Tecnológico de Estudios Superiores de San Felipe del Progreso

Practica #1:
“REFRACTÓMETROS”

Presentan:
Arcos Telles Anayanssi
Arellanes Borja Rafael
Mendoza Segundo Ernesto
Moreno Maya Lizeth
Nicolas Jiménez Karina

Docente:
I.Q.I. Nallely Guerrero Vidal

Asignatura:
Análisis Instrumental

División de Ingeniería Química

I.Q-401
Contenido
Introducción ............................................................................................................................ 3
Objetivo general ..................................................................................................................... 4
Investigacion previa / marco teorico ...................................................................................... 4
Calibración de los métodos instrumentales: ....................................................................... 4
Curvas de calibración: ........................................................................................................ 5
Refractómetro e índice de refracción.................................................................................. 6
Método de estándar externo / Método de estándar interno ................................................. 7
Material / Sustancias / Equipo ................................................................................................ 8
Metodología / Desarrollo ........................................................................................................ 8
Resultados............................................................................................................................... 9
Cuestionario .......................................................................................................................... 11
Conclusión ............................................................................................................................ 12
Bibliografía ........................................................................................................................... 12
 INTRODUCCIÓN
Un refractómetro es un aparato destinado a medir el índice de refracción de un medio
material. Se basan en la medida del llamado ángulo crítico o ángulo límite o en la medida del
desplazamiento de una imagen.
Se denomina ángulo crítico, o ángulo límite, al ángulo de refracción en un determinado medio
material cuando el ángulo de incidencia de la radiación es de 90º respecto de la
recta perpendicular a la interfaz de separación entre un medio material de índice de
refracción conocido, generalmente el aire, y el medio material de índice de refracción
desconocido.
Existen varios tipos de refractómetros:
 Refractómetro de Abbe.
 Refractómetro de Pulfrich.
 Refractómetro de inmersión.
Partes del refractómetro:
 Lámpara: La fuente de radiación más común es la luz de un filamento de tungsteno
que emite luz blanca.
 Prisma: Es un pequeño bloque de material de vidrio con dos superficies planas y
pulcras, diseñado para controlar ángulos con gran precisión. El prisma más común es
el prisma Amici (Giovanni Battista Amici), que actúa como monocromador y
selecciona la longitud de onda de 589 nm (línea de emisión del sodio).
 Escalas: Escala de índice de refracción: Proporciona directamente los valores de
índice de refracción, el intervalo es de n = 1,3 a n = 1,7. Puede ser analógica o digital.
Escala de fracción (concentración) en masa de sacarosa: Significa el % en peso de
sacarosa contenida en 100 g de solución de sacarosa. Proporciona directamente los
valores de concentración de sacarosa en % (el intervalo es de 0% a 95%). Puede ser
analógica o digital.
Los refractómetros fueron inventados por Dr. Ernst Abbe, científico alemán / Austriaco a
principios del siglo XX. El refractómetro Abbe es el “abuelo” de todos los refractómetros
modernos, gracias a su sencillo funcionamiento y su fiabilidad, todavía tiene cabida en los
laboratorios. Existen dos tipos de refractómetros en función de la detección del índice de
refracción; sistemas transparentes y sistemas de reflexión. Los refractómetros portátiles y los
refractómetros Abbe usan los sistemas transparentes, mientras que los refractómetros
digitales usan los sistemas de reflexión.
 OBJETIVO GENERAL
El alumno obtendrá los conocimientos básicos sobre el manejo y uso de un refractómetro.

INVESTIGACION PREVIA / MARCO TEORICO

Calibración de los métodos instrumentales:
Calibración: Se entiende por calibración al conjunto de operaciones que establece, bajo
condiciones específicas, la relación entre las señales producidas por un instrumento analítico
y los correspondientes valores de concentración o masa del juego de patrones de calibrado.
Calidad de una Calibración.
La calidad de la determinación de una concentración no puede ser mejor que la calidad
intrínseca de la calibración. Los factores que determinan la calidad de una calibración son:
 La precisión de las medidas:
Estimada a través de la repetitividad y la reproducibilidad de las medidas. La repetitividad
se evalúa a través del cálculo de la desviación estándar relativa (RSD%) de la medida de
los patrones de calibrado. En la práctica puede ocurrir que la repetitividad para los
patrones sea más pequeña que para las muestras, por lo que será necesario fabricar
patrones similares a las muestras o agregar el analito a las mismas.
 Exactitud de los patrones.
El valor de concentración o masa asignado a cada patrón trae aparejado un error pequeño
si es preparado a partir de reactivos puros (grado analítico) con estequiometría bien
definida. Este error en general se desprecia, frente al error en las medidas de las señales
producidas por el instrumento.
 Validez de la calibración.
Generalmente es el factor más importante. Cuando se calibra un instrumento se debe tener
una razonable certeza de que éste responderá de igual manera a los patrones, así como a
las muestras, aunque estas tengan una matriz relativamente diferente. Si estas diferencias
son muy grandes, pueden llegar a invalidar el proceso de calibración. Es necesario estar
completamente seguro de que el calibrado es válido antes de utilizarlo para obtener el
valor de concentración de muestras incógnita. En caso contrario, pueden cometerse serios
errores en la determinación.
Modelos de calibración.
La forma de calibración más sencilla es la que utiliza un solo patrón. Este modelo es útil sólo
cuando el patrón es absolutamente confiable. Además, se supone que la señal cero del
instrumento corresponde al cero de concentración de la especie que se quiere determinar.
Entre el cero y valor obtenido para el patrón se realiza una interpolación lineal, pero la
extrapolación más allá de la concentración de patrón no es recomendada.
El modelo correspondiente es:
señal = [constante][concentración]
y = m x (1)
La constante m es llamada sensibilidad y corresponde a la constante de proporcionalidad
entre la señal y la concentración. Esta proporcionalidad es útil sobre un restringido intervalo
de valores. A valores muy bajos de concentración la señal es demasiado pequeña y está sujeta
a una gran incertidumbre. A valores muy altos la proporcionalidad dada en ecuación (1)
puede dejar de ser válida. Este modelo es utilizado en muy pocos casos. Si la respuesta a
concentración cero de analito no es conocida de antemano, es necesaria una calibración con
un mínimo de dos puntos. Para esta calibración se utiliza un modelo lineal con un término
constante:
señal = señal del blanco + [constante][concentración]
y=b+mx
El término b indica la magnitud de la señal estimada del blanco, mientras que m es la
pendiente de la recta de calibrado e indica nuevamente la sensibilidad.
Curvas de calibración:
Un procedimiento analítico muy utilizado en análisis cuantitativo es el llamado de calibración
que implica la construcción de una “curva de calibración”. Una curva de calibración es la
representación gráfica de una señal que se mide en función de la concentración de un analito.
La calibración incluye la selección de un modelo para estimar los parámetros que permitan
determinar la linealidad de esa curva. y, en consecuencia, la capacidad de un método analítico
para obtener resultados que sean directamente proporcionales a la concentración de un
compuesto en una muestra, dentro de un determinado intervalo de trabajo. En el
procedimiento se compara una propiedad del analito con la de estándares de concentración
conocida del mismo analito (o de algún otro con propiedades muy similares a éste). Para
realizar la comparación se requiere utilizar métodos y equipos apropiados para la resolución
del problema de acuerdo con el analito que se desee determinar.
La etapa de calibración analítica se realiza mediante un modelo de línea recta que consiste
en encontrar la recta de calibrado que mejor ajuste a una serie de “n” puntos experimentales,
donde cada punto se encuentra definido por una variable “x” (variable independiente,
generalmente concentración del analito de interés) y una variable “y” (variable dependiente,
generalmente respuesta instrumental). La recta de calibrado se encuentra definida por una
ordenada al origen (b) y una pendiente (m), mediante la ecuación y = mx + b. A partir de la
curva de calibración (conjunto de concentraciones que describen el intervalo en el cual se
deberá cuantificar el compuesto por analizar) y a fin de asegurar que la recta encontrada con
los puntos experimentales se ajuste correctamente al modelo matemático de la ecuación se
calculan los valores de la ordenada al origen, la pendiente y el coeficiente de determinación
(r2).
Por tener una buena exactitud y confiabilidad estadística, el método más empleado para
encontrar los parámetros de la curva de calibrado es el método de los mínimos cuadrados
Este método busca la recta del calibrado que haga que la suma de los cuadrados de las
distancias verticales entre cada punto experimental y la recta de calibrado sea mínima o
tienda a cero. A la distancia vertical entre cada punto experimental y la recta de calibrado se
le conoce como residual. En forma gráfica se representa como:

Curva de calibración con n=5

Refractómetro e índice de refracción
El refractómetro mide el índice de refracción de la solución, en la actualidad algunos estudios
han permitido establecer la relación entre el índice de refracción y otras medidas, de tal
manera, que algunos refractómetros tienen otros tipos de escalas. Ejemplos de ellos son los
que pueden determinar densidad (orinas y otros líquidos), proteínas totales, sólidos totales
etc. de tal manera que los refractómetros tienen una amplia aplicación tanto en la industria
(farmacéutica, alimenticia, lubricantes, manufactura de líquidos, petroquímica, solventes
químicamente puros, plásticos, biología marina) como en la medicina.
Se denomina índice de refracción al cociente de la velocidad de la luz en el vacío y la
velocidad de la luz en el medio cuyo índice se calcula. Se simboliza con la letra y se trata de
un valor adimensional.
n=c/v
donde:
c= la velocidad de la luz en el vacío
v= velocidad de la luz en el medio cuyo índice se calcula (agua, vidrio, etc.).
n= índice de refracción del medio.
El índice de refracción de un medio es una medida para saber cuánto se reduce la velocidad
de la luz (o de otras ondas tales como ondas acústicas) dentro del medio.
Método de estándar externo / Método de estándar interno
La estandarización es el proceso por el que se determina experimentalmente la relación entre
la señal y la cantidad de analito.
Los métodos de estandarización pueden dividirse en dos tipos: los que utilizan estándares
externos y los que utilizan estándares añadidos a la muestra.
 ESTÁNDARES EXTERNOS: son los que utilizan uno o varios patrones externos que
contienen concentraciones conocidas de analito. Se denominan así porque se separan
y analizan separadamente de las muestras.

 ESTÁNDARES AÑADIDOS: se dividen a su vez en dos categorías: los que se

denominan estándar interno y los de adición estándar. Los dos requieren añadir una
cantidad conocida de estándar a cada muestra que se analiza.

 2a) Estándar interno: requiere adicionar el patrón a la muestra, así como a la

disolución blanco. El estándar debe ser lo suficientemente diferente
químicamente al analito, para que cuando se le detecte en el mismo experimento,
no interfiera en el análisis y lo suficientemente similar para que tenga el mismo
comportamiento. El estándar interno puede añadirse antes de la preparación de la
muestra o antes de la medida.

 2b) Adición estándar: son cantidades fijas de analito que se añaden a cada
muestra, después de una medida inicial, la medida se vuelve a realizar después
de cada adición. Las adiciones y las medidas normalmente se llevan a cabo una
o dos veces, y por extrapolación, se averigua la concentración de analito presente
en la muestra al comienzo. La adición de los patrones, en este proceso, se realiza
después de haber completado la preparación de la muestra. Para estandarizar un
método se determina el valor de k (k = Sef/Cs, siendo Sef la señal y Cs la
concentración conocida del analito) midiendo la señal de una o más referencias,
para cada una de las cuales contiene una cantidad conocida de analito.
 MATERIAL / SUSTANCIAS / EQUIPO
 5 vasos de precipitados de 10ml
 Pipeta Pasteur
 Agua destilada
 Jugo natural y procesado
 Solución de sacarosa [20, 30, 40, 50 y 60%]
 Refractómetro para azucares
 Balanza analítica

METODOLOGÍA / DESARROLLO
1.- Identificar las partes principales refractómetro y describir las principales características y
funciones de cada uno de los componentes.
2.- Previo a su uso, verificar que el prisma del refractómetro se encuentre limpio.
3.- Calibrar el refractómetro, colocando una gota de agua destilada en el prisma y observar
por el ocular que la escala indique cero. En caso de no cumplir con esta especificación, ajustar
la escala a cero con el tornillo de calibración.
4.- Limpiar la superficie de la tapa y el prisma, con un trapo húmedo y déjese secar.
5.- Preparar 5 soluciones con sacarosa a diferentes concentraciones.
6.- Aplicar un poco de la muestra en la orilla inferior de la tapa, de tal forma que fluya sobre
la superficie por capilaridad.
7.- Orientar el refractómetro hacia una fuente de luz.
8.- Realizar la lectura de la muestra a través del ocular.
9.- Elaborar la curva de calibración correspondiente.
10.- En base a la curva de calibración elaborada determinar la concentración de sacarosa
contenida en una muestra de jugo natural comercial y en una muestra problema asignado por
el docente.
 RESULTADOS
A continuación, se muestran los cálculos para preparar la solución de sacarosa al 10, 15, 20,
30 y 40% en un matraz de 50 ml:
V= 50ml
C= 10, 15, 20, 30 y 40%
10%
𝑃= (50𝑚𝑙) = 5𝑔 𝑠𝑎𝑐𝑎𝑟𝑜𝑠𝑎
100%
15%
𝑃= (50𝑚𝑙) = 7.5𝑔 𝑠𝑎𝑐𝑎𝑟𝑜𝑠𝑎
100%
20%
𝑃= (50𝑚𝑙) = 10𝑔 𝑠𝑎𝑐𝑎𝑟𝑜𝑠𝑎
100%
30%
𝑃= (50𝑚𝑙) = 15𝑔 𝑠𝑎𝑐𝑎𝑟𝑜𝑠𝑎
100%
40%
𝑃= (50𝑚𝑙) = 20𝑔 𝑠𝑎𝑐𝑎𝑟𝑜𝑠𝑎
100%
Muestra °Brix
Sacarosa 40% 34
Sacarosa 30% 23.7
Sacarosa 20% 13.4
Sacarosa 15% 8.25
Sacarosa 10% 3.1
Jugo de limón (natural) 11
Jugo de manzana 10.3
(procesado)
1.- De acuerdo con el estudio realizado al refractómetro proporcionado en el laboratorio.
Identificar las partes del instrumento en el esquema siguiente y poner los nombres
correspondientes a cada una.

2.- Dibujar los siguientes componentes del refractómetro.

Escala del refractómetro de Azucares:

Prisma en donde se coloca la Muestra:

3.-Elaborar la curva de calibración de la sacarosa y determinar la concentración que

contienen sus muestras.

Muestra °Brix
Sacarosa 40% 34
Sacarosa 30% 23.7
Sacarosa 20% 13.4
Sacarosa 15% 8.25
Sacarosa 10% 3.1
 Curva de calibracion de la Sacarosa
40
35
y = 1.03x - 7.2
30 R² = 1
25
°BRIX

20
15
10
5
0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
CONCENTRACION (% P/V)

CUESTIONARIO
1. ¿Qué es refracción?
La refracción es el cambio de dirección y velocidad que experimenta una onda al pasar de un
medio a otro con distinto índice refractivo. Solo se produce si la onda incide oblicuamente
sobre la superficie de separación de los dos medios y si estos tienen índices de refracción
distintos. La refracción se origina en el cambio de velocidad de propagación de la onda
señalada.
2. ¿Qué es el índice de refracción?
Se denomina índice de refracción al cociente de la velocidad de la luz en el vacío(c) y la
velocidad de la luz en el medio(v), se simboliza con la letra n siendo un valor adimensional.
3. ¿Qué es el rayo crítico?
Es el fenómeno que se produce cuando un rayo de luz atraviesa un medio de índice de
refracción n2 menor que el índice de refracción n1 en el que éste se encuentra, se refracta de
tal modo que no es capaz de atravesar la superficie entre ambos medios reflejándose
completamente.
4. ¿Cuál es el principio de funcionamiento de un refractómetro?
El funcionamiento de los refractómetros se basa en la refracción de la luz, este fenómeno
cuando la luz pasa de un medio a otro es fácil de observar.
5. ¿En qué unidades se mide el índice de refracción?
Es un valor adimensional
 6. ¿En qué se diferencia un refractómetro clínico de uno de azúcares?
Un refractómetro clínico proporciona rapidez y la indicación exacta de niveles fluidos vitales
y el de azucares es utilizado para medir el índice de refracción de líquidos y sólidos
translucido
7. ¿Qué son los grados Brix?
Los grados Brix son una unidad de cantidad (símbolo °Bx) y sirven para determinar el
cociente total de materia seca (generalmente azúcares) disuelta en un líquido. Una solución
de 25 °Bx contiene 25 g de sólido disuelto por 100 g de disolución total.
Los grados Brix se cuantifican con un refractómetro, detectores de horquillas vibratorias o
con un caudalímetro másico.

CONCLUSIÓN
Tuvimos una pequeña complicación al momento de preparar las soluciones de sacarosa, ya
que el matraz que debimos de haber pedido era de 10ml, sin embargo, nosotros solicitamos
uno de 50ml, por lo que tuvimos que hacer cálculos para ese volumen, pero una ves ya
obtenidos los cálculos, nos pusimos a preparar las soluciones para pasarlos al refractómetro
y obtener lecturas en este. Tuvimos que calibrar primero el refractómetro para después
colocar las soluciones de sacarosa que preparamos e ir observando la refracción de cada uno,
como la de los jugos. Y así poder anotar nuestros resultados para la realización de la curva
de calibración.

BIBLIOGRAFÍA
Hérnandez Hérnandez, L., & Gonzáles Pérez , C. (2002|). Introducción al Análisis
Instrumental . Barcelona : Ariel 3.
Sierra Alonso , I., Gómez Ruíz , S., Pérez Quintanilla , D., & Morante Zarcero , S. (2010).
Análisis Instrumental . España : netbiblo.
Skoog, D., Holler, J., & Nieman, T. (2000). Principios de Análisis Instrumental . España:
McGraw Hill.