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Patrimoine Mondial
Nombre: Maria del Pilar
Apellido: Bosch Roig
Nacionalidad del autor: Española
Lenguaje de la tesis: Español
Título de la tesis: Caracterización del biodeterioro y desarrollo
de nuevos tratamientos de limpieza aplicables a los frescos
restaurados de Antonio Palomino en la iglesia de los Santos
Juanes de Valencia.
Tipo de tesis: PhD
Supervisor de la tesis: Maria Teresa Domenech Carbó, Rosa
Maria Montes Estellés y Fernando Bolívar Galiano
Institución del supervisor: Universidad Politécnica de
Valencia, España

7, place de Fontenoy
75352 Paris 07 SP, France
Tél. : +33 (0)1 45 68 10 00
Fax : +33 (0)1 45 67 16 90

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„ Resumen de 500 palabras de su tesis; puede adjuntar el índice o cualquier otro docu-
mento que considere oportuno:

CASTELLANO
Esta investigación se centra en el estudio de las pinturas murales realizadas por Antonio Palomino (s.
XVII) en la bóveda central de la iglesia de los Santos Juanes de Valencia y restauradas por Gudiol en los
años 60. Las pinturas están formadas tanto por materiales inorgánicos (propios del buen fresco) como por
materiales orgánicos (principalmente debidos a las restauraciones). Los componentes de las pinturas pue-
den experimentar procesos de biodeterioro con el consiguiente cambio en sus propiedades estéticas, físi-
co-mecánicas y químicas. El objetivo general de esta tesis doctoral es el estudio del biodeterioro presente
en las pinturas murales que alberga la iglesia y la formulación de una propuesta de intervención desde el
punto de vista biológico. Para ello, se realiza una caracterización de los materiales originales y de los
compuestos y tratamientos que se aplicaron en las restauraciones anteriores, con la intención de determi-
nar cuales son susceptibles de sufrir biodeterioro. Se han utilizado diferentes técnicas analíticas como:
Microscopía Estereomicroscopica, Óptica y Electrónica (SEM/EDX); Espectroscopía Infrarroja por
Transformada de Fourier (FTIR); Cromatografía de Gases-Espectroscopía de Masas (GC/MS) y Pirólisis
(Py-GC-MS). Por otro lado, se realiza la determinación del estado de contaminación de las pinturas me-
diante el estudio de las condiciones medioambientales y la identificación de microorganismos. Con este
objetivo, se procede al aislamiento, cultivo, recuento e identificación de microorganismos con microsco-
pía óptica, pruebas bioquímicas y técnicas de biología molecular. Así mismo, se evalúa la resistencia al
biodeterioro de los materiales utilizados en la restauración. Por último, se desarrollan nuevos métodos al-
ternativos de limpieza de pintura mural basados en la utilización de microorganismos (Pseudomonas stut-
zeri) para la eliminación de materia orgánica y eflorescencias. Se realizan primero pruebas de biolimpieza
en el laboratorio, para posteriormente aplicarlas sobre las pinturas murales de la iglesia.
Los resultados obtenidos más destacados son: La identificación de tres géneros liquénicos, Caloplaca sp.,
Lecanora sp. y Candelariella sp., capaces de bioacumular metales pesados; la presencia de elevados nive-
les de microorganismos en el aire interior de la iglesia, 151-400 UFC/m3, identificando Aspergillus sp. y
Penicillium sp. como los géneros de hongos más frecuentes, y la identificación sobre las pinturas murales
restauradas de bacterias de la clase Bacilli y de hongos de los géneros Aspergillus y Penicillium mediante
técnicas de biología molecular. Se ha comprobado la elevada susceptibilidad al biodeterioro del soporte
de madera y algodón utilizado en la restauración anterior, y la elevada resistencia al biodeterioro del nue-
vo soporte de aluminio y fibra de carbono que se está utilizando en la actual restauración. Por último, se
muestran magníficos resultados de biolimpieza, principalemente de sulfatos, mediante la utilización de
Pseudomonas stutzeri aplicada con un nuevo soporte: el agar.

VALECIÀ
Titol: Caracterització de la biodeterioració i desenvolupament de nous tractaments de neteja aplicables als
frescos restaurats d'Antonio Palomino en l'església dels Sants Joans de València.

Resum: Aquesta investigació se centra en l'estudi de les pintures murals realitzades per Antonio Palomino
(s. XVII) en la volta central de l'església dels Sants Joans de València i restaurades per Gudiol en els anys
60. Les pintures estan formades tant per materials inorgànics (propis del bon fresc) com per materials
orgànics (principalment deguts a les restauracions). Els components de les pintures poden experimentar
processos de biodeterioració amb el consegüent canvi en les seues propietats estètiques, físico-
mecàniques i químiques. L'objectiu general d'aquesta tesi doctoral és l'estudi de la biodeterioració present
en les pintures murals que alberga l'església i la formulació d'una proposta d'intervenció des del punt de
vista biològic. Per a això, es realitza una caracterització dels materials originals i dels compostos i tracta-
ments que es van aplicar en les restauracions anteriors, amb la intenció de determinar quins són suscepti-
bles de patir biodeterioració. S'han utilitzat diferents tècniques analítiques com: Microscopia Estereomi-
croscòpica, Òptica i Electrònica (SEM/EDX); Espectroscopia Infraroja per Transformada de Fourier
(FTIR); Cromatografia de Gasos-Espectroscopia de Masses (GC/MS) i Piròlisi (Py-GC-MS). D'altra ban-
da, es realitza la determinació de l'estat de contaminació de les pintures mitjançant l'estudi de les condi-
cions mediambientals i la identificació de microorganismes. Amb aquest objectiu, es procedeix a l'aïlla-
ment, cultiu, recompte i identificació de microorganismes amb microscopia òptica, proves bioquímiques i
tècniques de biologia molecular. Així mateix, s'avalua la resistència a la biodeterioració dels materials uti-
litzats en la restauració. Finalment, es desenvolupen nous mètodes alternatius de neteja de pintura mural
basats en la utilització de microorganismes (Pseudomonas stutzeri) per a l'eliminació de matèria orgànica
i eflorescències. Es realitzen primer proves de bioneteja en el laboratori, per a posteriorment aplicar-les
sobre les pintures murals de l'església.
Els resultats obtinguts més destacats són: La identificació de tres gèneres liquènics, Caloplaca sp., Leca-
nora sp. i Candelariella sp., capaços de bioacumular metalls pesants; la presència d'elevats nivells de mi-
croorganismes en l'aire interior de l'església, 151-400 UFC/m3, identificant Aspergillus sp. i Penicillium
sp. com als gèneres de fongs més freqüents, i la identificació sobre les pintures murals restaurades de bac-
teris de la classe Bacilli i de fongs dels gèneres Aspergillus i Penicillium mitjançant tècniques de biologia
molecular. S'ha comprovat l'elevada susceptibilitat a la biodeterioració del suport de fusta i cotó utilitzat
en la restauració anterior, i l'elevada resistència a la biodeterioració del nou support d'alumini i fibra de
carboni que s'està utilitzant en l'actual restauració. Finalment, es mostren magnífics resultats de bioneteja,
principalment de sulfats, mitjançant la utilització de Pseudomonas stutzeri aplicada amb un nou suport: el
agar.
ENGLISH
TITLE: Characterization of the biodeterioration and development of new cleaning treatments applied to
the restored frescoes of Antonio Palomino in the Santos Juanes church of Valencia.

This research focuses on the study of the frescoes painted by Antonio Palomino (XVII) in the central
vault of the Santos Juanes church of Valencia and restored by Gudiol in the 60's. The paintings are com-
posed of both inorganic materials (from the frescoes) and organic materials (mainly due to the restora-
tion). The components of the paintings may experience biodeterioration processes with a consequent
change on its aesthetic, physical, mechanical and chemical properties. The main objective of this thesis is
the study of the biodeterioration of the wall paintings presents in the church and the formulation of a bio-
logical intervention proposal. In order to do this, we characterize the original materials, compounds and
treatments that were applied in previous restorations, to determine which are susceptible to biodeteriora-
tion. We used different analytical techniques such as Optic and Electronic Microscopy (SEM/EDX), Fou-
rier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR), Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC/MS) and
Pyrolysis (Py-GC-MS). On the other hand, it is determined the contamination state of the paintings
through the study of environmental conditions and the identification of microorganisms. With this objec-
tive, isolation, culture, recount and identification of microorganisms is done by light microscopy, bioche-
mical tests and molecular biology techniques. It is also evaluated the resistance to biodeterioration of the
materials used in restoration. And finally, it is developed a new alternative method for wall painting clea-
ning based on the use of microorganisms (Pseudomonas stutzeri) to removal organic matter and efflores-
cence. Biocleaning tests are performed first in the laboratory, and later applied on the frescoes of the
church.
The most outstanding results are: The identification of three lichenic genus, Caloplaca, Lecanora and
Candelariella able to bioaccumulate heavy metals; the presence of high levels of airborne microorganisms
inside the church, 151-400 UFC/m3, identifying Aspergillus and Penicillium as the most common fungal
genera; and the recognition by molecular biology techniques in the restored frescoes, bacteria from the
Bacilli class and fungi from the Aspergillus and Penicillium genus. It has been prove the high susceptibili-
ty to biodeterioration of wood and cotton support used in the previous restoration, and the high resistance
to biodeterioration of the new aluminum and carbon fiber support being used in the current restoration.
Finally, there are shown great results of biocleaning, mainly sulfates, using Pseudomonas stutzeri applied
with a new delivery system: agar.

ITALIANO
TITOLO: Caratterizzazione del biodeterioramento e sviluppo di nuovi trattamenti di pulizia applicati agli
affreschi restaurati di Antonio Palomino nella chiesa dei Santos Juanes di Valencia.

SINTESI: Questa ricerca si concentra sullo studio dei dipinti murali di Antonio Palomino (XVII sec.) pre-
senti nella volta centrale della chiesa dei Santos Juanes de Valencia, e restaurati da Gudiol negli anni 60. I
dipinti sono composti da materiali inorganici (tipico dei buon affreschi) e materiali organici (principal-
mente a causa del restauro). I componenti dei dipinti possono essere soggetti a processi di biodeteriora-
mento con un conseguente cambio nella loro proprietà estetiche, fisiche-meccaniche e chimiche. L'obiet-
tivo generale di questa tesi è lo studio dei biodeterioramenti presenti nei dipinti murali che ospita la chiesa
e la formulazione di una proposta di intervento dal punto di vista biologico. Per fare questo, abbiamo ca-
ratterizzatto i materiali originali e i composti e trattamenti che sono stati applicati in precedenti restauri,
con l'intenzione di determinare quali sono suscettibili di biodeterioramento. Abbiamo utilizzato diverse
tecniche analitiche come Microscopia Estereomicroscopica, Ottica ed Elettronica (SEM/EDX), Spettros-
copia Infrarossa Trasformata di Fourier (FTIR), Cromatografia di Gas-Spettrometria di Massa (GC/MS) e
Pirolisi (Py-GC-MS). D'altra parte, si è determinato lo stato di inquinamento dei dipinti attraverso lo stu-
dio delle condizioni ambientali ed all’identificazione dei microrganismi. Con questo obiettivo sono stati
effettuati l'isolamento, la coltivazione, l’inventario e l'identificazione dei microrganismi mediante micros-
copia ottica, tecniche di biochimica e biologia molecolare. E’ stata valutata anche la resistenza al biodete-
rioramento dei materiali utilizzati nel restauro. Infine, si sono sviluppati nuovi metodi alternativi per la
pulizia dei dipinti murali basati sull'uso di microrganismi (Pseudomonas stutzeri) per la rimozione di sos-
tanze organiche ed efflorescenze. Le prove di biopulizia sono state effettuate prima in laboratorio, e poi
sono state applicate sui dipinti murali nella chiesa.
I risultati più importanti sono: l'identificazione di tre generi di licheni, Caloplaca, Lecanora e Candelarie-
lla, con la capacità di bioaccumulare metalli pesanti; la presenza di elevati livelli di microrganismi nell'a-
ria all'interno della chiesa, 151-400 UFC/m3, indentificando Aspergillus e Penicillium come i generi più
comuni di funghi, e l'identificazione sugli affreschi restaurati di batteri della classe Bacilli e funghi dei
generi Aspergillus e Penicillium mediante tecniche di biologia molecolare. E' stata dimostrata una elevata
suscettibilità al biodeterioramento di sostegno in legno e cotone utilizzato nel restauro precedente, e una
elevata resistenza al biodeterioramento dei nuovi sostegni di alluminio e fibra di carbonio utilizzati nel
restauro in corso. Infine, si mostrano ottimi risultati di biopulizia, principalmente dei solfati, utilizzando
Pseudomonas stutzeri applicati con un nuovo materiale: l’agar.
„ Áreas temáticas

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urbanos históricos

Desiertos Patrimonio Intangible

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Patrimonio Moderno y Contemporáneo
luntariado
Patrimonio mueble. Museos y Museolo-
Genealogía y Heráldica
gía
Impacto del cambio climático sobre el
Patrimonio mundial
Patrimonio (Natural y/o Cultural)
Investigación sobre la conservación
Patrimonio Natural y Medio ambiente
física y química de materiales
Legislación (nacional e internacional),
Convenciones, Recomendaciones, Car- Patrimonio Vernáculo
tas y Declaraciones

Lenguas y Toponimia Pintura y Arte Rupestre

Montañas Restauración y técnicas de conservación

Rutas e itinerarios culturales (rutas, ca-

Paisajes Culturales
nales, vías férreas, ríos, etc.)

Patrimonio arqueológico Turismo cultural y Ecoturismo

Patrimonio Científico, Astronómico,

Tecnológico e Industrial

Otras (Máximo 150 caracteres)

Biodeterioro de obras de arte y la utilización de bacterias para la limpieza de pintura

mural.
„ Índice de contenido
Indique el índice del trabajo de investigación

PARTE I: ASPECTOS GENERALES

INTRODUCCIÓN
Historia de la iglesia y de su restauración
Biología, Arte y Biodeterioro.
Pintura mural al fresco
Bibliografía
OBJETIVOS Y PLAN DE TRABAJO

PARTE II: EXPERIMENTAL

CAPÍTULO 1. ESTUDIO DE LAS CONDICIONES MEDIAMBIENTALES DEL

EXTERIOR DE LA IGLESIA

1.1. ESTUDIO CLIMATOLÓGICO DEL CENTRO DE LA CIUDAD DE VALENCIA

1.1.1. Introducción
1.1.2. Materiales y métodos
1.1.3. Resultados y discusión
1.1.4. Bibliografía

1.2. ESTUDIO DE LA CONTAMINACIÓN AMBIENTAL DEL CENTRO DE LA CIUDAD

DE VALENCIA MEDIANTE LA UTILIZACIÓN DE LIQUENES COMO
BIOINDICADORES
1.2.1. Introducción
1.2.2. Materiales y métodos
[Link]: Selección de puntos de muestreo y toma de muestras
[Link]: Identificación liquénica
[Link]: Estudio de la cantidad de metales pesados
1.2.3. Resultados y discusión
1.2.4. Bibliografía

CAPÍTULO 2: ESTUDIO MICROCLIMÁTICO DEL INTERIOR DE LA IGLESIA DE LOS

SANTOS JUANES DE VALENCIA
2.1. Introducción
2.2. Materiales y métodos
2.2.1. Instrumentación
2.2.2. Protocolo de muestreo
2.3.2. Análisis de los datos
2.3. Resultados y discusión
2.4. Bibliografía

CAPÍTULO 3: ESTUDIO ANALÍTICO DE LAS PINTURAS, DE LOS AGLUTINANTES

Y DE LOS MATERIALES INTEGRANTES DE LAS PINTURAS MURALES
RESTAURADAS.
3.1. Introducción
3.2. Materiales y métodos
3.2.1. Toma de muestra
3.2.2. Reactivos y materiales de referencia
3.2.3. Preparación de muestras
3.2.4. Técnicas microscópicas
3.2.5. Técnicas Químico-Analíticas.
3.3. Resultados y discusión
3.4. Bibliografía

CAPÍTULO 4: IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS

4.1: IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS DEL AIRE

4.1.1. Introducción
4.1.2. Materiales y métodos

[Link]
 [Link]. Toma de muestra.
[Link]. Cultivo, aislamiento e identificación de microorganismos.
[Link]. Medios de cultivo.
[Link]. Análisis estadístico de los datos.
4.1.3. Resultados y discusión
4.1.4. Bibliografía

4.2: IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS PRESENTES EN LAS PINTURAS

MURALES RESTAURADAS
4.2.1. Introducción
4.2.2. Materiales y métodos
[Link]. Toma de muestra.
[Link]. Extracción de ADN, selección de microorganismos por RAPD y secuenciación.
[Link]. Identificación morfológica de hongos y bacterias y Tinción de
Gram.
[Link]. Medios de cultivo.
4.2.3. Resultados y discusión
4.2.4. Bibliografía

4.3: IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS DE LOS SOPORTES DE LAS

PINTURAS RESTAURADAS
4.3.1. Introducción
4.3.2. Materiales y métodos
[Link]. Preparación de probetas de referencia.
[Link]. Selección de microorganismos utilizados
[Link]. Obtención de suspensiones de microorganismos
[Link]. Inoculación de las probetas
[Link] Observación y documentación fotográfica.
[Link]. Medios de cultivo.
4.3.3. Resultados y discusión
4.3.4. Bibliografía

CAPÍTULO 5: SISTEMAS DE BIOLIMPIEZA

5.1. Introducción
5.2. Materiales y métodos
5.2.1. Material artístico utilizado

5.2.2. Toma de muestra

5.2.3. Técnicas de análisis
5.2.3. Realización de las probetas
5.2.4. Ensayos de biolimpieza con bacterias
5.2.5. Medios de cultivo
5.3. Resultados y discusión
5.4. Bibliografía

CONCLUSIONES

ANEXOS