Biología Molecular

NORMAS DE BIOSEGURIDAD, RECONOCIMIENTO DE REACTIVOS, EQUIPOS Y

MICROPIPETAS EN EL LABORATORIO DE BIOLOGIA MOLECULAR

Sulbey Karina Fernández Figueroa 1611378,

1
Estudiantes de Biología Molecular, Programa Ingeniería Biotecnológica, facultad de ciencias

agrarias y del ambiente, Universidad Francisco de Paula Santander.2019, Cúcuta, Colombia.

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RESUMEN

El laboratorio de Biología Molecular es el espacio físico donde se ejecutan actividades propias

asociadas al tipo de investigación que se realice. Para que estas actividades se lleven a cabo sin

ningún contratiempo, se deben tener en cuenta las reglas mínimas para garantizar la integridad

física del investigador, alejándose de cualquier situación y riesgos que sean foco de eventos

perjudiciales. Además es necesario conocer que a la hora de desarrollar trabajos dentro del

laboratorio de biología molecular, se hace necesario el uso de reactivos, los cuales presentan

diferentes propiedades que pueden generan afectaciones a la salud humana y equipos, los cuales

pueden presentar fallas en su funcionamiento; conocer cada reactivo y equipo permite el desarrollo

tranquilo y normal del desarrollo del trabajo dentro del laboratorio. Dentro de los equipos de mayor

importancia empleados dentro del laboratorio, encontramos las micropipetas, las cuales resultan

de gran utilidad dentro del laboratorio, ya que manejan medidas volumétricas mínimas que son las

requeridas en cada proceso a desarrollar dentro de él mismo.

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PARTE A. NORMAS DE BIOSEGURIDAD

INTRODUCCIÓN

La bioseguridad es un conjunto de medidas probadamente eficaces para evitar la adquisición

accidental de infecciones con patógenos contenidos en las muestras, así como los riesgos

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relacionados con la exposición a agentes químicos, físicos o mecánicos a los que está expuesto el

personal en los laboratorios (Barrientos, 2005).

Una de las preocupaciones constantes de las personas que trabajan en áreas de laboratorio es la

protección personal o lo que se conoce como bioseguridad. La OMS ha reglamentado el uso de los

laboratorios. Su diseño y seguridades tanto para el personal, como para la maquinaria y los

reactivos. Además, cada laboratorio. según su complejidad y tipo de trabajo, debe adoptar normas

más o menos estrictas, según sea el caso (OMS, 2005). El laboratorio de biología molecular, en

muchas situaciones, funciona como cualquier otro laboratorio, pero, se convierte en un laboratorio

especial debido al tipo de muestras que se manipulan y los procedimientos que se aplican. El nivel

de bioseguridad asignado a un trabajo dependerá de la evaluación del riesgo que represente la

ejecución de dicho trabajo y estos abarcan desde la utilización de agentes patógenos hasta el diseño

y construcción de las instalaciones. Además de velar por la seguridad del individuo, atienden a la

precaución y cuidado de los diferentes materiales que se utilicen dentro del área de trabajo.

(Sandoval, 2013).

Las normas de bioseguridad se las puede dividir en tres tipos:

1) Riesgos que entrañan los reactivos: Muchos reactivos utili1izados en biología molecular son

potencialmente tóxicos, genotóxicos o mutagénicos, por lo que su manipulación debe ser idónea

evitando el contacto directo con la piel y mucosas. El uso de pinzas, guantes, etc.… es

indispensable. La misma recomendación debe considerarse con los reactivos que producen gases

o que sean volátiles. Se debe tomar en cuenta que la rotulación de los reactivos, su taponamiento

y su manipulación tienen que ser cuidadosas. En relación a los agentes físicos que pueden producir

efectos adversos, debe regularse su uso en relación a los requerimientos, leyes o normas nacionales

e internacionales, esto es especialmente válido para el uso de sustancias que produzcan algún tipo

de radiación (OMS, 2005).

2) Riesgos que entrañan las muestras: Las muestras que se usan en biología molecular deben

ser bien manipuladas. Básicamente, al trabajar ron cultivos de células deben guardarse las normas

de asepsia y esterilización comunes. Los frascos de cultivo, pipetas y cualquier otro tipo de

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materiales que estarán en contacto directo con la muestra, deben ser perfectamente lavados y

esterilizados. Actualmente los frascos de cultivo para células son descartables y de plástico no

tóxico; en caso de uso de material de vidrio, el lavado con jabón desionizado y luego. la corrección

del pH, dan buenos resultados. Es ideal el trabajo con campanas de bioseguridad tipo 11 (flujo

laminar), en las que se asegura el trabajo estéril con la muestra y los medios de cultivo. La

contaminación es tal vez el mayor prob1ema del trabajo con cultivos celulares y, pese a todas las

medidas de asepsia, se recomienda el uso de medios de cultivo con antibiótico 5 y aún

antimicóticos (OMS, 2005).

3) Riesgos para el personal: Una buena conducta con respecto al personal que labora dentro del

laboratorio, es llevar una ficha médica detallada en la que se registre el tiempo de trabajo, el tipo

de trabajo. los reactivos y muestras que maneja cada persona, deben darse a este personal las

facilidades y comodidades indispensables; el trabajo debe ser una actividad satisfactoria, social,

psíquica y biológica. Es necesario destinar un lugar para cambio y almacenamiento de ropas y

utensilios personales y sitios para reuniones, descanso y alimentación. Las muestras que llegan al

laboratorio deben ser manipuladas con guantes. Todas las medidas de bioseguridad para el personal

están encaminadas a evitar accidentes, exposiciones a radiaciones, infecciones, intoxicaciones,

quemaduras o envenenamientos (OMS, 200 5).

El objetivo de conocer las normas de bioseguridad es inculcar una mentalidad preventiva que

minimice la probabilidad de accidentes en el laboratorio de biología molecular, y también

disminuir riesgos derivados de la generación de residuos peligrosos.

METODOLOGÍA

Se realizo una breve sustentación de las normas de bioseguridad que se deben tener el laboratorio

de biología molecular, en sentido a las recomendaciones e indicaciones que se deben tener para la

prevención de accidentes, al usar los equipos, reactivos y residuos biológicos, por medio de

sustentaciones llevadas a cabo por la docente y por cada uno de los grupos que forman parte del

laboratorio de biología molecular.

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RESULTADOS Y DISCUSIONES

Se realizo la exposición de los cuidados y barreras de protección que se debe tener al usar y

manipular los diferentes reactivos (Figura 1) dentro del laboratorio de biología molecular, ya que

estos presentan diferentes propiedades y pueden representar afectaciones considerables a la salud

humana.

Figura 1. Exposición cuidados y barreras de protección de los reactivos usados en el laboratorio

de biología molecular.

Durante el desarrollo del trabajo se logró evidenciar, la falta de cumplimento de las normas de

bioseguridad dentro del laboratorio de biología molecular, ya que no se acataban correctamente

indicaciones como, utilizar prendas de vestir adecuadas, las personas con cabello largo deben

recogerlo, mantener un comportamiento adecuado dentro del laboratorio contradiciendo las

exposiciones que se realizaban. Seguir las normas de bioseguridad es importante, ya que en ella

está la vida de nosotros y aun más de las personas, es por eso que debemos utilizar nuestra

bioseguridad a cada momento (Ramos, 2012). Así mismo, el cumplimiento de las normas de

bioseguridad permite un ambiente de trabajo ordenado, seguro y que conduzca simultáneamente a

mejorar la calidad, reducir los sobrecostos y alcanzar los óptimos niveles de funcionalidad

confiable en estas áreas (Castro, 2007).

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 Biología Molecular
PARTE B. REACTIVOS

INTRODUCCIÓN

METODOLOGÍA

Se realizo un breve análisis de los diferentes reactivos usados para llevar a cabo diferentes

procedimientos dentro del laboratorio de biología molecular, teniendo en cuenta su uso, lo que

puede provocar y recomendaciones en caso de emergencia.

RESULTADOS

Se analizaron los diferentes reactivos usados dentro del laboratorio de biología molecular (Tabla

1), teniendo en cuenta, el uso, lo que causa la exposición a estos y las recomendaciones que se

debe tener, conociendo que estos presentan diferentes propiedades y pueden provocar diferentes

afectaciones a la salud si se realiza una utilización inadecuada.

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PARTE C. EQUIPOS

INTRODUCCIÓN

El laboratorio de biología molecular requiere la manipulación de equipos muy precisos, por lo

tanto, conocer su correcta manipulación garantiza la exactitud del resultado final. Dentro del

laboratorio de biología molecular podemos encontrar dos tipos de equipamiento: el especifico y el

genérico. El especifico es aquel que cuenta con la infraestructura necesaria para llevar a cabo tareas

relacionadas solo al contenido de biología molecular, como: PCR, Electroforesis, etc... El genérico

es aquel que podemos encontrar en todo tipo de laboratorio tales como: Cabina de flujo laminar,

Microscopio, Autoclave, etc… (Laso, 2016).

Es importante, además, seguir algunas normas de bioseguridad respecto a los equipos tales como,

no utilizar ninguna herramienta o máquina sin conocer su uso, funcionamiento y normas de

seguridad específicas, los equipos eléctricos se conectarán siempre con tomas de tierra debe

vigilarse la cercanía de los cables a fuentes de calor y el posible contacto de los equipos con agua,

las lámparas ultravioleta pueden causar lesiones oculares y en ocasiones, quemaduras en la piel

por lo tanto se debe evitar mirar directamente a la lámpara o en todo caso utilizar gafas especiales,

en caso de detectar alguna anomalía durante el funcionamiento de cualquier equipo o aparato, se

avisará al responsable del laboratorio o al profesor encargado (Fernández, 2016).

METODOLOGÍA

Se realizó un recuento de equipos que serán utilizados para las próximas prácticas o se encuentran

dentro del laboratorio de biología molecular

RESULTADOS

Se pudo reconocer cada equipo en el laboratorio de biología molecular. Estos equipos fueron:

Cámara de Electroforesis Horizontal, Marca BIO RAD y Cámara de Electroforesis Vertical,

Marca CLEAVER.

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Es un método básico en el campo de Biología Molecular para el análisis (separación, purificación,

preparación) de los ácidos nucleicos y proteínas. Así como el microscopio permite visualizar
b.
microorganismos y estructuras similares, la electroforesis nos ayuda a observar los ácidos

nucleicos y proteínas. El principio de la electroforesis consiste en la migración de las moléculas a

través de un gel u otro tipo de matriz de naturaleza porosa, en el cual, por acción de un campo

eléctrico, serán separadas de acuerdo a su tamaño o peso molecular. En la electroforesis de tipo

vertical, se analizan tanto moléculas de ADN como proteínas, mientas que la electroforesis

horizontal generalmente se traba con ADN o ARN (VelaQuin, 2008).

a.

Figura 2. Cámara de Electroforesis. a. Cámara de Electroforesis Horizontal. b. Cámara de

Fuente de Poder, Marca BIO RAD

La fuente de alimentación o de poder se recomienda para los usos básicos tales como electroforesis

vertical horizontal y mini sumergida del gel, mantiene un voltaje de 110 a 500 voltios.

Figura 3. Fuente de Poder.

Vórtex, Marca BECHMARK

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Pequeño agitador vórtex ideales para la mezcla de sustancias contenidas en tubos de ensayo o tubos

tipo Eppendorf gracias a su movimiento vibratorio (Labor, 2008). En el laboratorio de biología

molecular se puede usar a la hora de realizar protocolos de extracción de ADN para resuspender

las células.

Figura 4. Vórtex.

Baño Seco, Marca BECHMARK

Los baños secos digitales están diseñados para mantener las muestras a una temperatura constante

llegando hasta los 150°C. Ofrecen un control digital tanto de la temperatura, como así también del

tiempo, eliminando la necesidad de un termómetro o temporizador externo (Equinlab, 2009).

Figura 5. Baño Seco.

Fuente de Poder, Marca CLEAVER

Es una fuente de alimentación versátil multifunción adecuada para una amplia gama de

aplicaciones de electroforesis. Manteniendo un voltaje de 120 a 2500 voltios (Lab Brands, 2016).
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Figura 6. Fuente de Poder.

Shaker, Marca BECHMARK

Es un agitador orbital digital que es ideal para frascos de cultivo de tejidos, placas de Petri y

bandejas de tinción. (Biomedical, 2014).

Figura 7. Shaker.

Blotting

La técnica de transferencia (blotting) se basa en el mismo fundamento que la autorradiografía, y

permite identificar la presencia de una banda concreta en un gel de electroforesis, bien sea,

Southern Blot (detección de secuencias específicas de DNA), Northern blot (detección de

secuencias específicas de RNA) o Western Blot (detección de proteínas específicas con

anticuerpos) por medio de la transferencia de las bandas de proteínas o de ácidos nucleicos desde

el gel hacia una membrana de nitrocelulosa para que puedan reaccionar con la sonda radioactiva

(Nelson, 2013).

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Figura 8. Blotting.

Autoclave, Marca STURDY

La autoclave es un equipo utilizado para la esterilización por vapor para materiales estables al

calor, humedad y presión. Se considera el método de primera elección por su rapidez, eficacia,

compatibilidad con la mayoría de los materiales y, por, sobre todo, su bajo costo (Garnica, 2016).

Figura 9. Autoclave.

Transiluminador, Marca SPECTROLINE

El Transiluminador sirve para la visualización de bandas fluorescentes de proteína y DNA en geles

electroforéticos. El transiluminador para la visualización y fotografía de bandas fluorescentes de

proteína y DNA en geles electroforéticos comprende por lo menos una fuente de luz, un filtro de

excitación sobre el que se coloca un gel electroforético a analizar que contiene bandas de proteína

o DNA teñidas con colorantes fluorescentes, y por lo menos un filtro de detección, que se

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caracteriza por el hecho de que dicha fuente de luz emite radiación visible, dicho filtro de

excitación seleccionan un intervalo de longitudes de onda comprendido dentro de la región visible

y dicho filtro de detección presentan transmisión a longitudes de onda superiores a las de dicho

intervalo (Aguamarket, 2017).

Figura 10. Transiluminador.

Refrigerador

Se utiliza para almacenar reactivos, amplicones o ciertas muestras del trabajo de investigación o

docencia dentro del laboratorio.

Figura 11. Refrigerador.

Electroporador, Marca BIO RAD

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 Biología Molecular
Este instrumento compacto permite lograr resultados óptimos para la transformación de células

eucariotas o procariotas a partir de ADN, ARN, proteínas y otras moléculas pequeñas.

Figura 12. Electroporador.

Microcentrífuga, Marca HUMLE

Una Centrífuga es una máquina que pone en rotación una muestra para separar por la fuerza

centrífuga sus componentes o fases, en función de su densidad. (PROBIEN, 2015).

Figura 13. Microcentrifuga.

NanoDrop, Marca THERMO

Este equipo permite realizar medidas de espectrofotometría en un amplio rango de longitudes de

onda (220-750 nm) con gran exactitud y reproducibilidad, sin necesidad de emplear cubetas. Tan

sólo requiere un volumen de muestra de 1-2 μl y gracias a su pequeño tamaño y fácil manejo

permite medir un gran número de muestras en poco tiempo (IdiPaz, 2015).

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Figura 14. NanoDrop.

Cabina de Flujo Laminar, Marca ESCO

Las cabinas de seguridad biológica son equipos que proporcionan una barrera de contención para

trabajar de forma segura y en condiciones de esterilidad. Son equipos diseñados para mantener un

área libre de partículas o de probables contaminantes denominada zona de trabajo. La protección

se logra mediante la combinación de elementos electromecánicos/electrónicos (motor, ventilador,

filtro, conductos, iluminación, etc.), y procesos físicos (flujo laminar, diferencias de

presiones,etc…) que impulsan el aire a través de unos filtros especiales de gran superficie (Idipaz,

2015).

Figura 15. Cabina de Flujo Laminar.

Almacenador de Reactivos

Es usado para brindarle un almacenamiento adecuado a los reactivos usados dentro del laboratorio

según las propiedades de estos.

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Figura 16. Almacenador de Reactivos.

Plancha de Calentamiento

En el laboratorio, las placas calefactoras se utilizan generalmente para calentar el material de

vidrio o su contenido.

Figura 17. Plancha de Calentamiento.

Refrigerador -20 °C

Es usado para conservar muestras por largos periodos de tiempo.

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 Biología Molecular

Figura 1. Refrigerador -20°C.

Balanza Electrónica, Marca PRECISA

Está diseñada para medir pequeñas masas.

Figura 19. Balanza Electrónica

PARTE D. MICROPIPETAS

INTRODUCCIÓN

Las micropipetas son instrumentos que se utilizan para absorber y transferir pequeños volúmenes

de líquidos (microlitros µl) o mililitros (ml)). Estas nos permiten realizar mediciones y mezclas

muy precisas donde se emplean distintos líquidos, La importancia de medir volúmenes en

cualquier laboratorio resulta fundamental para la confiabilidad y reproductibilidad de los

experimentos, más cuando se manejan volúmenes tan pequeños como los utilizados en técnicas de

genética, biología molecular e ingeniería genética, donde se usan muy pocas cantidades de muestra

y reactivos, los cuales definen a su vez los costos del análisis de la exactitud y confiabilidad de los

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 Biología Molecular
resultados. Conocer las partes, la función y el manejo adecuado de las micropipetas digitales dentro

del área de trabajo del laboratorio de genética molecular para diferentes volúmenes, tales como:

p1000 (vol. 100 -1000 µl), p100 (vol. 10 – 100 µl) y p10 (vol. 0.5 – 10 µl), las cuales se diferencian

según su color, azules para volúmenes grandes, amarillas para volúmenes medianos y blancas

para volúmenes pequeños, sim embargo, el color de las micropipetas puede variar según el

fabricante o casa comercial de las mismas; estas necesitan de puntas de diferentes tamaños según

la micropipeta usada, que manejan los mismos patrones de colores que estas, sim embargo, sucede

los mismo que con las micropipetas, el color de estas difiere según el fabricante o casa comercial.

La gran mayoría de las técnicas en biología molecular se basan en procedimientos de

“microquimica”, en los que se emplean cantidades muy pequeñas de soluciones y reactivos para

este fin, se usan micropipetas de volumen fijo y volumen variable, con las que podemos medir

volúmenes en microlitros (µl). Es conveniente recordar que 1 mililitro equivale a 1000 microlitros.

Una micropipeta es un instrumento empleado para absorber y transferir pequeños volúmenes de

líquidos y permitir su manejo en las distintas técnicas científicas. Las micropipetas son dispositivos

que permiten medir volúmenes pequeños que desde 1µl hasta 1ml o más.

El uso de micropipetas permite emplear distintos líquidos sin tener que lavar el aparato: para ello

se emplean puntas desechables (plástico) que habitualmente son estériles.

Hay diferentes tipos de micropipetas de las cuales se utilizan en la práctica las de tipo p1000 (vol.

100 -1000 µl), p100 (vol. 10 – 100 µl) y p10 (vol. 0.5 - 10 µl), con sus respectivas puntas: azules,

amarillas y puntas amarillas o blancas.

METODOLOGIA

En esta práctica se realizó ejercicios de medición con micropipetas digitales adiestrándose en el

correcto uso y manipulación de las mismas, el cual es fundamental para el éxito de las siguientes

prácticas programadas en este curso.

RESULTADOS Y DISCUSIONES

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 Biología Molecular
Durante el desarrollo del ejercicio, se logró evidenciar falencias a la hora de tomar medidas

volumétricas con la micropipeta. Existen errores frecuentes que pueden estar asociados a la toma

de una medida, tales como:

 Dispensar los reactivos líquidos demasiado deprisa Pipetear distintas muestras con la

misma punta.

 No realizar un mantenimiento adecuado de las pipetas.

 No calibrar las pipetas en los plazos establecidos o hacerlo de manera diferente como lo

dice el fabricante.

 Pipetear desde un ángulo incorrecto.

 Guardar las pipetas en posición horizontal.

 No utilizar las puntas adecuadas (de acuerdo a sus volúmenes)

 No tener en cuenta la temperatura ambiente y/o la temperatura de la muestra.

Sin embargo, estos errores pueden ser evitados al:

 Pipetear despacio y con suavidad.

 Mantener la pipeta en posición vertical al aspirar la muestra.

 Sumergir la punta ligeramente en la muestra al aspirar.

 Dispensar el líquido sobre la pared lateral o sobre el líquido en un ángulo de 45º

ANEXOS

1. Consultar otras sustancias toxicas que se utilicen en el laboratorio de biología molecular

•VA-044: En biología molecular se utiliza para la separación de las proteínas la electroforesis en

gel de poliacrilamida. Esta técnica conocida como PAGE por sus siglas en inglés, polyacrylamide

gel electrophoresis, se basa en que las diferentes proteínas migrarán a una velocidad distinta en un

medio cargado eléctricamente.

•TAPS: Otro buffer comercializado por Wako es el ácido N-[tris(hidroximetil)metil]-3-

aminopropanosulfónico (TAPS). El TAPS tiene capacidad reguladora entre pH 7.7 y 9.1. Puede

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 Biología Molecular
ser usado para electroforesis capilar de ADN, como fase móvil para cromatografía y en otras

técnicas de biología molecular.

•HEPES: El HEPES (4-(2-hidroxietil)-1-piperazínetanosulfónico) es uno de los tampones

zwitteriónicos más usados en experimentos biológicos. Tiene capacidad reguladora entre los

valores de pH de 6.8 y 8.2.

•Bis-Tris: Bis-Tris es la forma abreviada de llamar al bis(2-hidroxietil) amino-

tris(hidroximetil)metano usado en biología molecular para gran cantidad de ensayos. En su

estructura química se encuentra una amina terciaria que es la encargada de mantener el equilibrio

ácido base que le confiere capacidad reguladora a esta sustancia en el rango de pH de 5.8 a 7.3.

Puede ser usado en el ensayo de la creatina quinasa, como medio protector de biomoléculas

refrigeradas y en la biosíntesis de muchas otras moléculas de interés en la investigación biomédica.

•Target mRNA Cloning Kit Wako: Este reactivo de laboratorio es útil para la amplificación del

ARN mensajero cuando se cuenta con pocas moléculas de este. Puede ser usado para cuantificar

la cantidad de ARN etiquetado que está presente en un cultivo.

•PIPES: El nombre común del PIPES es ácido piperazín-N,N′-bis(2-etanosulfónico) y se usa

también como tampón en ensayos biológicos. Es uno de los buffers estudiados por Good y

colaboradores en la década de los 60. Este tampón ácido tiene una constante de equilibrio cercana

al pH fisiológico por lo que es muy útil en experimentos que precisan del cultivo de células, resiste

el paso por la autoclave, lo que le confiere una ventaja adicional para ser seleccionado como

tampón ácido en estudios que requieren la fijación de células.

•ACES: ACES o ácido N-(2-acetamido)-2-aminoetanosulfónico es un tampón zwiteriónico con

capacidad reguladora en el rango de pH entre 6.4 y 7.4, Es útil para la separación de proteínas por

electroforesis de enfoque isoeléctrico (IEF) en dos dimensiones

•ADA: El ácido N-(Carbamoilmetil)iminodiacético o ADA es un tampón biológico útil en el rango

de pH entre 6.4 y 7.4, usado para la preparación de gradientes de pH con sustratos inmovilizados,

por ejemplo en una columna capilar monolítica.

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 Biología Molecular
• BES: El tampón conocido como BES es el ácido N,N-Bis(2-hidroxietil)-2aminoetanosulfónico,

este buffer biológico tiene utilidad en mucho procesos dependientes del pH, entre los que se

encuentra la separación por electroforesis capilar.

•TES: El ácido N-[tris(hidroximetil)metil]-2-aminoetanosulfónico, conocido como TES que es

usado, entre otras aplicaciones, para el crecimiento de células epidérmicas a pH entre 7.4 y 7.9. Es

también un buffer de Good.

•Bicine: El bicine, nombre con el que se conoce a la N,N-bis(2-hidroxietil)glicina es un tampón

recomendado para ensayos bioquímicos que se realicen a bajas temperaturas. Tiene un pKa de 8.35

y ha sido usado en ensayos de cristalografía, determinación cuantitativa de biomoléculas y muchos

otros experimentos de biología molecular.

•MES: El buffer preparado con MES (ácido 4-morfolínetanosulfónico) es útil para el cultivo

celular de plantas en el rango de pH entre 5.8 y 6.5. Es usado como fase móvil para aislar la

tubulina de cerebro por cromatografía de gel.

•CAP: Se conoce como CAPS al ácido 3-(ciclohexilamino)-1-propanosulfónico, buffer utilizado

en experimentos de biología molecular, de naturaleza zwiteriónica, que puede usarse en el rango

de pH entre 7.9 y 11.1. Entre otras aplicaciones se encuentra el secado de proteínas, la

secuenciación y análisis de aminoácidos y todos aquellos experimentos donde la glicina puede

actuar como interferente.

2. Consultar el uso de los siguientes equipos y menciónelos: termociclador de tiempo real, foto

documentador de geles, secuenciador automático y micro arreglos.

TERMOCICLADOR DE TIEMPO REAL:

La PCR a tiempo real permite cuantificar de forma relativa la expresión de nuestro gen de interés

en determinadas condiciones. Principio: utilizar un gen de referencia cuya expresión es constante

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 Biología Molecular
durante las condiciones del experimento (gen constitutivo). El proceso consta de dos partes: La

expresión del gen de interés será normalizada con la expresión del gen constitutivo. interés en las

condiciones

Figura . Termociclador de tiempo real.

FOTO DOCUMENTADOR DE GELES:

El equipo ChemiDoc XRS+ de Bio-Rad es un fotodocumentador que combina la tecnología de la

documentación de geles con la capacidad de detectar una señal quimioluminiscente mediante una

cámara CCD super-enfriada el ChemiDoc XRS+ le permite documentar geles de proteínas teñidos

con colorantes fluorescentes (p.e. Flamingo) y visibles (p.e. Coomasie) así como geles de ácidos

nucleicos.

Figura. Foto documentador de geles.

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 Biología Molecular

SECUENCIADOR AUTOMATICO:

En otras palabras, pueden determinar el orden de las bases de nucleótidos en cualquier molécula

dada. La secuenciación de la molécula de ADN puede ser el primero de una serie de pasos

necesarios para averiguar cómo los nucleótidos específicos en una molécula de ADN interactúan

unos con otros y codifican características diferentes en un organismo.

Figura . Secuenciador automatic.

MICROARREGLOS:

Microarray es una superficie sólida a la cual se une una colección de fragmentos de ADN. Los

chips de ADN se usan para analizar la expresión diferencial de genes, y se monitorean de manera

simultánea los niveles de miles de ellos. Su funcionamiento consiste, básicamente, en medir el

nivel de hibridación entre la sonda específica (probe, en inglés), y la molécula diana (target). Fig15.

Termociclador de tiempo real

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 Biología Molecular

Figura . Microarreglos

3. Consultar acerca de las señales que se deben en el laboratorio de genética y biología molecular.

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 Biología Molecular

CONCLUSIONES

 El conocimiento adecuado de las normas de la bioseguraidad ayudan a tener un concepto

basico de todos los tipos de riesgos que pueden suceder en el laboratorio de biologia

molecular y de el buen manejo de practicas de laboratorio, es muy importante recalcar el

uso de todos los implementos basicos de laboratorio y el conocimiento de las sustancias u

reactivos que se utilizan en cada practica de laboratorio, fue importate conocer todos los

diferentes equipos que estan presentes en el laboratorio para tener un concepto basico y

carcateristicas del mismo.

 La micropipeta es un instrumento necesario a la hora de realizar diferentes trabajos en el laboratio

y en el campo laboral, para poder manipular concentraciones de pequeños volumenes que me

permitiran diferentes tareas como extraccion de ADN, preparacion de soluciones, etc, por ello es

necesario comprender su funcion y darle un adecuado manejo.

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 Biología Molecular
REFERENCIAS

Parte A. Normas de Bioseguridad

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BIOLOGIA MOLECULAR. Barranquilla. Colombia. Recuperado de:

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Parte B. Reactivos

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 Biología Molecular

Parte C. Equipos

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 Biología Molecular
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