UNIVERSIDAD SANTIAGO DE CALI
PROGRAMA DE QUÍMICA FARMACÉUTICA
LABORATORIO DE QUÍMICA ANALÍTICA I
DETERMINACION DE NITROGENO UREICO Y
NITRÓGENO TOTAL EN ORINA
Sofía García, Stephany Mondragón, Valentina Sáenz
a
[email protected], b
[email protected], c
[email protected] Santiago de Cali, Colombia
22 de noviembre del 2019B
OBJETIVO
• Determinar por el método de Kjeldahl la cantidad de nitrógenos contenidos en una
muestra de orina.
• comprender el método de Kjeldahl.
INTRODUCCIÓN
El nitrógeno (N) es un nutriente presente e indispensable en los seres vivos, ya que forma
parte de muchos compuestos y sistemas vitales como aminoácidos, proteínas, enzimas,
procesos celulares y sus paredes, la sangre y también en el sistema urinario.
El nitrógeno ureico que encontramos en nuestra orina es el resultado de la descomposición
y el desecho de algunas proteínas que no requería nuestro cuerpo, para ello se va emplear el
método de Kjeldahl ya que por medio de este proceso se determina los niveles y cantidad
de nitrógeno tanto en muestras orgánicas como inorgánicas en una amplia variedad de
muestras en este caso será en orina.
NORMAS DE SEGURIDAD
Acido Sulfúrico: irritante y corrosivo, produce dificultad respiratoria, en altas
concentraciones del vapor puede producir ulceración de la nariz y la garganta. Puede
producir quemaduras severas, profundas y dolorosas. Utilizar caretas durante su
manipulación.
Sulfato de potasio: Irritante, al estar en contacto con el ojo puede presentar enrojecimiento
del tejido ocular, por ingestión produce dolor gastrointestinal y nauseas. Utilizar gafas de
seguridad
Selenio: Altamente toxico, presenta problemas en fertilidad o daño al feto, provoca daños
en los órganos. Utilizar gafas, caretas y guantes durante su manipulación.
Hidróxido de sodio: Es una sustancia altamente corrosiva, puede causar gran daño a los
ojos, piel y membrana mucosa. El contacto con el sólido o con soluciones concentradas
produce lesiones en la piel, incluso daños en los tejidos ocasionando quemaduras severas.
La ingestión de soluciones concentradas puede producir severo dolor abdominal y daños en
el aparato digestivo. No inhalar el polvo y evitar al máximo el contacto directo con la piel,
ojos y ropa. Lavar con abundante agua las manos después de su manipulación. Utilizar
gafas de seguridad con protección lateral, guantes de neopreno y bata de laboratorio, si hay
contacto con la piel remover la ropa contaminada inmediatamente y lavar con jabón y
abundante agua o solución salina. Si es ingerido suministrar grandes cantidades de agua o
leche, no realizar lavados gástricos.
Acido bórico: irritante para los ojos, piel, tracto digestivo, tracto respiratorio, afecta el
sistema nervioso central, el hígado y los riñones. Utilizar careta, gas y aguantes en su
manupulación.
Acido clorhídrico: Irritante severo, una dosis de 15 g puede ser mortal. El contacto
con la piel puede causar daño pulmonar. Evitar respirar el vapor o humo, mantener bien
cerrado el envase. Usar una adecuada ventilación, además de las gafas de seguridad y
guantes, lavar las manos después de su manejo. En caso de inhalar respirar aire fresco
inmediatamente, de ser necesario dar respiración artificial. Si hay contacto con la piel,
remover la ropa contaminada y lavar la zona afectada con abundante agua fría durante 15
minutos. Por contacto directo con los ojos, lavarlos inmediatamente con grandes cantidades
de agua. En caso de ingestión tomar suficiente agua (diluido 100 veces) o leche. Beber agua
de magnesia, de cal o de jabón.
PROCEDIMIENTOS ANALÍTICOS
DETERMINACIÓN DE NITRÓGENOS EN UNA MUESTRA PROBLEM
Material
50 ml de orina
(4) Erlenmeyer de 250 ml
(1) Equipo de destilación de Kjeldahl.
(1) Bureta de 25 ml
(1) Pipeta volumétrica de 25 ml
(4) Vasos de precipitados de 100ml
(1) Frasco lavador
(1) Espátula
(2) Vidrio reloj
(1) Pinza para bureta
(1) Plancha de calentamiento
(1) Tubo digestion
(1) Matraz redondo
Reactivos
Ácido Sulfúrico 95‐98%
Sulfato de potasio
Selenio
NaOH al 35%
Acido borico
NaOH al 35%
HCL
Procedimiento
Método de Kjeldahl: se divide en los siguientes pasos.
Digestión
Se lleva a cabo con H2SO4, en presencia de un catalizador de selenio para aumentar
velocidad y eficiencia del proceso de digestión y calor que debe tener una temperatura entre
los 350 a 380 0C, si queremos acelerar la digestión adicionamos sulfato de potasio que
ayuda aumentando la ebullición del ácido.
Neutralización y destilación
La muestra ácida (NH4) se neutraliza con una solución concentrada de una base fuerte
(disolución NaOH al 35%) para convertirse en amoniaco (NH3), seguida de una destilación
sobre un volumen conocido de un ácido fuerte (disolución de ácido bórico al 4%) ya que es
una solución absorbente.
Valoración
El anión borato (proporciona la cantidad de nitrógeno), se debe realizar una valoración
ácido-base empleando una solución de HCl estandarizado.
Preparación de soluciones
Digestión
Mida 10 ml de muestra e introducirlo en un tubo de digestión. Añadir al tubo 5 g de selenio, 10 ml
de ácido sulfúrico al 95‐98%. Colocar los tubos de digestión con las muestras en el Bloc‐digest con
el colector de humos funcionando. Realizar la digestión a una temperatura de 350 a 380ºC y un
tiempo de 30 minutos. Dejar enfriar la muestra a temperatura ambiente. Dosificar lentamente 50 ml
de agua destilada en el tubo de muestra.
Neutralización y destilación
Añadir 25 ml de ácido bórico en un erlenmeyer de 250 ml y 2 o 3 gotas de indicador mixto de Rojo
de Metilo el cambia de color: de rosa violeta a verde esmeralda (pH 4,8-5,5). Colocar el erlenmeyer
en la largadera del refrigerante teniendo la precaución de que esta quede sumergida dentro de la
disolución de ácido bórico. Colocar el tubo con la muestra en el destilador. Una vez colocado el
tubo de la muestra y el erlenmeyer con el ácido bórico,dosificar unos 40mL de NaOH e iniciar la
destilación. donde debemos recojer 150 ml aproximadamente.
Valoración
Valorar con ácido clorhídrico 0,31N el destilado obtenido, hasta que la solución vire de verde a
violeta.
Determinacion de nitrogeno total
Digestion
A la muestra respectiva de orina, agregar el HCl, en presencia de el catalizador
3: 1 𝐶𝑢𝑆𝑂4 − 𝑀𝑔𝑂, llevarlo a el matraz redondo y someterlo a calentamiento por medio de
elementos calefactores de fundición o de radios infrarroja sin contacto.
Destilación de la solucion de digestión
Agregar NaOH (la cantidad de ácido depende del peso y de la composición de la muestra),
cuando se muestra el final de la digestión agregar acido sulfúrico (𝐻2 𝑆𝑂4 ) en exceso
aproximadamente 20 ml y se debe llevar a un temperatura de 338 oC. En caso de querer
aumentar el punto de abullición del ácido sulfúrico, se debe agregar sal de sulfato.
Agregar con cuidado una solución alcalina concentrada en la solución de digestión de ácido
sulfúrico, luego añadir agua y llevar a calentamiento por aparatos quemadores de gas.
En un matraz Erlenmeyer llenar aproximadamente 70 ml de ácido bórico y agregar el
precipitado formado en la valoración. Por consiguiente se valora con ácido. Montar equipo
de destilación y hacer el procedimeinto correspondiente.
CÁLCULOS Y RESULTADOS
1.Calcule el porcentaje de nitrogeno en las resprectivas muestras.
2.Encuentre el volumen gastado de HCl en la titulación.
PREGUNTAS
1. Explique la importancia del metodo de Kjeldahl en la determinación de
nitrógeno ureico y nitrógeno en la orina.
2. ¿Porque es importante el paso de deigestion en el método de Kjeldah?
BIBLIOGRAFIAS
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