Análisis Químico

Informe de Laboratorio
Práctica No. 8, 25/02/2020

Determinación de espectrofotometría de hierro en suplemento

de sulfato ferroso
Susan A. Marquez T1, Catalina Clavijo A.2
Programa de Biología, Departamento de Biología y Química,
Universidad de los Llanos
Vereda Barcelona, km 12 vía a Puerto López, Villavicencio 500017, Meta, Colombia.
1 [Link]@[Link], 2 [Link]@[Link]

Resumen- En esta práctica, por medio de la técnica de espectrofotometría, se determinó la cantidad de Hierro en
una gragea de sulfato ferroso (muestra problema). Se realizó una curva de calibración con estándares de Hierro
(tanto concentración como absorbancia) con cada uno de los patrones, estableciendo una relación entre el color y
la concentración de los patrones. Para la preparación de la muestra problema, se pesó una pastilla de sulfato ferroso,
adicionando posteriormente 20ml de agua y realizando una extracción, una vez hecha la extracción, se transvaso a
un balón aforado de 100Ml, obteniendo así una solución. A partir de la solución preparada se adiciono 1,0mL en un
balón aforado de 100mL, 1ml de hidroxilamina, 10,0ml de solución buffer y 10,0ml de orto-fenantrolina. Los
estándares y el blanco fueron preparados en condiciones similares.

Palabras Clave-: Hierro, absorbancia, concentración.

I. INTRODUCCIÓN Un procedimiento analítico muy utilizado en análisis

Uno de los primeros análisis colorimétricos fue el método cuantitativo es el llamado de calibración que implica la
Nessler para el amoniaco en 1856, Nessler observó que construcción de una “curva de calibración”. Una curva
cuando se añadía una solución alcalina de HgI2 a una de calibración es la representación gráfica de una señal
disolución diluida de amoniaco, se producía un coloide que se mide en función de la concentración de un
amarillo o pardo rojizo, dependiendo de la concentración analito. La calibración incluye la selección de un modelo
de amoniaco. [1] Para determinar la concentración, se para estimar los parámetros que permitan determinar la
utilizó la comparación del color de la muestra con la de linealidad de esa curva. y, en consecuencia, la
una serie de patrones, los colores se comparaban capacidad de un método analítico para obtener
mirando los tubos que los contenía desde arriba, y estos resultados que sean directamente proporcionales a la
estaban colocados en una gradilla con base Iluminada. concentración de un compuesto en una muestra, dentro
[2] de un determinado intervalo de trabajo. [6]
La colorimetría en que una muestra absorbe luz visible,
es una ejemplo del análisis espectrofotométrico. [3] A En el procedimiento se compara una propiedad del
finales del siglo XIX la espectrofotometría se limitaba a la analito con la de estándares de concentración conocida
absorción, emisión y dispersión de la radiación del mismo analito (o de algún otro con propiedades muy
electromagnética visible, ultravioleta e infrarroja. Durante similares a éste). Para realizar la comparación se
el siglo XX, el método se fue ampliando para incluir otras requiere utilizar métodos y equipos apropiados para la
formas de radiación electromagnética como los rayos X, resolución del problema de acuerdo al analito que se
las microondas y las ondas de radio, así como partículas desee determinar. La etapa de calibración analítica se
de energía tales como los electrones y los iones. [4] realiza mediante un modelo de línea recta que consiste
en encontrar la recta de calibrado que mejor ajuste a una
Espectrofotometría se refiere al uso de la luz para medir serie de “n” puntos experimentales, donde cada punto
las concentraciones de sustancias químicas; cuando una se encuentra definido por una variable “x” (variable
molécula absorbe un fotón para de un estado basal o independiente, generalmente concentración del analito
fundamental, a un estado excitado (la energía de la de interés) y una variable “y” (variable dependiente,
molécula se incrementa), así, la intensidad de los fotones generalmente respuesta instrumental). La recta de
que pasan a través de una muestra que contiene el calibrado se encuentra definida por una ordenada al
analito, se atenúa debido a la absorción, la medida de origen (b) y una pendiente (m), mediante la ecuación y
esta atenuación, que recibe el nombre de absorbancia, = mx + b . [7]
es la que sirve de señal. [5]

1
 II. PROCEDIMIENTO lll. RESULTADOS

1. Preparación de la curva de calibración para la a. Concentración de cada uno de los patrones Fe

determinación de hierro: (ppm).

En esta fórmula o ecuación tenemos a:

En matraces aforados de 25ml se adiciono las  Ci = Concentración inicial
cantidades correspondientes de los reactivos a utilizar  Vi = Volumen inicial
según la tabla No 1, una vez agregados los reactivos  Cf = Concentración final
correspondientes, se completo con agua destilada hasta  Vf = Volumen final
el volumen correspondiente, finalmente homogenizamos
y dejamos reposar por 5 minutos para el desarrollo del Donde:
color.
𝑚𝑔𝐹𝑒
Balón Aforado Concentración Volumen de Ci = concentración del patrón = 0,04
𝑚𝐿
N° de Fe (ppm) solución patrón
De Fe (mL) Vi = Volumen de solución patrón Fe (mL)
Blanco 0 0,000 Cf = concentración de Fe (ppm)
3 2 1,250 Vf = volumen de balones aforados
4 4 2,50
5 6 3,75 𝑚𝑔𝐹𝑒 1000𝑚𝐿 𝑚𝑔𝐹𝑒
Ci = 0,04 ( ) = 40
6 8 5,00 𝑚𝐿 1𝑙 𝐿
7 10 6,25
Patrón 3.

Hidroxilamina Buffer pH o-fenantrolina Ci ∗ Vi = Cf ∗ Vf.

µL 3,5 (mL) mL
250 2,5 2,5 Ci∗Vi
250 2,5 2,5
Cf =
Vf
250 2,5 2,5
250 2,5 2,5 (40𝑚𝑔/𝑙)(1,250𝑚𝐿)
250 2,5 2,5 Cf = = 2𝑚𝑔/𝐿
25𝑚𝐿
250 2.5 2.5 Patrón 4.
Tabla N° 1. Reactivos correspondientes por utilizar.
40𝑚𝑔
( ) (2,50𝑚𝐿)
Cf = 𝑙 = 4𝑚𝑔/𝐿
2. Determinación de la cantidad de Fe presente en 25𝑚𝐿
Patrón 5.
una gragea de sulfato ferroso: (solución
problema) 40𝑚𝑔
( )(3,75𝑚𝐿)
𝑙
Cf = = 6𝑚𝑔/
25𝑚𝐿
Se peso una gragea de sulfato ferroso, posterirmente Patrón 6.
depositandola en un mortero con mano,se adiciono 20ml
de agua destilada y realizo la extracción.
Filtramos la solución obtenida a través del papel de filtro 40𝑚𝑔
( )(5,00𝑚𝐿)
y lavamos el residuo con 30 ml de agua destilada. 𝐶f = 𝑙
= 8𝑚𝑔/𝐿
25𝑚𝐿
*Transvasamos el filtrado a un balón aforado de 100ml Patrón 7.
(solución No 1).
40𝑚𝑔
2.1 De la solución anterior se tomo 1,0ml y coloco en un ( )(6,25𝑚𝐿)
𝑙
balón aforado de100ml, Seguidamente adicionando 1ml 𝐶f = = 10𝑚𝑔/𝐿
25𝑚𝐿
de hidroxilamina, 10,0ml de solución buffer y 10,0 ml de
orto-fenantrolina; llevamos a volumen con agua destilada b. Curva de absorbancia de los estándares y
y dejamos en reposo por 15min. absorbancias medidas a 510nm.
*Se procede a leer la absorbancia de la solución a
510nm.

2
 0,675
− 0,0196 = 𝑋
0,1423

X = 4.72

La concentración de nuestra muestra problema fue

de 4.72 ppm.

Curva de calibración. (absorbancia

en función de la concentración)
Fig. 1. Preparación de la curva. Muestra problema.
y = 0,1423x + 0,017
2
R² = 0,965
1.5
1

Concentración Fe (ppm) Absorbancia 0.5

0
0 0.277 A
0 2 4 6 8 10 12
2 0,456 A
Grafica 2. Se añadió el valor de la muestra
4 1.033 A problema.
6 1.198 A
Como se puede evidenciar el agregar otro dato a la
8 1.436 A curva de calibración no afecto el coeficiente de
10 1.648 A determinación, lo que nos hace concluir que sigue con
la misma exactitud que la gráfica de los patrones antes
realizada.
Tabla No 2. Relación de la concentración con la
absorbancia
IV. CONCLUSIONES
Curva de calibración
(absorsancia en función de CONCLUSIONES
concentración)
y = 0.1423x + 0.0196 El uso de estándares es de gran importancia en
2 R² = 0.965 determinaciones analíticas que requieran curvas de
calibración, ya que los compuestos considerados para
1.5
este fin deben tener afinidad química con la muestra. Así
1 mismo, el blanco también tiene importancia en la
0.5 determinación, ya que si este no se emplea ni se prepara
a las mismas condiciones de las muestras y de los
0
estándares, podría ser el causante de falsas señales
0 2 4 6 8 10 12 durante las mediciones.

Grafica 1. Curva de calibración de los patrones. En la construcción de la curva de calibración se realizó

el análisis a la longitud de onda de máxima absorción, es
El coeficiente de determinación de la curva de decir 510 nm, debido a que esto mejora la sensibilidad y
calibración nos indica que el modelo tiene una gran minimizaría posibles errores durante la determinación de
precision y un gran ajuste del modelo a los datos. hierro en las muestras.

Es deseable que, en todo análisis por curvas de

Para ubicar en la grafica y saber la concentración calibración, las señales referentes a las muestras se
de nuestra muestra problema usamos la ecuación localicen en el centro de la curva y no en los extremos,
que nos genera Excel y despejamos lo que se pues en el centro de la curva hay un menor límite de
necesitaba. confianza

Y= 0,1423X + 0,0196 Se desarrollo el uso de la espectroscopía ultravioleta

visible como técnica de análisis,
𝑌
= 𝑋 + 0,0196
0,1423

3
 REFERENCIAS
[1] Skoog D.A, West D.M. 2001. Química analítica,
séptima edición, Mc Graw Hill. México.
[2] Skoog D.A, Holler J.F, Nieman T.A.2001. Principios
de análisis instrumental, quinta edición, Mc Graw
Hill/ Interamericana.
[3] Willar H, Merritt L, Dean J y Settle F. 1991. Métodos
instrumentales de análisis, Grupo Editorial
Iberoamérica, México.
[4] Official methods of analysis of AOAC International
editado por Patricia Conniff. 1998. Publicado por
AOAC International, 16th edición, volumen 1 y 2,
U.S.A.
[5] Estándar Methods for the examination of water and
wastewater editado por Arnold E. Greenbers y otros.
[Link] por Publication office American
Public Health Association,18th edición,

[6] Danzer Klaus, Currie Lloyd A. “Guidelines for

calibration in analytical chemistry Part I.
Fundamentals and single component calibration”,
IUPAC Pure & Appl. Chem, Vol.70, No.4, pp.993-
1014, 1998
.
[7] Harris Daniel C. “Análisis Químico Cuantitativo”, 2ª
edición. Editorial Reverte, España 2001.