CK -NAC
Creatina quinasa
NAC. Cinético UV
Determinación cuantitativa de creatina quinasa (CK) Temperatura constante . . . . . . . . . . .25ºC / 30ºC / 37ºC
IVD 2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
3. Pipetear en una cubeta:
Conservar a 2-8ºC 25-30ºC 37ºC
RT (mL) 1,0 1,0
PRINCIPIO DEL MÉTODO Muestra (L) 40 20
La creatina quinasa (CK) cataliza la transferencia reversible de un grupo 4. Mezclar, incubar 2 minutos.
fosfato de la fosfocreatina al ADP. Esta reacción se acopla con otras 5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro
catalizadas por la hexoquinasa (HK) y por la glucosa-6-fosfato y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
deshidrogenasa (G6F-DH): 6. Calcular el promedio de la diferencia de absorbancia por minuto (A/min).
CK
Fosfocreatina + ADP Creatina + ATP CÁLCULOS
HK
ATP + Glucosa ADP + Glucosa-6-fosfato 25º- 30ºC A / min x 4127 = U/L CK
37ºC A / min x 8095 = U/L CK
G6F DH
Glucosa-6-fosfato + NADP+ 6-Fosfogluconato + NADPH + H+ Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 mol
La velocidad de formación de NADPH, determinado fotometricamente, es de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en
proporcional a la concentración catalítica de CK en la muestra unidades por litro (U/L).
ensayada1,2. Factores de conversión de temperaturas
Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
SIGNIFICADO CLÍNICO
La creatina quinasa es una enzima intracelular, distribuida por todo el Temperatura Factor para convertir a
organismo humano. Su función fisiológica está asociada con la adenosina de medición 25ºC 30ºC 37ºC
trifosfato (ATP) producida cuando el músculo se contrae. 25ºC 1,00 1,56 2,44
El nivel de CK en suero esta elevado en pacientes con alteraciones del 30ºC 0,64 1,00 1,56
músculo esquelético y en infartos de miocardio1,5,6. 37ºC 0,41 0,63 1,00
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos
clínicos y de laboratorio. CONTROL DE CALIDAD
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
REACTIVOS SPINTROL H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210).
Imidazol pH 7,0 100 mmol/L Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe
R1 Glucosa 20 mmol/L revisar el instrumento, los reactivos y la técnica.
Tampón Acetato de magnesio 10 mmol/L
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
EDTA 2 mmol/L
correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
ADP 2 mmol/L
AMP 5 mmol/L VALORES DE REFERENCIA1
di-Adenosina-5- pentafosfato 10 mmol/L 25ºC 30ºC 37ºC
R2 NADP+ 2 mmol/L Hombres, hasta 80 U/L 130 U/L 195 U/L
Substrato Hexoquinasa (HK) 2500 U/L Mujeres, hasta 70 U/L 110 U/L 170 U/L
Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6F-DH) 1500 U/L Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
N-acetilcisteína 20 mmol/L
30 mmol/L
establezca sus propios valores de referencia.
Fosfato de creatina
Opcional CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
CK-Nac / CK-MB CONTROL Suero humano liofilizado Ref: 1002260 Rango de medida: Desde el límite de detección 0,878 U/L hasta el límite de
linealidad 1300 U/L.
PRECAUCIONES Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/10
R1: H360-Puede perjudicar la fertilidad o dañar al feto. con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 10.
Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del Precisión:
producto. Intraserie (n= 20) Interserie (n= 20)
Media (U/L) 144 478 146 494
PREPARACIÓN SD 3,88 6,98 4,55 9,57
Reactivo de trabajo (RT): CV (%) 2,69 1,49 3,11 1,94
Ref: 1001050 Disolver ( ) un comprimido de R 2 en un vial de R 1. Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,0001 A/min.
Ref: 1001051 Disolver ( ) un comprimido de R 2 en 15 mL de R 1. Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas
Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
Estabilidad: 5 días a 2-8ºC o 24 horas a temperatura ambiente (15-25ºC). Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Coeficiente de regresión (r)2: 0,997.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD Ecuación de la recta de regresión: y= 1,031x – 0,5355.
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a
2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. INTERFERENCIAS
No usar las tabletas si aparecen fragmentadas. No se ha observado interferencia de la bilirrubina hasta 20 mg/dL y hemoglobina
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. hasta 10 g/L1,2. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren
Indicadores de deterioro de los reactivos: en la determinación de la Creatina quinasa3,4.
- Presencia de partículas y turbidez.
- Absorbancias del Blanco a 340 nm > 1,00. NOTAS
SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicación de este
MATERIAL ADICIONAL
reactivo en distintos analizadores.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm.
- Baño termostable a 25ºC, 30ºC ó 37º C ( 0,1ºC). BIBLIOGRAFíA
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. 1. Abbot B et al. Creatinine kinase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co.
- Equipamiento habitual de laboratorio. St Louis. Toronto. Princeton 1984: 1112-116.
2. Gerhardt W et al. Creatine kinase B-Subunit activity in serum after
MUESTRAS immunohinhibition of M-Subunit activity. Clin Chem 1979;(25/7): 1274-1280.
Suero o plasma1. Estabilidad: 7 días a 2-8ºC, protegida de la luz. 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
La actividad de la creatin quinasa disminuye un 10% tras 1 día a 2-5ºC ó 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
tras 1 hora a 15-25ºC. 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo: PRESENTACIÓN
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .340 nm Ref:1001050 Cont.
R1: 20 x 2,5 mL, R2: 20 2,5 mL
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm paso de luz
BEIS02-E 22/05/15 IMPORTADORES EXCLUSIVOS: LAB CENTER DE MEXICO S.A. DE C.V.
TEL : 01 (55) 5360-6772 Y 01 800 500 SPIN (7746)
[Link] asesoriatecnica@[Link]
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TEL : 01 (55) 5360-6772 Y 01 800 500 SPIN (7746)
[Link] asesoriatecnica@[Link]
