PRACTICA II

HEMATOCRITO

OBJETIVOS
APLICAR CORRECTAMENTE LA TECNICA DE HEMATOCRITO

1. Utilizar la técnica correcta del montaje del hematocrito

2. Leer correctamente los resultados del hematocrito en la tabla de lectura.
3. Controlar los resultados del hematocrito relacionándolos valores normales.
4. Interpretar los resultados

INTRODUCCION
El hematocrito representa el volumen de los glóbulos rojos proporcionados en litro por litro
de sangre total y se expresa en unidades internacionales ( U.I) L/L.
La lectura sobre la tabla se reporta en porcentajes, el que se convierte luego en U. I. Para
obtener el porcentaje de hematocrito existen dos métodos: automático y manual.
Partiendo de los conocimientos de la guía de conteo de eritrocitos se recordará la existencia
de equipos automáticos que permiten a través del dato del conteo eritrocitario y volumen
eritrocitario globular (constante) obtener por medio de la calculadora del equipo, el valor del
hematocrito.
El método manual ofrece dos variantes: marco y micro hematocrito. Ambos métodos se
apoyan sobre el mismo principio, pero se emplea más sangre para el macrohematócrito.
Entre las dos variantes, el punto de elección es el micro hematocrito, porque es una técnica
más fiable, rápida y de mejor precisión en los resultados. Sin embargo, el método de
macrohematócrito sigue utilizándose en algunos centros en que no existe la posibilidad de
practicar el micro hematocrito (escasez de material y equipo).
El resultado de hematocrito, nos permite determinar inicialmente el volumen global de los
eritrocitos. Este dato orienta al método para diagnosticas rápidamente eventuales
trastornos clínicos, como anemias o policitemias. De forma segundaria, con l valor de
hematocrito y el resultado del conteo de eritrocitos puede calcularse un índice globular (
V.C.M) volumen corpuscular medio, que induce la clasificación del tipo de anemia presente.
Existen factores que interfieren en los resultados obtenidos tales como : relación incorrecta
de sangre/ anticoagulante donde la dilución adecuada se recomienda, sea 1/10 o cuando
el grado de oxigenación de la sangre afecta porque una muestra oxigenada da un resultado
de 2% mas bajo que el de sangre venosa.
PRINCIPIO.
A través de la fuerza centrífuga que se ejerce desde el centro la periferia, cuando un
cuerpo está en movimiento circular (capilar con la sangre) es posible obtener después
de la centrifugación adecuada , los eritrocitos sedimentan a fondo del tubo, el plasma en
la parte superior.
MATERIAL EQUIPO REACTIVO.

I. Para macro hematocrito.

- tubos de Wintrobe.
- aguja de Wintrobe. –Micro centrifuga.
- Pipetas Pateur o Jeringas
- Gradillas .

II.- Para microhematocrito.

- Capilares heparinizados,
O sin anticoagulante. Microcentrifuga para
- Cera comercial HTO.
- Tabla de Lectura.
Desarrollo.
Procedimiento Técnico.
1.- Utilizando un algodón se aséptica la región a utilizar con alcohol y luego se seca al
aire o con algodón. Se coge entre el pulgar y el índice y se hace una punción
rápida y penetrante a través de la piel de la punta del dedo con una lanceta estéril.
2.- Llenar el capilar hasta ¾ partes de su capacidad.

3. utilizando la cera, se dejar un espacio entre cera y la sangre, en caso

De no contar con cera se utiliza mechero, calentando cuidadosamente
Uno de los extremos que tenga un espacio de aire, separado de la sangre (parevitar la
lisis). Se deja enfriar horizontalmente.
4. Se adapta un cubreobjetos sobre una cámara cuenta glóbulos limpia y seca y se coloca
una gota en uno de los lados del cubre; esta gota penetra por
capilaridad y rellena el retículo de la misma.
5.- Luego colocar los capilares identificados en la micro centrifuga
con la parte sellada hacia la periferia.
6.- Centrifugar los capilares colocando los en orden según asignación de números por un
tiempo de 3 a 5 minutos, esto dependerá de las revoluciones de la micro centrifuga.

7.- Leer en la tabla de lectura a la altura de la capa de glóbulos

rojos
En este caso el resultado del hematocrito es de 0.40 L/L l o 40%

Precisión de la Técnica: en condiciones adecuadas, el error del

Grado del cálculo no debe exceder el 1%
Calculo por el resultado en U.I..
Por ejemplo: 45% es decir 45mL de G

450mL de GR
1000 mL de
Sangre total (1 li

INTERPRETACION.
HOMBRE : 42 -55% O 0.42- 0.55 L/L.
MUJERES. :
NIÑOS :
RECIEN NACIDOS :
Las cifras bajas del valor del hematocrito pueden indicar anemia o hemodilución.
Las cifras altas del valor del hematocrito pueden depender de una policitemia (poli
globulina) o de una disminución del volumen plasmático Hemoconcentración por pérdidas
acuosas importantes, como en deshidratación, shock, quemaduras. En estas falsas poli-
globulinas se obtienen valores de hematocritos elevados que pueden llegar al 60-70%.
El valor del hematocrito depende, en primer lugar, del número de hematíes circulantes,
pero también de la forma y tamaño de los mismo k lo que representa un límite en su interés
clínico. Existe una equivalencia aproximada entre el valor del hematocrito y el número de
hematíes.
Cálculo aproximado: al valor expreso en millones (hematocrito), se suma el 10%. Ejemplo:
Un hematocrito de 40% se calcula de 4.000000 más el 10% = (400.000) da una cifra de
eritrocitos de 400.000. Si el valor globular es bajo, los eritrocitos no corresponden al
hematocrito.
Practica
TEMA: CONTEO DE ERITROCITOS ( O GLOBULOS ROJOS )
OBJETIVOS
APLICAR CORRECTAMENTE LA TECNICA DE RECUENTO DE ERITROCITOS.

1.- Utilizar la técnica del recuento de Eritrocitos manual y automatizado

2.- Utilizar correctamente la cámara de Neubauer.

3.- Obtener los resultados e interpretarlos

Introducción.
La sangre esta compuesta de dos partes: una parte liquida (plasma) y una parte solida
los elementos celulares): eritrocitos, leucocitos y plaquetas.
El eritrocito, en condiciones normales, es un disco bicóncavo elástico, a nucleado, con un
contenido de hemoglobina estable, con un tamaño, aspecto y espesor uniforme. Visto al
microscopio para el conteo o se aprecia el eritrocito con una membrana definida.
De perfil, en corte, el área de la periferia, es más gruesa y más obscura y el centro de la
célula, delgado, una coloración más pálida, semitransparente
El estudio de los eritrocitos es una practica frecuente en los laboratorios, tanto el
hematocrito como la determinación del numero eritrocitario brindan información valiosa
acerca de la eritropoyesis eficaz y la regulación corporal del individuo.
Para la realización del conteo de eritrocitos se requiere diluir 1/200 la sangre ya que los
eritrocitos son muy numerosos (millones /L).Para esta dilución se utiliza la PIPETA DE
THOMAS DE ERITROCITOS (Bulbo grande y perla interna roja). El reactivo diluyente
debe tener una concentración apropiada, ya que las soluciones hipo o hipertónicas
causarían la deformación o lisis de los eritrocitos. Este sirve además para prevenir la
aglutinación celular e impide la coagulación. Existen varias soluciones: Hayen , Dacie,
Grower , son las mas utilizadas . La solución mas recomendable e las solución de Hayen
por su estabilidad, ella se conserva bien manteniendo la forma original de los eritrocitos
.los conteos pueden ser efectuados después que la sangre ha sido diluida entre 30 a 40
minutos.
Para el conteo de los eritrocitos se emplea la cámara de Neubauer, usando el área del
Retículo de Thomas , y contando solamente 5 cuadritos. Es muy importante aplicar la
técnica de barrido par evitar conteos repetidos de las misma células.
Otro método de conteo de las células rojas, es el método automático.
Puede realizarse un recuento automático de glóbulos, empleando equipos especializados
denominados: autocitometros, celescopios o contadores automáticos . su diseño es
basado en el uso de manómetros de mercurio, que hacen fluir po un orificio de
dimensión fija , cantidades fija de partículas (células ) solidas suspendidas en un
electrolito . Aparece un impulso que capta tamaño es superior al umbral de la solución )
el empleo de este método. Descarta en alguna forma el error humano, sin embargo el
descuido en su limpieza o una mala calibración del aparato, provoca importantes causas
de error, que conducen a recuentos alterados.
Independientemente del método usado en el recuento celular, los resultados que se
encuentran fuera de los límites normales, deberán duplicarse como una medida de control
de calidad.
PRINCIPIO.
Para efectuar el cómputo se diluye la sangre con líquidos isotónicos (solución de Harem)
que no modifican los eritrocitos, los preservan en su forma original y destruyen las otras
células, permitiendo así realizar su recuento.
Además, en este recuento permite determinar el número de eritrocitos presentes en un
volumen determinado de sangre (normalmente, en 1 mm cúbico de sangre)
Metodología Experimental
Se debe emplear un líquido de dilución que sea isotónico para evitar la alteración
morfológica de los eritrocitos e incluso su lisis. ( Hayem) evitando contenga precipitados,
de lo contrario debemos filtrar con el embudo.
Componentes del liquido
-2,5 g de Na2SO4 (Sulfato sódico).
-0,5 g de NaCl (Cloruro sódico).
-0,25 g de HgCl2 (Cloruro mercúrico).
-100 ml de agua destilada.
MATERIAL EQUIPO REACTIVOS
-Sangre venosa recogida - Microscopio acetona
Con EDTA o sangre capilar -Liquido de dilución
-Frascos (Dacie, Hayem,
-Agua y alcohol Grower).
-Algodón seco
-Pipeta de Thomas
-Cámara de Neubauer
-Contador manual
-Boquilla
-Paños limpios
-Papel seda para la limpieza
De los lentes.

DESARROLLO.
Procedimiento Técnico.

1.- Utilizando un algodón se aséptica la región a utilizar con

alcohol y luego se seca al aire o con algodón. Se coge
entre el pulgar y el índice y se hace una punción rápida y
penetrante a través de la piel de la punta del dedo con una
lanceta estéril.

CAMARA Y PIPETAS THOMAS

2.- hecha la primera gota de sangre y se aspira la siguiente con la
pipeta de dilución perfectamente limpia y seca hasta la
señal 1 o 0.5 (también puede utilizarse la pipeta de hemoglobina, de 20 microlitos).
Hay que evitar la entrada de burbujas de aire, pudiendo ayudarnos de un papel de
filtro para conseguir el enrasado.

3.- continuación se toma con la pipeta líquido de Hayem,

isotónico con la sangre, hasta la señal 1; así, la sangre
queda diluida al 1/10, si tomamos sangre hasta la señal
1, o al 1/20 si tomamos hasta 0.5. Esto es así porque el
volumen de la bola de la pipeta es 100 veces superior al
del capilar de la misma. (Si hemos utilizado la pipeta de
hemoglobina podemos diluir su contenido en 2 o 4 ml de
REACTIVO DE HAYENAMARA
líquido de Hayem para obtener diluciones 1/100 o 1/200).
4. Tomamos la pipeta (o el tubo de ensayo) entre los dedos
índice y pulgar y agitamos. A través de la goma de
conexión con la pipeta, soplamos para despreciar las
primeras gotas por corresponder al líquido que estaba
en el capilar.
MODO DE LLENADO DE LA CAMARA
5. Se adapta un cubreobjetos sobre una cámara cuenta
CAMARA Y PIPETAS THOMAS
glóbulos limpia y seca y se coloca una gota en uno de los
lados del cubre; esta gota penetra por capilaridad y rellena el
retículo de la misma.
6. colocar la cámara sobre la platina del microscopio
dejándose unos minutos en reposo para que
sedimenten los glóbulos. Disponemos el condensador
bajo y luz débil; enfocamos primero con el objetivo
débil seco (10X) y luego se cambia al fuerte seco(40x)
para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los
cuadrados pequeños del retículo marcado en color rojo. Finalizado el recuento se
procede a la limpieza de la pipeta con acético 1:3, agua destilada y alcohol-éter
sucesivamente.
7.-El volumen de sangre en el cual se han contado las células resulta de multiplicar la
profundidad de la cámara por el factor de dilución, la superficie de los cuadrados y el
número de cuadrados contados.

Con cámara de NEUBAUER: Superficie de 1 cuadrado grande (1/20 mm de lado):

8.-Contar los glóbulos rojos con objetivo (XC 40), los cincos cuadritos eligiendo 4 de los
ángulos del retículo de Thomas ( A, B, D, D ) y uno del centro ( C ) utilizando el
recorrido indicado.
9.-Con el número de eritrocitos obtenido aplicar el cálculo de la siguiente manera:
FORMULA
Número de glóbulos rojos/mm³ = número de eritrocitos contados X 5 X 10, cada valor
proviene de:
X5 el conteo se realiza en la quinta parte del retículo;
X10 profundidad;
X200 dilución utilizada 1 / 200.
Esto se reduce a un factor de 10 000.
PRECAUCIONES

-Usar pipetas secas y en perfecto estado (Sin ruptura en la parte inferior del tallo).
-Conservar, preparar y usar adecuadamente el diluyente (evitando su contaminación)
-Evitar la presencia de burbujas (dilución – montaje de la pipeta y cámara).
Valores normales
Hombres : de 4 300 000 a 5 900 000/mm³ (4,3 - 5,9 X 10 12 /L)
Mujeres : de 3 900 000 a 5900 000/mm³ (3,9 - 5,9 X 1012 /L)
Niños : de 3 800 000 a 5500000 /mm³ (3,8 - 5,5 X 1012 /L)
Recién nacidos : de 4 4600000 a 6 600000 /mm³ (4,6 - 6,6 X 1012 /L)
 CAPITULO II ERITROCITOS.

TEMA DOSIFICACION DE HEMOGLOBINA

OBJETIVOS

APLICAR DE FORMA CORRECTA LA TECNICA DE CIANOMETAHEMOGLOBINA

PARA OBTENCION DE HEMOGLOBINA TOTAL.

TERMINACIÓN DE LA HEMOGLOBINA

Objetivo:
Emplear el procedimiento técnico para hemoglobina mediante la fotometría
Realizar cálculos según los valores obtenidos en absorbancia, estándar y factor.
3.- Interpretar los resultados.

Introducción

La hemoglobina es una proteína conjugada que sirve para el transporte de oxígeno y dióxido
de carbono. La masa total de eritrocitos de un adulto contiene unos 600gr, de hemoglobina
capaces de transportar 800ml de oxígeno.

Hemoglobina es el mejor índice para medir la capacidad transporte de gases, tanto para
oxigeno como para bicarbonato por parte del eritrocito. En cuanto a la concentración de
hemoglobina y el hematocrito representan en forma directa el número de eritrocitos.

Desde el punto de vista de la evaluación de la integridad hematológica, la determinación de

hemoglobina es superior al hematocrito y al recuento de eritrocitos. Las enfermedades
relacionadas con los eritrocitos (especialmente los síndromes anémicos) están definidas por
la concentración de la hemoglobina.

Una molécula de hemoglobina consta de 2 pares de cadenas poli pépticas (unión de

aminoácidos) (globina) y 4 grupos proteicos HEM que contienen cada uno un átomo de fe en
estado ferroso. Cada punto HEM se localiza en una zona determinada de una de las cadenas
de polipepticos. Localizando cerca la superficie de la molécula, el HEM se combina de forma
reversible con una molécula de oxígeno y dióxido de carbono. Este grupo HEM es el
responsable del del color rojo de la hemoglobina (hb).

Para medir la hemoglobina se realiza empleando métodos electrónicos, siendo uno de ellos
el método de la cianometahemoglobina que determina otras formas de hemoglobina como la
oxihemoglobina y la carboxihemoglobina, mediante un pequeño hemoglobinómetro
incorporado al equipo.

El método de la cianometahemoglobina fue recomendado por el Comité Internacional para

la Estandarización de Hematología (ICSH) en 1966, modificado en 1977 y sigue siendo hasta
hoy el más recomendado. Este procedimiento tiene muchas ventajas, tales como la
disponibilidad de estándares satisfactorios y la capacidad de cuantificar todas.

La medición del valor de la hemoglobina es considerada como una

prueba de laboratorio más demandada a diario en pacientes por emergencias
pacientes agudos o crónicos entre otro

FUNDAMENTO
Al mezclar la sangre con el reactivo de DRABKIN, se transforma la hemoglobina en cian
metahemoglobina, la intensidad de color de esta reacción es medida en un fotocolorímetro o
espectrofotómetro.

1) Hba se oxida en metahemoglobina por acción del ferricianuro de potasio

Hba + K3 [Fe (CN) 6] Metahemoglobina

2) La metahemoglobina será transformada en cianometahemoglobina por acción del

cianuro de potasio.
Meta Hba + KCN Cianometahemoglobina

PROCEDIMIENTO

MATERIALES REACTIVOS EQUIPOS

Sangre Total (EDTA) solución de Drabkin

Pipetas automáticas solución ferricianuro potásico
Agitadores +Tampón fosfato potásico
Puntas de pipetas
Tubos de ensayos 75x 100
Marcadores
Gradillas

METODOLOGIA

Se determinará la concentración de Hemoglobina de una muestra problema siguiendo los

pasos Detallados a continuación:

Conectar el espectrofotómetro. 15 minutos antes de la realización de la práctica

1.- Preparar el reactivo de trabajo de la siguiente manera.
2.45ml de H20 , destilada + 50ul de Reactivo para hemoglobina por paciente
Esto significa que hay que realizar un cálculo según la cantidad de pacientes que se trabaja
en el laboratorio.

2. A partir de la muestra tomada con EDTA, proceder a

Homogeneizar bien la sangre mediante agitación suave con
un sistema automático (rodillos/disco giratorio) durante un
tiempo mínimo de 5 min o manualmente por inversión del
tubo 3 veces. Dos minutos

3. Leer la técnica según casa comercial ejemplo (5 ml de reactivo de Drabkin en un tubo de

ensayo limpio colocar 20ul de sangre homogenizada).

4. Al realizar esta operación, es fundamental eliminar el exceso de sangre que pueda quedar
en las paredes de las puntas de pipetas antes de introducirlo en el Reactivo y procurar
asimismo que no quede sangre adherida a las paredes internas de la pipeta.

5. Agitar el tubo mediante inversión (4 o 5 veces) con el fin de conseguir homogeneizar bien
la mezcla sangre-reactivo y esperar un mínimo de 5 min para que se produzca la hemólisis
total y se complete la transformación de toda la hemoglobina en ciano-metahemoglobina.
7.- Dejar a temperatura ambiente por 5minutos o incubar según la técnica y casa comercial

6. Leer la A de la solución a 540 nm, utilizando agua destilada como blanco.

7. Para calcular la concentración de hemoglobina es recomendable disponer de una curva de

calibración.

8.-Existen tres formas de lectura en el espectrofotómetro ver Manual del uso del equipos para
las respectivas lecturas.
En absorbancia:
Contra estándar (se toma del frasco que dice estándar y se coloca la concentración que dicta
la etiqueta)
Con factor (se toma según la técnica o casa comercial o en algunas veces por el laboratorio).

9.- Realizar los cálculos correspondientes

Ab del estándar x la concentración del estándar
Absorbancia del paciente

INTERPRETACIÓN

Valores de referencia

Hombre………………..……. 14 17 g/dL 0 140 --- 170g/dL

Mujeres…………………...… 12 16 g/dL 0 120 --- 160g/dL
Niños………………………… 11.5 13.5 g/dl 0 115 --- 135g/dL
Recién Nacido…………...….. 13.6 19.6 g/dL 0 136 --- 196g/dL

Niveles bajos de hemoglobina.

Un conteo ligeramente bajo de hemoglobina no siempre es un signo de enfermedad, que

puede ser normal para algunas personas. Las mujeres embarazadas suelen tener un recuento
bajo de hemoglobina.( anemias fisiológica ) por hemodilución .

Niveles bajos de hemoglobina asociados con enfermedades condiciones

∞Un recuento bajo de hemoglobina puede estar asociado con una enfermedad o condición
que hace que su cuerpo tenga muy pocos glóbulos rojos. Esto puede ocurrir si: El cuerpo
produce menos glóbulos rojos de lo normal, Su cuerpo destruye los glóbulos rojos de la
sangre más rápido de lo que pueden ser producidos Experimenta pérdida de sangre

∞Anemias (por disminución de la masa de hemoglobina total circulante)

∞ Hemoglobinopatías, de anomalías estructurales de hemoglobina

Ejemplo: drepanocitosis

Producción insuficiente de glóbulos rojos

Las enfermedades y condiciones que causan que el cuerpo produzca menos glóbulos rojos
de lo normal, incluyen:

Anemia aplásica
Cáncer
Ciertos medicamentos, como los medicamentos anti-retrovirales para los medicamentos de
quimioterapia y de infección por el VIH para el cáncer y otras condiciones
Cirrosis
Linfoma de Hodgkin (enfermedad de Hodgkin)
Hipotiroidismo
Anemia por deficiencia de hierro o Vitamina
Enfermedad renal crónica
Envenenamiento por plomo
Leucemia
Mieloma múltiple
Síndromes mielodisplásicos
Destrucción de los glóbulos rojos.

Las enfermedades y condiciones que causan su cuerpo destruya los glóbulos rojos de la
sangre más rápido de lo que pueden ser producidos son:
Agrandamiento del bazo (esplenomegalia)
Anemia falciforme
Talasemia
Hemólisis
Pérdida de sangre

Un recuento bajo de hemoglobina también puede ser debido a la pérdida de sangre, lo cual
puede ocurrir debido a:

Sangrado de una herida

Sangrado en el tracto digestivo, como úlceras, cánceres o hemorroides
Sangrado en el tracto urinario
Donación de sangre frecuentes
Sangrado menstrual abundante
Las causas incluyen:
Vivir en una gran altura
Fumar
Enfermedad cardíaca congénita
Cicatrices y engrosamiento del tejido pulmonar (fibrosis pulmonar)
Policitemia vera
La deshidratación, como de la diarrea severa o sudoración excesiva
La enfermedad renal
El uso de esteroides anabolizantes

Aumento por encima de los valores normales

Poli globulinas: debido al aumento de la tasa de hemoglobina y aumento paralelo dela tasa
de glóbulos rojos (valores > 16g /dL en la mujer
>17 g/dl en hombres

Curva de calibración de hemoglobina

Se usa utilizando diversas diluciones seriadas del estándar de hemoglobina con el objetivo
de conocer una concentración desconocida ver (anexo No 4 para la confección de la curva)

Se toma un Kit. de calibración con estándar de CC. Normal, de una CC. Alta y otro de una
CC .baja, y se miden las absorbancia de cada una de ellas o se toma un Standard de CC.
Conocida y se hacen diluciones mayores y menores que el normal y se miden las absorbancia
y se determina un factor que es el promedio de las tres diluciones.

Teniendo que A=ɛ . b. C y como b=1 cm => A/ ɛ = C para facilitar el cálculo A . (1/ ɛ) =
C donde (1/ ɛ)= F y es la inversa de la pendiente de la curva tendremos que C= F. A.
Dicho en otras palabras la recta se ajusta a una ecuación del tipo y=ax+b.
Grafico:
De esta manera controlo:
• La linealidad del equipo
• El deterioro que sufre el reactivo
Puedo trabajar con un estándar diario, procesado por cada operador que realiza la
determinación de hemoglobina, como si fuese una muestra más y determino el factor del
estándar.
i.-Control o el deterioro que puede sufrir el reactivo desde el dia que se lo preparo y se
realizó la curva.

ii.-Controlo el factor humano cambios en la tensión de la red o desgaste de la lámpara

del fotocolorímetro Causas de error en la determinación de la

iii.-Concentración de hemoglobina
La determinación de hemoglobina está sometida a posibles errores que deben ser tenidos en
cuenta. Algunos de ellos obedecen a características peculiares del espécimen como la
presencia de hiperlipémica o leucitocitosis intensa ( 50 x 109/l). No obstante, la mayoría de
las veces los errores se deben a defectos técnicos en la manipulación y el análisis del
espécimen.

Errores en la obtención del espécimen de sangre:

1. Errores de extracción
2. Empleo de anticoagulantes no recomendados
3. Coagulación parcial de la sangre

Errores de la dilución:
1. Empleo de pipetas automáticas sin calibración, sucias o húmedas
2. No eliminación del exceso de sangre adherida a las paredes punta antes de introducirlo en
el reactivo
3. Dilución incompleta de la sangre en el reactivo.

Errores de la transformación de la hemoglobina en HiCN:

1. Empleo de reactivo de Drabkin mal preparado o vencido
2. Lectura antes del tiempo necesario para la completa transformación de la Hb en HiCN
Errores de la determinación:
1. Empleo de instrumentos no calibrados
2. Cubetas sucias o deterioradas
3. Soluciones turbias de HiCN

Errores en la conservación del reactivo:

1. Congelación del reactivo, lo que produce transformación de K3 Fe(CN) 6 en K4 Fe(CN)

6 y una oxidación parcial de la Hb.
Conservación del reactivo en botellas de polietileno: se pierden grupos CN con formación
exclusiva de metahemoglobina, en vez de HiCN, con lo que los valores de concentración de
Hb obtenidos son inferiores a los reales.

Evaluación
1.- Que es la hemoglobina
2.- Cual es la estructura de la hemoglobina
3.-En que se basan los métodos de determinación de la hemoglobina?.
4.-Cuál es el método recomendado por el Comité Internacional para la estandarización de la
Hemoglobina?.
5.-De dónde procede el 20 de la fórmula para calcular la concentración?.
6.- Explique con sus palabras el principio de Hemoglobina
7.- indique dos alteraciones cuando los niveles de hemoglobina dan bajos.

Cálculos

Se obtuvieron los siguientes resultados

Absorbancia
0.136
0.069
0.056
BIBLIOGRAFIA
- Quick, A.J. - “Fisiología y Patología de la Hemostasis” - Ed. El Ateneo, Buenos Aires
(1952).
- Araldi, H.T., et al. - “Primer Reactivo Nacional Argentino de Referencia de Tromboplastina
de Cerebro Humano” – Acta Bioquím. Clín. Latinoam. XVI/1:131 (1982).
- Comité de Expertos de la O.M.S. en Patrones Biológicos - Inf. Nº 28: Normalización de la
Vigilancia del Tratamiento Anticoagulante (oral) - Serv. Inf. Tec. Nº 610:49-56 (1977).

- Comité de Expertos de la O.M.S. en Patrones Biológicos - Inf. Nº 31: Requerimientos para

Tromboplastinas y Plasmas usados en la terapia anticoagulante oral - Serv. Inf. Téc. Nº
658:202-223 (1981).
- Suñer Casadevall, F. - “Nuevas Normas Internacionales para la Expresión del Tiempo de
CAPITULO

II ERITROCITOS

TEMA DETERMINACION DE RECUENTO DE RETICULOSITO

OBJETIVOS:
APLICAR LA TECNICA YCALCULO PORCENTUALES DEL NUMERO DE
RETICULOSITO

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1.-Identificar los reticulocitos presentes en una muestra de sangre.
2.-Reconocer y observar su morfología en relación a los ribosomas
3.- Relacionar la cantidad presente de estas células, con respecto a 1000 hematíes
4.- Interpretar los resultados en relación a los cálculos.

Introducción

Los reticulocitos son hematíes jóvenes recién salidos de la médula ósea y que todavía
conservan algunas organelas citoplasmáticas, como las mitocondrias, los ribosomas y restos
del aparato de Golgi.
Son llamados glóbulos rojos inmaduros formados por ARN y protoporfirina en el citoplasma.
Son la fase anterior a ser un eritrocito.

Tienen un tamaño de 8-9 micrómetros de diámetro. Permanecen en la médula ósea (MO)

unos 2 o 4 días y después salen a la sangre periférica, donde maduran un día.
La tinción de los reticulocitos es una tinción supra vital porque se hace mientras las células
están aún vivas.

Para poder verlos con el microscopio es necesario teñirlos mediante un colorante sin fijación
previa (colorante supravital), como el azul de cresil brillante.

En estas condiciones aparecen teñidos de color azul con un punteado más o menos abundante,
oscuro y agrupado en forma de retículo que se conoce como sustancia reticulofilamentosa y
que corresponde en realidad a restos de ribosomas con artefactos. El tamaño de estas células
es superior al de los hematíes adultos.

Su número en sangre periférica oscila entre 0,5 y 1,5% de los hematíes maduros o, en cifras
absolutas, de 25 a 75 x 109/L.
El aumento de reticulocitos en sangre periférica es característico de las anemias de tipo
regenerativo, en las que la médula ósea produce más serie roja en respuesta a la pérdida
eritrocitaria (hemorragia) o a su destrucción patológica (hemólisis).

Por el contrario, su número desciende constantemente en las anemias de origen medular

(anemias arre generativas), en las que existe una insuficiente producción eritrocitaria por
aplasia o displasia de la médula ósea o por ocupación de ésta por células que comprometen
la eritropoyesis (mieloptisis).

El aumento del número de reticulocitos puede advertirse, simplemente, mediante la

observación al microscopio de una extensión de sangre periférica correctamente teñida con
la tinción panóptica. En efecto, en estos casos pueden verse hematíes con un color
ligeramente azulado (policromasia o policromatofilia) o bien con un fino punteado de color
azul (punteado basófilo). Debido a la impregnación o fijación del tinte azul claro u violeta al
grumo de ribosomas precipitados. Su nombre se debe que inicialmente se pensó que era el
“retículo endoplasma tico de allí (reticulosito), otros dicen que puede llamarse pro-eritrocito
Los colorantes usados son habitualmente colorantes básicos como el azul de cresil y azul
de metileno .
Su porcentaje permite determinar ciertas anomalías orgánicas pero su uso práctico en el
laboratorio debe usarse con otros parámetros de la línea roja. (Constantes corpusculares y
recuento de eritrocitos)

Cuando se trata de alteraciones del aspecto del hematíe obedecen al contenido ribosómico
del hematíe joven comentado anteriormente, pero que adoptan una forma distinta a la del
reticulocito por el hecho de que la tinción panóptica implica la fijación previa del eritrocito.
Esto nos permite estudiar lo siguiente:
 Evaluar la capacidad de la médula ósea de generar hematíes nuevos
 Diferenciar entre las causas de anemia
 Monitorizar la respuesta de la médula ósea y su recuperación funcional, tras
quimioterapia o transplante de médula ósea.
 Seguimiento después de un tratamiento de anemia por deficiencia de ferropénica, Vit.
B12, folato o insuficiencia renal.

El análisis se suele indicar cuando se observa:

 Descenso de los hematíes

 Descenso de la Hb
 Descenso del HTO y/o síntomas de anemia.
 Para evaluación de la funcionalidad de la médula ósea

Fundamento
Los reticulocitos contienen una fina red de ARN y protoporfirina que se puede teñir con el
azul de cresil brillante. Este colorante en combinación con una misma cantidad de sangre anti
coagulada se mezcla y con la ayuda de la temperatura (baño maría) se produce la coloración
de estos eritrocitos jóvenes, mediante precipitado dentro de cada eritrocito en un tiempo de
15 minutos, visualizándose en un frotis puesto al microscopio.

METODOLOGIA EXPERIMENTAL

Los reticulocitos son eritrocitos más jóvenes y su número en la sangre es el mejor índice de
la efectividad de la Eritropoyesis. Debido a la sencillez del método, permitiendo evaluar
seriadamente el funcionamiento medular como respuesta a tratamientos.

MATERIALES REACTIVO EQUIPO

Baño de María
♦ Láminas portaobjetos. Azul de cresil o azul de metileno Microscopios
♦ Tubos de ensayos de 12 x 75 mm.
♦ Embudo.
♦ Filtro de papel.
♦ Pipetas Pasteur con chupones.
♦ Contador manual (no imprescindible).
♦ Solución saturada de azul de cresil brillante (filtrada).
Procedimiento
♦ En el tubo de ensayo colocar dos gotas de sangre total con anticoagulante.
♦ Inmediatamente adicionar con la ayuda de una pipeta Pasteur la misma cantidad de
colorante.
♦ Mezclar la solución.
♦ Tapar el tubo de ensayo con algodón seco o papel parafin para evitar la evaporación de la
solución y facilitar la precipitación
♦ Se coloca luego en baño maría por espacio de 10 a 15 minutos.
♦ Se realizan frotices sanguíneos.
♦ Se lee con objetivo de 100x.

Examine por lo menos 100 eritrocitos con el objetivo de inmersión. Cuente Cuidadosamente:

♦ Cantidad total de glóbulos rojos.

♦ Número total de reticulocitos que haya entre ellos.

El recuento se ha venido haciendo clásicamente de forma manual mediante la observación

en el microscopio óptico. El resultado se da en porcentaje sobre cada 100 hematíes. Es más
útil calcular el número de reticulocitos por litro, mediante la fórmula:

Reticulocitos/L = % reticulocitos x número hematíes/L

 100
Observación

En la actualidad existe la posibilidad de hacer el recuento rutinario de forma automática,

mediante aparatos específicamente diseñados al respecto, bien a través de adaptaciones de
los clásicos auto analizadores para hemogramas.
En estos casos se puede conocer, además, las distintas proporciones de reticulocitos según su
grado de maduración, su volumen medio y el índice de maduración.

De otra manera más sencilla

Al observar al microscopio se deben contar 1.000 hematíes en total, para calcular el
porcentaje de reticulocitos tenemos que emplear la siguiente fórmula:

% reticulocitos = ( Nº de reticulocitos contados / Nº de hematíes contados) x 100

Para descartar errores se deben realizar dos extensiones y hacer el recuento a ambas, por lo
que la diferencia entre ellas tiene que ser igual o menor a 5 reticulocitos.

% reticulocitos = ( 16 / 1.000 ) x 100 = 0,8 % de reticulocitos.

La cantidad de reticulocitos expresada en tanto por ciento es un valor relativo que se refiere
a una cifra normal de eritrocitos (en nuestro caso 1.000 ).Por ello, cuando existe una anemia
con disminución en al cantidad de eritrocitos se compensa con un aumento de reticulocitos y
debemos corregir su valor en tanto por ciento para poder considerarlo real.

La corrección se hace en base al hematocrito (HTO) del paciente, se calcula con la siguiente
fórmula:

% de reticulocitos corregido = % reticulocitos x ( HTO del paciente / HTO normal

Si la anemia es muy intensa, aparece en sangre periférica un número mayor de reticulocitos

del que correspondería por regeneración eritoblástica. Esto se debe a que el estímulo
eritropoyético que compensa va acompañado de un periodo de maduración intramedular más
corto y una etapa de maduración en sangre periférica más larga.

Esto se conoce como "desviación reticulocitaria".Se debe hacer una segunda corrección del
% de reticulocitos en función de los días que tarda en madurar el reticulocito en sangre
periférica, y a esto se le llama índice de producción reticulocitaria (IPR).

Se utiliza la siguiente fórmula:

IRP = % reticulocitos corregido / días de maduración en sangre periférica

Esta tabla muestra los días que tarda en madurar el reticulocito:

Un IPR mayor de 3 nos indica un aumento de la actividad eritropoyética medular, mientras

que un IPR menor de 2 indica una escasa actividad eritropoyética.

Resolución de los objetivos propuestos:

-Los reticulocitos son la fase anterior al eritrocito. Se origina por maduración del eritroblasto
ortocromático.

IPR( Significa índice de producción reticulocitario (IPR) y nos proporciona un valor

numérico de la estimulación hematopoyética por encima de la actividad de la línea base
normal.

CAUSAS DE ERROR:

El error más significativo fue al realizar la solución colorante, debido a que, al no estar bien
disuelto el frotis, no se podía realizar correctamente la extensión.

Otro posible error pudo ser al contar el número de reticulocitos .Nosotros fuimos contando
los reticulocitos de la muestra en forma de zig-zag y separando la muestra en secciones con
reticulocitos guía, pero no es un contaje 100% fija

Causas de aumento

El número de reticulocitos aumenta en todas las circunstancias en las que existe un

incremento de la eritropoyesis, tales como en la hemólisis, como respuesta a sangrados o tras
el inicio de un tratamiento anti anémico que ha resultado eficaz.

Causas de disminución

Como la producción de reticulocitos es necesaria para compensar las pérdidas

Fisiológicas de glóbulos rojos maduros, una disminución de su número es la expresión de un
estado arre generativo o hipo regenerativo de la serie roja. Esta circunstancia es típica de
anemias aplásicas, anemias carenciales y enfermedades inflamatorias y neoplásicas.
Preparación del azul de cresil
 Se han mezclado 80ml de suero salino con 20ml de citrato sódico al 3%.
 Con una balanza de precisión, pesar 1g de azul cresil brillante.
 A la mezcla anterior se le añade el gramo de azul cresil brillante pesado.
  Se filtra el colorante con papel de filtro, para evitar precipitados que puedan alterar
la tinción.

Resultados
Valores de referencia
Adultos 0,2 - 6%
Niños: 2.0- 6%
Al nacer 2,5 - 6,0%

EVALUACION
1. En qué casos se produce reticulopenia o disminución en la cifra de reticulocitos
2. .La cantidad de reticulocitos expresada en tanto por ciento es un valor relativo referido a
una cifra normal de hematíes. Cierto o falso justifíquela repuesta
3.- El Índice Reticulocitario o Índice de Producción Reticulocitaria (IPR), suministra una
Información más fidedigna sobre la capacidad arre generativa de la médula.
4.- Porque es importante el reticulosito con otras pruebas y cuales son
5.- Explique brevemente el principio de la prueba

6.- identifique la cantidad de reticulositos en esta diapositiva y haga sus propias

interpretaciones tratándose de un paciente adulto.
 Tema VSG

Objetivos
Medir la rapidez con que sedimentan los hematíes de una muestra de sangre que ha sido
tratada con citrato sódico 1/9. Poniendo de manifiesto las características físicas de la
sangre.

Comparar la VSG medida mediante tubo de witrobe

Fundamentos

VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN

La velocidad de sedimentación es un examen hematológico que no está incluido en el

desarrollo de un hemograma; sin embargo, es una prueba muy importante por su gran
sensibilidad, pues resulta normal en las enfermedades funcionales, así como en los
procesos inactivos o estrictamente locales.

Los glóbulos rojos tienden a ir cayendo hacia el fondo del tubo, en condiciones normales
este proceso es lento, pues la fuerza con la que es atraído cada hematíe hacia el fondo de
la pipeta es casi compensada por la fuerza ascendente creada por el plasma al desplazarse
hacia arriba.

MÉTODO DE WESTERGREN

Fundamento
Este examen mide la tendencia de los eritrocitos a sedimentar, al colocar sangre anti
coagulada en un tubo en posición vertical. Leer macroscópicamente la columna de plasma
al cabo de una hora de reposo.

Introducción:

La medición de la velocidad de sedimentación globular (VSG) es una prueba para evaluar la

respuesta inflamatoria durante la fase aguda de diversos padecimientos infecciosos y no infecciosos.
Su historia se remonta a la observación de Fahraeus en 1918, de una rápida sedimentación de los
eritrocitos en el plasma de una mujer gestante que no ocurría en otra mujer no embarazada.
Sin embargo, fue hasta 1941 cuando MacLeod describió la VSG como reactante de fase aguda.
El fenómeno se debe a la tendencia de los eritrocitos de agregarse en forma de columnas de
monedas (fenómeno de Rouleaux) como resultado de un proceso electroquímico reversible. En la
sangre normal, los eritrocitos tienen una carga negativa (potencial zeta) en su superficie, que hace
que se “repelan” entre sí, lo cual da por resultado una velocidad de sedimentación de menos de 10
milímetros (mm) por hora. Por el contrario, todas las condiciones asociadas con procesos
inflamatorios que cambian el potencial zeta favorecen el fenómeno de Rouleaux e incrementan la
VSG.1 La VSG se incrementa en infecciones agudas y crónicas, necrosis tisular, lesiones malignas,
enfermedades de la colágena y reumáticas, niveles séricos anormales de proteínas y embarazo, así
como en pacientes con falla renal crónica en hemodiálisis y pacientes con insuficiencia cardiaca
congestiva, entre otras.3 Para medir la VSG hay diversos procedimientos; en 1974, Wintrobe
describió el método que es aún la regla de oro y requiere 1 ml de sangre venosa anti coagulada con
EDTA. La sangre se coloca en el tubo de Wintrobe (tubo de vidrio con un diámetro de 3 mm y
graduado en mm en una escala de 0 a 10 cm) y se deja reposar a temperatura ambiente durante
una hora en un soporte para mantener la posición vertical; al término, se cuantifica la sedimentación
en milímetros desde el borde superior del plasma hasta la base de las células.1 Otra técnica es la de
Westergreen, validada y aceptada por el Comité Internacional de Estandarización en Hematología y
descrita en 1988
Ésta consiste en extraer sangre venosa y mezclarla con citrato trisódico al 3.8% como
anticoagulante. Luego se vierte en un tubo de cristal de 300 ± 1.5 mm de longitud y 2.55 ± 0.15 mm
de diámetro, con una escala graduada en mm de 0 a 200, y se coloca en posición vertical durante
24 horas. Las lecturas en milímetros (a partir del borde superior del plasma y hasta las células) se
realizan después de una, dos y 24 horas

Existen dos maneras de realizarla mediante el uso de Wintrobe (prueba de Oro) como en un capilar
sin heparina, como se menciona a continuación. Método de Wintrobe se basa en colocar un mililitro
(ml) de la muestra anti coagulada a cada tubo manteniendo en forma 90 durante una hora. La
cuantificación de la VSG se efectúa de manera visual y puede corregirse mediante el hematocrito
del paciente con el hemograma.
Cabe recalcar que la medición de la micro-eritrosedimentación puede hacerse con una regla
milimétrica desde el borde superior del plasma hasta el inicio de la columna de eritrocitos. Los
resultados se expresaron como mm/hora

La técnica en capilares llamada “velocidad de microeritrosedimentación” se utiliza de manera

empírica desde la década de 1930 hasta nuestros días, como un procedimiento sencillo y útil para
apoyar el diagnóstico de sepsis.
Consiste en tomar una pequeña muestra sanguínea por punción venosa o en el talón y colectada
en un capilar heparinizado para micro hematocrito de 75 mm de largo y 1.1 mm de diámetro
interno; posteriormente, se coloca en posición vertical durante una hora.
La lectura se realiza de la misma manera que las dos técnicas anteriores y el resultado se reporta
en mm/hora.6,7 Aunque los métodos de Wintrobe y Westergreen están validados y tienen un alto
grado de confiabilidad, en ocasiones presentan algunas desventajas:

requieren la toma de un poco más de un mililitro de sangre del paciente, lo cual es un problema en
algunos recién nacidos pretérmino; 2) se requieren tubos diseñados específicamente para tal
propósito (se carece de ellos en muchos países en vías de desarrollo) y el resultado con frecuencia
demora varias horas; y 3) es una prueba no disponible las 24 horas del día en muchos hospitales de
países en vías de desarrollo.
La determinación de la VSG mediante capilares con heparina es un método simple, económico y
rápido que puede realizarse en la cabecera del paciente pediátrico a cualquier hora.
Sin embargo, se necesita la punción del paciente sólo para ese propósito, se utiliza un
anticoagulante distinto (heparina) al de la técnica de Wintrobe (EDTA) y aún no se valida.
Hasta donde sabemos, la VSG no ha sido evaluada por microtécnica con capilares sin anticoagulante
a partir de la misma muestra que se emplea tanto para la biometría hemática, como para la técnica
estándar de Wintrobe (ambas con EDTA

PROCEDIMIENTO TECNICO

Materiales
- Tubos de Westergren.
- Soporte para tubos de Westergren.
Tubos de citrato sódico al 3,8 % como anticoagulante, también se puede utilizar EDTA.
No se deben emplear anticoagulantes como: heparina (altera el potencial zeta de los
eritrocitos) ni oxalatos (encogen las células sanguíneas).

Cada tubo deberá contener 0,5 ml de anticoagulante citrato de sodio al

3,8% se extrae sangre venosa, se mezcla mediante movimientos
rotatorios sobre una superficie lisa.

Se vierte mediante una pipeta Pasteur o una jeringa de metal en el tubo

de Westergren, el cual tiene una graduación de 0 a 200 mm de arriba
hacia abajo y presenta ambos extremos abiertos.

La sangre debe llenarse hasta la marca cero, de abajo hacia arriba

evitando burbujas o espacios de aire.
Colocar la pipeta Pasteur en posición vertical sobre una gradilla
especial que llene ambos extremos.
Dejar reposar durante 1 hora y anotar los resultados

El resultado se puede expresar de dos maneras:

- Longitud en mm del recorrido descendente de la columna de eritrocitos en una hora

y en dos horas (lo realizado anteriormente).

- Índice de Katz, con la siguiente fórmula:

Índice de Katz = ( VSG 1º h. + (VSG 2º h. / 2) ) :
Índice de Katz = ( 7mm + ( 10mm / 2 ) ) : 2 = 6
Los valores normales oscilan entre 2 y 16.

Interpretación clínica de los resultados:

En nuestro caso, el resultado nos sale dentro de los valores normales.

La VSG es más alta en la mujer, y aumenta en la vejez y a partir del tercer mes del
embarazo.

La VSG aumenta en alto grado en enfermedades en las que hay hiperproducción de Ig

monoclonales (neoplasias malignas de las células plasmáticas) y, en menor grado, en
enfermedades que cursan con un aumento inespecífico de las Ig (por ejemplo, las
enfermedades autoinmunes) o con un ascenso en las proteínas involucradas en la
inflamación. Este último caso es el más frecuente y es propio de enfermedades infecto-
inflamatorias.
La VSG desciende en las hepatopatías graves que conllevan hipo producción de
fibrinógeno.
Número, tamaño y forma de los hematíes también alteran la VSG. Por ejemplo:

-La VSG aumenta en las anemias (pequeño nº de hematíes en gran volumen de plasma
sedimenta con mayor facilidad).

-La VSG disminuye en las poliglobulias (incrementan las fuerzas de fricción existentes
entre los hematíes).
-La VSG asciende en la macrocitosis (mayor peso y menor área superficial relativa de los
eritrocitos).
-La VSG desciende en la microcitosis (por razones opuestas a la macrocitosis).

-La VSG disminuye en las proliferaciones de formas anómalas de glóbulos rojos (está
dificultada la formación de apilamientos).

Resultados definitivos:

-Valor de la VSG a la 1º hora: 7 mm.

-Valor de la VSG a la 2º hora: 10 mm.

-La carga electrostática negativa de los glóbulos rojos se llama potencial zeta.
-El anticoagulante más apropiado para la determinación de la VSG es el citrato sódico.

Se recomienda practicar la determinación a temperatura ambiente.

-Si la pipeta para VSG está inclinada la determinación no se realizará correctamente.

-La lectura de la VSG se efectúa tras una 1º hora y tras una 2º hora.
-La VSG aumenta en las anemias y en la macrocitosis .
Resultados
Medir los milímetros descendidos de glóbulos rojos mediante la columna de
plasma por encima del paquete globular

Valores de referencia
Hombres: 1 - 10 mm de altura/hora
Mujeres: 3 - 14 mm de altura/hora

7.2 MÉTODO DE WINTROBE

Fundamento
Al igual que el método de Westergren, este método mide la tendencia de los eritrocitos a
sedimentación al colocar sangre anti coagulada en un tubo pequeño. Se lee la columna
de plasma al cabo de una hora de reposo.

Procedimiento
El mismo que para el método de Westergren.
Resultados
Medir los milímetros descendidos de glóbulos rojos mediante la columna de plasma por
encima del paquete globular.

Valores de referencia
Hombres: 0 - 5 mm/hora
Mujeres: 0 - 10 mm/hora
EVALUACION
PROCEDIMIENTO
 Materiales:
- Pipetas de un solo uso para determinar la VSG
- Muestra de sangre
- Pipeta graduada de 2 ml
- Prepipeta
- Tubo al vacío con el tapón negro (contiene citrato sódico
1/9
- Gradilla de sedimentación

 Técnica:
* Dato importante: La muestra debe estar libre de hemólisis. La
determinación se realizará antes de que pasen 2 horas desde
la extracción, hasta un máximo de 6 horas si se conserva la
muestra a 4ºC. Hay que realizarla a temperatura ambiente, ya
que a mayor temperatura asciende la VSG y a menor
temperatura disminuye.

1. Cogemos de la muestra de sangre 2 ml de sangre, utilizando la

pipeta gradual (aunque sería más precisa una aforada) y la
prepipeta.

2. A continuación, con esa sangre llenamos el tubo al vacío con el

tapón negro hasta la marca de enrase.

3. Ahora, procedemos a pinchar el tubo con la pipeta de un solo

uso para la determinación de VSG, y se llena hasta 0 mm.

4. Colocamos la pipeta con el tubo en la gradilla de

sedimentación y dejamos que pase 1 hora.

Como está colocada en tubo vertical, va a estar sometida a

fuerzas gravitatorias y eléctricas que resultan de la interacción del
plasma (líquido) con las células (sólido). Es un proceso lento, pues la fuerza con que es
atraído cada hematíe hacia el fondo del tubo es casi compensada por la fuerza
ascendente creada por el plasma al desplazarse hacia arriba.

Una vez que haya pasado la hora, medimos lo que ha bajado la sangre. (Nuestra muestra
es la segunda).
 Resultado de la 1º hora: Observamos que en la primera hora
ha bajado 5 mm.

Lo dejamos otra hora más para ver lo que ha bajado.

(Nuestra muestra es la segunda).

Resultados de la 2º hora: Observamos que ha bajado 2 mm en la segunda hora.

 Resultados:
Hacemos la medida de la VSG que se realiza con la
siguiente fórmula:

Donde: a = VSG a la 1º
hora.
b = VSG a la 2º
hora.

Valores normales: En hombre: 4 a 14 mm/h.

En mujeres: 6 a 20 mm/h.

*Conclusiones: Conforme al resultado que nos ha salido, 4.25 mm/h, podemos deducir
que la sangre con la que hemos trabajado es de un hombre, ya que entra dentro de sus
valores normales.

Significado clínico: esta prueba permite detectar estados de desequilibrio físico-químico

como consecuencia de alteraciones orgánicas sobre todo de tipo infeccioso e inflamatorio.
Aunque hay que tener en cuenta que hay diversas causas no patológicas que pueden
aumentar la VSG.

LEUCOCOCITOS No2.1.
OBJETIVOS

APLICAR LAS TÉCNICAS PARA RECUENTO DE LEUCOCITOS Y FORMULA

LEUCOCITARIAS
Identificar las características de los leucocitos granulocitos y agranulocitos
Realizar el recuento de glóbulos blancos y formula leucocitarias
Interpretar los resultados.

RECUENTO LEUCOCITARIO

Principio

La sangre con EDTA, con la solución de TURK, permite evidenciar los leucocitos, manteniéndolos
visibles, mientras que los eritrocitos son hemolizados. El recuento del número de leucocitos o
glóbulos blancos se expresa por mm3 (milímetro cúbico).

Introducción

Los leucocitos o glóbulos blancos son las células del sistema inmune. Se producen en la médula ósea
y en la sangre, la linfa, los órganos linfoides (ganglios linfáticos, bazo, amígdalas y adenoides, y
parches de Peyer) y muchos otros tejidos del cuerpo. Los adultos sanos tienen normalmente entre
4,5 mil millones y [Link] células blancas de la sangre por litro de sangre. A medida que aumenta su
número, se denomina leucocitosis, cuando disminuye su número, se llama leucopenia.
Los leucocitos incluyen principalmente dos grupos A granulocitos y Granulocitos células, en función
de su morfología y actividad:

1.- Monocitos, que representan el 5% de los leucocitos. Los monocitos son células grandes del
sistema inmunitario. Su función es eliminar agentes extraños sus membranas. Es decir destruyen los
residuos de gran tamaño.

Linfocitos: que representan el 25% de los leucocitos. Los linfocitos son las células blancas de la
sangre que desempeñan un papel importante en el sistema inmunológico. Por eso es que están
implicados en el reconocimiento específico de antígenos. En términos de estructura y función, hay
dos líneas diferentes: los linfocitos B y los linfocitos T. El papel de los linfocitos B es la producción de
proteínas llamadas anticuerpos, son por lo tanto responsables de la inmunidad humoral. Por su
parte, los linfocitos T también llamados timocitos o células T, son una clase de linfocitos que juegan
un papel importante en la respuesta inmune. “T” representa el timo. Son responsables de la
inmunidad celular: las células (bacterias, células cancerosas) reconocidas como extrañas son
destruidas por un complejo mecanismo.

2.- Granulocitos, Representan el 70% de los leucocitos. Su función es la de fagocitosis, es decir la

destrucción de microbios, por esto es que participan en contra de las bacterias, parásitos y alergias.
Hay tres tipos de granulocitos, conocidos como neutrófilos, basófilos y eosinófilos. Los neutrófilos
representan el 99% de los granulocitos. Sus células tienen un papel crucial en la fagocitosis cuando
se enfrentan a una célula extraña o infección. La fagocitosis se produce justo después de la
estimulación de neutrófilos por un antígeno transportado por la célula diana con la emisión de
seudópodos que rodean a la célula diana, y, finalmente, se incluyen en el cuerpo celular de los
neutrófilos. Los basófilos son los más raros (0,3%) de los granulocitos. En sus células se almacenan
muchas moléculas químicas, en particular, la histamina, la serotonina, y la heparina.
La histamina y heparina se usan para prevenir la coagulación en los vasos sanguíneos. Los
eosinófilos, por su parte, representan el 0,7% de los granulocitos. Sus células tienen un papel
importante para hacer frente a los parásitos en el cuerpo.

En General combaten infecciones mediante los procesos de fagocitosis ver figura No. 3.
Un recuento normal de glóbulos blancos en la sangre es de entre 4.500 y 10.000 células por
microlitro. En la ausencia de cualquier enfermedad, forman sólo alrededor de 1% en volumen de la
sangre total en el cuerpo. Hay cinco tipos diferentes de células blancas de la sangre y cada uno sirve
una función diferente en el cuerpo. Ellos son los neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y los
basófilos

Estos recuentos sirven como indicadores para enfermedades específicas. Por ejemplo, un recuento
elevado de neutrófilos indicaría un NFECCIÓN i, un cáncer o estrés físico mientras que los altos
recuentos de linfocitos indicarían SIDA. Alta de monocitos y conteo de eosinófilos generalmente
infección bacteriana.

PAPEL DE LOS LEUCOCITOS EN EL ORGANISMO DE FORMA GENERAL

Producción de anticuerpos.
La producción de proteína.
Abordar los parásitos del cuerpo y destruirlos.
Aumentar la permeabilidad de los capilares sanguíneos.
Evitar la coagulación en los vasos sanguíneos Activar la respuesta inflamatoria.
Desencadenar una reacción alérgica. Destrucción de las células infectadas o muertas

Algunas alteraciones cuando el recuento de leucocitos esta sobre el límite superior

Infecciones
Inflamación
Trauma
Daño tisular
Virus
Alergias
Enfermedades de medula ósea como un transtorno mieloproliferativo
Leucemias agudas o crónicas

Pero existen otras ocasiones cuando el número de glóbulos blancos se consideran normales en
casos como.

Embarazo en el último mes

Extirpación del bazo podría otorgar persistente leve o moderado
En Recién Nacidos normales y bebes neonatos.
Pacientes fumadores
Cuando el recuento de leucocitos tiende a ser menor en la mañana y más alta en la tarde y están
relacionados con la edad.

Si los recuentos de células blancas de la sangre siguen aumentando o caer a niveles anormales
significa que la afección está empeorando.
Los científicos aún no están seguros de sí, además de ser un buen indicador o un problema, alta de
glóbulos blancos también podría provocar una enfermedad grave o si se eleva de forma natural
después de una enfermedad.

MATERIALES Y EQUIPOS A UTILIZAR.

Equipos
- Microscopio.
(Cámara de Neubauer).
La altura entre el cubreobjetos y la lámina portaobjetos es de 0,1 mm. Cada cuadrícula mide 3 mm
de lado y se divide en 9 cuadrados grandes.

Cada uno de los cuales mide 1 mm2 de superficie, que se subdivide a su vez en 16 cuadrados
medianos. El cuadrado grande central se divide en 25 cuadrados pequeños y cada uno de ellos en
16 cuadraditos. Cada cuadrado pequeño mide 0,2 mm de lado (0,04 mm2 de superficie), y cada
cuadradito mide 0,05 mm de lado (0,0025 mm2 de superficie).

Pipeta de glóbulos blancos (De Thoma) o pipeta automática (de 0 a 100 mL).

Presenta cerca del extremo superior una marca de 11, inmediatamente continúa una dilatación
(bulbo) que contiene una perla que funciona como mezcladora, luego sigue el extremo más largo
de la pipeta (tallo) que está dividida en 10 partes, con 2 marcas: 1 (parte final del bulbo) y 0,5 (a la
mitad del tallo). Se le acopla a su extremo superior 1 tubo de goma y una boquilla para aspirar.

Reactivo: Diluyente de glóbulos blancos: Solución de Turk al 1%.

Contador manual
Papel filtro.

Procedimiento
I.-
1.-Una vez obtenida la sangre con anticoagulante o sangre capilar del dedo, se procede a aspirar la
sangre con la pipeta de glóbulos blancos hasta la marca de 0,5 y a limpiar la punta con papel
absorbente.

2.- Introducir la pipeta en el tubo que contenga solución de Turk y absorber

hasta la marca de 11 (no debe haber burbujas).

3.-Tapar ambos extremos y proceder a mezclar manualmente o en un rotador automático por 2 ó 3

minutos.

4.-Monte la laminilla de vidrio en la cámara para recuento que debe estar limpia y seca.

5.-Agitar la pipeta y descartar las cuatro primeras gotas para luego colocar una gota pequeña de
esta solución en la cámara.
6.-Deje reposar por espacio de 3 minutos para que las células se sedimenten.
7.-Enfocar con objetivo de 10x y contar en 4 cuadrados grandes angulares.
Cuando se usa la pipeta automática, se toma 20 mL (0,02 mL) desangre total con anticoagulante o
sangre capilar con anticoagulante y se diluye en un tubo que contenga 380 mL de solución de Turk
(aquí contenga una dilución 1:20).

8.-La lectura se realiza en los campos 1, 3, 7 y 9 como está indicado en

anexo No.

Además de los leucocitos contados dentro de cada uno de los

cuadrantes, se deben contar todos los leucocitos que se encuentren
adheridos en la línea horizontal superior y vertical exterior, o de lo
contrario, todos los leucocitos, adheridos a la línea horizontal inferior y
vertical interior.

II.-Resultados

Nº de leucocitos x mm3 = leucocitos contados en 4 campos

altura x dilución x área

Reemplazando = leucocitos contados en 4 campos

1/10 x 1/20 x 4=

leucocitos contados en 4 campos

4/200

= X/1 = Nº leucocitos contados x 504x200

III. Valores de referencia

5000 - 10 000 leucocitos / mm3

IV. Corrección de valores para restar eritrocitos nucleados

Los normoblastos no se destruyen (lisis) en el líquido de dilución, por lo tanto pueden observarse al
realizar el recuento leucocitario y confundirse con los leucocitos, de tal manera que se debe emplear
la siguiente fórmula:

V. Cálculo:
La concentración del número de normoblastos (por litro) es: Número de normoblatos contados x
concentración o número de leucocitos 100 + Nº de normoblastos contados.

Ejemplo:

Si se cuentan 50 normoblastos y la concentración del número de leucocitos es

16 x 109/l, la concentración del número de normoblastos será:

50 x 16 = 5,3 x 109/l
 100 + 50

Lla concentración de leucocitos corregida será: 16 - 5,3 = 10,7 x 109/l En unidades tradicionales las
concentraciones de normoblastos y leucocitos se expresan por milímetro cúbico. En tales unidades
el cálculo correspondiente al ejemplo que se ha dado sería

50 x 16 000 = 5300 / mm3

100 + 50
Recuento corregido de glóbulos blancos o leucocitos = 16 000 - 5300 = 10 700 mm3
La línea que pase al nivel del tope de la columna de eritrocitos indicará la fracción de volumen de
éstos.

Valores de referencia:

Hombres: 40% - 50%

Mujeres: 38% - 44%
Niños: (5 años) 38% - 44%
Lactantes: (3 meses) 37% - 42%
Recién nacidos : 50% - 58%

 A disposición celular es:

 Parte superior, una columna de plasma.
 En la interface están los leucocitos y plaquetas
 Parte inferior está la columna de eritrocitos

FÓRMULA LEUCOCITARIA

La fórmula leucocitaria tiene por objetivo determinar los porcentajes de las distintas clases de
leucocitos normales y anormales en la sangre. A partir de los porcentajes puede incluso calcularse
el número real de cada clase de leucocitos por mm3 de sangre (valor absoluto), conociéndose el
total de leucocitos.

Por ejemplo:

Si se tiene 60% de neutrófilos segmentados y el recuento total de leucocitos total es de 20 000,

entonces la cifra absoluta de neutrófilos segmentados sería:
60/100 x 20 000 = 12 000 (valor absoluto)

Valores de referencia absolutos de neutrófilos segmentados = 3000 – 5000 Conclusión: Los valores
relativos sólo nos sirven cuando los valores totales de leucocitos se encuentran dentro del valor
normal. En caso contrario (leucocitosis o leucopenia) se debe emplear la fórmula para obtener el
valor real, y así determinar que elemento celular se encuentra fuera del rango normal, sea elevado
o disminuido.

Procedimiento
Apartir del frotis sanguíneo.
Se examina la lámina a pequeño aumento para comprobar si los elementos celulares están bien
distribuidos.
Si es favorable se examina con el objetivo de inmersión. La parte ideal para visualizar células para la
fórmula leucocitaria es en la parte final del cuerpo y comienzos de la cola, recorriendo la lámina de
izquierda a derecha o de arriba hacia abajo hasta contar 100 leucocitos incluidos los agranulocitos
y granulocitos. Aquí no se incluyen los elementos inmaduros de sangre roja.

A medida que se va contando, se va anotando el número de cada una de las clases de glóbulos
blancos observados.

Se determina luego los porcentajes de cada uno de ellos para luego comparar con los porcentajes
normales.

Si se tiene en el recuento de leucocitos valores por encima de 10 000 y por debajo de 5000 se debe
repetir el recuento.

Valores de referencia

LEUCOCITOS valores relativos valores absolutos %

Neutrófilos segmentados 55-65 3000-5000

Neutrófilos abastonados 3-51 50-400
Eosinófilos 0,5-4,0 20-350
Basófilos 0-0,5 10-60
Monocitos. 4-8 100-500
Linfocitos 25-35 1500-4000

Desviación a la derecha y ala izquierda

Los glóbulos blancos que normalmente aparecen en la sangre son de varios tipos: neutrófilos
(leucocitos polimorfo nucleares; PMNs), células en banda (neutrófilos ligeramente inmaduros),
linfocitos tipo T (células T), linfocitos tipo B (células B), monocitos, eosinófilos y basófilos.

Se habla de "desviación a la derecha" cuando el porcentaje de linfocitos y monocitos se haya

acrecentado en relación a los granulocitos, es decir, a con respecto a los neutrófilos, eosinófilos y
basófilos.

Estos términos se originaron cuando los reportes de laboratorio se hacían a mano, y la serie de los
granulocitos (Neutrófilos, eosinófilos y basófilos) se escribía en el lado izquierdo del reporte, y los
agranulocitos (linfocitos y monocitos) se escribían en la parte derecha del reporte.

Corresponde a la hipersegmentación nuclear. La mayoría de PMN presenta más de 5 lobulaciones.

Ocurre en:

Anemia perniciosa.
Hipersegmentación constitucional hereditaria.
Reacciones mieloides de la sepsis.
Afecciones hepáticas.
Leucemia mieloide.
En la agonía.
Existe disminución (neutropenia) en:
Aplasia medular
Mieloptisis de la médula ósea
Agentes citotoxicos.
Granulopoyesis inefectiva (anemias megaloblásticas).

Desviación a la izquierda

Cualquier infección o estrés repentino ocasiona un aumento en la producción de leucocitos, que

generalmente lleva a un incremento en el número de células y en el porcentaje de células inmaduras
en la sangre (principalmente de células en banda). Este cambio se conoce como "desviación a la
izquierda".

En otras palabra aumento de las formas inmaduras (en banda o cayado, y juveniles)
Dentro de los neutrófilos. Constituye un importante valor diagnóstico y pronóstico. Puede
observarse en: infecciones e intoxicaciones.

MORFOLOGIA Y ALTERACIONES DE LOS GRANULOCITOS.

Eosinófilos (Fig. 8)

Son parecidos a los neutrófilos, pero son algo mayores. Generalmente el núcleo es bilobulado y lo
que más caracteriza a esta célula es la presencia de gránulos color naranja-marrón vistos
claramente, muchas veces estos gránulos hacen que se pierda la membrana celular por el
rompimiento de ésta, ya que estas células son muy frágiles.

Patología: Existe aumento en:

• Infecciones parasitarias.
• Reacciones alérgicas.
• Enfermedades cutáneas.
• Neoplasias.

Basófilos (Fig. 9)

La característica más importante de esta célula es la cantidad de gránulos de olor azul negruzco que
se encuentra ocupando toda la célula (esto cuando la célula es madura) y parte de la célula cuando
ésta es inmadura. Presenta un núcleo que muchas veces no logra observarse por la cantidad de
gránulos que contienen histamina y heparina.

Patología: Existe aumento en:

Leucemia por basófilos.

AGRANULOCITOS (No poseen gránulos. Aquí tenemos a los linfocitos y monocitos)

 Linfocitos. Pueden ser:
- Linfocitos grandes.
- Linfocitos pequeños.
Linfocitos grandes (Fig. 11a)
Miden de 15m a 25m, presentan generalmente un núcleo ligeramente oval discretamente
indentado, la cromatina es densa pero no tanto como en el linfocito pequeño (esto lo puede
confundir con el monocito). Citoplasma abundante, azul pálido y puede contener gránulos azurófilos
inespecíficos.

Linfocitos atípicos (Fig. 12)

Llamados también virus linfocitos, células linfomonocitoides, células activadas

de Turk, células de Turk, virocitos, inmunoblastos, etc. Miden de 15m a 30m, núcleo irregular,
indentado, excéntrico y puede observarse nucléolos. El citoplasma es amplio, color azul tenue, y
puede presentar gránulos azurófilos y vacuolas. Estas células pueden observarse en mononucleosis
infecciosa, hepatitis viral, herpes zoster, enfermedades autoinmunes y normalmente pueden
hallarse hasta en 5%.

• Linfocitos con mitosis o binucleados (Fig. 13)

Pueden encontrarse en enfermedades virales.
• Linfocitos vacuolados (Fig. 14)
En caso de linfocitos que reaccionan por efecto de la radiación ultravioleta o
Respuesta a tratamientos de quimioterapia.
Linfocitos pequeños (Fig. 11b)

Miden de 9m a 15m, presentan un núcleo que ocupa casi toda la célula, excéntrico, cromatina
fuertemente densa. El citoplasma es escaso, basófilo y puede contener gránulos azurófilos
inespecíficos.

Monocitos (Fig. 10)

Son los leucocitos de mayor tamaño en la sangre (14m a 20m). Su núcleo es generalmente
excéntrico, aunque puede ser central. Su cromatina nuclear es laxa, distribuida en forma regular, la
forma del núcleo generalmente es de una madeja de lana o arriñonada, aunque puede tener forma
de un bastón
El citoplasma es de color gris y puede presentar gránulos inespecíficos (azurófilos) que carecen de
significado clínico.

Están elevados en:

• Tuberculosis.
• Endocarditis bacteriana.
• Enfermedades virales como sarampión, rubéola, etc.
• Colagenosis, neoplasias, etc.
CRITERIOS PARA EL DESARROLLO DE UN LEUCOGRAMA

Se considera leucocitosis cuando la cifra de glóbulos blancos excede

de 10 000.
En relación al Recuento de glóbulos blancos debe considerarse leucopenia cuando la cifra de
glóbulos blancos es inferior a 5 000.

Leucocitosis: es el aumento en el número de células de glóbulos blancos de la sangre (leucocitos).

Se dice que hay leucocitosis cuando la cifra de glóbulos blancos es superior a 11 000 por mm³.

Observaciones: en casos de pacientes atléticos pueden presentar leucocitosis fisiológica de

consideración, de allí que el recuento debe hacerse en condiciones basales.
En los granulocitos debe informarse el número de lobulaciones del núcleo. A mayor edad de la
célula mayor el número de lóbulos y lo contrario.

ANEXO I. Alteraciones leucocitarias de los neutrófilos

• Granulaciones tóxicas
Son gránulos basófilos más oscuros que lo normal y se observan durante
el transcurso de infecciones severas y estadios tóxicos.
Guía de estudio UNIDAD III LEUCOCITOS.

Objetivos.

1.- Profundizar los conocimientos adquiridos

2.- Clasificar los tipos de leucocitos granulocitos y granulocitos.
3.- Explicar el mecanismo de defensa de los leucocitos.
4.- Indicar los análisis del hemograma de leucocitos
5.- Hacer diferencias de los leucocitos normales y alteraciones.
6.- Interpretar resultados.

Orientaciones

Para esta guía es necesario formar grupos de dos personas para ayudarse con el autoestudio. Para
aquellos temas de mayor complejidad.
Esta guía deberá venir resuelta el día de la práctica para cualquier aclaración al respecto

Preguntas.
1.- Defina Leucopoyesis
2.- Cuales son los mecanismos de regulación de leucopoyesis
3.- Funciones de los leucocitos
4.- Defina los conceptos
Quimio taxis
Migración
Diapedes
Fagocitosis
Circulación.
5.-Nombre los cambios que sufren los leucocitos por separado.
6.- Explique la diferencia de desviación derecha e izquierda.
7.- Nombre al menos 4 alteraciones de los leucocitos.
8.- En cuadro explique lo siguiente
Morfología de cada leucocito
Función y valores normales.
9.- Que es un linfocito atípico
10.- Cite los criterios del formula leucocitaria

Buena suerte.
SECCIÓN ANEXO 2. ALTERACIONES ERITROCITARIAS
Aquí se encuentran incluidas las células progenitoras de la serie roja que normalmente se encuentra
en la médula ósea, pero cuando éstas pasan a sangre periférica antes de su maduración en
normocitos o hematíes pueden indicar alguna patología como leucemias, anemias u otras
alteraciones celulares.

Aquí tenemos:

PRONORMOBLASTO (Fig. 1a)

Es una célula primitiva (inmadura) de aproximadamente 25m a 35m de diámetro, citoplasma

basófilo, presencia de 1 a 2 nucleolos, existe una condensación ligera de la cromatina, citoplasma
ligeramente excéntrico.
Esta célula se divide en:

NORMOBLASTO BASÓFILO (Fig. 1b)

Es ligeramente menor que el pronormoblasto, 12m a 18m, citoplasma gualmente basófilo, pero, se
diferencia del anterior en que ya no presenta nucléolos y su cromatina nuclear es más condensada
ya que es un elemento menos inmaduro. El siguiente paso en la maduración es:

NORMOBLASTO POLICROMATÓFILO (Fig. 1c)

Es una célula que mide de 12m a 16m, aunque usualmente puede ser mayor
que el normoblasto basófilo, presenta núcleo excéntrico y lo que más caracteriza a esta célula es
que ya presenta pequeñas cantidades de hemoglobina citoplasmática que se traduce en un color
violeta (azul y rojo). Su cromatina es más condensada que la anterior.

NORMOBLASTO ORTOCROMÁTICO (Fig. 1d)

Mide de 10m a 14m, esta célula es bien característica y no debe confundirse con el linfocito ya que
prácticamente es un hematíe nucleado, como también se le conoce. Presenta su citoplasma rosado,
núcleo totalmente excéntrico.
como una bola maciza. Este normoblasto ya no se divide, sino que pierde su núcleo por un
mecanismo de expulsión y se convierten en:

RETICULOCITOS (Fig. 2)

Estos todavía presentan en su citoplasma restos de ARN y protoporfirina resultados de la conversión

del normoblasto ortocromático a reticulocito y solo se pueden observar con coloraciones especiales.
En sangre periférica se les puede observar como elementos macrocíticos y policromatófilos.

NORMOCITOS O HEMATÍES (Fig. 3)

Discos cuya biconcavidad hace que aparezcan con cierta palidez central al no
captar el colorante en esa zona. Miden aproximadamente de 7,2m a 7,4m y puede llegar hasta ocho.
Presenta un pigmento respiratorio que le da el color rosado característico que es la hemoglobina
que se encarga del transporte de oxígeno. Más adelante se explicarán las alteraciones más
frecuentes de estos Elementos celulares.

Se dividen en:
♦ Alteraciones en tamaño.
♦ Alteraciones en su forma.
♦ Alteraciones de color.
♦ Inclusiones anormales.
♦ Alteraciones en el tamaño
Llamadas también anisocitosis. Pueden ser de dos tipos:

Macrocitos (Fig. 4): Hematíes que presentan un tamaño superior al normal (más de 9m) y su
expresión máxima es el megalocito. Suelen aparecer en la anemia megaloblástica debida a déficit
de vitamina B12 o ácido fólico.

Se suele observar cuando hay un aumento de la actividad eritropoyética, como un mecanismo de

compensación a la pérdida de los hematíes, sea por anemia severa o hemorragias. En la sangre
periférica se pueden observar como hematíes grandes policromatófilos o reticulocitos.

Microcitos (Fig. 5): Hematíes que presentan un tamaño inferior al normal (menos de 6m) y se
encuentran en pacientes con anemia ferropénica y talasemias.

♦ Alteraciones en la forma

Llamadas también poiquilocitosis. Entre éstos tenemos:

Esferocitos (Fig. 6): Son hematíes esféricos como unas pelotas, no son bicóncavos, presentan un
diámetro inferior al normal pero más grueso.

Su vida media es de 14 días, producen taponamiento de los vasos sanguíneos. Se encuentran en la

enfermedad esferocitosis hereditaria o enfermedad de Mihkowski-Chauffard (defecto congénito de
la membrana eritrocitaria). También pueden ser adquiridos por factores extraeritrocitarios.
Codocitos (Fig. 7): Llamados también dianocitos. En la región central presentan un área con mayor
contenido hemoglobínico (zona densa). La interfase entre la membrana celular y el centro es
transparente. Se encuentran en hemoglobinopatías, talacemias, anemia ferropénica y en algunas
hepatopatías crónicas con aumento de colesterol y fosfolípidos.

Drepanocitos (Fig. 8): Son hematíes cuya membrana hemática se altera y se hace falciforme (forma
de hoz o media luna). Su apariencia es propia del estado homocigoto de la hemoglobina S. Su
enfermedad se conoce como drepanocitosis hereditaria.

Eliptocito (Fig. 9): Los hematíes son alargados (ovalocitos). Se encuentran

en la enfermedad llamada ovalocitosis hereditaria. Su presencia se debe a una alteración congénita
de la membrana del hematíe, aunque puede ser adquirida en caso de una anemia megaloblástica,
ferropénica arregenerativa.

Crenocitos (Fig. 10): Son aquellos que presentan membrana ondulante e irregular. Se encuentran
en algunas anemias hemolíticas. Este fenómeno puede ser inducido in vitro exponiendo los
hematíes a una solución hipertónica. Cuando la característica es muy notable puede emplearse el
término equinocito.

Equinocitos (Fig. 11): También llamados acantocitos. Las prominencias de la membrana eritrocitaria
son más aguzadas (alargadas) y distribuidas irregularmente. Se encuentran en la acantocitosis que
se caracterizan por la ausencia de lipoproteínas plasmáticas.

Dacriocitos (Fig. 12): Son hematíes en forma de lágrima. Se encuentran en la anemia ferropénica,
anemia megaloblástica y talasemia.

Esquistocitos (Fig. 13): Son fragmentos hemáticos. Se encuentran en anemias hemolíticas,

microangiopatías, quemaduras y con más evidencias en individuos esplenectomizados.

Estomatocitos (Fig. 14): Son hematíes que en lugar de una depleción central clara tienen una banda
pálida central que les da un aspecto de boca. Se hereda como carácter autosómico dominante. Esta
enfermedad es causada por anormalidad hereditaria de la membrana eritrocitaria.

Selenocitos (Fig. 15): Son eritrocitos alterados que adoptan forma semilunar. Es un artificio de
técnica que aparece especialmente en frotices sanguíneos de pacientes anémicos.

Excentrocitos: Son hematíes con distribución irregular de la hemoglobina.

Su tamaño es inferior al normal y se caracteriza por poseer contornos parcialmente arrugados, pero
además se observa una distribución irregular de la hemoglobina que aparece desplegada de la parte
interna hacia uno de los extremos.

Qnizocito: Son hematíes que presentan un estoma o boca en la región central completamente
coloreada y lo demás incoloro. Morfológicamente es todo lo contrario a las características del
estomatocito. Se encuentran en algunas anemias como las ferropénicas.

♦ Alteraciones de color
Aquí observamos las diferentes tonalidades de color de los hematíes dependiendo del contenido
hemoglobínico. Tenemos:

Hipocromía (Fig. 16): Son hematíes con disminución del contenido de la hemoglobina y
dependiendo de la cantidad de este pigmento es que observamos
A los hematíes con diferentes caracteres de color. Aquí están incluidos los anulocitos, que son
hematíes en forma de anillo en que solo la membrana eritrocitaria está coloreada y que se traduce
en una hipocromía de grado severo (+++).

Hipercromía (Fig. 17): Son hematíes ávidos de hemoglobina. Pueden encontrarse en caso de
enfermedades como la policitemia vera o o la policitemia fisiológica y esferocitosis hereditaria.

Policromatofilia (Fig. 18): Presencia de hematíes con tonalidad (azul y rojo) morada. Se le relaciona
con inmadurez celular, células nucleadas, presencia de reticulocitos, macrocitos, etc. Esto debido a
su elevada cantidad de ARN.

Anisocromía: Diferentes tonalidades de color como hematíes hipocrómicos, hipercrómicos,

normocrómicos y policromatófilos. Se encuentran en ciertas anemias refractarias.

♦ Inclusiones anormales
Punteado basófilo (Fig. 19): Son gránulos basófilos presentes en el citoplasma de los hematíes.
Puede tratarse de un reticulocito por su elevado contenido de ARN. Se encuentra en una
intoxicación por plomo llamada saturnismo.

Cuerpos de Heinz (Fig. 20): Son formaciones redondeadas de hasta 3m de diámetro localizadas
habitualmente en la periferia de la célula. Se observan con colorantes para reticulocitos. Estos
cuerpos son abundantes en sujetos esplenectomizados.

Anillos de Cabot (Fig. 21): Se cree que sean restos de membrana nuclear eritroblástica o restos
después de una mitosis anormal. Se observan en forma de anillo u ocho invertido. Pueden ser
precipitados de ARN o proteína carente de importancia diagnóstica.

Cuerpos de Howel-Jolly (Fig. 22): Son restos de cromatina nuclear, resultados de la pérdida del
núcleo por parte del normoblasto ortocromático hasta la conversión del hematíe. Se les considera
signos de regeneración celular.
Se observan en pacientes esplenectomizados.

Siderocitos (Fig. 23): Son hematíes con contenido de hierro libre no hemoglobínico de color verde
azulado.

Gránulos de Shuffner: Son gránulos que presentan algunos hematíes en caso de parasitismo por
plasmodium vivax.

Gránulos de Maurer: Son gránulos de color violeta oscuro que se encuentran

en pacientes con parasitismo por plasmodium falciparum.

Granulacion azurófila: Son pequeñas granulaciones eritrocitarias color violeta púrpura y

corresponden a restos de normoblastos ortocromáticos producto de la cariorrexis y del paso de un
elemento inmaduro a otro maduro. Se observa tanto en síndromes diseritropoyéticos congénitos o
adquiridos.

Elementos progenitores de la serie roja Fig. 1. Fig. 2. Fig. 3.

1 Pronormoblasto (a) Reticulocitos Hematíes normales
2 Normoblasto basófilo (b)
2 Normoblasto policromatófilo (c)
6 Normoblasto ortocromáticos (d)
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