Análisis Clínico II
DETERMINACIÓN DE ALBÚMINA Y
GLOBULINAS EN SANGRE
I.- INTRODUCCIÓN:
Las proteínas totales del suero se pueden separar en dos grandes grupos la
Albúmina y las globulinas. La albúmina es la proteína de más concentración en la
sangre. Se forma en el hígado y cuyas funciones primordiales son el transporte de
diferentes elementos y sostén de la presión oncótica.
La albúmina que se encuentra en los diferentes tejidos del cuerpo, es catabolizada y
sus componentes de construcción, es decir sus aminoácidos, en particular los
esenciales, son usados allí donde sean necesarios.
La albúmina transporta muchas moléculas pequeñas (bilirrubina, progesterona, y
medicamentos), y tiene también la función de mantener la presión sanguínea ya que
favorece la presión osmótica coloidal para mantener líquidos en el torrente
sanguíneo y que no pasen a los tejidos, manteniendo un equilibrio. .La albúmina
representa el 60% de las proteínas que contiene el suero, el resto son las globulinas.y
es la principal responsable de que se mantenga la presión oncótica, es decir la
presión osmótica coloide, gracias a que retiene el agua dentro de los vasos
sanguíneos.
Cuando los valores de albúmina descienden por debajo de lo que se entiende por sus
valores normales, disminuye la presión oncótica del plasma, y el agua es trasvasada
fuera de los vasos sanguíneos, formándose en consecuencia edemas.
Las globulinas se pueden dividir en alfa-1, alfa-2, beta y gamma globulinas. Las
globulinas también son componentes proteicos encargados de regular el PH
sanguíneo, contribuir a las necesidades nitrogenadas, defender el organismo de las
infecciones, formar anticuerpos y regular la actividad y funcionamiento celular. La
unión de las dos integran las proteínas totales.
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II.- OBJETIVOS:
Conocer el método a usarse en práctica para la determinación enzimática
Albúmina y globulinas.
Calcular el valor aproximado de albúmina y globulinas en muestra de suero y
determinar la relación entre estos valores.
III.- FUNDAMENTO TEÓRICO
Unión de albumina con colorante e indicadores siendo el mas común el verde de
bromocresol (BCG).
TÉCNICA UTILIZADA:
BLANCO STANDARD DESCONOCIDO
SUERO ---- ---- 10 ul
STANDARD ---- 10 ul ----
B.C.G. 1 ml 1ml 1 ml
INCUBAR POR 3 MIN A UNA T° AMBIENTE
AGUA 2ml 2ml 2ml
DESTILADA
LEER LAS ABSORVANCIAS A 620 nm
Valores de Referencia: 3,5 – 5,0 g/dl
Los cálculos se realizan con la siguiente formula:
Para calcular el factor:
(𝐶𝑂𝑁𝐶𝐸𝑁𝑇𝑅𝐴𝐶𝐼𝑂𝑁 𝐷𝐸𝐿 𝑆𝑇𝐴𝑁𝐷𝐴𝑅𝐷)
𝐹𝐴𝐶𝑇𝑂𝑅 =
𝐴𝐵𝑆𝑂𝑅𝐵𝐴𝑁𝐶𝐼𝐴 𝐷𝐸𝐿 𝑆𝑇𝐴𝑁𝐷𝐴𝑅𝐷
Para calcular la cantidad de proteínas totales:
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𝐴𝐿𝐵Ú𝑀𝐼𝑁𝐴 (𝑔⁄𝑑𝑙) = 𝐹𝐴𝐶𝑇𝑂𝑅 𝑥 𝐴𝐵𝑆𝑂𝑅𝐵𝐴𝑁𝐶𝐼𝐴 𝐷𝐸𝐿 𝐷𝐸𝑆𝐶𝑂𝑁𝑂𝐶𝐼𝐷𝑂
IV.- PROCEDIMIENTO
1° Se extrae la muestra de sangre se deja reposar por unos 3 o 4 minutos, se
rompe el coagulo y luego se lleva a centrifugar para obtener el suero.
2° Se preparan los tubos blanco y estándar.
El tubo blanco solo va a contener 1 ml de reactivo de B.C.G. y 2 ml de
agua destilada
El tubo estándar va a contener 10 ul de la solución estándar para
proteínas totales, 1 ml del reactivo de B.C.G. y 2 ml de agua destilada.
3° Se extrae el suero del tubo centrifugado, con una micropipeta, y se traspasa
a otro tubo para realizar el respectivo análisis siguiendo la técnica indicada.
Al nuevo tubo se le agrega 10 ul del suero a analizar y 1 ml de
reactivo de B.C.G.
Se lo lleva a incubar a temperatura ambiente por 3 minutos.
Al término de los 3 minutos, se le agrega 2 ml de agua destilada
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4° Se calibra el espectrofotómetro con el blanco; después se procede leer la
solución estándar y por último se realiza la lectura de las soluciones
desconocidas.
V.- RESULTADOS
Con los datos obtenidos en práctica a partir de una muestra de suero se remplaza en
la fórmula:
Absorbancia del estándar: 0,227
Absorbancia de la muestra a analizar: 0,310
En primer lugar se halla el factor:
3,1
𝐹𝐴𝐶𝑇𝑂𝑅 = = 13.65
0,227
En segundo lugar se halla la cantidad de Albumina:
𝐴𝑙𝑏ú𝑚𝑖𝑛𝑎 (𝑔⁄𝑑𝑙) = 13.65 𝑥 0,310 = 4.2 𝑔/𝑑𝑙
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DETERMINACION DE GLOBULINAS
𝐺𝑙𝑜𝑏𝑢𝑙𝑖𝑛𝑎𝑠 (𝑔⁄𝑑𝑙) = G = Pt. – Alb.
G= 5.9 – 4.2
G= 1.7
RELACION VALORES ALBUMINA GLOBULINAS
A/G= 4.2/1.7
A/G= 2.5 VR=1.2 - 2.2g/dl
VI.- CONCLUSIONES
Se llevo a cabo correctamente el procedimiento para la práctica obteniendo
valores que se analizarán a continuación.
Se determino que la concentración de Albumina en la muestra de suero es de 4.2
4,2(𝑔⁄𝑑𝑙) y la de Globulinas es de 1,7(𝑔⁄𝑑𝑙)
Tomando en cuenta los valores de referencia podemos deducir que los valores de
albumina esta dentro de los parámetros y de relación entre A/G esta
ligeramente alto, lo que indicaría un posible cuadro infeccioso.
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IMPORTANCIA ALBUMINA Y SU RELACION CON LAS GLOBULINAS
La albumina es la proteína en mayor proporción en la sangre, se encuentra en la parte
plasmática de esta. Es tan importante en el plasma, que su fracción corresponde entre el
50 y 65 % de las proteínas totales que circulan en él.
Es en consecuencia la presencia de la albúmina en la sangre es el principal responsable
de que se mantenga la presión osmótica de ésta. Por esta razón, si llega a disminuir por
diversas razones, el líquido que se encuentra en los vasos sanguíneos, se desplaza fuera
de este e invade el espacio tisular, haciendo que las personas o los tejidos se vean
hinchados, es decir, edema tizados.
La albúmina es esencial en todos los mecanismos de nutrición de las personas, interviene
en el transporte de lípidos en la sangre, y sirve como molécula transportadora de
muchas sustancias. La importancia de la albúmina en la nutrición se debe a que es una
proteína que puede ser fácilmente metabolizada, es decir, encontrándose en muchos
alimentos, como puede ser el huevo, es fácilmente digerida y asimilada.
Es por tanto, entre otras cosas, una especie de almacén de aminoácidos que pueden ser
movilizados desde el hígado, donde es sintetizada, hasta los tejidos periféricos donde su
degradación o catabolismo puede facilitar materia prima para la síntesis de novo de
proteínas necesarias.
Otra de las funciones importantes de la albúmina como ya dijimos es la de transportar
diferentes moléculas en el torrente sanguíneo, tanto orgánicas como inorgánicas. Esto se
debe a que posee diferentes epítopes o regiones que pueden usarse como "bolsillos" para
transportar esas moléculas. Así, la albúmina resulta el vehículo por medio del cuál
pueden desplazarse por la sangre entre otras sustancias o moléculas, hormonas
adrenales, tiroxina, bilirrubina, calcio, magnesio, grupos hemo, ácidos grasos libres y
una variedad bastante grande de medicamentos, entre otros.
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SIGNIFICADO CLÍNICO DE LA RELACIÓN ALBUMINA-GLOBULINA
Denominada también Proporción albúmina/globulina, proporción A/G
plasmática. Proporción A/G es una expresión de la relación albúmina a globulinas en
sangre u orina. Se usa para expresar los cambio de las proteínas de la enfermedad y se
calcula dividiendo la concentración de albúmina entre la concentración de globulinas.
Antes del advenimiento de las técnicas de electroforesise inmunoforesis, la proporción
A/G fue el mejor indicador disponible para apreciar la relación entre los componentes de
las proteínas séricas, que para un individuo cualquier es constante.
En varios estados patológicos hay una relación constante entre el aumento de las
globulinas y la reducción de las concentraciones de albúmina por ejemplo:
Cirrosis, Nefrosis, Infecciones agudas, Neumonía, Fiebre reumática.
La albúmina sanguínea es una fracción proteica que se forma en el hígado y cuyas
funciones primordiales son el transporte de diferentes elementos y sostén de la presión
oncotica. Las globulinas también son componentes proteicos encargados de regular el
PH sanguíneo, contribuir a las necesidades nitrogenadas, defender el organismo de las
infecciones, formar anticuerpos y regular la actividad y funcionamiento celular. La
unión de las dos integran las proteínas totales. Antiguamente se le tenía valor clínico a
la relación albumina/globulina, pero el sistema en la actualidad no se emplea por la
inconstancia en sus resultados
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