PLAQUEO AMBIENTAL MICROBIOLOGÍA
MICROBIOLOGÍA PLAQUEO AMBIENTAL
Profesora: Dra. Sonia Herrera Sanchez
Semestre: 2019-B
G.H de Laboratorio: 91G-4
AUTOR:
AMAO ASENCIOS , JACKELINE NICOLL 1716120564
2019
PLAQUEO AMBIENTAL MICROBIOLOGÍA
I. INTRODUCCIÓN
Los microorganismos se encuentran presentes en todos los ambientes: en el aire, en el
agua, en la superficie de los objetos e incluso sobre nuestra piel. Cuando el tema a tratar
es la microbiología de alimentos, es importante determinar el grado de contaminación
ambiental, ya que las condiciones higiénicas del lugar de trabajo (utensilios, superficies,
etc.) y del propio manipulador van a influir en el número y tipo de microorganismos del
alimento.
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II. OBJETIVOS
Determinar aproximadamente el número de aerobios mesófilos en el servicio
higiénico de mujeres de la Facultad de Ingeniería Química.
Comparar el resultado con estudios hechos anteriormente
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III. MARCO TEÓRICO
3.1 AEROBIOS MESÓFILOS
Son todas aquellas bacterias aerobias mesófilas capaces de crecer en agar nutritivo. Se
investigan por el método de recuento en placa con siembra en profundidad que se basa
en contar el número de colonias desarrolladas en un placa de medio de cultivo
solido(agra para recuento en placa), donde se ha sembrado un volumen conocido de la
solución madre.
La palabra mesófilos significa que son afines a
la temperatura media (30-37℃ y la palabra
aerobios que son dependientes de oxigeno
Se deberán contar todas las colonias desarrolladas en cada placa. Si se ha sembrado
más de una dilución se seleccionará la que proporcione entre 30 y 300 colonias,
descartando las demás. El recuento no se efectuara en placas que contengan menos de
30 colonias, excepto en aquellas sembradas con solución sin diluir.
El recuento en placa es el método más utilizado para la determinación del número de
células viables o unidades formadoras de colonias (u.f.c.) en un alimento. Los recuentos
totales deben hacerse en función de uno de los siguientes factores:
método de muestreo utilizado
distribución de los microorganismos en la muestra
naturaleza de la microflora del alimento
naturaleza del alimento
antecedentes del alimento
adecuación nutricional del medio de cultivo
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temperatura y medio de incubación
pH, aw, potencial de oxidación reducción del medio
tipo de diluyente utilizado
número relativo de microorganismos en la muestra
Los recuentos de microorganismos viables se basan en el número de colonias que se
desarrollan en placas previamente inoculadas con una cantidad conocida de alimento e
incubadas en unas condiciones ambientales determinadas. Estos recuentos no pueden
considerarse como recuentos totales ya que solo son susceptibles del contaje aquellos
microorganismos capaces de crecer en las condiciones establecidas. Se puede
conseguir una amplia gama de condiciones variando la temperatura, la atmósfera, la
composición del medio y el tiempo de incubación.
El intervalo de temperaturas en el que crecen los microorganismos es muy amplio: de –
34º C a > 90º C. En función de esto se encuadra a los microorganismos en tres grupos:
los que crecen bien a 7º C o por debajo de esta temperatura cuya temperatura:
psicrótofos.
Los que crecen entre 20 – 30º C, con una temperatura óptima de crecimiento está
entre 30 – 40º C: mesófilos.
los que crecen por encima de los 45º C: termófilos
Recuento de aerobios mesófilos
En este grupo se incluyen todas las
bacterias, mohos y levaduras
capaces de desarrollarse a 30º C en
las condiciones establecidas.
En este recuento se estima la
microflora total sin especificar tipos
de microorganismos.
Refleja la calidad sanitaria de un alimento, las condiciones de manipulación, las
condiciones higiénicas de la materia prima.
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Un recuento bajo de aerobios mesófilos no implica o no asegura la ausencia de
patógenos o sus toxinas, de la misma manera un recuento elevado no significa presencia
de flora patógena. Ahora bien, salvo en alimentos obtenidos por fermentación, no son
recomendables recuentos elevados.
ANÁLISIS DEL AIRE
El aire, además de partículas en suspensión, es portador de bacterias o sus esporas.
Por ello, puede ser causa tanto de contaminación de alimentos y superficies como de
infecciones en el hombre (patologías respiratorias, etc.). Existen distintos métodos para
el análisis del aire: sedimentación, filtración, choque en líquidos y precipitación
electrostática, entre otros. En esta práctica vamos a explicar el primero, por ser uno de
los métodos más empleados. El método de sedimentación en placa es uno de los más
sencillos para la determinación de microorganismos del aire.
A pesar de ello, los resultados obtenidos son orientativos de las cifras de
microorganismos presentes en el aire, ya que estos niveles varían en función de las
corrientes de aire y del tamaño de las partículas en suspensión.
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Agar utilizado para la práctica a continuación:
El Plate Count Agar o agar de recuento de bacterias (pH 7,0 ± 0,2) es un agar listo para
usar para una detección cuantitativa rápida y segura de microorganismos en la industria
de alimentos y bebidas. El medio se conoce también como agar de triptona glucosa
levadura, agar de recuento de bacterias o agar de caseína-peptona dextrosa levadura, y
cumple las especificaciones de la Asociación Americana de Salud Pública (APHA) y la
norma ISO 4833.
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IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
PASOS A SEGUIR
Nos colocamos la indumentaria
correspondiente (guardapolvo,
guantes, cofia)
Esterilizamos los materiales de laboratorio
que utilizaremos, en este caso la placa petri
Fundir el medio (AGAR PLATE
COUNT). La temperatura debe
estar entre 50-60
Colocar 10 ml aprox en una placa
Petri y dejar enfriar. Tener en todo
momento la placa cerrada
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Ubicar el lugar donde se realizará el plaqueo, en este caso el baño de mujeres de la FIQ
y colocar la placa abierta por 15 minutos expuesta al ambiente y luego cerrar.
BAÑO DE MUJERES DE LA FIQ
Rotular la placa y colocarlo en la
incubadora para el crecimiento
durante 24-72 horas a 37°C.
Después sacamos nuestra
muestra de la incubadora y
contamos colonias
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V. ANALISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS
INFORME DE ENSAYO
Análisis: Plaqueo ambiental
Lugar : BAÑO DE MUJERES (FIQ - UNAC)
Fecha de Muestreo : 26/09/2019
Fecha de Ejecución : 26/09/2019
LUGAR DE
MUESTREO
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RESULTADOS OBTENIDOS
MICROORGANISMO RESULTADO LMP MORFOLOGÍA OBSERVACIÓN
AEROBIOS 1575 127 PUNTIFORME El ambiente se
MESÓFILOS UFC/15MIN UFC/15MIN encuentra
contaminado
LMP FUENTE:
Análisis de mesófilos aerobios, mohos y levaduras, coliformes totales y Salmonella spp. en cuatro
ingredientes utilizados en la planta de lácteos de Zamorano, Honduras
[Link]
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VI. CONCLUSIONES
El número de colonias de Aerobios Mesofilos, en la placa petri fue 1575 ufc/15min.
Comparando los resultados con el LMP que es de 127 UFC/15min se puede decir
que nuestra muestra: Baño de mujeres (FIQ-UNAC). Es un área que no se
encuentra limpia, ya que el resultado no está dentro del LMP.
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VII. RECOMENDACIONES
Controlar correctamente el tiempo de exposición de la placa al ambiente
(15minutos), ya que este es un factor influyente en los resultados.
Mantener una limpieza adecuada tanto en las superficies de trabajo como en los
utensilios que hay que emplear.
No sacarnos en ningún momento ningún implemento personal porque podríamos
contaminar la muestra a tratar.
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VIII. ANEXOS
CUESTIONARIO
1. ¿Cuáles son los microorganismos patógenos que se encuentran en ambientes
donde se preparan alimentos?
Las bacterias son los patógenos más habituales en los alimentos, aunque no son los
únicos. Virus, mohos y levaduras también suelen frecuentar los alimentos. Las bacterias
pueden causar al consumidor infección e intoxicación, son dos consecuencias diferentes.
La infección se produce por la ingesta de alimentos contaminados con bacterias vivas que
entran en el huésped y provocan la enfermedad. La intoxicación, en cambio, aparece
cuando se ingieren alimentos que antes se han contaminado con bacterias que producen
toxinas, y estas últimas son las que causan la enfermedad. Sin embargo, el denominador
común de todas ellas son los síntomas gastrointestinales que producen: dolor abdominal,
nauseas, vómitos, diarreas, calambres, fiebre, etc.
Entre las más habituales son las siguientes:
Salmonella
E. coli
Listeria monocytogenes
Campylobacter jejuni
Staphylococcus aureus
Shigella
Yersinia enterocolítica
2. ¿Cuáles son los LMP de los microorganismos que se encuentran presentes
en ambiente de trabajo en EEUU y la Comunidad Europea?
Diferentes organizaciones internacionales como la OMS y el CIBC (International
Council of Building Research), privadas como la ASHRAE (American Society of
Heating Refrigerating and Air Conditioning Engineers), y algunos países como
Suecia (The Swedish Council of Building Research), Estados Unidos, Canadá y
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Australia han desarrollado guías y estandards de exposición. Referencias de la
necesidad de renovar el aire de ambientes cerrados con aire fresco se conocen
ya desde mediados del siglo XVIII recomendándose aportaciones de aire fresco
mínimas, por ocupante, para diluir las concentraciones de bioefluentes humanos
y evitar las molestias debidas a malos olores.
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CAUSA RAIZ:
El personal de limpieza encargado de los SSHH de la FIQ no realiza un trabajo
correcto.
ACCIÓN CORRECTORA:
Capacitar al personal de limpieza
Recomendar que contraten a más personal y compren más implementos de limpieza
