vn%2Fdocuments%2F101
82%2F2611026%2Fupload_00059250_1503977363541.pdf%3Fversion
%3D1.0%26fileId%3D2619474&usg=AOvVaw0N3bAPJLCiNG0PdQyZw
88D
14
Canbulat, N. I. (2014). Efficacy of distraction methods on procedural pain and
anxiety by applying distraction cards and kaleidoscope in children. Asian
Nursing Research, 23-28. doi:10.1016/j.anr.2013.12.001
Fink, N. E. (2005). Automatización en hematología. 9. Argentina . Obtenido de
http://www.sah.org.ar/revista/numeros/vol9.n1.4.16.pdf
Maya, G. C. (2017). Del hemograma manual al hemograma de sexta generación.
Retrieved from https://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-
2007/myl011-12b.pdf
Hernández, L. (2013). Advances and clinical application of automated hematic
cytometry. Cuba . Obtenido de
http://scielo.sld.cu/pdf/hih/v29n1/hih04113.pdf
Medical, B. (2019). Comparison of capillary and venous blood samples on
Medonic TM M32 hematology analyzer.
MEDONIC. (2015). Total Quality Concept increases the value of your reportable
CBC results. Recuperado 26 de mayo de 2019, a partir de
https://www.medonic.se/tqc/
MEDONIC. (2016). Medonic M-series M32 Innovación basada en la calidad total.
Recuperado a partir de https://quik.com.co/images/productos/catalogo
MEDONIC.pdf
MEDONIC. (2017). User´s Manual - Medonic. Recuperado a partir de
https://www.medonic.se/download/distributors/medonic_m-series/sales_m-
series/manuals_m-series/user_manual_m-series_2/1504470-Medonic-
User-Manual.pdf
MEDONIC. (Agosto de 2017). Medonic M-series M32 Manual del usuario.
Obtenido de
https://www.medonic.se/download/distributors/medonic_m32/sales_m32/
manuals/user_manual_m32/BM850_MedonicM32_V7_ES.pdf
Medonic. (2019). Medonic® haemotology analysers. Making it easier to make a
difference. Obtenido de https://unahealth.co.uk/analysers/medonic/
Mustafa, A. (2017). Test and Evaluation of a Novel Passive Tool Used For Blood
15
Dilution in Hematology Analyzers. Recuperado a partir de
https://pdfs.semanticscholar.org/7b36/79688ed225297719650cd3a4c8a53c
36532f.pdf
Nipro Corporation. (2018). ANALISADOR HEMATOLÓGICO MEDONIC M32S.
Recuperado 26 de mayo de 2019, a partir de
https://www.niprobrasil.com.br/produto/medonic-m-series-analyzer-
m32s-bd-ar/
SYSMEX. (2019). XE-5000™ Sistema automatizado de hematología. Canadá.
Obtenido de https://www.sysmex.com/la/es/Products/Documents/XE-
5000-Espa%C3%B1ol.pdf
Rincón, M. C. (2009, Mayo 26). Retrieved from
http://www.nib.fmed.edu.uy/Seminario%202009/Monografias%20seminario%20
2009/Cecilia-Calibracion_CC.pdf
Corres, R. C. (n.d.). Retrieved from
http://www.ifcc.org/media/214854/Errores%20en%20el%20laboratorio%20cl%C
3%ADnico.pdf
16
