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REACCIONES ENZIMATICAS
NOTA: 4.6
Barón Daniel, Mora Maicol, Gómez Diego.
Facultad de ciencias agrarias. Universidad de Pamplona, Pamplona, Colombia, junio
2019.
0.6 Resumen: la práctica de reacciones enzimáticas se enfocó en la demostración o prueba de la
presencia de enzimas catalizadoras en los procesos de oxidación de una manzana, más en
mejorar redacción
concreto la presencia de polifenol oxidasa en dicha muestra y de los procesos retardantes de
un antioxidante, para lo cual se usa un método casero el cual incluye vitamina c macerada
como el retardante, además de ello también se permitió observar la presencia de la enzima
catalasa en una porción de papa al hacer reaccionar dicha muestra con peróxido de
hidrogeno(𝐻2 𝑂2 ).
0.2 Palabras claves: polifenol oxidasa, antioxidante, peróxido de hidrogeno, catalasa, catalizador.
0.5 Introduccion:
El motivo por el cual es interesante el conocimiento de la enzimas es porque los seres
vivos son un complejo conjunto de reacciones, donde las enzimas son catalizadores
naturales de dichos procesos, es decir son las encargadas que este gran número de
reacciones sucedan de manera mucho más rápida, por lo que si se exceptuara la acción de
catalizadores en los procesos vitales de dichos organismos sería un colapso total de la vida
como se conoce, ya que cada proceso u reacción tardaría demasiado y no permitiría el
complejo de homeostasis realizado por los seres vivos, por ejemplo las enzimas realizan
procesos catalizadores muy importantes como la degradación de la molécula de glucosa
para poder obtener la energía necesaria para poder realizar actividades físicas y mantener
un funcionamiento óptimo de los procesos metabólicos del organismo. Ref
Enzimas: “Las enzimas son moléculas orgánicas que actúan como catalizadores de
reacciones químicas, es decir, aceleran la velocidad de reacción. Comúnmente son de
naturaleza proteica, pero también de ARN. Las enzimas modifican la velocidad de
reacción, sin afectar el equilibrio de la misma, ya que una enzima hace que una reacción
química transcurra a mayor velocidad, siempre y cuando sea energéticamente posible” [1]
En el cuerpo de los seres vivos una de las reacciones enzimáticas más importante es la
degradación del peróxido de hidrogeno, ya que este es un compuesto químico muy
oxidativo, por lo que debe ser convertido en sustancias más inofensivas para el cuerpo
como agua y oxígeno. Esta reacción enzimática es catalizada por la catalasa para que la
reacción sea más rápida. Ref
El peróxido de hidrogeno (𝐻2 𝑂2 ), o agua oxigenada, es un compuesto químico con
características de un líquido altamente polar, fuertemente enlazado con el hidrogeno tal
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como el agua, y además Es conocido por ser un poderoso oxidante, el peróxido de
hidrógeno es producido por el organismo en cantidades muy pequeñas, también se
encuentra en el aire y en algunos otros compuestos naturales igualmente en muy bajas
concentraciones.[2]
La catalasa: es una enzima perteneciente a la categoría de las oxidorreductasas que se
encuentra presente en la mayoría de los seres vivos, la cual es la encargada de la
descomposición del peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua debido a la toxicidad del
compuesto en el organismo, a su vez la enzima catalasa es muy utilizada en la industria
para eliminar residuos de (𝐻2 𝑂2 ). [3]
Otro de los procesos que suceden a diario o es decir son muy comunes es el proceso de
oxidación, el cual puede definirse como un fenómeno en el cual un elemento o compuesto
se une con oxígeno, aunque su verdadera definición química seria la perdida de electrones
por parte de un elemento, átomo, molécula u ion. Que para el caso de los alimentos o más
en concreto con la mayoría de frutas las enzimas que estas poseen al momento de
reaccionar parte del fruto sin ningún tipo de protección, es decir exposición directa al
ambiente o más en concreto al oxigeno sucede este proceso de oxidación siendo visible al
ojo humano mediante un cambio en la coloración a marrón. [4]
las polifenol oxidasas (PPOs) “son enzimas ubicuas que catalizan la reacción dependiente
de oxígeno que transforma o-difenoles en o-quinonas. Estas quinonas son reactivas y
capaces de modificar covalentemente un amplio abanico de especies nucleófilas, del
interior de las células, que conduce a la formación de polímeros marrones, conocido como
pardea miento enzimático” [5]. Es decir, son las encargadas de apresurar o maximizar la
oxidación en quien las contenga al primer contacto con el oxígeno, produciendo cambios en
la melanina la cual es la encargada de la pigmentación de algunos organismos o productos
de ellos como los frutos de las plantas.
La vitamina C: o también conocida como ácido ascórbico, es un potente antioxidante
soluble en agua que se asocia con varios efectos beneficiosos en el sistema inmune, en el
proceso de envejecimiento, en el cuerpo ayuda a proteger las células contra los radicales
libres producidos por el organismo en su metabolismo, o radicales que se encuentran en el
entorno. [6]
0.5 Métodos:
Para la realización de la práctica se tuvo en cuenta las instrucciones contenidas en las guías
prácticas de laboratorio y las indicaciones previas del docente a cargo, en el cual se
realizaron dos pruebas experimentales descritas en el siguiente orden
1. El primer diseño experimental consistió en la prueba de polifenol oxidasa en una
manzana, para lo cual fue necesario una manzana y vitamina c en tableta, donde la
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vitamina c fue macerada en un mortero con la ayuda de pistilo hasta conseguir un
polvillo de vitamina c, posteriormente la manzana fue partida por la mitad.
seguidamente se tomó una de las mitades de la manzana y fue puesta sobre un
mesón a libre exposición y fue tomada como muestra, mientras que la otra mitad fue
cubierta con vitamina c ya macerada y colocada junto a la porción muestra; ambas
muestras se mantuvieron bajo observación durante una hora para visualizar los
cambios.
2. El segundo experimento se basó en la prueba para determinar la presencia de
catalasa en una porción de papa negra (solanum tuberosum), para lo cual se usó una
papa y agua oxigenada (𝐻2 𝑂2) , en primer lugar se tomó una pequeña rebanada de
papa y se colocó sobre un porta objetos, luego con un gotero se tomó una cantidad
mínima de agua oxigenada y se adicionaron tres gotas del mismo directamente
sobre la muestra de papa y se tomó el tiempo en que tardo la reacción.
0.9 Resultados:
mejorar redacción Lo que se obtuvo en el experimento 1 o prueba de polifenol oxidasa para la manzana es
que al cabo o transcurso de una hora la mitad de la manzana dejada a libre exposición
sin adicionar nada se encontraba de una tonalidad marrón, mientras que la otra mitad la
cual se encontraba cubierta con la vitamina c o ácido ascórbico no le sucedió lo mismo
es decir no tenía tonalidad marrón, cabe aclarar que para observar dicho resultado fue
necesario remover el polvo de vitamina c que le recubría con agua destilada, sin
embargo esta mitad tenía una tonalidad naranja producto del colorante artificial que
contenía la tableta de ácido ascórbico como se muestra en las figuras 1 y 2.
mejorar el contenido de los pies de figura
Inicial final
Figura 1: manzana a libre exposición sin protección
.
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Inicial final
Figura 2: manzana a libre exposición con vitamina c
Igualmente, el resultado obtenido en el segundo experimento fue que al momento de
adicionar las tres gotas de peróxido de hidrogeno sobre la superficie del trozo de papa,
aproximadamente transcurren 5 segundos hasta que se puede apreciar la formación de
una capa blanquísina espumosa de manera efervescente el cual se mantiene en este
estado de efervescencia casi por 2 min luego del cual va desapareciendo, en la figura 3
se puede apreciar la espuma efervescente sobre la muestra.
Figura 3: papa en reacción al peróxido de hidrogeno.
0.9 Discusión:
Ahora bien el cambio que se pudo evidenciar en el experimento 1, en el cual la el trozo de
manzana que se deja a libre exposición sin ningún tipo de protección y sufre un cambio de
mejorar redacción
coloración a marrón, esto se debe al proceso de oxidación que presenta la manzana al estar
en contacto con el oxígeno del ambiente, más en concreto la enzima polifenol oxidasa
presente en frutos ya algunos otros órganos de la planta, para el caso en el fruto esta enzima
se encuentra en el interior de la vacuolas y citoplasma celular y al momento de ser lacerado
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o cortado el fruto, se libera de manera directa y al no tener ninguna protección reacciona
con oxigeno 𝑂2 presente en la atmosfera y produce que la melanina quien es un pigmento
natural encargada de dar una coloración marrón entre en acción, es decir,
Polifenol Oxidasa + O2 → Melanina (Color marrón) [7]
El oxígeno es quien reacciona con la enzima polifenol oxidasa para así dar el color marrón.
Además de ello la segunda demostración en la cual la manzana es cubierta con ácido
ascórbico o vitamina c, este cumple el papel de un antioxidante, es decir impide o retarda
que el oxígeno presente en la atmosfera reaccione con la enzima polifenol oxida presente en
la manzana y por ello no se observe la coloración marrón. Ahora bien, este es uno de los
grandes problemas de tipo alimentario, ya que al pasar de los años los estudios han
demostrado que la perdida tanto de calidad como de sanidad de orden vegetal es causada
por las PPO o polifenol oxidasa, ya que en el transporte y manipulaciones dichos alimentos
de orden industrial se produce algunas laceración por mínima que sea y el trascurrir del
tiempo desde el momento de cosechado el fruto hasta su consumo final suele ser variado y
un poco extenso, en este transcurso inician los procesos de oxidación que posteriormente se
convierte en descomposición del material orgánico y finalmente traduciendo a perdidas
alimentarias y monetaria para la industria, es por ello que desde las décadas pasadas se han
encontrado soluciones para los problemas mencionados y esto es el uso industrial de
antioxidantes, hoy en día ya existe una amplia gama de productos que cumplen la función o
el papel que para el caso de este experimento cumplió el ácido ascórbico o vitamina c como
También esta antioxidante.[8]
reacción pudo
haber ocurrido Así mismo en el experimento 2, para el caso de presencia de catalasa en la papa, esta
por la oxidación reacción enzima se efectúa o mejor dicho se evidencia en el momento en que se le adiciona
de las
biomoléculas de el peróxido de hidrogeno(𝐻2 𝑂2 ) e inicia el proceso de descomposición del peróxido en
la célula por agua y oxígeno, lo que se observa como una espuma blanca de esencia efervescente, en el
parte del cual se puede deducir que la acción de efervescencia es el 𝑂2 que es liberado por la acción
peróxido de
hidrógeno, no? de la catalasa en el peróxido, y el agua se puede apreciar sobre el porta objetos de manera
líquida, y además se libera un poco de calor, en resumidas lo que ocurre es:
𝐻2 𝑂2 + 𝐶𝑎𝑡𝑎𝑙𝑎𝑠𝑎 → 𝐻𝑂2 + 𝑂2 + ∆
Y la importancia de dicha enzima radica en que esta es una de las enzimas más
características de los seres vivos, en los seres humanos y animales esta encima se encuentra
principalmente en el hígado, y “por sus innegables, poderosas y demostradas propiedades
antioxidantes, la catalasa es muy benéfica para los procesos de los órganos y el cuerpo” [9]
Además de ello en un acto fuera del experimento se realizó un segundo montaje con un
trozo de papa al cual al momento de adicionar el 𝐻2 𝑂2 también se encendió un cerillo y se
pudo observar una pequeña reacción de inflamación lo que indicaría que el gas que se
desprende es oxigeno 𝑂2, aunque la combustión sucede en cuestión de segundos.
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0.5 Conclusiones:
Los catalizadores o enzimas son sustancias en su mayoría proteicas que se encargan
de acelerar los procesos en las reacciones químicas, que ocurren de manera natural o
artificial.
La manzana presenta polifenol oxidasa la cual es una enzima que reacciona al
contacto con el oxígeno y permite la oxidación de la manzana la cual se evidencia
con el cambio de coloración a marrón.
La vitamina c o ácido ascórbico es un antioxidante que retarda la acción del proceso
oxidativo en el fruto de manzana.
Los inhibidores enzimáticos actualmente son más comunes de lo que se piensa y sus
usos más conocidos son en la industria alimentaria para la conservación de
productos perecederos.
La papa presenta la enzima catalasa la cual cumple con la función de romper el
peróxido de hidrogeno en agua y oxígeno, dicha enzima también se encuentra
presente en el hígado de animales y humanos.
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0.5 Bibliografía:
[1] [On line] https://es.wikipedia.org/wiki/Enzima,22/06/2019.
[2] [On line] https://www.atsdr.cdc.gov/es/toxfaqs/es_tfacts174.html, 22/06/2019.
[3] [On line] https://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/enzima-catalasa, 22/06/2019.
[4] [On line] https://www.significados.com/oxidacion/,22/06/2019.
[5 y 8] [On line] http://www.uteq.edu.ec/revistacyt/publico/archivos/C2_Doc2.pdf, 23/06/2019.
[6] [On line] https://ods.od.nih.gov/factsheets/VitaminC-DatosEnEspanol/23/06/2019.
[7] [On line]
https://extension.purdue.edu/4h/Documents/Volunteer%20Resources/Science%20Made%20Easy
%20Spanish/Oxidacion%20en%20manzanas.pdf, 23/06/2019.
[9] [On line] https://sites.google.com/site/experimentalentos/experimentando-con-la-catalasa-
5-b, 23/06/2019.
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Anexos:
Interpretación de resultados
Después de efectuar todos los experimentos en cada caso:
1. ¿Cómo evidencia que se produjo una reacción enzimática?
Se evidencio cuando después de cierto tiempo, observamos la manzana en la parte que tenía
vitamina c y lavarla, observamos que esta no había cambiado de color, lo que sugiere que hubo
presencia enzimática en la parte de la manzana sin vitamina c, o sea presencia de poli fenol
oxidasa.
2. ¿A qué se debe la presencia del color marrón en la manzana que no tiene vitamina C?
El color marrón es un efecto producido por el oxígeno que se conoce como oxidación, al estar
expuesta al aire libre esta se oxida.
3. ¿Qué papel desempeña la vitamina C sobre la manzana expuesta al oxígeno?
Dado que la vitamina c es un antioxidante no permite que el oxígeno oxide la parte de la manzana
en contacto con esta.
4. ¿A qué se debe la producción de burbujas en el experimento de la catalasa?
Se debe a que está siendo liberado el oxígeno del peróxido de hidrogeno, para quedar por
separado agua y oxigeno debido a la catalasa.
5. ¿Y cuando dejan de formarse?
Cuando ha sido libera todo el oxígeno presente en el peróxido de hidrogeno agregado a la papa,
en pocas palabras cuando finaliza la reacción.
6. ¿Qué es lo que estamos midiendo en ese caso?
La velocidad de reacción de la catalasa presente en el corte de papa.
7. ¿Cómo comprobar que el gas desprendido en el experimento con catalasa es oxígeno?
Se puede comprobar haciendo el experimento y al momento de agregar el oxígeno encender un
fosforo o mechera si la llama crece o se presenta algún cambio en esta significa que hay presencia
de oxígeno.
Cuestionario
1. Diseñe un experimento para averiguar cómo varía la velocidad de la reacción. Y así poder
determinar qué tan veloz y afín es la enzima por su sustrato en el caso de los experimentos
realizados en clase. Realice un esquema.
2. ¿Cómo calculan la velocidad total de cada una de las reacciones realizadas en el laboratorio?
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En la práctica usamos cronómetros para medir la velocidad de cada una de las reacciones, desde
que empezamos a realizar el experimento hasta que finalizó, se calculó el tiempo, que demoro.
3. ¿Cuál es el efecto de agregar diferentes cantidades de sustrato sobre la velocidad de esta
reacción? Justifiquen sus conclusiones.
Pues a mayor cantidad de sustratos las enzimas van a tener mayor trabajo lo que significaría que
estas reacciones van a ser un poco más lentas, porque ahora tienen que catalizar más.
