Prueba Medio de Sustrato Enzima/Vía Productos Indicador Interpretación Inoculaci

cultivo Metabólica degradación ón

Hidrolisis de
almidón Agar Malto triosas, Lugol Estría
almidón Almidón Amilasa maltosa, recta
glucosa,
dextrinas, El Lugol con el almidón
etc. forman un complejo color
café-púrpura
que desaparece cuando el
almidón ha sido degradado.

Degradación de la Peptonas,
caseína Agar Caseína péptidos, No requiere Estría
Las proteasas son excretadas
Leche Caseinasa aminoácidos. al medio para la degradación recta
Descrem de proteínas, la caseína es la
ada
proteína de la leche que le
confiere el color blanco,
cuando la caseína es
hidrolizada desaparece el
color blanco alrededor del
crecimiento microbiano.
Hidrólisis de Biliverdina Por
sangre Agar Hemoglobina Hemolisina (degradación No requiere agotamie
Sangre parcial) o nto en
bilirrubina estría
(degradación
total)

Hidrólisis de DNA Agar DNA DNA DNAsa Nucleótidos y Verde de metilo, Estría
nucleósidos HCl recta

Licuefacción de la Gelatina Gelatina Gelatinasa Aminoácidos No requiere o La gelatina Suspenci

gelatina Nutritiva (proteína) (Proteasa, puede emplearse el es una ón
exoenzima) carbón activado en proteína
polvo que tiene la
capacidad
de gelificar,
cuando es
hidrolizada por la gelatinasa
en los aminoácidos que la
componen pierde su
característica de gelificar. Se
 pueden emplear varios
medios que permiten la
visualización macroscópica
como la gelatina adherida a
carbón activado.
Kygler Agar Glucosa 0.1%, Vía Ácidos mixtos Rojo de fenol y Estría
hierro de lactosa 1% y Fermentati y H 2S. sales de Fe2+ recta
Kligler Tiosulfato o va y
grupos –SH Enzimas:
de la cisteína Tiosulfato
reductasa y
cisteína
desulfurilas
a

Prueba de Rojo RM-VP Glucosa Fermentaci Acido Solución de Rojo de Fermentación Suspensi
ácido mixta:
de metilo ón ácida o orgánicos o Metilo, Alfa Naftol Los productos ón
neutra acetoína y KOH 40%. finales son
ácidos
orgánicos que
provocan un
descenso
brusco del pH inicial del medio (viraje
del indicador de amarillo pH por
encima de 5,1) y rojo (pH por debajo de
4,4). Fermentación butilenglicólica: en
ésta, parte del piruvato se metaboliza
produciendo cantidades menores de
ácido láctico, fórmico y acético, la
mayor parte del piruvato se condensa
formando acetilmetilcarbinol, que es
reducido a 2,3-butilenglicol, productos
que son neutros. Para determinar la
 presencia de los productos neutros
(prueba de Voges-Proskauer): Se agrega
un poco de α-naftol al 5% en etanol
(medio adquiere aspecto lechoso),
luego se le añade (KOH 40%) que
desaparece el aspecto lechoso, se agita
fuertemente. (Prueba positiva color
rosado - violáceo en la parte superior
del tubo; Prueba negativa no tiene
coloración).
Caldo Rojo de Medio carbohidratos enzimas de Acido rojo de fenol Si Suspensi
fenol más base rojo la glucólisis pirúvico hay ón
carbohidratos de fenol

fermentación del
carbohidrato el caldo
tornara de color amarillo ,
puede observarse gas en
forma de burbujas. Si no hay
fermentación el caldo tiene
una coloracion naranja -
rojiza.
Oxidación/Ferme Hugh and Carbohidrato Vías Acido Azul de bromotimol Picadura
ntación Leifson s fermentati pirúvico
va y/u
oxidativa
Descarboxilasas LIA o M Aminoácidos Descarboxil Amoníaco Púrpura de Los aminóacidos al Picadura
IO (lisina, asas bromocresol perder el grupo
carboxilo se
ornitina o convierten en
arginina) diaminas lo que
incrementa el pH del medio y el
indicador (púrpura del
 bromocresol) vira a violeta. Las
descarboxilasas son útiles en la
diferenciación de enterobacterias
Prueba de SIM SIM Tiosulfato o Tiosulfato H2S e Indol. Sales de Fe2+ y p- Picadura
(Sulfhídrico Indol (medio grupos –SH reductasa, Dimetilaminobenza
Movilidad) semisólid de la cisteína cisteína ldehído (DMABA)
o) y triptófano. desulfurilas
ay
tiptofanasa
En presencia de tiosulfato en el medio o la
degradación de proteínas liberando
aminoácidos azufrados, algunos
microorganismos forman H2S gaseoso por
medio de las enzimas tiosulfato reductasa y
cisteína desulfurilasa. El gas incoloro H2S
reacciona con el citrato de amonio férrico
para producir un precipitado negro insoluble
de sulfuro ferroso metálico
Utilización del Citrato Citrato de Citrato (NH4 )2CO2 Azul de Estria
citrato de sodio permeasa bromotimol. recta y
Simmons picadura

Un microorganismo que
puede utilizar el citrato como
única fuente de carbono
también utiliza las sales de
amonio del medio como
única fuente de nitrógeno. La
extracción de nitrógeno de
las sales de amonio producen
amoniaco y se alcaliniza el
 medio virando el indicador al
alcalino.
Utilización de Caldo Urea ureasa NH4 rojo de fenol, (azul La hidrólisis Estria
urea urea, de bromotimol) de la urea por recta
urea de la enzima
Christens ureasa libera
ens, dos
caldo moléculas de
surraco amoniaco
que alcaliniza el medio,
entonces se vira el indicador
de pH, en el caso del rojo de
fenol una prueba positiva es
color bugambilia.
Reducción de Medio nitrato de nitrato nitritos, NO, anaftil-amina y Suspenci
nitratos caldo sodio reductasa N2O N2 ácido sulfanílico ón
nitrato
Prueba de la Cultivo N,N,N,Ntetra citocromo N,N,N,Ntetra Reactivo de Kovacs Estria
oxidasa de medio metil- oxidasa c metil- recta
nutritivo pfenilendiami pfenilendiami
na na oxidado

Prueba de No es H2O2 catalasa H2O + O2 No requiere NO es

catalasa nesesario necesari
o