FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
PROCESO DE DISEÑO CURRICULAR
LABORATORIO DE PARASITOLOGÍA
Código: FCQ-P05-F06; Versión: 01; 15 de enero de 2017
Practica Título de la Diagnóstico directo de plasmodium spp
Nº01 Práctica:
Integrantes: Grupo N.º
Lizbeth Córdova Día: miércoles
Karen Correa Horario: 15:00-17:00
Fabricio Jiménez Fecha:
Jeyke Viteri 24/04/2019
INFORME DE LABORATORIO
1. Introducción:
La malaria es una enfermedad del género Plasmodium, siendo 4 las especies que pueden
parasitar al hombre: P. falciparum, P. vivax, P. ovale Y P. malariae. Desde que se describió
por primera vez en 1980, el diagnostico de esa enfermedad se ha realizado mediante la
observación de distintas formas del parásito en el examen microscópico de extensiones de
sangre periférica teñidas con diversos colorantes. Sin embargo, las parasitemias bajas han
impulsado el desarrollo de nuevas técnicas más sencillas. (Bhandary,2011)
Según un importante organismo de salud de los Estados Unidos, en Ecuador todas las
provincias ubicadas a lo largo de la frontera oriental y de la costa del Pacífico incluyendo
Cañar, Cotopaxi, El Oro, Esmeraldas, Guayas, Los Ríos, Manabí, Morona-Santiago, Napo,
Pastaza, Pichincha, y Zamora-Chinchipe son áreas de riesgo. No así Quito y sus áreas
circundantes, ni las zonas turísticas de la Sierra Central, ni las Islas Galápagos
Examen de muestras de sangre periférica: Realización de frotis y la gota gruesa que
permite analizar una mayor cantidad de sangre, facilitando la detección de parasitemias
bajas y un ahorro de tiempo en el examen, aunque al romperse los eritrocitos resulta difícil la
identificación de especie
Tinciones de sangre periférica. Son muchas las tinciones que se aplican para el diagnóstico
del paludismo, desde las convencionales de Giemsa, May-Grünwald-Giemsa, Field y
Leishman hasta las fluorescentes con naranja de acridina o el sistema QBC. (Montoya
E.,2008)
Serología: La detección de anticuerpos anti-P. falciparum en el suero de los pacientes tiene
una baja sensibilidad para el diagnóstico de malaria. Se utiliza en determinados casos en los
que la microscopía es negativa por la toma de medicación, o en los bancos de sangre. La
técnica habitual es una inmunofluorescencia.
Técnicas moleculares: Se utiliza una técnica de PCR múltiple que permite la detección del
DNA genómico de las cuatro especies parasitarias. La amplificación por PCR permite incluso
la detección de 3-4 parásitos/µ l), así como la determinación de infecciones mixtas
Inmunocromatografía: Detección del HRP-2. La proteína-2 rica en histidina (HRP-2) se
secreta por P. falciparum a la sangre, lo que permite su detección mediante la captura
antigénica con anticuerpos específicos y técnicas de inmunocromatografía. Con posterioridad
se han desarrollado otros métodos que detectan tanto el antígeno HRP-2 de P.
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falciparum como el antígeno panmalárico que se expresa en las fases sanguíneas de P.
falciparum y P. vivax y, probablemente, también de P. ovale y P. malariae
Detección del lactato deshidrogenasa (LDH) parasitaria. Se basa en la detección de esta
enzima parasitaria, común a las cuatro especies de Plasmodium. (Turrientes M,)
2. Objetivos:
● Conocer las diferentes técnicas de diagnóstico para el género Plasmodium.
● Identificar al microscopio los diferentes estadios del género Plasmodium:
formas anulares, trofozoítos, esquizontes y gametos
3. Métodos.
4. Discusión de resultados:
Dentro del laboratorio el método más utilizado para la examinación y diagnóstico de malaria es a
través de la tinción y extensión fina de muestra de sangre, de tal manera que los parásitos
puedan ser observados una vez que la sangre se encuentre fija, este método de tinción, como lo
señala Turrientes (2000), se lo lleva a cabo principalmente con la tinción de Giemsa en el cual se
procede a fijar el frotis con metanol por 5 min, se tiñe con colorante de Giemsa al 10% por 10
min y finalmente se realizan los respectivos lavados con agua tamponada de pH 7,2 a la vez que
se deja secar, tras realizar todos estos pasos inmediatamente se lleva la muestra para ser
observada en el microscopio, cabe mencionar que no es necesario el uso del cubreobjetos
debido a que la fijación mantiene a la muestra y al tratarse de muestra sanguínea se debe
aplicar aceite de inmersión para observar con el lente de 100x.
Es importante tomar en cuenta que la correcta tinción de la muestra permitirá observar
claramente los estadíos parasitarios, por lo que el Instituto Nacional de Salud de Lima (2003)
indica que antes de teñir hay que asegurarse que el frotis se encuentre seco y evitar que la
solución madre del colorante entre en contacto con el agua para que no se deteriore; si se toman
en cuenta estas descripciones el colorante podrá actuar de forma eficaz sobre la muestra y de
esta manera los estadíos parasitarios podrán ser distinguidos.
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Otra forma rápida y precisa del diagnóstico de Malaria es la detección de antígenos parasitarios
que son pruebas muy fáciles de realizar, rápidas, sensibles y no precisan microscopio, sin
embargo, de ninguna forma sustituyen al frotis y la gota gruesa, ya que tienen falsos negativos y
no son cuantitativos, así, pueden pasar por alto casos de malaria, retrasando el diagnóstico. Una
buena combinación de antígenos parasitarios como pLDH y HRP-2 constituye una buena
probabilidad de obtener mejores pruebas rápidas para el diagnóstico de malaria, sin embargo
Turrientes, (2000) afirma que existe una gran diferencia entre ellas: la proteína-2 rica en histidina
(HRP-2) se secreta por P. falciparum a la sangre, lo que permite su detección mediante la
captura antigénica con anticuerpos específicos, mientras que lactato deshidrogenasa (LDH)
parasitaria se basa en la detección de esta enzima parasitaria, común a las cuatro especies de
Plasmodium. Cabe mencionar que no siempre estas pruebas nos van a ayudar a realizar un
diagnóstico perfecto, por ello hay que diferenciar que la especificidad es similar a las técnicas
que detectan HRP-2, pero la sensibilidad es un poco inferior (88-90%), disminuyendo ésta a
medida que la parasitemia baja.
Ahora bien, comparando este diagnóstico con el frotis se deduce que tiene una gran ventaja ya
que es de fácil realización, barata y da una diferenciación de las especies cuantitativa, sin
embargo, es un diagnóstico que posiblemente el personal experto no detecta parasitemias bajas
ni la detección de parasitemias mixtas. (Turrientes, 2000); sí mencionamos el diagnóstico
inmunocromatográfico, éste en cambio no requiere personal especializado, es útil cuando la
microscopía es negativa y existe una alta sospecha clínica de malaria.
5. Conclusiones:
Se logró conocer las técnicas para identificar Plasmodium, siendo utilizada la
observación microscópica ya sea en un frotis sanguíneo o en gota gruesa con la
tinción de Giemsa, además se conoció de manera teórica que es posible identificar
Plasmodium mediante PCR o serología de anticuerpos anti-P. falciparum.
Previamente antes del realizar el diagnóstico microscopio se estudió cada estadio
morfológico género Plasmodium siendo éstos glóbulo rojo infectado, fase de anillo
(trofozoíto precoz), trofozoíto tardío, esquizonte maduro, gametocitos, sin embargo,
durante la práctica se logró sólo identificar esquizonte maduro, trofozoíto maduro de
P. vivax y fue de fácil identificación gracias a sus características morfológicas que es
grande, ameboide y con pigmento en forma de bastones finos.
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6. Cuestionario:
1. Dibujar los principales estados morfológicos de P. vivax y P. falciparum en
sangre periférica.
P. Vivax
Trofozoíto Trofozoíto Micro Macro
Esquizontes Gametocito
s jóvenes s maduros Gametocito
P. Falciparum
Trofozoítos Trofozoítos Micro
Esquizontes Gametocitos
jóvenes maduros Gametocito
2. Realizar una tabla resumida acerca de las principales diferencias morfológicas
de las especies Plasmodium vivax y Plasmodium falciparum en sangre periférica.
Plasmodium vivax Plasmodium falciparum
● El eritrocito parasitado es hipertrofiado, ● El eritrocito parasitado posee
deformado y pálido tamaño normal
● Los trofozoítos jóvenes son grandes ● Los trofozoítos jóvenes
y anillados son pequeños y ⅙ de
● Los trofozoítos adultos son eritrocito
grandes, ameboides y ⅔ partes del ● Los trofozoítos adultos rara
eritrocito vez salen a sangre periférica
● Esquizontes son grandes, ameboides y ● Gametocitos de forma semilunar
originan 16 merozoitos o salchicha
● Gametocitos son grandes y esféricos
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7. Bibliografía:
Turrientes M (2010) “Aspectos prácticos del diagnóstico de laboratorio y profilaxis de la
Malaria” recuperado
de:https://www.seimc.org/contenidos/ccs/revisionestematicas/parasitologia/malaria.pdf
Montoya E. (2008) “Concordancia entre gota gruesa, inmunocromatografía y
reacción en cadena de la polimerasa para el diagnóstico de malaria” recuperado
de https://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/96
Nithish Bhandary (2011) “Trombocitopenia en la malaria “recuperado de
http://www.biomedres.info/biomedical-research/thrombocytopenia-in-malaria-a-clinical-study.html
Turrientes, C. (2015). Unidad de Medicina Tropical y Parasitología Clínica. Obtenido de
https://www.seimc.org/contenidos/ccs/revisionestematicas/parasitologia/malaria.pdf
OMS, P. M. (2006). Uso de las pruebas en el diagnóstico rápido de la Malaria. Obtenido de
http://www.wpro.who.int/publications/docs/Malaria_RDT_2ndEd_Spanish.pdf
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