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AGRADECIMEINTO
Contenido
1. Introducción ........................................................................................................................................ 4
2. Objetivo ............................................................................................................................................... 5
2.1. Objetivo General .......................................................................................................................... 5
2.2. Objetivo Específicos ..................................................................................................................... 5
3. Marco Teórico ..................................................................................................................................... 6
3.1. Copro Simple ................................................................................................................................ 7
3.1.1. Preparación para la prueba................................................................................................... 8
3.2. Copro Seriado............................................................................................................................... 8
3.2.1. Preparación para la prueba................................................................................................... 9
3.3. Moco Fecal ................................................................................................................................. 10
3.3.1. Preparación para la prueba................................................................................................. 11
3.4. Indicaciones y solicitud .............................................................................................................. 11
3.5. Algoritmo de procesamiento y metodologías ........................................................................... 12
3.6. Técnicas especiales y coloraciones ............................................................................................ 15
4. Conclusión ......................................................................................................................................... 19
5. Bibliografía ........................................................................................................................................ 20
1. Introducción
El examen coproparasitario es un conjunto de técnicas diagnosticas que constituyen
la indicación metodológica para la identificación de la mayoría de las enteroparasitosis
motivadas por protozoarios o helmintos.
Su eficacia y sensibilidad para establecer un diagnostico correcto depende de la
adecuada indicación
y preparación de la muestra, los datos clínicos y antecedentes de interés que sean
aportados al laboratorio y de su correcta y completa ejecución con examen directo
microscópico, enriquecimiento y examen macroscópico final.
Otras técnicas complementarias (coloraciones, enriquecimientos especiales, etc),
contribuyen a completar el esquema del examen, en circunstancias especificas
(agentes oportunistas, emergentes, exóticos o endémicos).
Coproparasitología es la ciencia que estudia los parásitos y microorganismos que
están de más o interfieren con el buen funcionamiento del organismo, y que de alguna
manera se dan a conocer por la materia fecal; ya que ahí van los desechos que el
cuerpo no necesita y son expulsados, pero en algunas ocasiones no se expulsan del
todo, sino que algunas partes quedan dentro y es necesario examinar la muestra para
saber cuál es el problema que se presenta.
2. Objetivo
2.1. Objetivo General
2.2. Objetivo Específicos
3. Marco Teórico
El examen coproparasitoscópico es uno de los estudios de laboratorio que se pueden
hacer para analizar las heces fecales, en particular este estudio se utiliza para
identificar anormalidades correspondientes a infecciones parasitarias.
El tipo de muestra recogida dependerá de la especie y forma del parásito sospechado.
El conocimiento del ciclo vital del parásito ayuda a determinar el tipo, cantidad y
frecuencia de los especímenes necesarios para el diagnóstico.
Para el estudio se requiere que se recolecte una muestra de heces fecales en un
frasco limpio de vidrio con tapa de rosca. No se deben mezclar las heces con orina o
con ningún otro líquido como agua de la taza del baño.
El estudio se puede hacer con una sola muestra de heces fecales (examen
coproparasitoscópico simple), este estudio simple es suficiente cuando la evidencia
es tal que con una sola muestra se logran identificar gran cantidad de parásitos. Sin
embargo la mayor parte de las veces es mejor solicitar un examen
coproparasitoscópico seriado que consiste en evaluar 3 muestras de heces fecales,
una cada día.
La muestra de heces fecales debe de recolectarse de preferencia en la mañana unas
horas o minutos antes de llevarla al laboratorio, y de no ser posible, en la noche
anterior y refrigerarla en el recipiente en el que se recolecto. La cantidad de heces no
debe de ser mucha, generalmente con una pequeña muestra (100 grs.) es suficiente.
El frasco debe cerrarse herméticamente y no exponerse a calor extremo.
Las muestras no deben recogerse durante 1 semana si el paciente ha estado tomando
materiales que dejan residuos cristalinos, como compuestos antidiarreicos,
antiácidos, bismuto y bario, Además los laxantes a base de aceites, como la parafina,
pueden interferir en los exámenes. Los antibióticos y los medios de contraste pueden
disminuir la cantidad de organismos, particularmente los protozoos, en las heces
durante 2 a 3 semanas.
El análisis de las heces e hace primero de manera macroscópica, evaluando
consistencia, color, aspecto, presencia de moco, sangre, parásitos, etc.
Se toma la muestra, se mezcla con yodo de lugol y se observa al microscopio para la
identificación de células inflamatorias, presencia de glóbulos rojos, y sobre todo para
identificar huevos, quistes o parásitos microscópicos. Otra muestra se evalúa en
fresco para identificar parásitos móviles.
En caso de no identificar parásitos en el primer examen se debe examinar las
muestras obtenidas cada 2 a 3 días.
Muchas infecciones parasitarias pueden pasar inadvertidas, a menos que se estudien
con tinciones permanentes especiales.
3.1. Copro Simple
¿Qué es?
Es una prueba útil para el diagnóstico de infecciones parasíticas intestinales, que al
analizarse aspectos macroscópicos y microscópicos podemos identificar algún
problema a nivel intestinal causado por parásitos intestinales.
¿Para qué sirve?
Es útil en el diagnóstico de parásitos intestinales que pueden generar problemas
como malabsorción de nutrientes, inflamación, obstrucción, disentería (heces con
sangre), diarrea acuosa y lesiones graves que pueden llevar a parasitosis migratorias
invasivas, dependiendo la capacidad inmune del paciente. Las complicaciones de las
parasitosis intestinales pueden ser problemas nutricionales, anemias, deshidratación,
daño de órganos aledaños o daños de órganos periféricos causando lesiones graves.
Es necesario que el paciente consulte con el personal de laboratorio o medico acerca
del parasito identificado, tratamiento y posibles complicaciones.
Resultados de la prueba de leucocitos fecales para diferentes umbrales de positividad
para todos los enteropatogenos bacterianos:
3.1.1. Preparación para la prueba
Tipo de Muestra: Heces Fecales
Revise las Instrucciones de Toma de Muestra en la sección Recolección de Heces
Fecales. Evite contaminar la muestra con agua del inodoro u orina. Solo deposite en
el frasco una cantidad del tamaño de una pepa de durazno. Limpie el frasco e
identifique con todos los datos del paciente.
3.2. Copro Seriado
¿Qué es?
Es una prueba útil para el diagnóstico de infecciones parasíticas intestinales, al
solicitar un examen seriado de heces, lo que se pide al paciente es llevar al laboratorio
muestra de heces durante tres días continuos, esto debido a que ciertos parásitos
cumplen un ciclo reproductivo y los estadios pueden depender de un día a otro y así
ayudar a identificar el parasito causante de la infección.
¿Para qué sirve?
Es una prueba útil para el diagnóstico de infecciones parasíticas intestinales
causando malabsorción de nutrientes, inflamación, obstrucción, disentería (heces con
sangre), diarrea acuosa y lesiones graves que pueden llevar a parasitosis migratorias
invasivas, dependiendo la capacidad inmune del paciente. Las complicaciones de las
parasitosis intestinales pueden ser problemas nutricionales, anemias, deshidratación,
daño de órganos aledaños o daños de órganos periféricos causando lesiones graves.
Es necesario que el paciente consulte con el personal de laboratorio o medico acerca
del parasito identificado, tratamiento y posibles complicaciones.
Frecuencia de recuperación de parásitos intestinales utilizando tres técnicas
coproparasitologicas de concentración
3.2.1. Preparación para la prueba
Tipo de Muestra: Heces Fecales
Revise las Instrucciones de Toma de Muestra en la sección Recolección de Heces
Fecales. Evite contaminar la muestra con agua del inodoro u orina. Solo deposite en
el frasco una cantidad del tamaño de una pepa de durazno. Limpie el frasco e
identifique con todos los datos del paciente.
3.3. Moco Fecal
¿Qué es?
Es una prueba útil para el diagnóstico de infecciones parasíticas intestinales, que al
analizarse aspectos macroscópicos y microscópicos podemos identificar algún
problema a nivel intestinal a partir de la muestra de heces.
¿Para qué sirve?
A diferencia de un coproparasitologico simple, se realiza una investigacion profunda
de diversos procesos infecciosos, inflamatorios y digestivos, observando
microscopicamanete la presencia de células sanguíneas, parasitos, hongos,
levaduras o actividad bacteriana o viral, además de la capacidad digestiva del
paciente y la respuesta corporal a este proceso.
3.3.1. Preparación para la prueba
Tipo de Muestra: Heces Fecales
Revise las Instrucciones de Toma de Muestra en la sección Recolección de Heces
Fecales. Evite contaminar la muestra con agua del inodoro u orina. Solo deposite en
el frasco una cantidad del tamaño de una pepa de durazno. Limpie el frasco e
identifique con todos los datos del paciente.
3.4. Indicaciones y solicitud
La indicación del examen coproparasitario, por parte del médico, debe atender al
parásito que se sospecha, tomándose en cuenta que esta metodología es realmente
útilpara aquellos protozoarios, cuyos trofozoítos, quistes u ooquistes, o helmintos,
cuyos huevos o anillos se emiten mezclados con las materias fecales. Esta
consideración excluye a Etzterobius vemicularis (oxiuro), dada su característica
biológica de oviposición en la margen anal, por lo que su diagnóstico se efectúa
mediante el método de espátula adhesiva.
Debe tenerse en cuenta, para efectuar con éxito el examen coproparasitario, la
adecuada obtención de tres muestras mínimas de materia fecal, debidamente
obtenidas mediante: preparación del paciente, correcta preparación del material y
cronograma de obtención .
La preparación del paciente pasa por lograr mediante un régimen alimenticio previo
(48 horas antes), con la menor cantidad posible de frutas, verduras y grasas,
observaciones microscópicas libres de residuos, que obstaculicen el estudio.
Una muestra correcta de materia fecal para el examen coproparasitario debe ser
suficiente (más de 50 g), reciente (conservar en heladera hasta 8 horas y aplicar
conservadores en plazos mayores), correctamente rotulada (nombre del paciente y
fecha de emisión), en frasco de vidrio transparente, limpio, seco y de boca ancha con
tapa-rosca y sin mezcla de orina (para evitar deterioro de parásitos o dificultades nara
extender frotis de coloraEl cronograma de obtención del material debe considerar: a)
que muestras únicas solo permiten diagnósticos positivos en 60% de las materias con
parásitos (i3); b) que los parásitos (protozoarios y helmintos) tienen ciclos de
eliminación de huevos y quistes con períodos negativos para la presencia de los
mismos en las materias fecales y c) que existen diversos esquemas sobre la
secuencia de las muestras recolectables.
Los esquemas de recolección más empleados indican tres muestras en días alternos,
colectadas según lo anteriormente expresado.
Una condición fundamental para obtener los más completos y rigurosos resultados es
acompañar el material con datos clínicos y antecedentes (personales, familiares y
ambientales) del paciente, así como la sospecha que lleva a la búsqueda del
diagnóstico coproparasitológico.
Datos como inmunodepresión de diverso tipo, procedencia del extranjero,
condiciones ambientales del examinado o antecedentes familiares de parasitosis,
pueden orientar o adaptar la secuencia de estudios y técnicas que se ejecutarán.
3.5. Algoritmo de procesamiento y metodologías
El desarrollo básico del examen coproparasitario debe incluir ineludiblemente tres
tiempos: a) examen directo en fresco, b) técnica de enriquecimiento y c) examen
macroscópico.
La presencia de nuevas enteroparasitosis emergentes (criptoporidiosis,
ciclosporidiasis, etcétera) o la pesquisa de parásitos exóticos para nuestro medio, con
requerimientos diagnósticos especiales (anquilostómidos, etcétera) llevan
actualmente a la adopción de técnicas complementarias en 10 referente a
coloraciones y enriquecimientos.
El material recibido, en correctas condiciones de envío y conservación, pasa a ser
procesado en un primer tiempo de observación microscópica directa, en fresco y con
tinción por lugo1 parasitológico. Para la obtención de la muestra se procede a una
observación de la materia fecal recibida, tomándose mediante asa bacteriológica
muestras de elementos patológicos (moco, pus o sangre) si se los observara, o de
cualquier sector aleatoriamente en caso de no identificarse materiales anormales.
La observación se inicia con la suspensión de ese material en una gota de 0,05 ml de
solución salina isotónica, sobre portaobjeto, y simultáneamente otra muestra similar
seria mezclada en 0,015 ml de lugo1 parasitológico. Este colorante; de gran afinidad
por los azúcares complejos, permite obtener coloraciones contrastadas que facilitan
la observación de elementos intracelulares
Los aumentos empleables en el microscopio, se iniciarán por el lente topográfico (30
x), para seguir progresivamente hasta completar la totalidad de objetivos en seco
disponibles (generalmente 200 x y 450 x). La búsqueda de huevos o larvas de
helmintos requiere especial cuidado; ya que su presencia puede concentrarse en
sectores de la laminilla o de la muestra preparada
Un resultado positivo, en el examen directo, depende del azar o de la presencia de
un gran número y concentración de elementos parasitarios en el material observado
El enriquecimiento es el tiempo del examen coproparasitario que tiene por finalidad la
concentración de los elementos parasitarios, aumentando la sensibilidad de la
observación cuando su número es escaso y escapa a la detección del examen directo.
Existen dos grupos de técnicas de enriquecimiento: a) técnicas de sedimentación y
b) técnicas de flotación.
Algunas de las técnicas más conocidas y empleadas son, entre las de sedimentación,
Ritchie o Carles y Barthelemy; y entre las de flotación, Willis o Faust (14,‘5).
En la práctica diaria del Laboratorio de Parasitología del Departamento de Laboratorio
Clínico, las técnicas de concentración empleadas son el Ritchie, en sedimentación, y
el Faust, en flotación (ver anexos 1 y 2).
En relación a técnicas de sedimentación derivadas de la técnica básica de Ritchie, se
cuenta con diversas modificaciones como en caso del tiempo de lavado para la
extracción de grasas, utilizándose en lugar de éter sulfúrico el acetato de etilo o el
empleo soluciones alcohólicas tamponadas, en los últimos lavados del sedimento.
Existen en la actualidad técnicas de enriquecimiento
con equipos comerciales descartables, que poseen la ventaja de un procesamiento
en circuito cerrado, hecho que brinda resaltable bioseguridad con gran exactitud
diagnóstica, pero estos materiales descartables poseen un costo no siempre posible
de a La tabla 1 detalla las ventajas y utilidades de las técnicas de Ritchie y Faust”,
que se utilizan en Uruguay desde largo tiempo atrás por las instituciones.
El examen macroscópico se fundamenta en el macerado de la materia remanente
sobre un tamiz (malla tina de 0,5 mm) que se coloca debajo de un fuerte chorro de
agua de canilla, hasta observar solo restos vegetales o eventuales parásitos
macroscópicos. El residuo retenido en la malla fina se depositará para su examen en
una bandeja esmaltada de fondo bicolor (campo negro y blanco). Este tiempo del
examen coproparasitario es útil en el control de tratamiento de teniasis por
Tsaginato/soLium con antihelmínticos, a los efectos de certificar curación por
eliminacion del escolex, o para detectar otros parásitos de gran tamaño (Ascaris
lumbricoides, hidatides evacuadas por vía digestiva, etcétera.)
Los tres tiempos básicos (directo, enriquecimiento y macroscópico) constituyen
etapas ineludibles del trabajo diagnóstico, que implica un completo examen
coproparasitario.
La realización de estas tres etapas junto con la correcta preparación del material a
examinar y la recolección seriada de tres muestras son la garantía de mayor eficacia
en el diagnóstico a realizar.
3.6. Técnicas especiales y coloraciones
La llegada de nuevos agentes de enteroparasitosis oportunistas emergentes
(Cryptosporidium sp., microsporideos, etcétera.), la localización de endemias
enteroparasitarias focalizadas o regionales (estrongiloidiasis, uncinariasis, etcétera.),
problemas diagnósticos (identificación de agentes, alteración de trofozoítos, etcétera.)
o finalidades de docencia e investigación obligan al empleo de técnicas especiales o
de diversas coloraciones, muchas de ellas de reciente generalización o descripción,
que permiten abordar los problemas y situaciones reseñados.
En la observación directa “en fresco” y del enriquecimiento, la primera, más simple y
generalizada coloración
Tanto el sedimento como el sobrenadante del enriquecimiento de rutina, para
identificación de Cryptosporidium sp., deben pasar por la coloración identificatoria del
Ziehl-Neelsen modificado (técnica de semiácido resistencia) o de Kinyoun, que utiliza
las cualidades tintoriales de semiácido resistencia de los ooquistes (17) (ver anexo 4
y figura 2). El empleo de anticuerpos monoclonales marcados con fluoresceína,
disponibles comercialmente, constituye otra alternativa al diagnóstico.
Esporas de microspondios, extendido de material de enriquecimiento. teñido
con técnica de Kinyoun.
Ooquiste de Cyclospora cayetanensis, extendido de material de
enriquecimiento, teñido con técnica de Kinyoun.
La propiedad de semiácido resistencia también colabora al diagnóstico de dos nuevos
enteroparásitos emergentes: los microsporidios (figura 3) y Cyclospora caye tanensis.
LOS microsporidios (Enterocytozoon bieneusi, Septata intestinalis, Encephalitozoon
sp.) se caracterizan por el pequeño tamaño de sus esporas (1x2 Pm), que poseen
propiedades de fluorescencia al utilizar la técnica de Van Gool con el colorante Uvitex
2b 0 Calcofluor (MR), siendo esta técnica de tinción y observación en microscopio de
fluorescencia el principal elemento de SU reconocimiento. Van Gool y colaboradores
han empleado, complementariamente, técnicas de concentración especiales para
estos parásitos (WES o técnica del Cytospin (MR)(ver anexo IO), que logran aumentar
sensiblemente su detección
C. cuyetunerzsis puede reconocerse por su semi ácido resistencia, unida a un tamaño
de ooquistes que alcanza entre las 7 y 9 pm de diámetros del ooquiste, con
fluorescencia propia al ser observados en microscopio de fluorescencia
La identificación de quistes, ooquistes o trofozoítos de protozoarios enteroparasitos
puede necesitar, en circunstancias determinadas, de coloraciones especiales. La
hematoxilina férrica de Heindenhain ha sido el método tradicionalmente empleado en
nuestro medio, pero su laboriosidad, prolongado tiempo de procesamiento y manejo
artesanal de alguna de sus fases (decoloración), han hecho desaconsejable su
empleo en los actuales esquemas diagnósticos de rutina.
Por ello. nuevas técnicas de coloración más simples, rápidas y fácilmente
reproductibles se han integrado al trabajo en coproparasitología. Una de ellas, la
tinción con Negro E de clorazol, que permite una rápida solución a la identificación de
quistes, con correcta apreciación de detalles morfológicos útiles en la identificación.
A la observación rutinaria de los sedimentos o sobrenadantes, según el
enriquecimiento seleccionado, se puede añadir como rutina de extrema utilidad para
fines docentes, la observación de una muestra de material con coloración de tionina
(ver anexo 6), entre porta y cubreobjeto. Esta simple metodología permite destacar
detalles de pared, núcleos y organelos, en casos de difícil observación como
Endolirnax nana, con ventajas sustantivas para actividades de docencia o
entrenamiento.
Similar rendimiento y posibilidades posee la coloración de Ballenger, aplicable al
producto final de un enriquecimiento, para su rápida observación coloreada entre
lámina y laminilla.
Para la identificación de los helmintos enteroparásitos es el examen coproparasitario
la técnica de elección, por medio de la observación microscópica de sus huevos o
macroscópica de anillos en el caso de Tnenk sp. o de helmintos adultos como en el
caso de Ascuris lumbricoides, siendo Ellterobius vermiculnris (oxiuro) la única
excepción, ya que su diagnóstico particular se fundamenta en técnica de espátula
adhesiva en todas sus variantes.
Pero en casos especiales, como los nematodes que dispersan larvas y no huevos
(Strongyloides stercomlis uncinarias), el empleo de una técnica clásica
complementaria, como la de Baermman, complementa el procedimiento del examen
coproparasitario
4. Conclusión
El examen coproparasitario es la mayor herramienta diagnóstica disponible en el caso
de las enteroparasitosis, y su composición puede ser variada de acuerdo a las
necesidades eventuales de un diagnóstico, presencia de nuevas afecciones
emergentes o peculiaridades regionales. Que impongan el diagnóstico de una
endemia local.
Su eficacia está directamente relacionada a la interacción del clínico con el
parasitólogo actuante. Factores como la calidad de la muestra, el aporte de datos
clínicos y antecedentes suficientes y la solicitud oportuna y adecuada del
procedimiento, harán que el rendimiento diagnóstico alcance su máxima performance
No debe menospreciarse la prevalencia e incidencia de las enteroparasitosis, ya que
en nuestro medio para algunos grupos sociales de riesgos estas afecciones
constituyen un claro motivo de morbilidad.
5. Bibliografía
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