Guía Práctica de Laboratorios
LABORATORIOS INSTITUCIONALES Facultad de Ciencias Ambientales y
Corporación Universitaria Autónoma del Cauca
Jefatura de Laboratorios
Desarrollo Sostenible
Programa de Ingeniería Ambiental y
Sanitaria
Nombre del Curso: Bioquímica Guía No. G-IAS-B-02
Semestre: III Laboratorio: Laboratorios de Ciencias Ambientales
Ubicación: Carrera 1 No. 4-24
Área de Formación: Ciencias Naturales y Exactas
Duración: 1 Hora
Nombre de la Práctica: Desnaturalización de Proteínas
DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS
INTRODUCCIÓN
Las proteínas se encuentran involucradas en virtualmente todos los procesos que se
llevan a cabo dentro del organismo, teniendo una gran variedad de funciones. Algunas
son enzimas, otras formadoras de estructuras claves como el músculo, otras son
transportadoras, otras defienden al cuerpo humano y otras son parte de la estructura
corporal. Estas moléculas son capaces de cumplir muchas funciones tan distintas debido
a que poseen varios niveles de organización que les permite ser el centro de atención de
la mayoría de procesos dentro del organismo humano.
Si en una disolución de proteínas se producen cambios de pH (tratamiento con soluciones
salinas, ácidas, alcohol, etc.), alteraciones en la concentración, agitación molecular y
variaciones bruscas de temperatura, la solubilidad de las proteínas puede verse reducida
hasta el punto de producirse su precipitación, formando coágulos. La Figura 1 ilustra el
cambio en la conformación de una proteína nativa, donde los enlaces que mantienen la
conformación globular se rompen y la proteína adopta la conformación filamentosa
(estructura primaria).
A) B)
Figura 1. Proteína nativa y desnaturalizada en proceso A) reversible y B) irreversible
Comportamiento Diodos de Unión | Laboratorio de Instrumentación Básica 1
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Esta variación de la conformación de las proteínas se denomina desnaturalización. La
desnaturalización es un proceso reversible o irreversible como se muestra en la Figura 1 y
se debe a la acción de los efectos por los agentes indicados anteriormente que al actuar
sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria, terciaria y
cuaternaria.
Son ejemplos de desnaturalización, la leche cortada como consecuencia de la
desnaturalización de la caseína, la precipitación de la clara de huevo al desnaturalizarse
la ovoalbúmina por efecto del calor o la fijación de un peinado del cabello por efecto de
calor sobre las queratinas del pelo.
OBJETIVOS
Identificar los diferentes factores que afectan la estabilidad de las proteínas
(desnaturalización).
Observar y analizar los cambios evidentes en una proteína cuando sufre
desnaturalización.
CONSULTAS PRELIMINARES
1. ¿Qué son las proteínas, cuál es su composición química?.
2. ¿Qué es un enlace peptídico?.
3. ¿Cuáles son las proteínas que están presentes en la leche y en la clara del huevo?.
4. ¿Qué significa la desnaturalización de una proteína?
5. Consulte las fichas de seguridad, normas de riesgo (R) y seguridad (S) de los reactivos
a usar
EQUIPOS Y MATERIALES
MATERIAL DE LABORATORIO CANTIDAD
Tubos de ensayo 10
Gradilla 1
Probeta 10 mL 1
Probeta 25 mL 1
Probeta 50 mL 1
Vaso de precipitado de 50 mL 1
Vaso de precipitado de 100 mL 1
Vaso de precipitado de 250 mL 1
Varilla de vidrio 1
Frasco lavador 1
REACTIVO CANTIDAD
Agua destilada 500 mL
Etanol 50 mL
Solución al 40% NaOH 50 mL
EQUIPOS
Huevo CANTIDAD
1
Plancha de calentamiento
Leche entera 501mL
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Termómetro
Zumo de limón 101mL
Vinagre 10 mL
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NOTA: Cada grupo de estudiantes traerá las soluciones de uso comercial (leche, zumo de
limón, huevo y vinagre).
PROCEDIMIENTO
Marcar 10 tubos de ensayo y adicionar 5mL de cada sustancia como se indica a
continuación:
Tabla 1. Preparación de muestras
TUBO Muestra
1 Leche Entera
2 Clara de Huevo
3 Leche Entera
4 Clara de Huevo
5 Leche Entera
6 Clara de Huevo
7 Leche Entera
8 Clara de Huevo
9 Leche Entera
10 Clara de Huevo
1. DESNATURALIZACIÓN TERMICA. Tubos 1 y 2
Tomar 2 tubos de ensayo (tubos 1 y 2), adicionar en cada uno 5 mL de muestra y
calentar en baño María (80-90 °C) por 5 minutos.
Reposar, observar y reportar todos los cambios y resultados.
2. DESNATURALIZACIÓN POR pH. Tubos 3 al 8
Tomar 6 tubos de ensayo (tubos 3 al 8), adicionar en cada uno 5 mL de muestra y:
5 mL de HCl en tubos 3 y 4,
5 mL de Ácido acético en tubos 5 y 6, y
5 mL de solución NaOH (solución básica) en tubos 7 y 8.
Agitar suavemente los tubos, dejar reposar, observar y reportar todos los cambios y
resultados.
3. DESNATURALIZACIÓN POR SOLVENTES ORGÁNICOS. Tubos 9 y 10
Tomar 2 tubos de ensayo (tubos 9 y 10), adicionar en cada uno 5 mL de muestra y 5
mL de etanol en cada tubo.
Reposar, observar y reportar todos los cambios y resultados.
OBSERVACIONES, CÁLCULOS Y RESULTADOS
Tabla 2. Resultados desnaturalización de proteínas presentes en la leche entera y
la clara de huevo.
TUBO MUESTRA TRATAMIENTO OBSERVACIONES
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1 Leche Entera
Desnaturalización
térmica
2 Clara de Huevo
3 Leche
Entera
5 mL HCl
4 Clara de
Huevo
5 Leche
Entera
5 mL Ácido
acético Desnaturalización
6 Clara de por
Huevo pH extremo
7 Leche
Entera 5 mL
NaOH
8 Clara de
Huevo
9 Leche
Entera
5 mL de Desnaturalización
etanol por solventes
10 Clara de orgánicos
Huevo
PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1. En qué procesos de su actividad diaria en casa, utiliza o induce usted la
desnaturalización de las proteínas?.
2. En qué procesos del cuerpo humano se dá la desnaturalización de las proteínas?.
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RECOMENDACIONES
1. Leer la guía de laboratorio antes de ingresar al laboratorio.
2. Llevar resueltas las preguntas previas al desarrollo de la práctica.
3. Llevar los elementos de protección para el desarrollo de la práctica: Bata de
laboratorio de manga larga, guantes de nitrilo y gafas de seguridad.
4. Trabajar en orden en el laboratorio.
5. No ingerir alimentos durante la práctica.
6. Entregar el informe de laboratorio cuando el docente lo estipule, en medio digital y
bajo la norma IEEE.
7. El informe de laboratorio debe llevar los siguientes items:
a. Nombre de la práctica.
Autores: Apellidos e iniciales de los nombres, correo electrónico. Programa,
Facultad y Universidad.
Número del grupo, fecha de realización de la práctica, fecha de entrega de
informe.
b. Resumen.
c. Objetivos.
d. Resultados y Análisis de Resultados: Los resultados pueden estar contenidos en
tablas, figuras (fotos del experimento).
e. Conclusiones.
f. Referencias (normas IEEE).
RECUPERACIÓN, DESACTIVACIÓN Y/O ALMACENAMIENTO TEMPORAL DE LOS
RESIDUOS QUÍMICOS
RECUPERACIÓN
Los residuos que contengan soluciones ácidas, básicas y alcohólicas, deben ser
entregados a la persona encargada del laboratorio.
DESACTIVACIÓN
No aplica.
BIBLIOGRAFÍA
1. D. Plummer, Bioquímica Práctica, México: Mc Graw Hill Latinoamericana, 1981.
2. L. Stryer, Bioquímica, 4a ed., Barcelona: Reverte, 1995.
3. G. Rentina, Técnicas de Bioquímica Aplicada, México: Editorial Interamericana, 1974.
CONTROL DE EMISIÓN
Elaboró Revisó Autorizó
Mónica A. Moreno
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Fecha: 05-11-2018 Fecha: Fecha:
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