0% encontró este documento útil (0 votos)
421 vistas26 páginas

Técnicas Histoquímicas

Este documento describe diferentes técnicas histológicas de rutina y especiales, incluyendo hematoxilina-eosina, azul de toluidina, coloración con azán, Giemsa y técnica de Schiff. Explica los principios, procedimientos y resultados de cada técnica.
Derechos de autor
© © All Rights Reserved
Nos tomamos en serio los derechos de los contenidos. Si sospechas que se trata de tu contenido, reclámalo aquí.
Formatos disponibles
Descarga como DOCX, PDF, TXT o lee en línea desde Scribd
0% encontró este documento útil (0 votos)
421 vistas26 páginas

Técnicas Histoquímicas

Este documento describe diferentes técnicas histológicas de rutina y especiales, incluyendo hematoxilina-eosina, azul de toluidina, coloración con azán, Giemsa y técnica de Schiff. Explica los principios, procedimientos y resultados de cada técnica.
Derechos de autor
© © All Rights Reserved
Nos tomamos en serio los derechos de los contenidos. Si sospechas que se trata de tu contenido, reclámalo aquí.
Formatos disponibles
Descarga como DOCX, PDF, TXT o lee en línea desde Scribd

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA: LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO
TERCER SEMESTRE “A”

ASIGNATURA: TÉCNICAS HISTOLÓGICAS


DOCENTE: MgS. IVÁN PEÑAFIEL MÉNDEZ
ESTUDIANTE:
SALGADO MANRIQUE LAURA PAOLA
TEMA:
TÉCNICAS HISTOQUÍMICAS DE RUTINA Y ESPECIALES

TAREA 10

FECHA DE ENTREGA:
16 DE JULIO DE 2019

PERIODO:
ABRIL-AGOSTO 2019

Página 1 de 26
Tabla de contenido
TABLA DE CLASIFICACIÓN DE TÉCNICAS DE HISTOQUÍMICA ............................... 3
TÉCNICAS DE RUTINA ........................................................................................................ 4
HEMATOXILINA – EOSINA .......................................................................................... 5
AZUL DE TOLUIDINA .................................................................................................... 7
COLORACIÓN CON AZÁN .............................................................................................. 9
GIEMSA ........................................................................................................................... 11
TÉCNICA DE SHIFF ...................................................................................................... 13
TÉCNICAS ESPECIALES .................................................................................................... 15

Página 2 de 26
TABLA DE CLASIFICACIÓN DE TÉCNICAS DE
HISTOQUÍMICA

TÉCNICAS DE HISTOQUÍMICA

Tinciones de Rutina Tinciones Especiales

1. Hematoxilina—Eosina. 1. Tricómica de Mallory

1. Azul de toludina 2. Rojo de Congo

2. Coloración con Azán 3. Tricrómica de Gomori

3. Giemsa 4. Tricrómica de Masson

4. Técnica de Shiff 5. Tinción de Weigert

6. Tricrómica de Van Gieson

7. Orceína

8. Tinción con tinta china o nigrosina

Página 3 de 26
TÉCNICAS DE RUTINA

Página 4 de 26
HEMATOXILINA – EOSINA

Se utiliza en histología para teñir los componentes aniónicos (ácidos) de los tejidos, a
los que da una coloración violeta. Tiñe intensamente los núcleos de las células, dado
que estos contienen ácidos nucleicos ricos en radicales ácidos. Además, se usa una
contracoloración citoplasmática rosada con el colorante ácido.
Técnica
1. Sumergir los preparados histológicos en sustituto de xilol para eliminar los
excesos de parafina.
2. Hacer inmersiones (15 a 20 en cada cuba) en baños de etanol a concentraciones
crecientes: 70%, 80% y 90% para rehidratar la muestra.
3. Lavar con agua corriente para eliminar los excesos de etanol.
4. Sumergir los preparados en Hematoxilina de Harris por 5 minutos (aumentar o
disminuir dependiendo de la calidad del colorante)
5. Lavar en agua corriente para eliminar los excesos de hematoxilina
6. Sumergir los preparados en alcohol ácido realizando de 3 a 5 inmersiones rápidas
7. Lavar en agua corriente
8. Sumergir los preparados en agua amoniacal realizando de 5 a 10 inmersiones, para
provocar el azulamiento
9. Lavar en agua corriente
10. Hacer inmersiones (15 a 20 en cada cuba) en baños de etanol a concentraciones
crecientes: 70%, 80% y 90%
11. Sumergir directamente en la eosina por 3 a 5 minutos (éste colorante tiene base
alcohólica por lo que no se necesita lavar los preparados antes de este paso)
12. Lavar con agua corriente
13. Hacer inmersiones (15 a 20 en cada cuba) en baños de etanol a concentraciones
crecientes: 70%, 80%, 90% y 100% para deshidratar la muestra y se pueda realizar
el montaje con un pegamento no soluble en agua.
14. Hacer inmersiones (15 a 20 en cada cuba) en sustituto de xilol 2 y 3. (Se puede
dejar reposar por dos minutos en el último xilol
15. Dejar secar al aire o en estufa histológica
16. Limpiar los excesos de colorante o parafina que queden en el dorso y en el borde
de la placa
17. Realizar el montaje final

Resultados
 Núcleo celular: Violeta
 Citoplasma: Rosa
 Musculatura: Rojo, rosa o fucsia
 Glóbulos rojos: Rojo, anaranjado
 Fibrina: Rosa

Página 5 de 26
IMÁGENES GUÍA

Secciones de parafina de 8 µm de grosor teñidas con hematoxilina y eosina. A) Vellosidades


del intestino delgado. B) Detalle del epitelio del digestivo. C) Hepatocitos. D) Papila
fungiforme de la lengua.

TEJIDO AUMENTO 10X AUMENTO 40X

Colon

Intestino
delgado

Piel

Página 6 de 26
AZUL DE TOLUIDINA

Como colorante ortocromático, se usa frecuentemente para teñir tejido nervioso, donde
tiñe la heterocromatina y los gránulos de Nissl (acúmulos de cisternas de retículo
endoplásmico rugoso de los somas neuronales). Tiñe metacromáticamente las
estructuras ricas en proteoglucanos sulfatados, como el heparán sulfato, presente por
ejemplo en el cartílago joven (condroblastos y matriz inmadura) y en gránulos de las
células cebadas.
Técnica tinción en conjunto:
1. Agua destilada 1 minuto
2. Solución de Azul de toluidina O 0,1 % 10 - 20 minutos
3. Agua destilada 1 minuto
4. Montar con glicerina

Para preparados permanentes:


5. Etanol 95 % 1 minuto Etanol 95 % 1 minuto
6. Etanol 100 % 1 minuto
7. Etanol 100 % 1 minuto
8. Xileno 1 minuto
9. Xileno 1 minuto
10. Montar los preparados humedecidos con xileno con Entellan y cubreobjetos

Resultados:
 Núcleos celulares azul oscuro
 Tejido azul

Técnica de metacromasia
1. Agua destilada 1 minuto
2. Solución de Azul de toluidina O 0,1 % 1) 1 - 2 minutos
3. Agua destilada 1 minuto
4. Montar con glicerina y cubreobjetos

Para preparados permanentes:


5. Etanol 95 % 1 minuto
6. Etanol 95 % 1 minuto
7. Etanol 100 % 1 minuto
8. Etanol 100 % 1 minuto
9. Xileno 1 minuto
10. Xileno 1 minuto

Página 7 de 26
11. Montar los preparados humedecidos con xileno con Entellan y cubreobjetos.

Resultados:
 Núcleos y citoplasma ortocromático - azul
 Diversos hidratos de carbono ácidos* metacromático - rosa a rojo o violeta *
 Visualización metacromática de tejido conjuntivo, mucosidades, sustancias
básicas de cartílagos, gránulos de mastocitos, muchas sustancias mucínicas
epiteliales.

IMÁGENES GUÍA

TEJIDO AUMENTO 10X AUMENTO 40X

Nervio periférico
(Técnica en
conjunto)

Lengua
(Técnica de
metacromasia)

Página 8 de 26
COLORACIÓN CON AZÁN

Diferencia una mayor diversidad de estructuras histológicas, sobre todo por la


obtención de imágenes nucleares con diferente coloración.
Reactivos
 Xileno
 Etanol de 50º, 80º, 90º, 96º y 100º
 Azocarmín G (C.I. 50085)
 Anilina
 Azul de anilina (C.I. 42755)
 Naranja G (C.I. 16230)
 Ácido fosfotúngstico
 Ácido acético
 H2O destilada
 Agua corriente
 Medio de montaje

Técnica
1.- Xileno para desparafinar, 2x10 min.
2.- Etanol 100º, 2x10 min.
3.- Etanol 96º, 10 min.
4.- Etanol 80º, 10 min.
5.- Etanol 50º, 10 min.
6.- H2O destilada, 5 min.
7.- Azocarmín previamente calentado a 60 ºC durante, 1 h a 60ºC
Azocarmín G
0.1 g de azocarmín G (C.I. 50085)
200 ml H2O destilada
2 ml de ácido acético

8.- H2O destilada, varios lavados.


9.- Diferenciar bajo el microscopio mediante inmersiones sucesivas en alcohol-anilina
(anilina al 0.1 % en etanol 96º).
La velocidad de diferenciación es proporcional a la cantidad de anilina y a la
concentración del alcohol.
10.- Detener la diferenciación con etanol-acético (ácido acético 1% en etanol 96º)

Página 9 de 26
11.- H2O destilada, varios lavados.
12.- Ácido fosfotúngstico al 5%, 1 hora.
Este ácido actuará como mordiente y prepara la tinción con el azul de Heidenhain al
mismo tiempo que continúa la diferenciando el azocarmín.
13.- H2O destilada, varios lavados.
14.- Azul de Heidenhain, 2 h.
Azul de Heidenhain
0.2 g de azul de anilina (C.I. 42755)
0.5 g de naranja G (C.I. 16230)
100 ml de H2O destilada
1 ml de ácido acético
15.- Etanol 96º, una inmersión rápida.
16.- Etanol 100º, varias inmersiones rápidas.
17.- Xileno, 2x10 min.
Resultados
 Núcleos: distinta coloración, desde naranja a rojo.
 Citoplasma: coloración diversa.
 Músculo: naranja a rojo.
 Colágeno: azul.

IMÁGENES GUÍA

Página 10 de 26
GIEMSA
GIEMSA
La tinción de Giemsa tiene como fundamento la disociación controlada de sales de
eosinato que ocurre al insolubilizar la mezcla de Giemsa por dilución en agua
destilada; la eosina así liberada colorea el componente extracelular y determinadas
estructuras acidófilas. La cromatina nuclear adopta una tinción azul violácea algo
distinta a la habitual para colorantes tiacínicos y que recibe la denominación de
efecto Giemsa
Técnica:
1. Desparafinar de forma habitual los preparados histológicos y rehidratar en serie
descendente de alcohol.
2. Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los diferentes
pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario arrastre de
soluciones.
3. Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los períodos
indicados.
4. Agua destilada 10 segundos
5. Azur-eosina-azul de metileno según Giemsa en solución (sin diluir, filtrada) 15
minutos
6. Ácido acético 0,1 % 10 segundos
7. Agua destilada 10 segundos
8. 2-Propanol 10 segundos
9. 2-Propanol 10 segundos
10. 2-Propanol 10 segundos
11. Xileno o Neo-Clear® 5 minutos
12. Xileno o Neo-Clear® 5 minutos
13. Realizar el montaje
Resultado
 Núcleos celulares y células: azul a azul oscuro
 Colágeno, osteoide: azul pálido
 Gránulos eosinófilos: rojo
 Mucopolisacáridos ácidos, gránulos de mastocitos, matriz de cartílago:
rojizo-violeta
 Sustancias acidófilas: rojo anaranjado

Página 11 de 26
IMÁGENES GUÍA

Superficie glandular gástrica con tinción de Giemsa

Músculo esquelético con tinción Giemsa en el que se evidencia una larva de


Trichinella spiralis

Página 12 de 26
TÉCNICA DE SHIFF

Utiliza PAS, ácido peryódico de Schiff, o leucofucsina, un colorante incoloro pero que
se torna rojo estable al contacto con los grupos aldehídos.
La técnica de PAS se utiliza en el laboratorio dentro de los preparados
para microscopía óptica, permitiendo la tinción de componentes celulares que
contienen hidratos de carbono, por ejemplo algunas membranas celulares, células
caliciformes en la mucosa del intestino, fibras reticulares que están rodeados por
hidratos de carbono.
Reactivos
 Reactivo A Ácido peryódico
 Reactivo B Reactivo de Schiff
 Reactivo C Potasio meta-Bisulfito solución
 Reactivo D Solución fijadora
 Reactivo E Hematoxilina de Mayer

Técnica
1. Una vez los cortes hayan sido desparafinados y rehidratados, enjuagar con agua
destilada.
2. Depositar sobre el corte 10 gotas de Reactivo A. Dejar reaccionar durante 10
minutos.
3. Lavar con agua destilada.
4. Depositar sobre el corte 10 gotas de Reactivo B. Dejar reaccionar durante 20
minutos.
5. Lavar con agua destilada.
6. Depositar sobre el corte 10 gotas de Reactivo C. Dejar reaccionar durante 2
minutos.
7. Escurrir el portaobjetos.
8. Sin lavar, depositar sobre el corte 10 gotas de Reactivo D. Dejar reaccionar
durante 2 minutos.
9. Lavar con agua destilada.
10. Depositar sobre el corte 10 gotas de Reactivo E. Dejar reaccionar durante 3
minutos.
11. Hacer virar en agua corriente durante 5 minutos.
12. Deshidratar utilizando la serie creciente de alcoholes.
13. Aclarar con Xileno.
14. Montar con medio de montaje.
15. Observar al microscopio.

Página 13 de 26
Resultados
 Núcleo Violeta-negro
 Polisacáridos simples (glucógeno), mucopolisacáridos neutros, mucoproteínas,
membrana basal, glucolípidos: Rojo-Púrpura.

IMÁGENES GUÍA

Secciones de parafina de 8 µm de grosor teñidas con hematoxilina y eosina (A) y con


PAS y hematoxilina (B). Las secciones pertenecen a campos similares del digestivo.
La tinción de fucsia corresponde al reactivo de Schiff, el cual marca
mucopolisacáridos de las células caliciformes.

Hidradenoma de células claras. Disposición de las fibras de colágeno entre las


células tumorales. (A) Técnica de Shiff 10x; (B) Técnica de Shiff 40x

Página 14 de 26
TÉCNICAS ESPECIALES

Página 15 de 26
TRICÓMICA DE MALLORY
Es utilizada para el estudio del tejido conectivo, glándulas, hongos, piel, lengua, etc.
Se compone de tres colorantes: Fucsina ácida que colorea de rojo a los núcleos. Orange
G es un colorante ácido que se fija al tejido conectivo, citoplasma, músculo, eritrocitos.
Tiñe de color rojo a amarillo. Y Azul de anilina: que es un colorante básico que en
presencia del ácido fosfotúngstico tiñe la colágena de color azul.
Técnica:
FIJACIÓN: Líquido de Zenker.
PROCEDIMIENTO:
1. Desparafinar e hidratar en agua destilada.
2. Remover los cristales de cloruro de mercurio con Yodo por 5 min. Aclarar con
Tiosulfato de sodio 5 min.
3. Lavar en agua corriente bajo el chorro por 10 a 20 min.
4. Enjuagar en aguad destilada por 2 min.
5. Fuschina ácida de 1-5 min.
6. Transferir directamente al Azul de Anilina Orange G por 30-60 min.
7. Deshidratar en alcoholes de 96% - 100% y aclarar en Xilol: 2 cambios de 2
minutos cada uno.
8. Realizar la técnica de montaje

RESULTADOS
 Núcleos rojos.
 Fibras colágenas azul.
 Eritrocitos. amarillos.
 Células basófilas. azul.
 Células cromófobas amarillo.

IMÁGENES GUÍA

Colágeno de músculo con Tricrómica de Mallory

Página 16 de 26
ROJO DE CONGO
El Rojo Congo es un colorante aniónico y puede depositarse en fibrillas de amiloide,
las cuales presentarán en este caso un destacado dicroísmo bajo luz polarizada. Al
trasluz, el tejido teñido con Rojo Congo aparece en color naranja-rojo, mientras que,
si se mira bajo luz polarizada, los depósitos de amiloide se presentan en forma de doble
refracción de color verde intenso sobre fondo oscuro. Hay otros materiales que
también se tiñen con Rojo Congo, como p. ej. el colágeno, pero que, sin embargo, no
son visibles bajo luz polarizada.
Técnica:
1. Desparafinar de forma habitual los preparados histológicos y rehidratar en serie
descendente de alcohol.
2. Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los diferentes
pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario arrastre de
soluciones.
3. Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los períodos
indicados
4. Agua destilada 1 minuto
5. Solución de hematoxilina modificada según Gill II 5 minutos
6. Agua corriente del grifo 5 minutos
7. Reactivo 1 (solución de Rojo Congo) 10 minutos
8. Agua corriente del grifo 5 minutos
9. Reactivo 2 (solución de KOH) 30 - 40 segundos A
10. gua corriente del grifo 5 minutos
11. Etanol 96 % 30 segundos
12. Etanol 96 % 30 segundos
13. Etanol 100 % 1 minuto
14. Etanol 100 % 1 minuto
15. Xileno o Neo-Clear® 5 minutos
16. Xileno o Neo-Clear® 5 minutos
17. Realizar la técnica de montaje
Resultados:
 Núcleos celulares azul oscuro
 Amiloide al trasluz rosa a rojo bajo luz polarizada metacromasia verde
 Tejido conjuntivo, colágeno rojo claro

Página 17 de 26
IMÁGENES GUÍA

Micrografía revelando material amiloide (mancha rojiza) tras teñir tejido cardíaco
con rojo congo en un caso de amiloidosis cardíaca.

Amiloidosis primaria nodular cutánea.


Dermis con tinción de Rojo Congo

Página 18 de 26
TRICRÓMICA DE GOMORI
Es un método idóneo para teñir fibrina, tejido muscular y citoplasmas, donde destaca
esencialmente el condrioma como un fino granulado rojizo.
Técnica
1. Desparafinar e hidratar.
2. Realizar mordentaje en líquido de Bouin durante 1 hora a 56 ºC o 24 horas a Tª
ambiente.
3. Lavar en agua destilada hasta que desaparezca el color amarillo.
4. Teñir con hematoxilina de Weigert durante 10-13 minutos.
5. Realizar un lavado prolongado con agua corriente.
6. Teñir con la solución Tricrómica durante 15 minutos.
7. Diferenciar en la solución de ácido acético al 0,5% durante 15 s (se puede
utilizar también ácido acético al 1%)
8. Si las secciones son muy rojas, se diferenciará con una solución de ácido acético
al 1%, a la cual se le agregarán 0,7 gr de ácido fosfotúngstico.
9. Lavar en agua destilada.
10. Teñir con la solución de verde luz durante 20 o 30 s
11. Deshidratar con alcoholes, aclarar con xileno
12. Realizar la técnica de montaje
Resultados
 Núcleos: negro
 Músculo: rojo
 Colágeno: verde
 Células mioepiteliales: rojo

IMÁGENES GUÍA

Músculo esquelético con tinción Tricrómica de Gomori

Página 19 de 26
TRICRÓMICA DE MASSON

Esta tinción es muy útil para poner de manifiesto las fibras de colágeno, y el conectivo
en general, en comparación células musculares o epitelios. Se emplea mucho en la
diagnosis de procesos tumorales. Hay muchas variantes de esta tinción adaptadas a las
necesidades particulares de cada laboratorio.
Técnica
Partimos de muestras que han sido fijadas en solución de Bouin e incluidas en
parafina. Se han obtenido secciones de unas 8 µm adheridas a portaobjetos.
1. 2x10 min en xileno para desparafinar
2. 2x10 min en etanol 100º
3. 10 min en etanol 96º
4. 10 min en etanol 80º
5. 10 min en etanol 50º
6. 5 min en H2O destilada
7. 3x3 min en H2O destilada.
8. 5 min en Hematoxilina férrica de Weigert (10 min si el colorante lleva más de
5 días hecho).
9. 5 min en agua corriente para diferenciación.
10. 3 min lavado en H2O destilada.
11. 5 min en fucsina-escarlata.
12. 90 ml de Escarlata de Biebrich (C.I. 26905) al 1% en H2O destilada.
13. 9 ml de fucsina ácida en solución acuosa al 1% en H2O destilada.
14. 1 ml de ácido acético glacial.
15. 2 min lavado en H2O destilada
16. 15 min en ácido fosfomolíbdico al 5% en agua destilada
17. 10 min en verde luz al 2 % (puede ser sustituido por azul de anilina).
18. Unos segundos en agua destilada.
19. 3 min de diferenciación con ácido acético al 1% en H2O destilada.
20. Deshidratado rápido, unos segundos, en etanol de graduación creciente: 80º,
96º y 100º
21. 2x10 min en xileno.
22. Realizar la técnica de montaje
Resultados
 Núcleos: café
 Músculo: rojo
 Colágeno: azul
 Glía: rojo
 Cartílago: azul
 Osteoide: azul
 Hueso: rojo
 Citoplasma: rosado.

Página 20 de 26
IMÁGENES GUÍA

Micrografía: tejido conjuntivo denso irregular. Tricrómica de Masson.

Sección de parafina de 8 µm de grosor teñidas con Tricrómica de Masson.


Zona profunda de la lengua

Página 21 de 26
TINCIÓN DE WEIGERT
Se usa para teñir exclusivamente fibras elásticas.
Técnica
1. Desparafinar de forma habitual los preparados histológicos y rehidratar en serie
descendente de alcohol.
2. Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los diferentes
pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario arrastre de
soluciones.
3. Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los períodos
indicados.
4. ELASTINA solución de tinción según Weigert 15 minutos
5. Agua corriente del grifo 1 minuto
6. Solución de rojo nuclear sólido - sulfato de aluminio 0,1 % 5 minutos
7. Agua corriente del grifo 1 minuto
8. Enjuagar con agua destilada 5 - 10 segundos
9. Etanol 70 % 1 minuto
10. Etanol 70 % 1 minuto
11. Etanol 96 % 1 minuto
12. Etanol 96 % 1 minuto
13. Etanol 100 % 1 minuto
14. Etanol 100 % 1 minuto
15. Clarificar con Neo-Clear® o xileno 5 minutos
16. Clarificar con Neo-Clear® o xileno 5 minutos
17. Realizar la técnica de montaje
Resultados
 Fibras elásticas negro
 Núcleos celulares rojo
 Citoplasma rojo claro

IMÁGENES GUÍA

Estructura de una vena caudal post renal con tinción de Weigert.


TA: Túnica adventicia, TM: Túnica media

Página 22 de 26
TRICRÓMICA DE VAN GIESON

Es una tinción donde se combina la tinción nuclear mediante la hematoxilina férrica


de Weigert con la mezcla ácido pícrico-fucsina ácida, la cual permite diferenciar
cromáticamente las fibras colágenas del tejido conjuntivo.
Técnica:
1. 2x10 min en xileno para desparafinar.
2. 2x10 min en etanol 100º
3. 10 min en etanol 96º
4. 10 min en etanol 80º
5. 10 min en etanol 50º
6. 5 min en H2O destilada
7. 10 min en hematoxilina férrica de Weigert
8. 5 min en H2O corriente
9. 1 min en H2O destilada
10. 4 a 5 min con picrofucsina de Van Gieson.
11. 2 x 30 s en H2O acidificada.
12. 3 x 1min en etanol 100º
13. 2 x 5 min en xilol.

Resultado:
 Colágeno: rojo rosado.
 Músculo: amarillo anaranjado.
 Citoplasma: amarillo anaranjado.
 Núcleos: negro azulado.

IMÁGENES GUÍA

Corte longitudinal de la fascia muscular teñida con técnica de van gieson, 10x.
fibras musculares estriadas (1), fibras de colágeno I (2) y tejido adiposo (3)

Página 23 de 26
ORCEÍNA

La orceína pertenece al grupo de los colorantes de oxazina y se recomienda


especialmente para la tinción de fibras elásticas. La orceína se usa también para la
tinción de la cromatina del sexo, para tinción nuclear y para tinción de inclusiones en
el hígado, especialmente de antígenos de la hepatitis B.
Técnica:
1. Desparafinar de forma habitual los preparados histológicos y rehidratar en
serie descendente de alcohol.
2. Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los
diferentes pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario
arrastre de soluciones.
3. Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los
períodos indicados.
4. Agua destilada 1 minuto
5. Solución de orceína 30 minutos
6. Agua destilada enjuagar
7. Hematoxilina en solución modificada según Gill II 30 segundos
8. Agua corriente del grifo 30 segundos
9. Etanol 95 % 1 minuto
10. Etanol 95 % 1 minuto
11. Etanol 100 % 1 minuto
12. Etanol 100 % 1 minuto
13. Xileno 5 minutos
14. Xileno 5 minutos
15. Realizar la técnica de montaje
Resultado
 Fibras elásticas pardo rojizo
 Núcleos celulares azul oscuro a violeta oscuro
 Colágeno no teñido
IMÁGENES GUÍA

Hígado. Tinción con Orceína. Depósitos de proteína asociada con


cupricosis en hepatocitos

Página 24 de 26
TINCIÓN CON TINTA CHINA O NIGROSINA

La tinta china en los laboratorios de anatomía patológica se aplica en muestras de tejido


extraídas quirúrgicamente con la finalidad de marcar los márgenes de resección del
tumor.
El tejido marcado se rocía con ácido acético. Este actúa como un mordiente y evita
que la tinta se salga cuando el tejido es sometido al procesamiento de rutina para el
preparado de la biopsia.
El procedimiento consiste en bañar el tejido en alcohol y xileno, y luego embeber en
cera de parafina. Este marcaje orienta al patólogo al momento de observar el tejido,
indicándole dónde está el margen de resección quirúrgica u otro punto de interés.

Página 25 de 26
REFERENCIAS

 BARRERA SORAYA, “Técnicas de Histoquímica” Madrid – España


[Publicado el 22 de mayo, 2017 – Citado 14 de julio, 2019] Obtenido de:
https://www.seap.es/documents/228448/526861/01_Barrera.pdf%0D
 ACUÑA ULISES, “Histoquímica en Anatomía Patológica” El Salvador
[Publicado el 04 de febrero, 2015 – Citado 14 de julio, 2019] Obtenido de:
https://dialnet.unirioja.es/descarga/articulo/3959325.pdf
 Rosai and Ackermans Surgical Pathology, 10th Edition, By Juan Rosai
[Citado 14 de julio, 2019]
 ROBINSON FRANCISCO “écnicas Histoquímicas” [Publicado el 09 de
noviembre, 2016 – Citado 14 de julio, 2019] Obtenido de:
http://redsalud.uc.cl/ucchristus/anatomia-patologica/lab-apatologica/lab-
histoquimica.act

Página 26 de 26

También podría gustarte