Informe laboratorio 1: “introducción a la microscopia”
Franco Eduardo Moreno Escobar
Docente responsable: Alejandra Saavedra
Carrera: Licenciatura en química
Asignatura: Laboratorio Biologia
Fecha: 06/05/2019
Introducción:
- El microscopio desde su invención y perfeccionamiento producto de diferentes aportes y
eventos en la historia (1) abrió una ventana para el estudio de muestras no visibles para el
ojo humano, tanto como bacterias o tejidos celulares que antes no se podían estudiar con
tanto detalle debido a la limitada resolución de la vista y si bien antes de su invención se
tenía una noción de la célula no fue hasta que se dispuso de este instrumento que se
hicieron descubrimientos importantes sobre su estructura y funcionamiento. Existen
distintos tipos de microscopios, en el laboratorio pertinente se utilizaron microscopios
ópticos que funcionan basados en un sistema de lentes ópticas que generan un aumento
a la muestra a estudiar (2).
El objetivo principal de este laboratorio es aprender a utilizar de forma correcta y eficiente
un microscopio óptico analizando distintos tipos de muestra para aprender a utilizar las
diferentes herramientas que este pone a la disposición del observador.
Procedimiento experimental:
-Con el microscopio ya dispuesto sobre el mesón se procedió a conectarlo a la
electricidad y encenderlo. Luego de esto se explicó brevemente el funcionamiento de los
diferentes mecanismos del microscopio como el regulador de intensidad de la luz, como
desplazar la muestra sobre la platina, como enfocar correctamente usando el tornillo
macrométrico y micrométrico y también se explicó el uso adecuado de los objetivos del
microscopio (x10, x40, x100) y que para usar el aumento x100 se debe utilizar una gota
de aceite.
Una vez que termino la explicación sobre el uso del microscopio se procedio a analizar la
primera muestra:
La primera muestra fue un trozo de papel con una letra, en este caso la letra z, puesto
sobre un porta objeto y cubierto con un cubre objeto. Con el objetivo fijado en x10 de
aumento la muestra fue ajustada en las pinzas sobre la platina y luego con la ayuda de
ambos ojos se ajustó con el tornillo macrometrico el enfoque de la muestra hasta que
fuera ligeramente visible, luego se terminó de enfocar con el tornillo micrométrico hasta
que la imagen fuera nítida, se procedió a observar y tomar fotografía. Se repitió el
procedimiento de enfoque con el tornillo micrométrico pero esta vez con el objetivo en x40
de aumento, se procedió a observar y tomar fotografía.
La segunda muestra estudiada fue una muestra de hueso descalcificado. Se bajó la
platina con el tornillo macrometrico para retirar la muestra anterior, después de volver a
ajustar el objetivo x10 se tomó la muestra de hueso, se depositó en la platina y se subió
nuevamente con el tornillo macrometrico, luego se enfocó con el micrométrico hasta
obtener una imagen nítida, se tomó una fotografía de la imagen. Se repiten los pasos con
el objetivo x40 y se tomaron fotografías.
La tercera muestra es lengua de gato. Se retira la muestra anterior y se repiten los pasos
para enfocar la muestra con un objetivo de x10 de aumento hasta que esta sea nítida, se
observó y se tomaron fotografías. Se continuó con el objetivo x40 y se tomaron
fotografías.
Se retiró la muestra y se puso la cuarta y última muestra que era glandula tyroideal. Se
ajustó el enfoque como en las muestras anteriores hasta conseguir una imagen nítida y se
fotografió en distintas posiciones moviendo la muestra sobre la platina con el objetivo
fijado en x10. Luego se cambió al objetivo x40 y se fotografió nuevamente. En esta
muestra se intentó utilizar el objetivo con aumento x100 agregando sobre la muestra una
gota de aceite, se ajustó el tornillo macrometrico y se observó.
Resultados:
Muestra: papel con letra impresa
Aumento: x10
Tipo de tinción: ninguna
Muestra: papel con letra impresa
Aumento: x40
Tipo de tinción: ninguna
Muestra: hueso descalcificado
Aumento: x10
Tipo de tinción: Hematoxilina eosina H/E
Muestra: hueso descalcificado
Aumento: x40
Tipo de tinción: Hematoxilina eosina H/E
Muestra: lengua de gato
Aumento: x10
Tipo de tinción: hematoxilina eosina H/E
Muestra: lengua de gato
Aumento: x40
Tipo de tinción: hematoxilina eosina H/E
Muestra: glandula tyroideal
Aumento: x10
Tipo de tinción: hematoxilina eosina H/E
Muestra: glandula tyroideal
Aumento: x40
Tipo de tinción: hematoxilina eosina H/E
Discusión:
-Cuando se logró enfocar la primera muestra con el objetivo x10 de aumento se pudo
observar de inmediato un tipo de relieve o irregularidad en la tinta impresa sobre el papel
la cual a simple vista no es distinguible, esto se puede explicar por la rugosidad del papel
que el ojo no puede distinguir por sus limitaciones con respecto a la resolución. Al
observar la misma muestra con el objetivo x40 de aumento se pueden observar incluso
pequeñas burbujas que pueden ser producto de aire que quedó atrapado entre el porta
objeto y el cubre objetos. Este nivel de aumento es posible gracias al sistema de lentes
ópticos que posee el microscopio. En las siguientes muestras se puede ver la
predominancia del color rosa o el color violeta, por ejemplo en el hueso descalcificado y
en la lengua de gato se puede ver la predominancia del rosa y en la glándula tiroidea una
predominancia del violeta. Esto se debe al tipo de tinción que se usa y a si se utiliza
hematoxilina o eosina de forma independiente o combinadas (2).
Se pudo observar también que al variar la intensidad de la luz algunas muestras se veian
más nítidas o no como en el caso de la lengua de gato que mostraba mayor nitidez al
poner una menor intensidad de la luz.
En la última muestra se intentó usar el aumento x100 con una gota de aceite pero no se
logró una imagen tan nítida como con el resto de objetivos. para lograr un mayor aumento
del que disponen los microscopios ópticos se debería usar un microscopio de tipo
electrónico.
También se pudo observar que mientras más aumento se le aplicaba a las muestras
menor era el campo visual pero mayor era la resolución y el detalle que se podía recopilar
de las imágenes por lo tanto se puede hacer un estudio más preciso de las muestras por
lo que el microscopio se hace imprescindible a la hora del estudio de estructuras de nivel
celular (3).
Conclusiones:
- El microscopio en conclusión es una herramienta muy útil cuando se necesitan estudiar
muestras no visibles o fuera del margen de resolución del ojo humano.
-Es importante conocer todas las técnicas de tinción y el uso adecuado y eficiente del
microscopio, conociendo sus partes y mecanismos que lo hacen funcionar.
-Se debe tener conocimiento previo de las actividades que se realizaran en un laboratorio
para trabajar de forma eficiente y constructiva.
-Al usar distintos objetivos con distintos aumentos se podrán recopilar datos diferentes
sobre la muestra por lo que se debe conocer el correcto uso de estos.
Referencias:
(1) Volcy, C (2004), Lo malo y lo feo de los microbios (1ra edición), capitulo 1 “historia
del microscopio”
(2) Ross, P (2012), Histologia “texto y atlas color con biología celular y molecular”. (6ª
edición),capitulo 1 “técnicas de histología y microscopia”
(3) Curtis, Barnes, Schnek, Massarini (2008), Biologia
