Scribd
Cargar
229 vistas4 páginas

Detección de PCR en Suero con Látex

Este documento describe la prueba de PCR-látex, un método cualitativo y semicuantitativo para detectar la proteína C-reactiva (PCR) en suero humano. La PCR es una proteína de fase aguda que aumenta durante procesos inflamatorios. La prueba involucra partículas de látex recubiertas con anticuerpos anti-PCR que se aglutinan en presencia de PCR en la muestra. El método cualitativo detecta si hay PCR presente, mientras que el semicuantitativo determina el título de diluc

Cargado por

Giomar Velásquez
Derechos de autor
© © All Rights Reserved
Nos tomamos en serio los derechos de los contenidos. Si sospechas que se trata de tu contenido, reclámalo aquí.
Formatos disponibles
Descarga como DOCX, PDF, TXT o lee en línea desde Scribd
229 vistas4 páginas

Detección de PCR en Suero con Látex

Este documento describe la prueba de PCR-látex, un método cualitativo y semicuantitativo para detectar la proteína C-reactiva (PCR) en suero humano. La PCR es una proteína de fase aguda que aumenta durante procesos inflamatorios. La prueba involucra partículas de látex recubiertas con anticuerpos anti-PCR que se aglutinan en presencia de PCR en la muestra. El método cualitativo detecta si hay PCR presente, mientras que el semicuantitativo determina el título de diluc

Cargado por

Giomar Velásquez
Derechos de autor
© © All Rights Reserved
Nos tomamos en serio los derechos de los contenidos. Si sospechas que se trata de tu contenido, reclámalo aquí.
Formatos disponibles
Descarga como DOCX, PDF, TXT o lee en línea desde Scribd

PRÁCTICA 37: PCR-LÁTEX.

 Objetivo: la PCR-Látex es una técnica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y


semicuantitativa de PCR en suero humano. Las partículas de látex recubiertas con Ac anti-
PCR humana son aglutinadas por moléculas de PCR presentes en la muestra del paciente.

 Significado clínico: la proteína C-reactiva es una proteína de fase aguda, presente en el


suero de pacientes sanos, la cual puede incrementarse significativamente en la mayoría de
procesos infecciosos bacterianos y virales, tejidos dañados, inflamación y neoplasias
malignas. El incremento de concentración de esta proteína se produce después de unas horas
desarrollarse la inflamación pudiendo alcanzar niveles de 300 mg/L en 12-24h.
 Materiales:
- Muestra: suero fresco
- Tarjeta con pocillos
- Reactivos:
. Látex: suspensión de partículas de látex cubiertas de IgG de cabra anti-PCR humana, pH
8.2
. Control +: suero humano con concentración de PCR > 20 mg/L
. Control -: suero animal
Se recomienda utilizar los controles para controlar la funcionalidad del reactivo de látex, así
como de modelo para la interpretación de resultados. Todo resultado distinto al resultado que
da el control negativo, se considera positivo.
- Palillos
- Agitador
 Técnica:
Método cualitativo:

1. Atemperar los reactivos y las muestras a Tª ambiente. La sensibilidad del ensayo disminuye
a temperaturas bajas.

2. Depositar 50µL de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los controles Positivo y
Negativo, sobre círculos distintos en la tarjeta.

3. Agitar bien el reactivo de PCR-látex antes de usar. Depositar una gota junto a cada una de
las gotas anteriores.

4. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie
interior del círculo. Emplear distintos palillos para cada muestra.

5. Situar la tarjeta sobre un agitador a 80-100 r.p.m. y agitar durante 2 minutos. El exceso de
tiempo puede originar la aparición de falsos positivos.

Examinar macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación inmediatamente


después de la agitación. La presencia de aglutinación indica una concentración de PCR igual
o superior a 6 mg/L.
Muestra (+)
Control +: (+)
Control -: (-)

Método semicuantitativo: (en este caso si se realiza este método, ya que la muestra ha
resultado positiva)

1. Realizar diluciones dobladas (1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64). Poner 50µL de solución salina
fisiológica en todos los pocillos de la tarjeta.

2. A continuación, adicionar sobre el primer pocillo 50µL de la muestra a estudiar, mezclamos,


cogemos 50µL y lo llevamos al siguiente pocillo. Repetimos el proceso en todos los pocillos.
Finalmente desechamos 50µL.

3. Poner una gota de reactivo PCR-látex en todos los pocillos y agitar utilizando palillos
distintos para cada pocillo.

4. Agitar a 80-100 r.p.m. durante 2 minutos. Observar los resultados. El exceso de tiempo
puede originar falsos positivos.

El título se define como la dilución mayor que da resultado positivo.


Título: 1/2

Título: 1/4

La concentración aproximada de PCR en la muestra del paciente se obtiene aplicando la


siguiente fórmula: 6 x Título de PCR = mg/L

- En el primer caso: 6 x 2 = 12 mg/L


- En el segundo caso: 6 x 4 = 24 mg/L

*Valores de referncia: hasta 6 mg/L

También podría gustarte