DISTRIBUCIÓN Y ELIMINACIÓN DE FÁRMACOS: PAPEL DE LAS PROTEÍNAS
PLASMÁTICAS E INFLUENCIA DEL pH EN LA ELIMINACIÓN
Dayana Parra a y Victoria Eugenia Salazar b
ayb
Universidad Icesi, Facultad de Ciencias Naturales, Programa de Química Farmacéutica, Laboratorio
de Biofarmacia y Farmacocinética
Santiago de Cali, Colombia
07 de Octubre de 2019
RESUMEN.
Palabras clave:
INTRODUCCIÓN Sin embargo, factores como la unión a las
La farmacocinética puede definirse como la proteínas y el pH, pueden afectar el ADME
medida y la interpretación formal de los cambios completamente. Puesto que, en la unión a las
en el tiempo de la concentración de fármaco en proteínas plasmáticas actúa como un reservorio
una o más regiones del cuerpo en relación con la del mismo dentro del organismo y disminuyendo
dosis (Rang, Ritter, Flower, & Henderson, 2016). las concentraciones plasmáticas finales en los
tejidos, y por ende, el volumen de la distribución.
La evolución en el tiempo de la concentración de Igualmente, el pH afecta la proporción de
fármaco después de la administración de la dosis fármaco libre puede atravesar las membranas,
depende de los procesos de absorción, debido a la ionización que puede llegar a ocurrir,
distribución, metabolismo y excreción, mejor y por tanto este tiene influencia en la
conocidos como ADME. Una vez se absorben los distribución y en la eliminación del fármaco.
fármacos, el medicamento se distribuye a los
distintos compartimentos o espacios, ya sea Por tanto, en esta practica se evaluara como la
disuelto o unido a proteínas glucoproteínas o unión a proteínas plasmáticas como la albumina,
lípidos y para alcanzar los sitios de acción, el la cual es la proteína plasmática as abundante en
principio activo debe atravesar membranas el torrente sanguíneo, puede llegar a influir en
celulares e incluso intracelulares para sufrir sus factores como el volumen de distribución.
últimas etapas de paso por el organismo, la Además, se estudiará la eliminación urinaria del
eliminación, que es básicamente la excreción del fármaco en personas voluntarias sanas, lo
medicamento, ya sea en metabolitos o sin anterior con el fin de conocer la importancia que
metabolizarse (Chávez-Favela, Hernández- el pH urinario tiene en el grado de ionización de
González, Díaz Torres, & Vázquez, 2014). los fármacos y, por consiguiente, en su
aclaramiento renal.
MATERIALES Y METODOS CALCULOS Y RESULTADOS
Inicialmente se estudió la influencia de la unión
de los fármacos a la albúmina plasmática sobre En la Tabla 1 se encuentran los resultados
la concentración de fármaco libre, en este caso obtenido para el estudio de la unión de proteínas
ácido salicílico (AS), en el plasma y sobre el plasmáticas sobre la concentración de fármaco
volumen de distribución y, por tanto, sobre los libre en el plasma y sobre el volumen de
distribución (Practica 1).
procesos de distribución y excreción. Para esto
se marcaron tres matraces (A, B y C). El matraz A
Estos resultados pertenecen a la absorbancia
que simuló ser un compartimento plasmático sin medida de las soluciones patrón problema 1 (sin
albúmina, y el matraz B simuló un albúmina; Tubo 3 ) y problema 2 (con albúmina;
compartimiento con albúmina. Se adicionó al Tubo 2 ), respectivamente. Las absorbancias se
matraz A, 20 mL de agua destilada; al B y al C, 20 midieron a una longitud de onda de 540 nm y el
mL solución de albúmina en agua destilada de Tubo 2 fue el usado como es el patrón.
concentración de 4 g/dl. Luego A, B Y C se
agitaron constantemente los durante diez Tabla 1. Absorbancias de muestras con silicatos, Practica 1.
minutos hasta conseguir una mezcla Tubo No. Absorbancia
homogénea. 2 0,334
3 0,720
Posteriormente, se usaron dos tubos de ensayo, 4 0,236
rotulados como D y E; y se adiciono 5 mL del
matraz B al tubo D y 5 mL del matraz C, al tubo E. Con la Ecuación (1) se procedió a calcular la
Luego, a cada tubo se le adicionaron 5 ml de la concentración de acido salicílico (AS) en las
solución de ácido tricloroacético al 10%, se agitó soluciones problemas 3 y 4. Los resultados de
vigorosamente y se centrifugó a 8000 rpm por 10 este procedimiento se encuentran en la Tabla 2.
minutos, que se formó un sobrenadante.
[𝐴𝑏𝑠 𝑝𝑟𝑜𝑏𝑙𝑒𝑚𝑎] 𝑚𝑔
[𝐴𝑆] = × 0,2 (1)
Subsiguientemente, se rotularon 5 tubos de [𝐴𝑏𝑠 𝑝𝑎𝑡𝑟ó𝑛 ] 𝑚𝐿
ensayo del 1 al 5 a los cuales se le adicionó 1 mL Tabla 2. Concentración de acido salicilico en soluciones
de nitrato férrico. De estos se empleó el tubo 1 problemas
como blanco para la medición de absorbancias
Concentración de ácido
de los tubos 2 y 3 los cuales correspondían a la Tubo No.
AAS (mg/mL)
solución patrón (con 1 mL de salicilato).
2 ---
Igualmente, se usó el tubo 5 como blanco para la 3 0,431
medición de la absorbancia del tubo 4 el cual 4 0,141
contenía 1 mL del sobrenadante de la solución D
correspondiendo a la solución problema 2.
Muestra de calculo
Finalmente, se realizó la medición de la 0,720 𝑚𝑔 𝑚𝑔
absorbancia basado en la formación de un [𝐴𝑆]𝑡𝑢𝑏𝑜 3 = × 0,200 = 0,431
0,334 𝑚𝐿 𝑚𝐿
complejo azul de ácido salicílico con el
compuesto ferroso lo cual se leyó a 540 nm.
Posterior a eso con la Ecuación (2) se realizo el
En cuanto al segundo ensayo en primer lugar,
cálculo del porcentaje de fármaco libre en el
matraz B. En este caso se usó como blanco el
tubo 3, puesto que el este no posee proteinas salicílico. Esto se determino mediante el
plasmaticas a las cuál puede unirse el fármaco, el siguiente procedimiento,
resultado de esto fue 32.8%. Cabe agregar que
TCP es el Tubo con proteina y TSP es Tubo sin 𝑄 = [𝐴𝑆]𝐴 × 𝑉𝑑𝐵
proteina. 𝑚𝑔
𝑄 = 0,431 × 70,8 𝑚𝐿 = 30,5 𝑚𝑔
[𝑇𝐶𝑃] 𝑚𝐿
%𝐴𝑆𝑙𝑖𝑏𝑟𝑒 = × 100 (2)
[𝑇𝑆𝑃]
En cuanto a la segunda practica
Muestra de calculo
ANALISIS DE RESULTADOS
0,413
%𝐴𝑆𝑙𝑖𝑏𝑟𝑒 = × 100 = 32,8% Los fármacos en la sangre existen en dos formas:
0,141
ligado o libre. Estas dependen de la afinidad
Luego, se realizó el calculo del porcentaje de específica del fármaco con el plasma; lo anterior,
fármaco unido a proteinas plasmaticas usando debido a que una proporción del mismo puede
Ecuación (3). De esto se obtuvo que el porcentaje unirse a las proteínas del plasma y el resto
de fármaco libre es de 67,2%. quedar libre, si la interacción molecular
[𝑇𝑆𝑃] − [𝑇𝐶𝑃] proteínica es reversible, entonces existirá un
%𝐴𝑆𝑢𝑛𝑖𝑑𝑜 = × 100 (3) equilibrio químico entre los estados libre y ligado
[𝑇𝑆𝑃]
(Brunton, Chabner, Knollmann, & Hilal-Dandan,
2018), tal:
Muestra de calculo
[𝐹] + 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛𝑎 ↔ [𝐹𝑈] (1)
0,431 − 0,141
%𝐴𝑆𝑢𝑛𝑖𝑑𝑜 = × 100 = 67,2% Para la evaluación de la unión del ácido salicílico
0,431
a proteínas plasmáticas se usó Albumina. Ya que,
Posteriormente, utilizando la Ecuación (4) se esta proteína plasmática es la más importante
calculó el volumen de distribución para los debido a su abundancia plasmática y además, es
matraces A y B. El resultado de esto fue un Vd de con la que se unen principalmente los fármacos
23,2 mL para A, mientras que para B fue de 70,8 ácidos, como el ácido salicílico. Cabe agregar,
mL. que la concentración de albumina adicionada en
el matraz B, fue de 4g/dL, debido a que esta es la
𝑄
𝑉𝑑 = (4) concentración plasmática a nivel fisiológico.
𝐶𝑝
En el procedimiento es fundamental agitar, esto
Muestra de cálculo con el fin de que todo el fármaco interaccione
𝑚𝑔 con la albúmina y se una a ella. Posteriormente,
𝑄 = 2,00 × 5,00 𝑚𝐿 = 10,0 𝑚𝑔 𝐴𝑆 se adicionó acido tricloroacético, esto debido a
𝑚𝐿
que este facilita la precipitación de las proteínas
Para el tubo 3 (Solución problema 1) debido a la desnaturalización de la misma,
permitiendo cuantificar el fármaco libre.
10,0 𝑚𝑔 𝐴𝑆 Sin embargo, para la cuantificación es necesaria
𝑉𝑑 = = 23,2 𝑚𝐿
0,431 𝑚𝑔/𝑚𝐿 la formación de un complejo coloreado. Este
complejo coloreado se forma debido a la
Por otra parte, para que la concentración del
reacción entre ácido salicílico y nitrato de hierro,
matraz B de fármaco libre sea similar a la del
matraz A se deben adicionar 30,5 mg de ácido en la cual forman cristales color purpura de
salicilato de hierro. Por tanto, estos son los aumenta transitoriamente la concentración de
responsables de permitir la formación del fármaco libre, lo que puede desencadenar
complejo. Cabe agregar que el complejo solo se efectos tóxicos por sobredosis, según Rang et al.,
forma con la fracción libre del fármaco. 2016.
En cuanto a los resultados obtenidos en la Por otra parte, se determinó el volumen de
práctica , como se observa en la Tabla 2; el Tubo distribución (Vd), el cual está definido en la
3 (solución sin albumina) obtuvo la mayor Ecuación (4), aquí se considera el cuerpo como
concentración de fracción fármaco libre (0,431 un compartimento único homogéneo. Por tanto,
ppm) , debido a que no había albumina a la cual los fármacos que se unen ampliamente a las
unirse; caso contrario al del Tubo 4, puesto que proteínas plasmáticas pero no están unidos a los
si había presencia de albumina, por tanto la componentes del tejido, el volumen de
fracción libre se ve diezmada (0,141 ppm), distribución se acercará al del volumen
debido la unión del fármaco a las proteínas plasmático (Brunton et al., 2018), además, el
plasmáticas. volumen de distribución es estimativo porque no
refleja con exactitud dónde se encuentra el
Luego, se obtuvo que el porcentaje de fármaco
fármaco. Por tanto, si la Cp es baja el Vd será alto,
que se une a proteínas plasmáticas fue de 67,2%.
indicándonos que está acumulado en algún
Por tanto, el equilibrio planteado en el esquema
tejido; por el contrario, si el fármaco está unido
1, favorece a fármaco libre + proteína. De igual
a proteínas plasmáticas la Cp será alta Vd será
forma, experimental y teóricamente, la reacción
bajo.
se ve favorecida hacia esta dirección, y el
porcentaje de unión de ácido salicílico a Al contrastar lo anterior con lo obtenido en la
albumina obtenido está dentro del rango teoría, en lo cual los resultados fueron, un Vd en
teórico, es decir, de 50% al 90%1. Aunque, el Tubo 3 (solución sin albumina) de 23,2 mL y
también debe considerarse que este de 70,8 mL en el Tubo 4 (solución con albumina).
experimento fue in vitro y por tanto, no se Se concluye, que los resultados obtenidos son
consideran factores fisiológicos como la contrarios a la teoría.
temperatura, el pH, la vía de administración y el
Esto se debe se debe a que fisiológicamente la
modelo compartimental, etc.
concentración plasmática depende del equilibrio
Es de vital importancia conocer el porcentaje de entre la fracción unida del fármaco y la libre.
unión a las proteínas, puesto que esto establece Mientras que, de manera experimental, sólo se
de manera directa los efectos farmacológicos del determinó la fracción libre del fármaco, ya que al
medicamento. Ya que, si el médico administra un agregar ácido tricloroacético y centrifugar la
fármaco y desea evitar la unión a proteínas para proteína, esta se precipita en el fondo debido a
lograr un efecto terapéutico, es factible aplicar la desnaturalización, y esto hace que una
otro que tenga más afinidad por las proteínas, pequeña parte del fármaco que estaba unido a la
con lo que es posible saturar los sitios de unión y proteína plasmática quede en forma de fármaco
dejar libre el fármaco (Chávez-Favela et al., libre produciendo un Cp menor y por ende un
2014). Sin embargo, debe considerar el aumento de Vd en el Matraz B.
desplazamiento de un fármaco de sus sitios de
unión en el plasma o los tejidos, puesto que esto
1
Información tomada de las bases de datos
Micromedex y UpToDate.
REFERENCIAS
Brunton, L. L., Chabner, B. A., Knollmann, B. C.,
& Hilal-Dandan, R. (2018). Goodman &
Gilman’s. The Pharmacological Basis of
Therapeutics (13th ed.). Ciudad de México:
McGraw-Hill Global Education Holdings.
Chávez-Favela, A. F., Hernández-González, A.,
Díaz Torres, J. A., & Vázquez, E. V. (2014).
Farmacología general. Una guía de
estudio. In Farmacología general. Una guía
de estudio (1st ed., p. 257). Ciudad de
México: MacGrawn Hill.
Rang, Ritter, Flower, & Henderson. (2016). Rang
y Dale. Farmacología (8th ed.). Elsevier.
