Pontificia Universidad Javeriana
Grupo Trisomía PSP- Paula Acevedo, Sara González y María Paula Rivera
Informe I
Cruce Monohíbrido
Introducción:
Drosophila melanogaster, es un modelo biológico utilizado desde principios de 1900 por T. H.
Morgan, quien estaba buscando una especie adecuada para realizar estudios sobre la teoría
cromosómica de la herencia, para ello necesitaba un organismo que cumpliera con todos sus
criterios; una especie pequeña con un ciclo de vida corto que podría criarse fácilmente para
producir grandes cantidades de progenie. De este organismo se han podido obtener grandes
avances en la comprensión de las bases genéticas del desarrollo y del comportamiento,
adicionalmente se destaca por su capacidad de proporcionar información sobre procesos biológicos
complejos (Beckingham, K., et al 2005; Tolwinski, N., 2017). Esta especie presenta un ciclo de
vida de aproximadamente 12 días, empieza la gastrulación a los 180 minutos después de la
fertilización, a las veinticuatro horas se genera el primer estadío de larvas hasta aproximadamente
los seis días siguientes cuando ya se obtiene el tercer estadio de desarrollo “pupas”; al octavo día
ocurre la metamorfosis y finalmente a los doce días se obtienen moscas adultas (Puerta, M., 1999).
Las Leyes de Mendel planteadas en 1865 por Gregor Mendel, son presentadas como las reglas
básicas de la genética, explican la transmisión por herencia de caracteres. La primera ley o
“Principio de uniformidad”, explica que de un cruce de individuos homocigotos para un caracter,
donde un individuo es dominante y el otro recesivo, se obtendrá que su descendencia será
fenotípicamente iguales y genotípicamente heterocigota y dominante. La segunda ley o “ley de la
segregación” aplicada a la segunda generación (F2), donde los alelos para cada caracter se segregan
durante la formación de gametos y se unen de manera aleatoria, por lo tanto en la F2 reaparecen los
caracteres recesivos en la progenie (Hartwell, 2011). Se realizan todo tipo de cruces haciendo uso
de este modelo biológico con el fin de evidenciar dichas leyes de Mendel, y con el fin de descubrir
cómo ocurre la herencia de ciertas mutaciones. El cruce monohíbrido, por ejemplo, es la
combinación entre organismos que difieren en una característica, por lo tanto si se cruzan
individuos puros se obtiene una F1 con heterocigotos donde se expresa el carácter dominante y en
la F2 se obtiene tres partes de dominantes y una parte de recesivos (proporción 3:1) (Garner, et al
2003).
En este trabajo se hizo uso de las cepas de Drosophila melanogaster ebony, las cuales presentan una
mutación en el cromosoma 3 en la posición 70.7, esto les otorga una coloración oscura en el cuerpo
y como en la mayoría de los insectos, los genes que determinan el color del cuerpo son
pleiotrópicos. El objetivo del trabajo es evidenciar la primera y la segunda ley de Mendel, realizando
un cruce entre cepas silvestre y ebony y a partir de las frecuencias esperadas halladas por medio de la
realización de cuadros de Punnet, realizar una comparación con los resultados obtenidos
experimentalmente.
Metodología:
Primeramente, se hizo una revisión de literatura para saber la dominancia y el tipo de herencia de
los caracteres, y así poder realizar los cuadros de Punnet correspondientes, y tener los valores
esperados en la F1 y la F2 de los cruces (Tabla 1). Lo que se encontró, se tomó a su vez de hipótesis
del presente experimento, es decir para ambos cruces, original y recíproco tener en la F1 un 100%
de genotipo +e/e+, es decir observar fenotipo Silvestre y en el caso de la F2 50% de genotipo e+/+e,
25% genotipo ++ y 25% genotipo ee, es decir observar 75% fenotipo silvestre y 25% fenotipo
Ebony (3:1).
Se realizó una selección inicial de hembras vírgenes provenientes de los ceparios provistos por la
monitora de la asignatura, tanto de Silvestre como de Ebony para posteriormente realizar los cruces
correspondientes. Se tomó como cruce original el realizado entre hembras silvestres y machos
Ebony y el recíproco hembras Ebony y machos Silvestres, cada uno de ellos con 4 réplicas, de 3
individuos de cada mutación cada uno. Estas réplicas son importantes como en cualquier
experimento por su objetivo de aumentar la precisión de los resultados, reduciendo los errores, y
por otro lado, en el caso de las moscas, es necesario prever cualquier tipo de imprevisto, en la
calidad de los medios, la contaminación de los mismos, la mortalidad de las moscas y su
reproducción, ya que son factores muy variables y que causan efectos en los resultados.
Todos estos fueron llevados a incubación por una semana para obtener la generación F1, que se
observó para definir los fenotipos y desechar los parentales para evitar errores en la F2, que se
obtuvo después de incubar unas semanas más, cuando se realizó el conteo según características
fenotípicas para hacer el cálculo de sus frecuencias y según sexo, para comprobar el tipo de herencia
de los caracteres. Por último con las frecuencias calculadas se hizo un chi cuadrado, para observar
diferencias significativas entre los resultados obtenidos y los esperados, teniendo en cuenta un p
valor de 0,05
Tabla 1: Cuadros de Punnet para los cruces parental y recíproco de D. melanogaster silvestre con
ebony. ++: silvestre - ee: mutación ebony.
Resultados:
En el conteo de la generación F2 (Tabla 2), en general se puede observar una dominancia de
fenotipo silvestre sobre Ebony, en los dos cruces parental y recíproco, además en la mayoría de
casos predominan los machos sobre las hembras.
Tabla 2: C onteo de la F2 para todas las réplicas del parental y el recíproco
Réplica Sexo Original ♀
++ ♂ee Recíproco ♀
ee ♂++
Mutación Silvestre Ebony Silvestre Ebony
Macho 115 16 65 43
1 Hembra 56 15 203 8
Total 171 31 268 51
Macho 123 21 87 39
2 Hembra 112 20 188 26
Total 235 41 275 65
Macho 145 49 76 55
3 Hembra 83 38 96 47
Total 228 87 172 102
Macho 75 21 85 31
4 Hembra 150 16 62 23
Total 225 37 147 54
Teniendo en cuenta, los resultados expuestos en la figura 2, se realizó el cálculo de frecuencias de
cada fenotipo para cada réplica y se realizó un promedio de las réplicas (Tabla 3). Se puede observar
concordancia con los valores esperados en la hipótesis, los valores son más cercanos a los esperados
en el cruce recíproco, sin embargo las frecuencias del cruce original solo se alejan de lo esperado
(75% silvestre, 25% Ebony), un 7% aproximadamente.
Tabla 3:Cálculo de frecuencias de fenotipos para la F2.
Frecuencia (%)
Réplica Original Recíproco
Silvestre Ebony Silvestre Ebony
1 84,65 15,35 84,01 15,99
2 85,14 14,86 80,88 19,12
3 72,38 27,62 62,77 37,23
4 85,88 14,12 73,13 26,87
Promedio 82,01 17,99 75,20 24,80
A partir de las frecuencias obtenidas de los fenotipos para la F2 (Tabla 3), se realizó un análisis
estadístico de chi cuadrado para verificar las diferencias entre los resultados observados y esperados.
Se observa un valor p<0,05 para el caso del cruce recíproco, es decir que los valores obtenidos son
diferentes significativamente a los esperados, pero para el caso del cruce original no se encuentran
diferencias significativas. (Tabla 4)
Tabla 4: Cálculo de chi cuadrado para valores obtenidos y esperados de frecuencias fenotípicas.
Valor de frecuencia Valor de X2
Genotipo observada frecuencia
esperada
Original Recíproco Original Recíproco
Silvestre 82,01 75,20 75 0,655 5,33x10^-4
Ebony 17,99 24,80 25 1,96 1,6x10^-3
Discusión:
Al ser el alelo silvestre dominante en los resultados observados en la F2 ya que la mayoría de
descendientes presentan un fenotipo silvestre, mientras el alelo ebony es recesivo, la razón de esto es
que la característica de las moscas silvestres es heredada, estos resultados permite inferir que la
característica de color de ojos rojos en las moscas silvestres está determinada por dos genes alelos en
donde el gen determina que el color rojo es dominante sobre el gen para la coloración negra que
caracteriza a las moscas ebony.
Ebony al ser una mutación autosómica, es decir, que el gen de la mutación está localizado en uno
de los cromosomas no sexuales, hace que no se presenten diferencias estadísticamente significativas
en los resultados entre el cruce original y el recíproco.
Analizando a su vez el sexo predominante en los resultados de la F2 fue el sexo masculino tanto en
silvestre como en ebony.
Por lo tanto podemos afirmar que la hipótesis esperada la cual era obtener mayor número de
silvestres que de individuos ebony en el cruce F2, con un 75% de probabilidad de que la generación
saliera con fenotipo silvestre y 25% de los individuos fueran ebony y que además estos individuos
resultantes no siguieran un patrón en cuanto a la prevalencia de alguno de los dos sexos, esta
hipotesis se cumplio ya que efectivamente domino el fenotipo silvestre en el cruce original y
recíproco y aunque prevalece el sexo masculino en la generación resultante de estos dos cruces,
podría presentarse el caso contrario de que fuera mayor el número de hembras ya que las
mutaciones autosómicas no están ligadas al cromosoma X o Y. La razón por la que posiblemente
resultó mayor proporción de individuos machos puede ser por errores experimentales o simple azar
Mediante estos resultados se confirmaron la primera y segunda ley de Mendel ya que en los
resultados de la F1 el 100% de los individuos resultaron silvestres y en los resultados de F2 la
relación obtenida fue de 3:1, siendo 3 partes moscas silvestres y 1 una parte moscas con la mutación
ebony y a su vez también se ve que se cumple dicha segunda ley por el valor < 0,05 que se obtuvo
con la prueba estadística Chi cuadrado.
Conclusión:
Se evidencio que la primera y segunda ley de Mendel se cumplio ya que se obtuvieron las
proporciones de 100% de los individuos resultantes de F1 con el fenotipo silvestre y para el F2 75%
de los individuos con fenotipo silvestre y 25% con fenotipo ebony, estas proporciones esperadas
reflejadas en el cuadro de Punnett demuestran que la hipótesis de esta práctica de laboratorio se
cumplio.
Bibliografía
- Beckingham, K. M., Armstrong, J. D., Texada, M. J., Munjaal, R., & Baker, D. A. (2007).
Drosophila melanogaster-the model organism of choice for the complex biology of
multi-cellular organisms. G ravitational and Space Research, 1 8(2).
- Garner, E. J., Simmons, M. J., & Snustad, D. P. (2003). Principios de genética. Mexico:
Limusa Wiley.
- Hartwell, L., Goldberg, M.L., Fischer, J.A., Hood, L., and Aquadro, C.F. (2011). Genetics:
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- Puerta, M.J. (1999) Genética: Fundamentos y perspectivas. McGraw-Hill Interamericana.
Segunda edición. Madrid.
- Tolwinski, N (2017). Introduction: Drosophila - A model System for Development
Biology, Journal of Development Biology.
- Noreña, A. Et al. 2013. Cruces monohibridos entre variedades mutadas y silvestres de
Drosophila Melanogaster. Universidad de Caldas.