CUANTIFICACIÓN DE OH EN TRIGLICÉRIDOS, ÉSTERES, POLIOLES
POLIÉSTER Y DERIVADOS.
La espectroscopia FT-NIR permite una determinación cualitativa y
cuantitativa del valor de oxhidrilos (OH) en triglicéridos, ésteres de
polietilenglicol, polioles, poliéster y sus derivados.
El método se basa en la medición del primer sobretono de OH, relacionado
con la presencia de grupos de oxidrilos que permite realizar una medición
simple del valor de oxhidrilos en todos estos compuestos.
Método
Instrumento: FTLA2000-160
Detector: InAs enfriado termoeléctricamente
Técnica de muestreo: viales de vidrio descartables de 8 mm
Región espectral: 12000-4500 cm-1
Performances de calibración
Performance de calibración PLS construida con 9 muestras de materias
primas:
Propiedad Rango # Factor Incertidumbre (1 x ?) Repetibilidad (1 x ?) R2
OHV 2,3 - 201,3 3 4,5 0,47 0,996
Esta nota fue desarrollada por el Centro NIR-Raman de JENCK S.A. cuya
finalidad es promover la aplicación de estas técnicas y brindar un soporte
integral para la generación de métodos de identificación y cuantificación a
través de las mismas. Para más información contáctenos.
CUANTIFICACIÓN DE POLIOLES
Método Enzimático
En este método se requiere de un extracto neutro o ácido libre de alcoholes y metales pesados "ya
que no se pueden usar sales de plomo para clarificar los extractos.
En este método se puede aplicar a una gran variedad de carbohidratos o compuestos relacionados
como monosacáridos, disacáridos, polisacáridos, ácidos, alcoholes y polioles).
CUANTIFICACIÓN DE OH
Un espectro de infrarrojo
Un espectro de infrarrojo característico de todos los PUs se muestra en la figura 1. En él se puede
apreciar la aparición de nuevas bandas de absorción de los grupos –OH alrededor de 3500 cm-1 las
cuales se encuentran asociadas a la incorporación de los polioles en la estructura polimérica. Así
mismo, se identifican bandas de absorción asociadas con la presencia de grupos –NH y C=O
provenientes de los grupos uretanos alrededor de los 3100 cm-1 y 1700 cm1, respectivamente. La
presencia de vibraciones en el espectro IR tanto grupos únicos de los alcoholes como de grupos
únicos del isocianato indican que efectivamente se obtuvieron los PUs respectivos.
CUANTIFICACIÓN DE MANITOL EN HONGOS (POLIOL)
Considerando los procedimientos de Reis et al., (2013a) y Reis et al., (2013b) se creó una
técnica de extracción a microescala a base de solventes orgánicos para manitol en cuerpos
fructíferos de hongos previamente deshidratados, por lo cual se macero cada especie por
separado utilizándose un mortero con pistilo, y se sometió a una digestión alcohólica
pesándose un gramo del tejido adicionándose de 3 a 4 mL de alcohol 80% dependiendo de
qué tan fibroso se veía el concentrado, se mezcló perfectamente y se agito cada 30 minutos
dejándose reposar los siguientes 30 durante una hora y media. Pasado este lapso se
colocaron las muestras en rotovapor hasta alcanzar punto de ebullición por 5 minutos e
inmediatamente se lavó tres veces filtrando con whatman No 4 y 5 mL de éter etílico
consecutivamente. Se aforo a 10 mL con agua destilada y se hizo una dilución 1:10
también con agua destilada para leer cada muestra por triplicado en un espectrofotómetro
UV-visible a una absorbancia de 450 nm según el Kit Assay (Abcam, 2013; SIGMAALADRICH, 2015)
para Manitol. Los resultados obtenidos se valoraron en una curva de
calibración para obtener la concentración en mg/g. Esta curva de calibración se realizó
diluyendo 10 diferentes concentraciones de fructosa grado reactivo (0.05, 0.1, 0.15…0.5 g)
en 1 mL de agua destilada, leyendo a 450 nm también por triplicado. Los resultados
obtenidos para las especies que se encuentre reportado se compararon con la recopilación
hecha por Kalak (2016) en hongos de Europa.
CUANTIFICACIÓN DE POLIOLES
Aunque los azúcares de alcohol son económicos y fáciles de analizar y cuantificar es necesario
utilizar métodos específicos de HPLC (cromatografía líquida) debido a su alta polaridad y a la falta
de cromóforos que absorban los UV. Para esas separaciones se recomienda utilizar cromatografía
de exclusión iónica para detectar y cuantificar los alcoholes de azúcar. Este método utiliza una
combinación de tipos de separacion incluyendo filtración por gel, intercambio iónico y afinidad,
para resolver las pequeñas diferencias entre los azúcares de alcohol.
Algunos métodos de USP han sido desarrollados aprovechando la selectividad única que brinda la
exclusión iónica de HPLC. En esta nota técnica, se realizaron varias separaciones diferentes de
azúcares y azúcares de alcoholes que imitan los métodos de USP mediante el uso de las columnas
RPM y RCU de HPLC de Rezex2 .
