ACCESS
Immunoassay Systems
Access Free T4
Instrucciones de uso Tiroxina, libre
© 2019 Beckman Coulter, Inc. All rights reserved.
33880
SOLO PARA USO PROFESIONAL
Rx Only
PARA UTILIZAR CON LA PRUEBA: FRT4
REVISIÓN ANUAL
Revisado por Fecha Revisado por Fecha
PRINCIPIO
INDICACIONES
El ensayo Access Free T4 es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas paramagnéticas para la
determinación cuantitativa de los niveles de tiroxina en suero y plasma humanos (heparina) utilizando Sistemas de
Inmunoensayo Access.
RESUMEN Y EXPLICACIÓN
El eje hipotálamo-hipofisario-tiroideo controla la síntesis, liberación y acción de las hormonas tiroideas. La hormona
liberadora de tirotrofina (TRH) secretada por el hipotálamo estimula la síntesis y liberación de tirotrofina u hormona
liberadora del tiroides (TSH). A su vez, la TSH estimula la síntesis, almacenamiento, secreción y metabolismo de tiroxina
(T4) y triyodotironina (T3). En la sangre se encuentran tanto las formas libre como fijada de T4 y T3. Más del 99 % de la
T4 y T3 circulan en la sangre unidas a proteínas portadoras, quedando menos del 1 % sin unir. Este nivel de hormona
unida o libre se correlaciona con el estado funcional del tiroides en la mayoría de los individuos.1,2
La T4 libre y la T3 libre regulan el crecimiento y desarrollo normal manteniendo la temperatura corporal y estimulando la
termogénesis. Además, la T4 libre y la T3 libre afectan todos los aspectos del metabolismo de los hidratos de carbono
así como ciertas áreas del metabolismo de lípidos y vitaminas. El desarrollo fetal y neonatal requiere también de las
hormonas tiroideas.1,2
Unos niveles de T4 libre claramente elevados apoyan los hallazgos clínicos de un diagnóstico de hipertiroidismo mientras
que valores de T4 libre claramente bajos junto con unos hallazgos clínicos apropiados pueden establecer un diagnóstico
de hipotiroidismo. La medida de los niveles de T4 libre junto con otras pruebas del tiroides y hallazgos clínicos pueden
establecer diagnósticos hipertiroides e hipotiroides limítrofes.3
Instrucciones de uso B01902 L Spanish Access Free T4
MAYO 2019 Página 1 de 13
El RIA de diálisis de equilibrio está considerado como el método de referencia para medir la T4 libre porque permite
la separación de T4 libre de la T4 fijada a proteínas antes de medir directamente la T4 libre.2 Sin embargo, este
método es engorroso, técnicamente exigente, y no resulta apropiado para el uso de rutina en el laboratorio clínico.
Más recientemente, se han desarrollado radioinmunoensayos e inmunoensayos enzimáticos para medir la T4 libre.
Estos ensayos emplean varias combinaciones de trazadores análogos y no análogos y procesos de incubación de una
y dos fases.
METODOLOGIA
El ensayo Access Free T4 es un ensayo inmunoenzimático de dos pasos. Se mezclan en un vaso de reacción una
solución de proteína tamponada de anti-tiroxina (T4) monoclonal, unida a biotina, con una fase sólida revestida con
streptavidina. Durante la primera incubación, el anticuerpo anti-T4 se une a los enlaces de biotina a la fase sólida y el
T4 libre de la muestra. Después de la incubación, la separación en campo magnético y el lavado eliminan cualquier
material no unido a la fase sólida. A continuación, se añade al vaso de reacción la solución tamponada de proteína
y conjugado de triiodotironina (T3)-fosfatasa alcalina. La triiodotironina (T3)-fosfatasa alcalina se une a las posiciones
vacías para anticuerpos.
Tras la incubación en un vaso de reacción, los materiales unidos a la fase sólida son retenidos en un campo magnético
mientras que los materiales que no han quedado unidos a la fase sólida se eliminan mediante lavado. A continuación,
se añade al vaso de reacción el sustrato quimioluminiscente y se mide la luz generada por la reacción utilizando un
luminómetro. La producción de luz es inversamente proporcional a la concentración de T4 en la muestra. La cantidad
de analito en la muestra se determina a partir de una curva de calibración de puntos múltiples almacenada.
MUESTRA
OBTENCIÓN Y PREPARACIÓN DE ESPECÍMENES
1. Las muestras recomendadas son suero y plasma (heparina).
2. Para la manipulación, proceso y conservación de las muestras de sangre deben cumplirse las siguientes
recomendaciones:4
• Recoger todas las muestras de sangre observando las precauciones habituales de la venopunción.
• Permitir que las muestras de suero se coagulen completamente antes de su centrifugado.
• Mantener las probetas cerradas en todo momento.
• Separe físicamente el suero o el plasma lo antes posible para que no entren en contacto con las células.
• Conservar las muestras cerradas herméticamente a temperatura ambiente (de 15 a 30 °C) durante un período
no superior a ocho horas.
• Si el ensayo no se realizara dentro de las ocho horas siguientes, refrigerar las muestras a una temperatura de
2 a 8 °C.
• Si el ensayo no se realizara dentro de las 48 horas siguientes, o para el transporte de las muestras, congelar
a una temperatura de -20 °C o inferior.
• Descongelar las muestras una sola vez.
3. Observar las siguientes recomendaciones a la hora de preparar las muestras:
• Antes de realizar el análisis asegurarse de que se han eliminado la fibrina residual y el material celular.
• Observar las recomendaciones de centrifugado del fabricante del tubo de recogida de muestras sanguíneas.
4. Cada laboratorio deberá determinar la validez de sus propios tubos de recogida de muestras de sangre y de sus
productos para separación de suero. Pueden existir diferencias en estos productos entre diferentes fabricantes y,
en ocasiones, entre distintos lotes.
Access Free T4 Spanish Instrucciones de uso B01902 L
Página 2 de 13 MAYO 2019
REACTIVOS
INFORMACIÓN SOBRE EL PRODUCTO
Envase de reactivos Access Free T4
Cat. Núm. 33880: 100 determinaciones, 2 envases, 50 ensayos/envase
• Se suministra listo para utilizar.
• Debe conservarse en posición vertical y en frigorífico, a una temperatura de 2 a 10 °C.
• Conservar en frigorífico de 2 a 10 °C durante un mínimo de dos horas antes de utilizar en el instrumento.
• Permanece estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta si se almacena a una temperatura de
2 a 10 °C.
• Permanece estable a una temperatura de 2 a 10 °C durante 28 días después del uso inicial.
• Una rotura de la capa elastomérica del envase o la presencia de valores de control fuera de rango son indicios de
un posible deterioro.
• Desechar el envase de reactivo si presenta algún daño (p. ej., rotura de la capa elastomérica).
• Todos los antisueros son policlonales a no ser que se indique lo contrario.
R1a: Partículas paramagnéticas Dynabeads* con revestimiento de streptavidina, en tampón
TRIS con proteína (aves), surfactante, NaN3, al 0,125 % y ProClin** 300 al 0,125 %.
R1b: Solución salina TRIS con proteína (aves), surfactante, NaN3 a < 0,1 %, y ProClin 300 al
0,1 %.
R1c: Solución salina TRIS con proteína (aves), surfactante, NaN3 al 0,125 %, y ProClin 300 al
0,125 %.
R1d: Conjugado de triiodotironina-fosfatasa alcalina (bovina) en solución TRIS con proteína
(aves), surfactante, NaN3 a < 0,1 %, y ProClin 300 al 0,1 %.
R1e: Anti-tiroxina (T4) monoclonal de ratón enlazada con biotina en solución TRIS con
proteína (aves y murine), surfactante, NaN3 al 0,125 % y ProClin 300 al 0,125 %.
*Dynabeads es una marca registrada de Dynal A.S., Oslo, Noruega.
**ProClin™ es una marca registrada de Dow Chemical Company (“Dow”) o una empresa asociada a Dow.
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
• Para uso diagnóstico in vitro.
• Las muestras de los pacientes y los hemoderivados pueden procesarse rutinariamente con un mínimo de riesgo
utilizando el procedimiento descrito. No obstante, deben manipularse dichos productos como potencialmente
infecciosos con arreglo a las precauciones universales y a las buenas prácticas de laboratorio clínico,
independientemente de su origen, tratamiento o certificación previa. Debe utilizarse un desinfectante apropiado
para la descontaminación. Deben conservarse y eliminarse dichos materiales y sus envases con arreglo a las
normas y directrices locales.
• Para conocer los riesgos que presenta el producto, consulte las siguientes secciones: INGREDIENTES DEL
REACTIVO, CLASIFICACIÓN DE MATERIAL PELIGROSO SEGÚN EL SGA.
Instrucciones de uso B01902 L Spanish Access Free T4
MAYO 2019 Página 3 de 13
INGREDIENTES DE LOS REACTIVOS
PRECAUCIÓN
El conservante azida sódica puede formar compuestos explosivos en las
tuberías metálicas de desagüe. Consulte el NIOSH Bulletin: Explosive Azide
Hazard (Boletín de NIOSH: Peligro de explosión con la azida) (16/08/1976).
Para evitar la posible acumulación de compuestos de azida, limpie con agua los
tubos de desagüe tras la eliminación del reactivo sin diluir. Para desechar la
azida sódica deben seguirse las normativas locales adecuadas.
CLASIFICACIÓN DE MATERIAL PELIGROSO SEGÚN EL SGA
PMP (Compartimiento R1a) ADVERTENCIA
H317 Puede provocar una reacción cutánea alérgica.
P280 Use guantes, ropa y equipo de protección para los ojos y
la cara.
P333+P313 En caso de irritación cutánea o sarpullido: consulte a un
médico.
P362+P364 Quitar la ropa contaminada y lavarla antes de usarla.
masa de reacción de: 5-cloro-2-metil-4-isotiazolina -3-ona
[EC# 247-500-7] y 2-metil-4-isotiazolina-3-ona [EC#
220-239-6] (3:1) < 0,05%
Tampón 1 (Compartimiento ADVERTENCIA
R1b)
H317 Puede provocar una reacción cutánea alérgica.
P280 Use guantes, ropa y equipo de protección para los ojos y
la cara.
P333+P313 En caso de irritación cutánea o sarpullido: consulte a un
médico.
P362+P364 Quitar la ropa contaminada y lavarla antes de usarla.
masa de reacción de: 5-cloro-2-metil-4-isotiazolina -3-ona
[EC# 247-500-7] y 2-metil-4-isotiazolina-3-ona [EC#
220-239-6] (3:1) < 0,05%
Tampón 2 (Compartimiento ADVERTENCIA
R1c)
H317 Puede provocar una reacción cutánea alérgica.
Access Free T4 Spanish Instrucciones de uso B01902 L
Página 4 de 13 MAYO 2019
P280 Use guantes, ropa y equipo de protección para los ojos y
la cara.
P333+P313 En caso de irritación cutánea o sarpullido: consulte a un
médico.
P362+P364 Quitar la ropa contaminada y lavarla antes de usarla.
masa de reacción de: 5-cloro-2-metil-4-isotiazolina -3-ona
[EC# 247-500-7] y 2-metil-4-isotiazolina-3-ona [EC#
220-239-6] (3:1) < 0,05%
Conjugado (Compartimiento ADVERTENCIA
R1d)
H317 Puede provocar una reacción cutánea alérgica.
P280 Use guantes, ropa y equipo de protección para los ojos y
la cara.
P333+P313 En caso de irritación cutánea o sarpullido: consulte a un
médico.
P362+P364 Quitar la ropa contaminada y lavarla antes de usarla.
masa de reacción de: 5-cloro-2-metil-4-isotiazolina -3-ona
[EC# 247-500-7] y 2-metil-4-isotiazolina-3-ona [EC#
220-239-6] (3:1) < 0,05%
Reactivo Biotina ADVERTENCIA
(Compartimiento R1e)
H317 Puede provocar una reacción cutánea alérgica.
P280 Use guantes, ropa y equipo de protección para los ojos y
la cara.
P333+P313 En caso de irritación cutánea o sarpullido: consulte a un
médico.
P362+P364 Quitar la ropa contaminada y lavarla antes de usarla.
masa de reacción de: 5-cloro-2-metil-4-isotiazolina -3-ona
[EC# 247-500-7] y 2-metil-4-isotiazolina-3-ona [EC#
220-239-6] (3:1) < 0,05%
La hoja de datos de seguridad está disponible en [Link]
MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS CON EL KIT DE REACTIVOS
1. Calibradores: Access Free T4 Calibrators
Se suministran a cero y aproximadamente 0,5, 1,0, 2,0, 3,0, y 6,0 ng/dL (6,4, 12,9, 25,7, 38,6, y 77,2 pmol/L).
Cat. No. 33885
Instrucciones de uso B01902 L Spanish Access Free T4
MAYO 2019 Página 5 de 13
2. Materiales de control de calidad: material de control de calidad comercial
3. Sustrato: Access Substrate
Cat. Núm. 81906
4. Tampón de lavado II Access, n.º de cat. A16792
Tampón de lavado II UniCel DxI, n.º de cat. A16793
EQUIPO Y MATERIALES
R1 Envases de reactivos Access Free T4
CALIBRACIÓN
INFORMACION SOBRE LA CALIBRACIÓN
Para todos los ensayos es necesaria un punto de calibración activa. Para el ensayo Access Free T4, se requiere realizar
la calibración cada 28 días. Consulte los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para obtener
información acerca de la teoría de calibración, la configuración de calibradores, la introducción de solicitud de la prueba
del calibrador y la revisión de los datos de calibración.
CONTROL DE CALIDAD
Los materiales de control de calidad simulan las características de las muestras de los pacientes y son esenciales
para controlar el rendimiento del sistema de ensayos inmunoquímicos. Dado que las muestras pueden procesarse en
cualquier momento en formato de “acceso aleatorio” en lugar de “por lotes”, deben incluirse materiales de control de
calidad en cada período de 24 horas.5 Incluya materiales de control de calidad existentes en el mercado que abarquen
al menos dos niveles de concentración de compuesto. El uso más frecuente de los controles o el uso de otros controles
adicionales se deja a la discreción del usuario, basándose en las buenas prácticas de laboratorio o en los requerimientos
de acreditación del laboratorio y en las leyes aplicables. Siga las instrucciones del fabricante para su reconstitución y
conservación. Cada laboratorio deberá establecer los valores medios y los rangos aceptables para garantizar resultados
correctos. Los resultados de control de calidad que no se encuentran dentro de los rangos aceptables pueden indicar
resultados de ensayo no válidos. Examine los resultados de todos los ensayos generados desde la obtención del
último punto de prueba de control de calidad aceptable para el analito en cuestión. Consulte los manuales del sistema
correspondientes o el sistema de ayuda para obtener información acerca de la revisión de los resultados de control de
calidad.
PROCEDIMIENTOS DE PRUEBA
COMENTARIOS SOBRE EL PROCEDIMIENTO
1. Consulte los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para obtener una descripción
específica de la instalación, puesta en marcha, principios de funcionamiento, características de rendimiento del
sistema, instrucciones de funcionamiento, procedimientos de calibración, limitaciones y precauciones operativas,
riesgos, mantenimiento y resolución de problemas.
2. Mezclar el contenido de los envases de reactivo nuevos (sin perforar) invirtiendo suavemente los envases varias
veces antes de cargarlos en el instrumento. No invierta envases abiertos (perforados).
3. Utilizar treinta (30) µL de muestra para cada determinación además de los volúmenes de tara del sistema y del
recipiente de las muestras. Consulte los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para
determinar el mínimo volumen de muestra requerido.
4. La unidad de medida predeterminada de los resultados de las muestras es ng/dL. Para modificar las unidades de
notificación de los resultados al Sistema Internacional de Unidades (unidades SI), pmol/L, c consulte los manuales
Access Free T4 Spanish Instrucciones de uso B01902 L
Página 6 de 13 MAYO 2019
del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para obtener instrucciones detalladas. Para convertir
manualmente las concentraciones al sistema internacional, multiplicar ng/dL por el factor de multiplicación 12,87.
PROCEDIMIENTO
Consulte los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para obtener información sobre la
manipulación de las muestras, la configuración de los tests, las solicitudes de tests y las revisiones de los resultados
de los tests.
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Los resultados de las pruebas de los pacientes son determinados automáticamente por el software del sistema utilizando
un modelo matemático de curva logística compensada de cuatro parámetros (4PLC). La cantidad de analito en la
muestra se determina a partir de la producción de luz medida mediante los datos de calibración almacenados. Los
resultados de las pruebas de los pacientes pueden revisarse utilizando la pantalla apropiada. Consulte los manuales
del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para obtener instrucciones completas sobre la revisión de los
resultados de las muestras.
INFORME DE RESULTADOS
RESULTADOS ESPERADOS
1. Se obtuvieron muestras de suero a partir de un mínimo de 150 varones y 150 mujeres con edades comprendidas
entre 18 y 60 años. Las muestras se recogieron en las regiones este, oeste y central de Estados Unidos. Siguiendo
las directrices tanto de la National Academy of Clinical Biochemists (NACB) de apoyo de laboratorio para el
diagnóstico y control de la enfermedad tiroidea6 y de la American Association of Clinical Endocrinologists,7,8,9
se utilizaron los siguientes criterios de detección: valor de TSH 0,3-3,0 µUI/mL, ausencia de historia familiar o
personal conocida de enfermedad tiroidea o enfermedad autoimmune, y ausencia de medicación tiroidea. Una
vez finalizado el cribado Access TSH se excluyeron 32 muestras debido a la obtención de valores TSH fuera
del intervalo 0,3-3,0 µUI/mL.
95 % Límite de referencia 95 % IC para el límite 95 % IC para el límite
n (ng/dL) inferior (ng/dL) superior (ng/dL)
316 0,61-1,12 0,54-0,67 1,07-1,24
95 % Límite de referencia 95 % IC para el límite 95 % IC para el límite
n (pmol/L) inferior (pmol/L) superior (pmol/L)
316 7,86-14,41 7,00-8,57 13,73-15,96
2. Se obtuvieron las muestras de suero a partir de un mínimo de 120 mujeres en el primer, segundo y tercer trimestre
del embarazo.
90 % IC para el 90 % IC para el
95 % Límite de límite inferior límite superior
TIPO DE MUESTRA n referencia (ng/dL) (ng/dL) (ng/dL)
1er Trimestre 131 0,52-1,10 0,47-0,57 1,08-1,27
2º Trimestre 120 0,45-0,99 0,40-0,48 0,80-1,08
3er Trimestre 121 0,48-0,95 0,45-0,51 0,83-1,23
Instrucciones de uso B01902 L Spanish Access Free T4
MAYO 2019 Página 7 de 13
90 % IC para el 90 % IC para el
95 % Límite de límite inferior límite superior
TIPO DE MUESTRA n referencia (pmol/L) (pmol/L) (pmol/L)
1er Trimestre 131 6,67-14,12 6,00-7,31 13,86-16,28
2º Trimestre 120 5,79-12,70 5,19-6,14 10,24-13,86
3er Trimestre 121 6,11-12,20 5,77-6,62 10,68-15,79
3. Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia para garantizar la representación adecuada
de poblaciones específicas.
4. El ensayo Access Free T4 no se ha validado para muestras puntuales e sangre seca.
NOTAS SOBRE PROCEDIMIENTOS
LIMITACIONES
1. Las muestras pueden medirse con precisión dentro del rango analítico comprendido entre el límite inferior de
detección y el mayor valor del calibrador (aproximadamente 0,25-6,0 ng/dL [3,2-77,2 pmol/L]).
• Si una muestra contiene una cantidad inferior al límite inferior de detección del ensayo, se deben informar los
resultados como inferiores a ese valor (es decir, < 0,25 ng/dL [< 3,2 pmol/L]).
• Si una muestra contiene una cantidad superior al valor establecido del mayor Access Free T4 Calibrator (S5),
debe informarse del resultado como superior a ese valor (es decir, > 6,0 ng/dL [> 77,2 pmol/L]).
LAS MUESTRAS NO SE PUEDEN DILUIR PARA LA DETERMINACION DE T4 LIBRE.
2. En los ensayos en los que se utilizan anticuerpos existe la posibilidad de que se produzcan interferencias
debido a la presencia de anticuerpos heterófilos en la muestra del paciente. Los pacientes que hayan estado
en contacto regularmente con animales o hayan recibido inmunoterapia o procedimientos diagnósticos con
inmunoglobulinas o fragmentos de inmunoglobulinas pueden producir anticuerpos, [Link]. HAMA, que interfieren
con los inmunoensayos. Además, otros anticuerpos heterófilos, como los anticuerpos anti-cabra humanos
pueden estar presentes en las muestras de los pacientes.10,11
Esos anticuerpos que crean interferencias pueden causar resultados erróneos. Evaluar cuidadosamente los
resultados de los pacientes que se sospeche que puedan tener esos anticuerpos.
3. Los resultados del ensayo Access Free T4 deben interpretarse a la luz del cuadro clínico total del paciente,
incluidos: síntomas, historial clínico, datos de análisis adicionales y otros datos apropiados.
4. Las muestras que contienen autoanticuerpos Tiroxina pueden testarse en procesos de dos fases, como el Ensayo
de Access Free T4 sin que haya interferencias significativas.2
5. Ciertos trastornos de origen no tiroideo pueden causar niveles anormales de T4. La terapia con drogas
anticonvulsivas (en particular, fenitoína) puede resultar en niveles de T4 libre disminuidos, debido principalmente
a un aumento en el metabolismo hepático, y secundariamente al desplazamiento de la hormona de los lugares
de fijación.2,12,13 Las drogas antiinflamatorias, tales como los salicilatos y la fenilbutazona también compiten
por los lugares de fijación en la hormona, pero su efecto sobre los niveles de T4 libre no se han definido
claramente.2,14 Pacientes en tratamiento con heparina pueden tener niveles elevados de T4 Libre debido a
la liberación de ácidos grasos no esterificados, los cuales pueden alterar el cociente entre hormonas libres
y ligadas.13 Las determinación del estado del tiroides en pacientes con patologías no tiroideas (PNT) debe
interpretarse con cautela.2,15 En enfermedades raras, como la hipertiroxinemia disalbuminémica familiar (FDH),
los ensayos directos de hormona libre pueden dar lugar a resultados erróneos debido a las extremas variaciones
de la capacidad de unión a albúmina de las células T4.
Las siguientes sustancias fueron añadidas a muestras de suero con niveles tiroideos normales. Cuando fueron
testadas en el ensayo de T4 Libre, se observaron los siguientes cambios en la media:
Access Free T4 Spanish Instrucciones de uso B01902 L
Página 8 de 13 MAYO 2019
Sustancia Capacidad añadida (mg/dL) % Variación
Aspirina 60 +6,4
Salicilato sódico 50 +9,1
Fenilbutazona 7,5 +8,48
Tiouracilo 5,0 -0,6
Fenitoína 5,0 +8,0
Metamizol 0,4 +0,9
6. Este ensayo no se ve influenciado de forma significativa, por la presencia de proteinas de unión a tiroxina. En un
estudio, se añadieron al Calibrador Cero (que tiene niveles normales de proteina) las siguientes proteinas de unión
a tiroxina de origen humano. A continuación está el cambio observado en la señal de respuesta en el ensayo.
Sustancia Analito añadido % Variación
Albúmina 10,0 g/dL -7,2
Globulina de Unión a Tiroxina 160 µg/mL -5,6
Prealbúmina 600 µg/mL -1,3
7. Este ensayo es sensible a las interferencias que se producen como consecuencia de altos niveles de biotina. El
consumo diario recomendado de biotina es de 30 μg. Pueden tomarse dosis elevadas de biotina (hasta 30 mg al
día) como suplemento alimenticio con el objetivo de mejorar la alopecia, el crecimiento ungueal o el estado de la
piel16.
En determinados estudios de farmacocinética, se ha observado que las concentraciones séricas de biotina pueden
alcanzar los 300 ng/mL cuando los sujetos toman suplementos con 20 mg de biotina17 o los 1160 ng/mL, en
el caso de sujetos que toman dosis de biotina de hasta 300 mg16. Estos estudios se realizaron en personas
aparentemente sanas y algunos pacientes puede que tomen suplementos con niveles de biotina > 20 mg al día.
Las tasas de aclaramiento de la biotina pueden ser distintas entre pacientes sometidos a pruebas con este
dispositivo (p. ej., pacientes con insuficiencia renal), lo cual puede generar concentraciones séricas prolongadas
o superiores a las previstas. Si puede llevarse a cabo desde el punto de vista médico, los pacientes que
toman suplementos de biotina deben suspender su uso antes de que se obtengan las muestras con el fin de
reducir al mínimo el riesgo de que se produzcan interferencias. Las muestras con concentraciones de biotina
≤ 10 ng/mL han puesto de manifiesto un sesgo no significativo (≤ 10 %) en los resultados. Las concentraciones
de biotina > 10 ng/mL pueden producir un sesgo positivo significativo (> 10 %) en los resultados de T4 libre.
Si se obtienen resultados inesperados, y se sospecha que existe interferencia de la biotina, es posible que el
ensayo TSH de Beckman Coulter ofrezca una mejor evaluación de la función tiroidea, ya que no es sensible a la
interferencia de la biotina.
CARACTERÍSTICAS DEL RENDIMIENTO
CARACTERÍSTICAS DEL RENDIMIENTO
COMPARACION DE METODOS
Una comparación de los valores de T4 Libre utilizando el ensayo de Access Free T4 en el Sistema de Inmunoensayo
Access y un sistema de test de inmunoensayo comercial arroja los siguientes datos estadísticos utilizando cálculos de
Deming:
Instrucciones de uso B01902 L Spanish Access Free T4
MAYO 2019 Página 9 de 13
Rango de Coeficiente de
TIPO DE observaciones correlación
MUESTRA n (ng/dL) Corte (ng/dL) Pendiente (r)
Suero 326 0,27-5,11 -0,275 1,16 0,940
Una comparación de valores de T4 libre obtenidos analizando muestras de plasma serumand (heparin) utilizando el
kit de ensayo Access Free T4 proporcionó los siguientes datos estadísticos, utilizando el modelo de matemático de
Deming:
Rango de Coeficiente de
TIPO DE observaciones correlación
MUESTRA n (ng/dL) Corte (ng/dL) Pendiente (r)
Suero vs plasma 51 0,61-1,06 0,033 0,962 0,980
(heparina)
IMPRECISIÓN
Este ensayo muestra una imprecisión total ≤ 10 % CV a concentraciones ≥ 0,61 ng/dL y < 0,06 ng/dL DE a
concentraciones < 0,61 ng/dL.
Un estudio en el que se utilizaron tres materiales de control a base de suero humano disponibles en el mercado y una
muestra de suero de paciente, generó un mínimo de 38 ensayos, 2 duplicados por ensayo durante al menos 19 días y
proporcionó los siguientes datos estadísticos que fueron analizados mediante análisis de varianza (ANOVA).18,19
Dentro de la serie Interensayo Total
Muestra Media (ng/dL) DE CV (%) DE CV (%) DE CV (%)
1 0,46 0,02 4,40 0,04 8,08 0,04 9,20
2 0,76 0,02 2,12 0,03 4,47 0,04 4,95
3 2,04 0,06 2,74 0,07 3,34 0,09 4,32
4 4,27 0,08 1,82 0,20 4,71 0,22 5,05
ESPECIFICIDAD ANALÍTICA / INTERFERENCIAS
Las muestras que contienen hasta 10 mg/dL (171 µmol/L) de bilirrubina, muestras lipémicas que contienen el equivalente
a 1800 mg/dL (20,32 mmol/L) de trioleína, y muestras hemolizadas que contienen hasta 1 g/dL (10 g/L) de hemoglobina,
no afectan a la concentración de la T4 Libre analizado.
En la siguiente table se describe la reactividad cruzada del anticuerpo utilizando en el ensayo de T4 Libre con sustancias
que son similares en estructura a T4. La especificidad del anticuerpo se determina en un ensayo de tiroxina total para
evitar el desplazamiento de la fijación de T4 por compuestos relacionados. Las sustancias se añadieron a un conjunto
de calibradores Access Free T4, y se encontró que proporcionan los siguientes resultados, expresados en peso.
Analito añadido Reactividad cruzada
Sustancia (µg/dL) (%)
L-T4 5 > 100
D-T4 10 71
L-T3 500 1,7
R-T3 100 23
Access Free T4 Spanish Instrucciones de uso B01902 L
Página 10 de 13 MAYO 2019
Analito añadido Reactividad cruzada
Sustancia (µg/dL) (%)
Acido Tetrayodotiroacético 25 4
D-T3 500 0,7
3,3' L-T2 5000 < 0,1
3,5 L-T2 5000 < 0,1
3',5' L-T2 5000 < 0,1
L-Tirosina 5000 < 0,01
d-Tirosina 5000 < 0,01
Monoyodotirosina 5000 < 0,01
Diyodotirosina 5000 < 0,01
Biotina
Las siguientes concentraciones de biotina se añadieron en muestras de suero normales con concentraciones reducidas
y elevadas de T4 libre y se observó el siguiente cambio porcentual en la respuesta que se obtuvo como resultado.
Biotina (ng/mL)
Rango Concentración de
analítico analitos 10 25 100 300 600 1200
Bajos 0,7-0,9 ng/dL 6 % 14 % 140 % 371 % 545 % *
Alto 1,8-4,3 ng/dL 8 % 13 % * * * *
* = resultado por encima el rango de medición del ensayo
SENSIBILIDAD ANALITICA
El mínimo nivel detectable de Free T4 distinguible de cero (Access Free T4 Calibrator S0) con un grado de confianza del
95 % es 0,25 ng/dL. Este valor se determina procesando una curva de calibración completa de seis puntos, controles y
10 replicados de calibrador cero en ensayos múltiples. Se calcula el valor de la sensibilidad analítica a partir del punto
de la curva que se encuentra a dos desviaciones estándar de la señal cero promedio medida del calibrador.
INFORMACIÓN ADICIONAL
Beckman Coulter, el logotipo estilizado y las marcas de productos y servicios de Beckman Coulter aquí mencionadas
son marcas comerciales o marcas comerciales registradas de Beckman Coulter, Inc. en Estados Unidos y otros países.
LISTA DE SÍMBOLOS
El glosario de símbolos está disponible en [Link] (número de documento C02724)
Instrucciones de uso B01902 L Spanish Access Free T4
MAYO 2019 Página 11 de 13
REFERENCIAS
1. Gornall, AG, Luxton, AW, Bhavnani, BR. Endocrine disorders. In Applied Biochemistry of Clinical Disorders. 1986,
305-318. Philadelphia, PA: J. B. Lippincott Co.
2. White, GH. Recent advances in routine thyroid function testing. CRC - Critical Reviews in Clinical Laboratory
Sciences, 1987, 24: 315-362.
3. Watts, NB, Keffer, JH. The thyroid gland. In Practical Endocrine Diagnosis. 1982; 77-96. Philadelphia, PA: Lea &
Febiger.
4. Approved Guideline - Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens for Common Laboratory
Tests, GP44-A4. 2010. Clinical and Laboratory Standards Institute.
5. Cembrowski GS, Carey RN. Laboratory quality management: QC ⇌ QA. ASCP Press, Chicago, IL, 1989.
6. Demers, LM, Spencer, CA. Laboratory medicine practice guidelines: laboratory support for the diagnosis and
monitoring of thyroid disease. Clin Endocrinol (Oxf) 2003; 58(2): 138-140.
7. Lee, SL. When is the TSH normal? New criteria for diagnosis and management. 12th Annual Meeting of the
American Association of Clinical Endocrinologists (AACE), May, 2003.
8. Haugen, BR. When isn't TSH normal and why? Clinical implications and causes. 12th Annual Meeting of the
American Association of Clinical Endocrinologists (AACE), May, 2003.
9. Singer, PA. Now it's normal - now it's not: food for thought from a complex case. 12th Annual Meeting of the
American Association of Clinical Endocrinologists (AACE), May, 2003.
10. Kricka L. Interferences in immunoassays - still a threat. Clin Chem 2000; 46: 1037-1038.
11. Bjerner J, et al. Immunometric assay interference: incidence and prevention. Clin Chem 2002; 48: 613 - 621.
12. Liewendahl, K, Majuri, H, Helenius, T. Thyroid function tests in patients on long-term treatment with various
anticonvulsant drugs. Clinical Endocrinology, 1978; 8: 187-191.
13. Wenzel, KW. Pharmacological interference with in vitro tests of thyroid function. Metabolis. 1981; 30(7): 717-732.
14. Wilke, TJ. Estimation of free thyroid hormone concentrations in the clinical laboratory. Clinical Chemistry. 1986;
32(4): 585-592.
15. Spencer, CA. Thyroid status: trends in testing - selective test use cuts cost. Clinical Chemistry News, November,
1989, 15(11): 9-14.
16. Piketty ML, et al. 2017. High-dose biotin therapy leading to false biochemical endocrine profiles: validation of a
simple method to overcome biotin interference. Clin Chem Lab Med. 55(6):817-825.
17. Grimsey P, et al. 2017. Population pharmacokinetics of exogenous biotin and the relationship between biotin
serum levels and in vitro immunoassay interference. 2(4):247-256.
18. Tentative Guideline - Internal quality control: Principles and definitions, C24-T. 1987. National Committee for
Clinical Laboratory Standards.
19. Krouwer, JS, Rabinowitz, R. How to improve estimates of imprecision. Clinical Chemistry. 1984; 30: 290-292.
Access Free T4 Spanish Instrucciones de uso B01902 L
Página 12 de 13 MAYO 2019
Beckman Coulter Eurocenter S.A., 22, rue Juste-Olivier. Case Postale 1044, CH - 1260 Nyon 1, Switzerland
Tel: +41 (0)22 365 36 11
Beckman Coulter, Inc., 250 S. Kraemer Blvd., Brea, CA 92821 U.S.A.
Instrucciones de uso B01902 L Spanish Access Free T4
MAYO 2019 Página 13 de 13
