Seminario III

Cadena Respiratoria y Fosforilación Oxidativa

I) Cadena Respiratoria:

1 Nombre las Características generales de la Cadena Respiratoria (CR)

 Es un conjunto de cuatro (4) complejos enzimáticos firmemente unidos dentro de
la MMI, además de Ubiquinona y Citocromo c, actuando todos en estrecha
asociación, como transportadores electrónicos.
 El nombre de Cadena Transportadora de Electrones(CTE) hace énfasis en el
hecho de que el sistema es una cadena de reacciones redox en la que hay interacción
sucesiva de transportadores que transfieren electrones.
 La denominación de CADENA RESPIRATORIA (CR) hace referencia a que el
transportador final de la cadena transfiere los electrones al oxígeno, es decir el
sistema consume oxígeno.
 La CR REOXIDA las coenzimas reducidas NADH y FADH2, y los electrones que
estas transportan, son conducidos al Oxígeno (O2), el ultimo aceptor de electrones.
 Este proceso es esencial para el metabolismo ya que proporciona NAD+ y FAD que
se puede dirigir a las vías metabólicas que los requieren para seguir funcionando,
como por el ejemplo, el Ciclo del Ácido Cítrico.
 Las Reacciones de Oxidorreducción que se dan en la CR, liberan energía la cual
se utiliza para producir ATP.
 Existen 2 puntos de entrada a la CTE:
Un Punto de entrada para la coenzima NADH (el complejo I) y
Un Punto de entrada para la coenzima FADH2 (la CoQ)
 Las reacciones de la CTE se ordenan según el valor de sus potenciales de
reducción, encontrándose el menos positivo en el extremo izquierdo ( - 0,32 V), y
el más positivo a la derecha (+0,82 V) , por tanto los electrones fluyen
sucesivamente a lo largo de la cadena hasta que finalmente son transferidos al
oxigeno (O2).
Por tanto los electrones pasan a través de los 4 complejos desde los potenciales de
reducción estándar más bajos hacia los más altos.
2 Describa los componentes de la Cadena Respiratoria

(I) Flavoproteínas (fp)

En la CR hay 2 flavoproteínas, estas contienen FMN o FAD fuertemente unidos, las
cuales no se disocian de la enzima durante su oxidación y reducción, por lo que se
comportan como grupos prostéticos. Estas son:
1. La enzima: NADH deshidrogenasa (también llamada NADH-Q oxidorreductasa o
Complejo I) , contiene FMN que recibe los hidrógenos del NADH.
2. La enzima: Succinato deshidrogenasa (también llamada Complejo II), contiene
FAD que recibe los hidrógenos del Succinato.
Las dos enzimas están fijadas a la MMI.
(II) Proteínas ferrosulfuradas: Proteínas con Centros hierro-azufre (Fe-S)

Fe2S2 Fe4S4
Los Centros hierro-azufre, son grupos prostéticos no hemo, consistiendo de átomos
de Fe unidos a S inorgánico y a 4 átomos de S de los residuos cisteína de la proteína.
Éstos centros Fe-S aceptan y liberan electrones, uno a la vez.
(III) Coenzima Q
También nombrada como, Ubiquinona, y abreviada: Q, CoQ10
1. La estructura de la Ubiquinona consiste en una 1,4 benzoquinona que contiene en
los mamíferos una cadena lateral hidrófoba de 10 unidades de isopreno (Q ), que
10
la hace Soluble en los fosfolípidos en la MMI y, es capaz de difundir y moverse
libremente a través de ésta.
2. Se le llama Ubiquinona ( por su ubicuidad , es una quinona que se encuentra en
todas partes )
3. Los animales pueden sintetizarla
4. Es el único transportador de electrones de la CR que no es una proteína.
5. Es un transportador de átomos de hidrógeno (protones + electrones), desde las
flavoproteínas Complejo I y II, hacia los citocromos.

(IV) Los Citocromos

 Un citocromo es una proteína transportadora de electrones que contienen un
grupo prostético hemo, con un átomo de hierro.
 El átomo de hierro del hemo sufre una oxidorreducción reversible:
 Reducción
+3 +2
Fe + 1e Fe
Hierro oxidado Hierro reducido
(férrico) - 1e (ferroso)
Oxidación

 Hay 5 tipos de citocromos en la CR.

 Los electrones se mueven a través de los 5 tipos de citocromos de la CR en el
siguiente orden:
 b c1 c a a3
 La unidireccionalidad del flujo de electrones en la CR esta dictada por la propiedad
de los citocromos a tener diferentes E’o
A excepción de la CoQ y el Citocromo c el resto de los transportadores electrónicos se
asocian en forma de grandes Complejos enzimáticos
3 Describa la ubicación y el ordenamiento de los componentes de la Cadena
Respiratoria
 4 Explique ampliamente la reacción del complejo I de la Cadena Respiratoria

Reacción catalizada por el Complejo I, NADH deshidrogenasa

Cataliza simultáneamente dos procesos acoplados:
1. La transferencia exergónica de 2e- y 1H+ (un ion hidruro) del NADH y 1 H+ (un
protón) de la matriz, hasta la Ubiquinona (Q).
Los 2 electrones fluyen desde el NADH al FMN y luego a FeS que puede aceptar los
electrones, pero uno cada vez, y de aquí hasta la Q (Ubiquinona).
2. Ocurre la transferencia endergónica de 4 protones de la matriz hacia el EIM. Por
tanto, el complejo I es una bomba de protones impulsada por la energía de la
transferencia de los 2 electrones.
5 Explique ampliamente la reacción del complejo II de la Cadena
Respiratoria

Reacción catalizada por el Complejo II, o Succinato deshidrogenasa

1. La Succinato deshidrogenasa, que comprende el Complejo II de la CR, es la
enzima que oxida una molécula de Succinato a Fumarato en el Ciclo del Ácido
Cítrico, y se encuentra unida a la membrana interna mitocondrial.
2. Los 2 electrones liberados en la conversión de Succinato a Fumarato se
transfieren primero al FAD, luego a FeS, y finalmente a la CoQ, formando CoQH2 .
3. Aunque el G’°, para esta reacción es negativa, la energía liberada NO es
suficiente para el bombeo de protones. Por lo tanto NO hay translocación de los
protones a través de la membrana por el Complejo II.
 La Succinato Deshidrogenasa, la Glicerol-3P Deshidrogenasa, y la EFT-Q
Oxidorreductasa, todas estas transfieren, electrones a la Coenzima Q, pero no
abarcan la membrana y no tienen un mecanismo de bombeo de protones.

6 Explique ampliamente la reacción del complejo III de la Cadena

Respiratoria

El Complejo III (CoQ - citocromo c reductasa) recibe electrones de los Complejos I y II. A
partir de este paso se transportan electrones, y quedan libre los H+. El Complejo III
Involucra a los citocromos y la energía aportada por este Complejo para el bombeo de
protones es suficiente para formar ATP

Representación de los complejos que integran a la cadena respiratoria. Se indica la dirección del transporte
de e- a través de los complejos y de los H+ desde la matriz al espacio intermembrana, y desde este
nuevamente a la matriz a través de la ATPasa (Complejo V).

7 Explique ampliamente la reacción del complejo IV de la Cadena

Respiratoria

El Complejo IV (citocromo oxidasa) cataliza la formación de H2O a partir de los 2

e-, ½ O y 2H+. Este complejo contribuye con la generación de un gradiente de
protones suficiente para generar un ATP. Se debe Observar que el oxígeno se
reduce a agua, mientras la energía liberada por los electrones permite la
fosforilación del ADP a ATP: el proceso se denomina fosforilación oxidativa.
 8 Calcule la cantidad de energía liberada en las reacciones de la Cadena
Respiratoria (rendimiento energético de la Cadena Respiratoria).

9 Explique los efectos que producen los Inhibidores de la Cadena

Respiratoria, sitios de inhibición y ejemplos de inhibidores.

Su principal función es el inhibir el transporte de electrones en la cadena de la

respiración. Los inhibidores del transporte de electrones más comúnmente usados
pueden reunirse en tres grupos principales según el sitio de la cadena respiratoria
donde actúan:
Sobre la NADH-deshidrogenasa, bloqueando la transferencia de electrones entre
la flavina y la ubiquinona. (Inhibidores del sitio I)
Barbitúricos, como el amobarbital
Piericidina A (antibiótico)
Rotenona (insecticida)
Actúa bloqueando la transferencia de electrones entre el citocromo b y el
citocromo c1. (inhibidores de sitio III)
Antimicina
Actúan sobre el Hemo a3 de la citocromooxidasa impidiendo su interacción con el
oxígeno (inhibidores de sitio IV)
Cianuro
Monóxido de carbono
H2S
Ejemplos:

Complejo I

El "complejo I" o NADH deshidrogenasa o NADH:ubiquinona oxidoreductasa (EC

1.6.5.3) capta dos electrones del NADH y los transfiere a un transportador
liposoluble denominado ubiquinona (Q). El producto reducido, que se conoce con
el nombre de ubiquinol (QH2) puede difundir libremente por la membrana. Al
mismo tiempo el Complejo I transloca cuatro protones a través de membrana,
produciendo un gradiente de protones.
El flujo de electrones ocurre de la siguiente forma:
El NADH es oxidado a NAD+, reduciendo al FMN a FMNH2 en un único paso que
implica a dos electrones. El siguiente transportador de electrones es un centro Fe-
S que sólo puede aceptar un electrón y trasferirlo a la ubiquinona generando una
forma reducida denominada semiquinona. Esta semiquinona vuelve a ser reducido
con el otro electrón que quedaba generando el ubiquinol, QH2. Durante este
proceso, cuatro protones son translocados a través de la membrana interna
mitocondrial, desde la matriz hacia el espacio intermembrana.
Complejo II
El "Complejo II" o Succinato deshidrogenasa; [1] EC 1.3.5.1 no es una bomba de
protones. Además es la única enzima del ciclo de Krebs asociado a membrana.
Antes de que este complejo actúe el FADH2 se forma durante la conversión de
succinato en fumarato en el ciclo del ácido cítrico. A continuación los electrones
son transferidos por medio de una serie de centros FeS hacia Q. EL glicerol-3-
fosfato y el acetil-CoA también transfieren electrones a Q mediante vías diferentes
en que participan flavoproteínas.
Complejo III
El "complejo III" o Complejo citocromo bc1; EC 1.10.2.2, obtiene dos electrones
desde QH2 y se los transfiere a dos moléculas de citocromo c, que es un
transportador de electrones hidrosoluble que se encuentra en el espacio
intermembrana de la mitocondria. Al mismo tiempo, transloca cuatro protones a
través de la membrana por los dos electrones transportados desde el ubiquinol.
Complejo IV
El complejo IV o Citocromo c oxidasa; EC 1.9.3.1 capta cuatro electrones de las
cuatro moléculas de citocromo c y se transfieren al oxígeno (O2), para producir
dos moléculas de agua (H2O). Al mismo tiempo se translocan cuatro protones al
espacio intermembrana, por los cuatro electrones. Además "desaparecen" de la
matriz 2 protones que forman parte del H2O.

II) Fosforilación Oxidativa :

1. Explique el Acoplamiento entre el funcionamiento de la Cadena Respiratoria
y la Fosforilación Oxidativa, de acuerdo a la Teoría Quimiosmótica de Peter
Mitchell.

Propone esencialmente que la mayor parte de la síntesis de ATP en la respiración

celular, viene de un gradiente electroquímico existente entre la membrana interna
y el espacio intermembrana de la mitocondria, mediante el uso de la energía de
NADH y FADH2 que se han formado por la ruptura de moléculas ricas en energía,
como la glucosa.

Las moléculas como la glucosa, son metabolizadas para producir acetil-CoA como
un intermediario rico en energía. La oxidación de acetil-CoA en la matriz
mitocondrial está acoplada a la reducción de una molécula transportadora como
NAD+ y FAD.2

Los transportadores traspasan electrones a la cadena transportadora de

electrones en la membrana mitocondrial interna, que luego los traspasan a otras
proteínas en la cadena transportadora. La energía disponible en los electrones se
usa para bombear protones desde la matriz, a través de la membrana mitocondrial
interna, guardando energía en forma de un gradiente electroquímico
transmembrana. Los protones se devuelven a través de la membrana interna,
mediante la enzima ATP-sintasa. El flujo de protones de vuelta a la matriz
mitocondrial mediante la ATP-sintasa, provee de suficiente energía para que el
ADP se combine con fósforo inorgánico para formar ATP. Los electrones y
protones en la última bomba proteica de la cadena transportadora son llevados al
oxígeno (O2) para formar agua (H2O)

III Fosforilación Oxidativa:

6. Describa la regulación de la Cadena Respiratoria y Fosforilación

Oxidativa

El control de la velocidad de la Fosforilación oxidativa esta ligada a la

demanda de energía celular.
El consumo de O2 (tasa respiratoria) esta controlado por la concentración
de ADP, la cual es una medida del estado energético de la célula.

La velocidad de la respiración celular aumenta si la concentración de ADP

es alto, como sucede cuando los requerimientos de energía por la celular
son altos, hay un aumento de la velocidad en la degradación ATP a ADP
+Pi, por tanto hay mayor disponibilidad de ADP para la Fosforilación
oxidativa y aumenta la velocidad de la Cadena respiratoria, y la fosforilación
de ADP, lo que da lugar a la regeneración de ATP.
 El ATP de forma a la misma velocidad en que es requerido por las
actividades celulares.

7. Explique los efectos que producen los Inhibidores de las

Translocasas de Nucleótidos de Adenina (ANT).

Adenina- Nucleótido Translocasa.

Es una proteína transportadora. El ADP es cotransportado con el ATP en
direcciones opuestas por esta proteína. (El ADP hacia dentro y el ATP hacia fuera
de la matriz).
Este translocador es inhibido por un glucósido tóxico llamado Atractilósido (de la
planta Atractylis gummifera) y el Ácido bongkrékico (Antibiótico producido por un
hongo que descompone la leche de coco).

8. Explique los efectos que producen los Inhibidores de la Fosforilación

Oxidativa, sitios de inhibición y ejemplos de inhibidores.
La oligomicina un antibiótico producido por un hongo se une a la proteína F0
de la ATP sintasa, impidiendo el normal movimiento de protones hacia la
matriz.
Bloque completamente la oxidación y la fosforilación en las mitocondrias
Intactas.

9. Explicar el mecanismo de acción y los efectos que producen los

desacopladores de la Cadena Respiratoria con la Fosforilación
Oxidativa. Desacopladoresquímicos utilizados experimentalmente
(DNP) y desacopladoresfisiológicos (proteínas
desacopladoras,termogenina o UCP1). Explique la importancia de este
proceso para los animales.

Los desacopladores son compuestos que aumentan la permeabilidad de la

membrana a los protones.
Mecanismo de acción:
Los desacopladores tienen como efecto desconectar la fosforilación oxidativa de la
transferencia de electrones.

Por tanto puede funcionar la cadena respiratoria sin tener lugar la síntesis de
ATP, en esta situación la energía que normalmente se hubiera conservado en la
formación del ATP, se pierde ahora en forma de calor.

Ejemplo de dos desacopladores químicos:

 2,4 - dinitrofenol (DNP)

 Carbonil-cianuro-p-trifluorometoxifenilhidrazona (FCCP)

 Dicumarol

Ambos son ionóforos, ácidos liposolubles débiles que se unen a los H+ en el

EIM, difunden a través de la membrana, y los liberan en la matriz.

Efectos fisiológicos de los desacopladores :

1. Aumenta la Tasa metabólica,

2. Aumenta el Consumo de oxigeno

3. Aumenta la Producción de calor (fiebre).

4. Causa Perdida de Peso

“Estos dan por resultado una respiración no controlada, La concentración de ADP

ya no limita la velocidad de la respiración”

Desacoplamiento fisiológico entre la Cadena respiratoria y la

Fosforilación Oxidativa

Termogénesis adaptativa condiciones en las que ocurre:

 En respuesta al frió

 En periodos de Hibernación

 Ingestión de alimentos
Lugar: exclusivamente en tejido adiposo marrón

En animales

Generación de calor (termogénesis) en el Tejido adiposo marrón. Las Mitocondrias

desacopladas del tejido adiposo marrón producen calor, bajo control hormonal,

Para mantener la temperatura corporal en los:

1. Animales Recién nacidos de algunas especies, que nacen sin pelaje

(incluyendo al humano)

2. Animales hibernantes ( distribución de la grasa marrón: en su cuello y parte

superior de la espalda)

3. Animales de hábitat frió

Seres humanos adultos, en poca cantidad (distribución de la grasa marrón:

parte dorsal del tórax, parte inferior de los omóplatos, alrededor de las
adrenales, riñones, corazón, región perianal e inguinal).